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1、志賀氏菌檢驗方法志賀氏菌簡介志賀氏菌簡介 志賀氏菌檢驗志賀氏菌檢驗 12生物學性狀 志賀氏菌為革蘭氏陰性桿菌,菌體短小,長約2-3 m ,寬0.5-0.7 m。不形成芽胞,無莢膜,無鞭毛,有菌毛 。為兼性厭氧菌,在有氧和無氧條件下均能生長;最適生長溫度為 36,最適ph為7.27.4;36培養(yǎng)18-24小時后菌落呈圓形、微凸、光滑濕潤、無色、半透明、邊緣整齊,直徑約2mm,宋內(nèi)氏菌菌落一般較大,較不透明,并常出現(xiàn)扁平的粗糙型菌落。在液體培養(yǎng)基中呈均勻渾濁生長,無菌膜形成。 致病因素 志賀氏菌的致病因素包括侵襲力、內(nèi)毒素,外毒素。志賀氏菌的菌毛能粘附于回腸末端和結(jié)腸粘膜的上皮細胞表面,繼而在侵襲
2、蛋白作用下穿入上皮細胞內(nèi),一般在粘膜固有層繁殖形成感染灶。各型痢疾桿菌都具有強烈的內(nèi)毒素。志賀氏菌a群型及部分ii型菌株還可產(chǎn)生外毒素,稱志賀氏毒素。 志賀氏菌屬(shigella)是人類細菌性痢疾最為常見的病原菌。細菌性痢疾是最常見的腸道傳染病,夏秋兩季患者最多。 可經(jīng)由食物,水,日常接觸,蒼蠅等傳播。抵抗力抵抗力 志賀氏菌屬在外界環(huán)境中的生存力,對理化因素的抵抗力較其他腸道桿菌為弱,對酸敏感 。 一般在潮濕土壤中能存活34天,37水中存活20天,在糞便內(nèi)(室溫)存活11天。日光直接照射30分鐘,56-6010分即被殺死,對高溫和化學消毒劑很敏感,1%石炭酸中15-30分鐘即被殺死,對氯霉素
3、、磺胺類、鏈霉素敏感,但易產(chǎn)生耐藥性。志賀氏菌檢驗流程圖36 ,6 h8 h41.5 , 16 h20 h厭氧培養(yǎng)xld瓊脂mac瓊脂或志賀氏菌顯色培養(yǎng)基36 ,20 h48 h挑取可疑菌落tsi,葡萄糖半固體, 營養(yǎng)瓊脂斜面血清學分型生化鑒定志賀氏菌屬分群及分型結(jié)果報告 檢樣 25 g(或25 ml)樣品+ 志賀氏菌增菌肉湯225 ml 檢樣25 g(或25 ml)樣品+gn增菌液225 mlxld瓊脂平板志賀氏菌志賀氏菌沙門氏菌沙門氏菌菌落呈粉紅色,帶或不帶黑色中心,有些菌株可呈現(xiàn)大的帶光澤的黑色中心,或呈現(xiàn)全部黑色的菌落;有些菌株為黃色菌落,帶或不帶黑色中心。 粉紅色至無色,半透明、光滑
4、、濕潤、圓形、邊緣整齊或不齊,直徑1 mm2 mm。 麥康凱瓊脂平板麥康凱瓊脂平板無色至淺粉紅色,半透明、光滑、濕潤、圓形、邊緣整齊或不齊,直徑2 mm3 mm。 培養(yǎng)物中出現(xiàn)下述情況之一者即可棄去: a)在三糖鐵瓊脂斜面上呈蔓延生長; b)發(fā)酵乳糖或蔗糖的; c)不分解葡萄糖和只生長在半固體表面的; d)產(chǎn)氣的(福氏志賀氏菌6型可產(chǎn)生少量氣體); e)產(chǎn)生硫化氫的; f)有動力的培養(yǎng)物 2志賀氏菌 3沙門氏菌 4大腸桿菌 血清學分型血清學分型 凡疑為志賀氏菌,挑取營養(yǎng)瓊脂斜面上的培養(yǎng)物,做玻片凝集試驗。 先用4種志賀氏菌多價血清檢查,如果由于k抗原的存在而不出現(xiàn)凝集,應將菌液煮沸后再檢查; 如果呈現(xiàn)凝集,則用a1、a2、b群多價和d群血清分別試驗。如系b群福氏志賀氏菌,則用群和型因子血清分別檢查。福氏志賀氏菌各型和亞型的型和群抗原見附表。可先用群因子血清檢查,再根據(jù)群因子血清出現(xiàn)凝集的結(jié)果,依次選用型因子血清檢查。 4種志賀氏菌多價血清不凝集的菌株,可用鮑氏多價1、2、3分別檢查,并進一步用115各型因子血清檢查。如果鮑氏多價血清不凝集,可用痢疾志賀氏菌312型多價血清及各型因子血清檢查。進一
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