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文檔簡(jiǎn)介
1、第一、二、三章復(fù)習(xí)題一、名詞解釋微生物:各種各樣以單細(xì)胞或多細(xì)胞群體、以及無(wú)細(xì)胞結(jié)構(gòu)群體存在的低等生物微生物學(xué):研究微生物在一定條件下的形態(tài)結(jié)構(gòu),生理生化特征,遺傳變異以及進(jìn)化、分類、生態(tài)等生命活動(dòng)規(guī)律及其應(yīng)用的一門學(xué)科。原核生物:不具有典型的細(xì)胞核(核質(zhì)體),無(wú)核膜、核仁,遺傳物質(zhì)DNA不與組蛋白結(jié)合形成典型的染色體,無(wú)減數(shù)分裂和有絲分裂繁殖特征的細(xì)胞型生物。真核生物:具有典型的細(xì)胞核,有核膜、核仁,遺傳物質(zhì)DNA與組蛋白結(jié)合形成典型的染色體,有減數(shù)分裂和有絲分裂繁殖特征的細(xì)胞型生物。生物工程, 微生物工程,利用微生物的特點(diǎn)、性狀、使微生物產(chǎn)生有用物質(zhì)或直接用于生產(chǎn)的技術(shù)。培養(yǎng)物,在人為規(guī)定
2、的條件下培養(yǎng)、繁殖得到的微生物群體。純培養(yǎng)物,只有一種微生物的培養(yǎng)物。純培養(yǎng),把特定的微生物從自然界混雜存在的狀態(tài)中分離、純化出來(lái)的技術(shù),是進(jìn)行微生物學(xué)研究的基礎(chǔ)。顯微技術(shù),是進(jìn)行顯微觀察時(shí),顯微鏡的使用技術(shù)、標(biāo)本制作技術(shù)、觀察技術(shù)及生物體組成成分定性和定量分析技術(shù)菌落,單個(gè)微生物在適宜的固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部生長(zhǎng)、繁殖到一定程度可以形成肉眼可見的,有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞生長(zhǎng)群體。培養(yǎng)基,人工配制的、適合不同生物生長(zhǎng)繁殖、積累代謝產(chǎn)物的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)及條件。無(wú)菌操作,用接種環(huán)或接種針,在無(wú)菌條件下把微生物由一個(gè)培養(yǎng)器皿轉(zhuǎn)接到另一個(gè)培養(yǎng)容器。培養(yǎng)平板,溶化的培養(yǎng)基倒入無(wú)菌空平皿中,冷卻凝固后盛有培養(yǎng)基的
3、平皿。二元培養(yǎng)物,只含有兩種微生物,且有意識(shí)保持二者之間關(guān)系的培養(yǎng)物,這是具有寄生、共生關(guān)系微生物的最有效保存途徑。顯微鏡分辨率,能辨別兩點(diǎn)之間最小距離的能力。細(xì)菌畸型,理化因素刺激,阻礙了生長(zhǎng)發(fā)育,引起形態(tài)的異常變化。細(xì)菌衰頹型,培養(yǎng)時(shí)間過(guò)長(zhǎng),營(yíng)養(yǎng)成分貧乏,代謝產(chǎn)物積累等原因造成中毒,引起形態(tài)異常;轉(zhuǎn)移到新鮮培養(yǎng)基內(nèi),條件適宜,可恢復(fù)原來(lái)形態(tài)基內(nèi)菌絲,又稱營(yíng)養(yǎng)菌絲,吸收營(yíng)養(yǎng),排泄廢物。氣生菌絲,基內(nèi)菌絲長(zhǎng)到一定時(shí)期,長(zhǎng)出培養(yǎng)基外,伸向空間的菌絲。孢子絲,氣生菌絲生長(zhǎng)發(fā)育到一定階段,氣生菌絲上分化出的可形成孢子的菌絲。孢子的形狀及在氣生菌絲上排列的方式隨種而異。霉菌,也稱絲狀真菌,指生長(zhǎng)在營(yíng)養(yǎng)
4、基質(zhì)上形成絨毛狀,蜘蛛網(wǎng)狀或絮狀菌絲體的真菌酵母菌,是一群以芽殖或裂殖進(jìn)行無(wú)性繁殖的單細(xì)胞真菌藻類,除苔蘚植物和維管束植物以外,基本上有葉綠素,可進(jìn)行光合作用,并伴隨放出氧氣的一大類真核生物原生動(dòng)物,是一類缺少真正細(xì)胞壁,細(xì)胞通常無(wú)色,具有運(yùn)動(dòng)能力,并進(jìn)行吞噬營(yíng)養(yǎng)的單細(xì)胞真核生物。磷壁酸(垣酸),是G+細(xì)菌細(xì)胞壁特有的一種酸性多糖;甘油磷壁酸和核糖醇磷壁酸是五種磷壁酸的主要兩種形式;壁磷壁酸通過(guò)磷酸基團(tuán)與N-乙酰胞壁酸六碳羥基相連;膜磷壁酸(脂磷壁酸)跨壁層與細(xì)胞膜磷脂相連.細(xì)胞周質(zhì)空間,也稱壁膜間隙; G-細(xì)菌常指外膜與細(xì)胞壁之間的狹窄空間,1215nm,呈膠狀,主要成分是周質(zhì)蛋白,如水解酶
5、類、合成酶類(肽聚糖)、結(jié)合蛋白(運(yùn)輸)及受體蛋白(與細(xì)胞的趨化性相關(guān)),可通過(guò)滲透休克法(osmotic shock)或稱冷休克法釋放,這是基因工程蛋白質(zhì)表達(dá)方式的一種。細(xì)胞壁缺陷細(xì)菌,形態(tài)多形性;染色革蘭陰性;培養(yǎng)高滲培養(yǎng)基;菌落油煎蛋樣。細(xì)胞質(zhì)膜,是緊貼在細(xì)胞壁內(nèi)側(cè),包圍著細(xì)胞質(zhì)的一層柔軟、脆弱、富有彈性的半透性薄膜;細(xì)胞貯藏物,是一類由不同化學(xué)成分累積而成的不溶性沉淀顆粒細(xì)菌芽孢,某些細(xì)菌在其生長(zhǎng)發(fā)育后期,于細(xì)胞內(nèi)形成一個(gè)圓形或橢圓形、厚壁、含水量極低、抗逆性極強(qiáng)的休眠體伴孢晶體,產(chǎn)芽孢細(xì)菌在形成芽孢同時(shí),在芽孢旁形成的堿性蛋白晶體內(nèi)含物。生物農(nóng)藥糖被,包被于某些細(xì)胞壁外層、厚度不定的
6、膠狀物,依有無(wú)固定層次、厚薄、包被細(xì)胞多少分為:莢膜、微莢膜、粘液層及菌膠團(tuán)。莢膜可通過(guò)負(fù)染色在顯微鏡下觀察到。鞭毛,生長(zhǎng)在某些細(xì)菌體表、長(zhǎng)絲狀、波曲的蛋白附屬物;可通過(guò)鞭毛染色法,于光學(xué)顯微鏡下觀察或在電子顯微鏡下觀察;也可在水浸片下觀察運(yùn)動(dòng)方式或半固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落狀態(tài)判斷是否有鞭毛存在。菌毛,也稱傘毛、纖毛、線毛,是一種長(zhǎng)在細(xì)菌體表纖細(xì)、中空、短直、數(shù)量較多的蛋白質(zhì)類附屬物性毛。構(gòu)造和成分與菌毛相同,比菌毛長(zhǎng);數(shù)量?jī)H一至少數(shù)幾根。性毛一般見于革蘭氏陰性細(xì)菌的雄性菌珠中;功能是向雌性菌珠(受體菌)傳遞遺傳物質(zhì)。二、問(wèn)答題1.微生物特點(diǎn)?個(gè)體微小,結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單;種類多,真菌10萬(wàn),細(xì)菌100
7、0種以上,放線菌500種以上;分布廣,無(wú)處不在,無(wú)處不有。 繁殖速度快; 代謝能力強(qiáng),1mg大腸桿菌與等重人體比表面積之比為30萬(wàn):1; 容易培養(yǎng);易于變異。2.舉例說(shuō)明微生物學(xué)在生命科學(xué)研究領(lǐng)域中所做出的貢獻(xiàn)。微生物基本問(wèn)題:微生物分類學(xué)、生理學(xué)、生態(tài)學(xué)、遺傳學(xué)、分子微生物學(xué)、細(xì)胞微生物學(xué)等;3.五界生物分類系統(tǒng)、三域(界)分類系統(tǒng)微生物組成?具有細(xì)胞結(jié)構(gòu)的五界生物分類系統(tǒng)(Whittaker,1969):原核生物界,細(xì)菌、放線菌、藍(lán)藻等;真核原生生物界,藻類、原生動(dòng)物等;真菌界,酵母菌、霉菌等;植物界;動(dòng)物界。具有細(xì)胞結(jié)構(gòu)的三域(界)分類系統(tǒng)(woese,1977):細(xì)菌(Bacteria
8、)、古生菌(Archaea)、真核生物(Eukarya)。4.法國(guó)科學(xué)家Pasteur微生物學(xué)之父,卓越貢獻(xiàn)?證實(shí)了微生物的活動(dòng),否認(rèn)了自然發(fā)生學(xué)說(shuō);明確提出酒精釀造是由微生物引起的發(fā)酵;證明傳染病是由病原微生物引起,提出了接種疫苗的預(yù)防方法及免疫學(xué)理論思想。發(fā)明了沿用至今的殺死有害微生物的Pasteur消毒法。5.德國(guó)科學(xué)家Koch細(xì)菌學(xué)之父,偉大功績(jī)?首先分離、純化、培養(yǎng)出炭疽桿菌、霍亂弧菌等病原微生物,并建立了一套微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)研究技術(shù);證實(shí)了病害的病原菌學(xué)說(shuō)。提出了柯赫法則微生物是否是某種疾病病原體。6.荷蘭人Antony van leeuwanhock劃時(shí)代貢獻(xiàn)?7.用固體培養(yǎng)基分離純
9、培養(yǎng)物方法及特點(diǎn)。(1)涂布平板法(Spread plate method)適于大多數(shù)好氧微生物。(2)稀釋倒平皿法(Pour plate method)(3)平板劃線法(Streak plate method)適于大多數(shù)非蔓延性的微生物。(4)稀釋搖管法(dilution shake culture method)不常用,適于厭氧微生物的分離。8.選擇培養(yǎng)分離純培養(yǎng)物方法及特點(diǎn)。設(shè)計(jì)特定的環(huán)境條件,使之適合所需微生物的生長(zhǎng),從而使所需微生物能從自然界混雜的群體中分離得到。 (1)利用選擇培養(yǎng)基進(jìn)行直接分離 (2)富集培養(yǎng):利用不同微生物間生命活動(dòng)特點(diǎn)的不同,在特定條件下使僅適應(yīng)于該環(huán)境的微生
10、物旺盛生長(zhǎng),從而增加其在群落中的數(shù)量,以便從自然界中分離得到所需微生物。9.微生物菌種保藏的原理及常用方法。原理:根據(jù)微生物生理、生化特點(diǎn),人工創(chuàng)造條件,使微生物的代謝處于不活潑,生長(zhǎng)繁殖受抑制的休眠狀態(tài);主要三個(gè)條件是:低溫、干燥和缺氧。(2)保藏方法 傳代培養(yǎng)保藏:斜面,半固體穿刺,液體等,可密封后冷藏。 沙土保藏:霉菌孢子及產(chǎn)芽孢細(xì)菌。 真空冷凍干燥法保藏 冷凍法:低溫冷凍(-20),超低溫,液氮;液體培養(yǎng)物中常加15%左右甘油,速凍后保藏。 其他保藏方法:曲法,麥粒法,無(wú)水硅膠法等。10.影響光學(xué)顯微鏡觀察效果的因素?采用那些方法改善微生物標(biāo)本的觀察效果?分辨率&反差;油鏡。1
11、1.電子顯微鏡的種類及特點(diǎn)?與光學(xué)顯微鏡的異同?透射電鏡、掃描電鏡;電子顯微鏡是由電子束為“光源”的顯微鏡(電鏡鏡筒要求高真空、用電磁圈是光線匯聚、需要用熒光屏來(lái)顯示或感光膠片做記錄)12.光學(xué)顯微鏡的樣本制備方法有哪些?活體觀察:壓片(滴)法;懸滴法;菌絲埋片法。 染色觀察13.電子顯微鏡的樣品制備常用技術(shù)?負(fù)染色技術(shù) 投影技術(shù) 超薄切片技術(shù) 冷凍蝕刻技術(shù) 整裝細(xì)胞技術(shù)14.細(xì)菌的個(gè)體形態(tài)有幾種?與環(huán)境條件的關(guān)系。球狀:?jiǎn)吻蚓?、雙球菌、鏈球菌、四聯(lián)球菌、八疊球菌,葡萄球菌; 桿狀:長(zhǎng)桿菌、短桿菌;螺旋狀:弧菌、螺旋菌。柄桿菌:有柄、菌絲附器等胞質(zhì)伸出物;球衣菌能形成衣鞘;支原體、變形菌具有高
12、度多型性。細(xì)菌的形態(tài)明顯受環(huán)境條件的影響,培養(yǎng)時(shí)間、溫度、培養(yǎng)基組成、濃度等發(fā)生改變,均引起形態(tài)的改變。幼齡階段和生長(zhǎng)條件適宜時(shí),形態(tài)正常,在較老的培養(yǎng)基中或不正常條件下,出現(xiàn)異常形態(tài)。15.典型微生物菌落形態(tài)的主要特征。大小、形狀、光澤、顏色、硬度、透明度、光滑度等特征。這些特征由組成菌落細(xì)胞的結(jié)構(gòu)、生長(zhǎng)行為及理化因素決定16.細(xì)菌細(xì)胞的結(jié)構(gòu)。細(xì)菌的結(jié)構(gòu),可分為兩部分:一是不變部分或一般結(jié)構(gòu),如細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞核、核糖體等為全部細(xì)菌細(xì)胞所共有;二是可變部分或特殊結(jié)構(gòu),如鞭毛、纖毛、莢膜、芽孢和氣泡等17.細(xì)菌細(xì)胞壁功能、結(jié)構(gòu)及組成?功能:固定細(xì)胞外形,保護(hù)細(xì)胞免受外力的損傷;細(xì)胞生長(zhǎng)、分
13、裂、鞭毛運(yùn)動(dòng)所必須;物質(zhì)運(yùn)輸?shù)钠琳?,可以免于溶菌酶、抗生素、消化酶等?duì)細(xì)胞的損害;與細(xì)菌的抗原性、致病性和對(duì)抗生素、噬菌體的敏感性密切相關(guān)。組成 革蘭氏陽(yáng)性菌的細(xì)胞壁 厚度20-80nm,化學(xué)成分簡(jiǎn)單,90%肽聚糖,10%磷壁酸。 肽聚糖層23nm,含量10%, G-細(xì)菌細(xì)胞壁的特殊組分外膜(outer membrane,由脂多糖、磷質(zhì)和脂蛋白等組成,也稱外壁18.磷壁酸的功能。因帶負(fù)電荷,故可與環(huán)境中的Mg等陽(yáng)離子結(jié)合,提高這些離子的濃度,以保證細(xì)胞膜上一些合成酶維持高活性的需要。保證革蘭氏陽(yáng)性菌與其宿主間的粘連。賦于革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌以特異的表面抗原。提供某些噬菌體以特異的吸附受體。貯藏磷原素
14、。調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)自溶素(autolysin)的活力防止細(xì)胞死亡。19.脂多糖功能及組成。組成:類脂A&核心多糖區(qū)&o-特異側(cè)鏈 是革蘭氏陰性細(xì)菌致病物質(zhì)內(nèi)毒素的物質(zhì)基礎(chǔ);與磷酸相似,也有吸附Mg2+、Ca2+等陽(yáng)離子以提高這 些離子在細(xì)胞表面的濃度的作用;由于LPS結(jié)構(gòu)的變化,決定了革蘭氏陰性細(xì)胞表面 抗原決定簇的多樣性;是許多噬菌體在細(xì)胞表面的吸附受體。具有控制某些物質(zhì)進(jìn)出細(xì)胞的部分選擇性屏障功能。20.細(xì)胞壁缺陷細(xì)菌種類、特點(diǎn)及及實(shí)踐意義。自發(fā)缺壁突變&人工方法去壁&自然界長(zhǎng)期進(jìn)化中形成 生物學(xué)特性:形態(tài)多形性;染色革蘭陰性;培養(yǎng)高滲培養(yǎng)基;菌落油煎蛋樣。實(shí)踐意
15、義:壁正常有壁細(xì)菌更易導(dǎo)入外源遺傳物質(zhì)。是研究遺傳規(guī)律和進(jìn)行原生質(zhì)體融合育種的良好實(shí)驗(yàn)材料21.溶菌酶和青霉素抑菌的機(jī)理。前者是溶去原有的細(xì)胞壁,后者是抑制新生細(xì)胞壁合成。22.革蘭氏染色的原理。通過(guò)結(jié)晶紫初染和碘液媒染后,在細(xì)胞內(nèi)形成了不溶于水的結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物。革蘭氏陽(yáng)性菌因?yàn)榧?xì)胞壁較厚,肽聚糖網(wǎng)層次多和交聯(lián)緊密,故遇乙醇脫色時(shí),因失水反而是網(wǎng)孔縮小再加上不含類脂,故乙醇處理不會(huì)溶出縫隙。故能夠呈現(xiàn)紫色。反之,革蘭氏陰性菌因其壁薄、外膜類脂含量高、肽聚糖層薄和交聯(lián)度差,因此遇乙醇脫色后細(xì)胞退成無(wú)色,再經(jīng)番紅復(fù)染就成了紅色。23.古生菌的細(xì)胞壁,細(xì)胞膜有哪些特征?古生菌中,除熱源體屬(Th
16、ermoplasma)沒(méi)有細(xì)胞壁外,其余都具有與細(xì)菌類似的細(xì)胞壁,但化學(xué)成分差異較大,無(wú)真正的肽聚糖。如甲烷桿菌屬的多糖骨架是由N-乙酰葡萄糖胺和N-乙酰塔羅糖醛酸以-1,3-糖苷鍵連接而成,在N-乙酰塔羅糖醛酸上連接的短肽是L-Glu、L-Ala和L-Lys,肽橋是L-Glu;甲烷八疊球菌細(xì)胞壁組分是雜多糖,不含磷酸和硫酸;鹽球菌屬組分是糖蛋白,蛋白質(zhì)中氨基酸主要是酸性Aa,可平衡環(huán)境中Na+。少數(shù)產(chǎn)甲烷菌的組分是蛋白質(zhì),有的是不同蛋白質(zhì),有的是同種蛋白的多聚體。24.芽孢的構(gòu)造及研究芽孢的意義?某些細(xì)菌在其生長(zhǎng)發(fā)育后期,于細(xì)胞內(nèi)形成一個(gè)圓形或橢圓形、厚壁、含水量極低、抗逆性極強(qiáng)的休眠體,是
17、細(xì)菌細(xì)胞的特殊構(gòu)造;由于一個(gè)營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞內(nèi)僅生成一個(gè)芽孢,無(wú)繁殖功能 ;芽孢是生物界中抗性最強(qiáng)的生命體、研究芽孢的意義 菌種保藏;制定滅菌參數(shù);細(xì)菌分類、鑒定中的重要形態(tài)學(xué)指標(biāo)。25.細(xì)菌莢膜依據(jù)其存在特點(diǎn)可分為幾種類型?莢膜&微莢膜26.細(xì)胞質(zhì)膜的組成及功能? 功能:選擇性物質(zhì)運(yùn)輸屏障;細(xì)胞維持及保護(hù)屏障;細(xì)胞壁各種組分和莢膜等大分子的合成場(chǎng)所;細(xì)胞代謝場(chǎng)所;鞭毛著生和提供其運(yùn)動(dòng)所需能量場(chǎng)所等。組成:磷脂2030%,蛋白質(zhì)5070%;磷脂甘油的C3上連接的是磷脂酰乙醇胺(甘油、膽堿、絲氨酸、肌醇)及磷脂酸,不飽和脂肪酸在C2,其種類、長(zhǎng)短及不飽和度決定膜的流動(dòng)性。蛋白質(zhì)分整合蛋白、周邊蛋
18、白。27.貯藏物種類及特點(diǎn)。種類:碳源及能源類的有糖原、聚-B-羥丁酸(細(xì)胞質(zhì)內(nèi)、貯藏能量、降低細(xì)胞內(nèi)滲透壓等作用)、硫粒;氮源類:藻青素、藻清蛋白;磷源 主要功能是貯存營(yíng)養(yǎng)28.磁小體的本質(zhì)、功能及意義。主要成分是Fe3O4外被為一層磷脂、蛋白或糖蛋白膜,是單磁疇晶體,無(wú)毒,大小20100nm,每個(gè)細(xì)胞有220顆,形狀為平截八面體、平行六面體或六棱柱體等;功能:導(dǎo)向作用,即借助鞭毛游向泥、水界面微氧環(huán)境處生活;生產(chǎn)磁性定向藥物或抗體,以及制造生物傳感器。29.莢膜的組成、功能及應(yīng)用。功能:保護(hù)作用、貯藏養(yǎng)料,保護(hù)細(xì)菌免受金屬離子的侵害;表面附著作用,細(xì)菌間的信息識(shí)別作用,堆積代謝物30.鞭毛
19、功能、著生方式?生長(zhǎng)在某些細(xì)菌體表、長(zhǎng)絲狀、波曲的蛋白附屬物;可通過(guò)鞭毛染色法,于光學(xué)顯微鏡下觀察或在電子顯微鏡下觀察;也可在水浸片下觀察運(yùn)動(dòng)方式或半固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落狀態(tài)判斷是否有鞭毛存在。著生方式有:一端生(一束、一根);兩端生(一束、一根);周生、側(cè)生31.葉綠體、線粒體、核糖體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體的功能、結(jié)構(gòu)及特點(diǎn)。內(nèi)質(zhì)網(wǎng) 細(xì)胞質(zhì)中,由脂質(zhì)雙分子層構(gòu)成,與細(xì)胞基質(zhì)相隔離,但彼此相通的囊腔和微管系統(tǒng);內(nèi)側(cè)與核被膜外側(cè)相連。膜上附有核糖體,稱粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng),合成和運(yùn)輸?shù)鞍?;不含核糖體,稱滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng),與脂類代謝、鈣代謝相關(guān)。核糖體 一切細(xì)胞中,無(wú)膜包裹的顆粒狀細(xì)胞器,功能是合成蛋白質(zhì),成分是蛋
20、白質(zhì)40%、RNA60%;旺盛生長(zhǎng)的細(xì)胞中可含107個(gè),真核生物為80S,原核生物為70S。.高爾基體 平行堆放的平膜囊和大小不等囊泡組成的膜聚體。功能是合成、分泌糖蛋白、脂蛋白;對(duì)一些無(wú)生物活性蛋白原的酶切加工;為細(xì)胞壁及質(zhì)膜的合成提供原料線粒體 真核生物氧化磷酸化反應(yīng)的重要細(xì)胞器,囊狀,由內(nèi)外雙膜包裹,囊內(nèi)充滿液態(tài)基質(zhì);外膜平整、內(nèi)膜褶皺成嵴管狀和板狀;內(nèi)膜和嵴中的空間除與ATP生成相關(guān)的各種蛋白質(zhì)外,還含有特殊的封閉環(huán)狀DNA和70S核糖體,用于自身部分蛋白的合成。.葉綠體 一種由雙膜包裹,能把光能轉(zhuǎn)化為化學(xué)能的綠色顆粒狀細(xì)胞器,只存在于綠色植物、藻類細(xì)胞中。功能是通過(guò)光合作用,把CO2
21、和H2O合成糖,并產(chǎn)生氧。由葉綠體膜、類囊體基質(zhì)中由單位膜封閉而成的扁平小囊、基質(zhì)三部分組成。基質(zhì)中含有雙鏈環(huán)狀DNA、70S核糖體、RNA、內(nèi)含物及1, 5二磷酸核酮糖羧化酶。32.核小體組成及功能。是染色質(zhì)的基本單位33.真核生物與原核生物鞭毛的異同。原核生物:基體、鉤形鞘、鞭毛絲;真核生物:鞭桿、基體、過(guò)渡區(qū)第四章 病毒一、名詞解釋病毒是一類超顯微的、無(wú)細(xì)胞結(jié)構(gòu)的、專性活細(xì)胞寄生的生物大分子微生物,在宿主體外以成熟的毒粒存在,具有一般大分子特征;進(jìn)入宿主細(xì)胞后,具有生命特征。蝕斑或空斑,病毒可在培養(yǎng)的細(xì)胞單層上形成肉眼可見的局部病損區(qū)域;病毒的感染單位,能夠引起宿主或宿主細(xì)胞一定特異性反
22、應(yīng)的病毒最小劑量病毒的效價(jià),單位體積內(nèi)病毒的感染單位數(shù)目(IU/ml)半數(shù)效應(yīng)劑量,病毒感染雞胚、動(dòng)物或細(xì)胞后,引起 50% 發(fā)生死亡或病變的最小量。ID50 (感染性核酸,從病毒顆?;虿《靖腥镜募?xì)胞提取分離的核酸,導(dǎo)入宿主細(xì)胞,能啟動(dòng)病毒復(fù)制,產(chǎn)生子代病毒。反之為非感染性核酸。核酸的結(jié)構(gòu)特征:有內(nèi)含子,ORF間有重疊,較大的遺傳不穩(wěn)定性。)病毒的復(fù)制周期,吸附-侵入-脫殼-病毒大分子的合成(包括病毒基因的表達(dá)和復(fù)制)-裝配與釋放病毒的一步生長(zhǎng)曲線,適量的病毒接種于標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)的高濃度敏感細(xì)胞,待病毒吸附后,或高濃度稀釋,或以抗病毒抗血清處理,以建立同步感染,然后繼續(xù)培養(yǎng),定時(shí)取樣測(cè)定培養(yǎng)物中的病
23、毒效價(jià),以感染時(shí)間為橫坐標(biāo),病毒感染效價(jià)為縱坐標(biāo),得到的病毒特征性繁殖曲線。病毒的裂解量,每個(gè)感染細(xì)胞所產(chǎn)生子代病毒的平均數(shù)目;等于穩(wěn)定期與潛伏期病毒效價(jià)之比,也等于穩(wěn)定期受感染細(xì)胞所產(chǎn)生的子代病毒顆粒之和除以潛伏期受感染細(xì)胞數(shù)。噬菌體為幾十至幾百,動(dòng)物病毒、植物病毒可達(dá)數(shù)百乃至上萬(wàn)病毒的非增殖性感染,病毒對(duì)敏感細(xì)胞的感染不能導(dǎo)致病毒繁殖,產(chǎn)生子代感染性毒粒。衛(wèi)星病毒,寄生于與自己無(wú)關(guān)輔助病毒基因產(chǎn)物的病毒,是自然界存在的絕對(duì)缺損病毒,形態(tài)、結(jié)構(gòu)、抗原性等均與輔助病毒不同,如HDV的輔助病毒是HBV。整合感染,某些病毒感染宿主后,其基因組整合到宿主染色體上,并隨宿主分裂傳遞給子代細(xì)胞;通常無(wú)感
24、染性毒粒產(chǎn)生,但在一定條件下,可產(chǎn)生有感染性的病毒顆粒。溶源性,噬菌體基因組長(zhǎng)期存在于宿主細(xì)胞內(nèi),無(wú)成熟噬菌體顆粒產(chǎn)生的現(xiàn)象。溶源性細(xì)菌,細(xì)胞中有以原噬菌體存在的噬菌體基因組的細(xì)菌。溫和(溶源性)噬菌體,導(dǎo)致溶源性發(fā)生的噬菌體,大部分基因組整合到宿主染色體上,少數(shù)以質(zhì)粒形式存在。原噬菌體,以整合于細(xì)菌染色體或以質(zhì)粒存在的溫和噬菌體。烈性噬菌體,感染宿主細(xì)胞的噬菌體能在細(xì)胞內(nèi)正常復(fù)制并最終殺死細(xì)胞。二、問(wèn)答題1、病毒的應(yīng)用。昆蟲病毒做為生物農(nóng)藥2、噬菌體污染的特征、檢測(cè)方法、預(yù)防措施。發(fā)酵周期明顯延長(zhǎng);碳源消耗緩慢 ;發(fā)酵液清淡;發(fā)酵產(chǎn)物形成緩慢或根本不形成;噬菌體檢測(cè)會(huì)發(fā)現(xiàn)大量噬菌斑;電鏡可看
25、到噬菌體;后果:減產(chǎn), 倒罐。噬菌體檢測(cè)-噬菌斑決不使用可疑菌種;嚴(yán)格環(huán)境衛(wèi)生;活菌液嚴(yán)禁排放;通氣加料嚴(yán)控;嚴(yán)格執(zhí)行會(huì)客制度 ;設(shè)備滅菌;使用抗噬菌體菌株。 補(bǔ)救方法: 盡快提取產(chǎn)品; 加藥抑制 及時(shí)更換菌種 。3、昆蟲病毒做為生物農(nóng)藥優(yōu)點(diǎn)。性高,毒力大,后效長(zhǎng),使用方便,對(duì)人畜安全,無(wú)公害,缺點(diǎn)危害經(jīng)濟(jì)動(dòng)物。4、按核酸類型和結(jié)構(gòu)進(jìn)行的病毒分類。dsDNA病毒、ssDNA病毒、DNA和RNA逆轉(zhuǎn)錄病毒、dsRNA病毒、負(fù)意ssRNA病毒、正意ssRNA病毒、裸露RNA病毒和亞病毒因子 5、亞病毒因子的種類及特點(diǎn)。包括衛(wèi)星病毒、衛(wèi)星RNA、類病毒和朊病毒 6、病毒感染對(duì)細(xì)胞的影響。對(duì)原核細(xì)胞:
26、(1)抑制宿主細(xì)胞大分子合成:產(chǎn)生關(guān)閉蛋白,抑制DNA復(fù)制、基因轉(zhuǎn)錄、蛋白質(zhì)合成。(2)宿主限制系統(tǒng)改變:噬菌體編碼的酶破壞宿主限制酶系統(tǒng)。(3)噬菌體顆粒釋放對(duì)宿主細(xì)胞的影響:分泌方式釋放的噬菌體,由于殼體蛋白與宿主細(xì)胞膜結(jié)合,造成宿主細(xì)胞的免疫學(xué)性質(zhì)改變;裂解釋放,造成宿主細(xì)胞死亡。(4)溶源性感染對(duì)細(xì)胞的影響:免疫性,對(duì)同源噬菌體有特異免疫力;溶源轉(zhuǎn)變,除免疫性外表型的改變,如致病性。對(duì)真核細(xì)胞:(1)病毒感染的致細(xì)胞病變效應(yīng):病毒基因表達(dá)產(chǎn)物引起,病毒復(fù)制的次級(jí)效應(yīng),毒性致死或活化程序死亡途徑。(2)病毒感染對(duì)宿主大分子合成的影響:宿主細(xì)胞轉(zhuǎn)錄的抑制;宿主細(xì)胞翻譯的抑制;宿主細(xì)胞DNA
27、復(fù)制的抑制(3)病毒對(duì)細(xì)胞結(jié)構(gòu)的影響:病毒對(duì)宿主細(xì)胞膜的影響;病毒對(duì)細(xì)胞骨架的影響;包涵體,復(fù)制、轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物或毒粒累積在宿主細(xì)胞的特定區(qū)域;細(xì)胞凋亡,關(guān)閉或干擾正常合成代謝誘發(fā)凋亡、蛋白因子作用于凋亡相關(guān)蛋白,細(xì)胞抵制病毒感染的方式之一。7、溫和性噬菌體的存在方式。8、缺損病毒的種類。干擾缺陷顆粒;衛(wèi)星病毒;條件缺損病毒;整合的病毒基因組9、非增殖性感染的類型。流產(chǎn)感染、局限性感染、潛伏感染10、病毒的復(fù)制過(guò)程。病毒進(jìn)入細(xì)胞后,具有感染的毒粒消失,存在于宿主內(nèi)的是具有繁殖性的病毒基因組;繁殖方式是復(fù)制,即接管宿主的生物合成機(jī)構(gòu),按病毒的基因組特性,合成大分子,組裝成成熟的病毒毒粒,然后釋放到胞外
28、。11、病毒的結(jié)構(gòu)、核衣殼的對(duì)稱形式。核衣殼的對(duì)稱形式 A 螺旋對(duì)稱型 C 二十面體立體對(duì)稱型 B 復(fù)合對(duì)稱型 12、噬菌體的種類。13、病毒蛋白質(zhì)的種類。結(jié)構(gòu)蛋白(衣殼蛋白、包膜蛋白、基質(zhì)蛋白、毒粒酶);非結(jié)構(gòu)蛋白14、病毒核酸的種類。DNA,RNA之分:一種病毒只含有一種核酸;動(dòng)物病毒DNA、RNA均有,植物病毒大部分為RNA,少數(shù)為DNA,微生物病毒大部分為DNA,少數(shù)為RNA; 環(huán)狀,線狀之分(閉合、開放):除dsRNA外,其它均有;基因組單、雙倍體:逆轉(zhuǎn)錄病毒為雙倍體,其它為單倍體。 單雙鏈(single strsnd,ss/double strand,ds)之分:ssDNA、ssR
29、NA,dsDNA、dsRNA;正負(fù)鏈之分:+ssRNAmRNA、-ssRNA、±RNA;+ssDNAmRNA、-ssDNA。15、動(dòng)物病毒培養(yǎng)的常用宿主。雞胚、組織培養(yǎng)、胚胎培養(yǎng)16、病毒的特征。形態(tài)極其微小,必須在電鏡下才能觀察,一般具過(guò)濾性;沒(méi)有細(xì)胞構(gòu)造,稱分子生物;主要成分是核酸和蛋白質(zhì)兩種;每一種病毒只含一種核酸,DNA或RNA;既無(wú)產(chǎn)能酶系,也無(wú)蛋白合成系統(tǒng);利用宿主細(xì)胞設(shè)施進(jìn)行增殖,不存在個(gè)體生長(zhǎng)和二均分裂等細(xì)胞繁殖方式;在宿主活細(xì)胞內(nèi)營(yíng)專性寄生;在離體條件下,能以無(wú)生命的化學(xué)大分子狀態(tài)存在,并可形成結(jié)晶;對(duì)一般抗生素不敏感,但對(duì)干擾素敏感。第五章 微生物的營(yíng)養(yǎng)名詞解釋微
30、生物營(yíng)養(yǎng),微生物吸取和利用營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的過(guò)程。碳源,構(gòu)成微生物細(xì)胞或代謝產(chǎn)物中碳架來(lái)源的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。 功能:(1)C素構(gòu)成細(xì)胞及代謝產(chǎn)物的骨架;(2)C素是大多數(shù)微生物代謝所需的能量來(lái)源。氮源,構(gòu)成微生物細(xì)胞和代謝產(chǎn)物中氮素來(lái)源的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。 功能:為微生物提供合成細(xì)胞物質(zhì)、代謝產(chǎn)物的原料,氮源一般不做能源,只有硝化細(xì)菌利用銨鹽,亞硝酸鹽做氮源,同時(shí)也做能源。生長(zhǎng)因子(生長(zhǎng)因素),微生物生長(zhǎng)不可缺少的微量有機(jī)物質(zhì)叫生長(zhǎng)因素基礎(chǔ)培養(yǎng)基,滿足大多數(shù)微生物營(yíng)養(yǎng)需要的培養(yǎng)基。選擇培養(yǎng)基,在基礎(chǔ)培養(yǎng)基內(nèi)加入某種化學(xué)物質(zhì)以抑制不需要微生物的生長(zhǎng),從而促進(jìn)某種微生物的生長(zhǎng),如馬丁氏培養(yǎng)基。加富培養(yǎng)基,根據(jù)某一微生物
31、的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)要求,在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入該種微生物所需特定營(yíng)養(yǎng)物,以便該種微生物生長(zhǎng)良好。鑒別培養(yǎng)基,在基礎(chǔ)培養(yǎng)基內(nèi)加入某種試劑,以便培養(yǎng)后發(fā)生某種變化,從而區(qū)別不同類型的微生物,如伊紅美蘭培養(yǎng)基。單純擴(kuò)散,物理擴(kuò)散作用,被運(yùn)輸?shù)奈镔|(zhì)是靠細(xì)胞內(nèi)外的濃度差或電位差來(lái)驅(qū)動(dòng),不消耗能量,氣體、水、脂溶性物質(zhì)都是通過(guò)這種方式進(jìn)出細(xì)胞內(nèi)。促進(jìn)擴(kuò)散,促進(jìn)擴(kuò)散以物質(zhì)的濃度梯度為動(dòng)力,由載體蛋白(透性酶:特異性較強(qiáng);運(yùn)輸?shù)倪^(guò)程中,本身不發(fā)生變化;加快物質(zhì)運(yùn)輸?shù)乃俣龋椭瓿?,速度快,特異性較強(qiáng)。主動(dòng)運(yùn)輸,在能量參與下,由膜載體逆濃度梯度在細(xì)胞內(nèi)積累營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)過(guò)程。基團(tuán)轉(zhuǎn)位。 主動(dòng)運(yùn)輸?shù)牧硪环N方式,在能量參與下,由膜載
32、體逆濃度梯度在細(xì)胞內(nèi)積累營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)過(guò)程,同時(shí)被運(yùn)輸?shù)奈镔|(zhì)發(fā)生化學(xué)變化。許多糖靠基團(tuán)移位進(jìn)行運(yùn)輸,如微生物是通過(guò)磷酸轉(zhuǎn)移酶系統(tǒng)來(lái)運(yùn)輸?shù)?。?wèn)答題1、 胞吞和胞飲的異同。胞吞作用:膜泡中包含的是固體;胞飲作用:膜泡中包含的是液體。 形成過(guò)程:吸附期,膜伸展期,膜泡迅速形成期,附著膜泡形成期,膜泡釋放期。2、 磷酸轉(zhuǎn)移酶系統(tǒng)的基團(tuán)轉(zhuǎn)位過(guò)程。3、 主動(dòng)運(yùn)輸?shù)奶攸c(diǎn)。 被運(yùn)送的物質(zhì)可逆濃度梯度進(jìn)入細(xì)胞內(nèi);必需有能量參加;有膜載體參加,膜載體發(fā)生構(gòu)型變化;被運(yùn)送物質(zhì)不發(fā)生任何變化。4、 單純擴(kuò)散和促進(jìn)擴(kuò)散的異同。單純擴(kuò)散特點(diǎn):物質(zhì)進(jìn)出細(xì)胞的動(dòng)力是細(xì)胞內(nèi)外的濃度差。不消耗能量。 沒(méi)有特異性,被運(yùn)輸物質(zhì)不與膜上物質(zhì)
33、發(fā)生任何反應(yīng),物質(zhì)不發(fā)生化學(xué)變化。促進(jìn)擴(kuò)散特點(diǎn):物質(zhì)運(yùn)輸動(dòng)力是細(xì)胞外的濃度差; 運(yùn)輸過(guò)程不消耗能量;有膜載體參加,多發(fā)生在真核微生物,原核生物少見。5、 配制培養(yǎng)基的原則及注意事項(xiàng)。(1) 微生物的營(yíng)養(yǎng)特點(diǎn)(2)培養(yǎng)微生物的目的(3)營(yíng)養(yǎng)成分配比適當(dāng):主要是C/N,菌體生長(zhǎng)與代謝物積累、速效與遲效(4)控制微生物的培養(yǎng)條件 pH值:不同微生物要求不同;加緩沖液;加碳酸鈣;流加酸堿。 調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的滲透壓:加鹽、分別滅菌以免沉淀產(chǎn)生。 氧化還原電位適當(dāng)。6、 不同固體培養(yǎng)基的凝固劑要求。 固體培養(yǎng)基:在液體培養(yǎng)若加入凝固劑;常用于微生物分類鑒定和保藏菌種。瓊脂固體培養(yǎng)基、明膠培養(yǎng)基、硅膠固體培養(yǎng)基
34、、天然固體基質(zhì)。 半固體培養(yǎng)基:液體培養(yǎng)基中加入少量瓊脂(0.30.6%),用于觀察帶鞭毛細(xì)菌的生長(zhǎng)。 液體培養(yǎng)基:不加凝固劑的培養(yǎng)基,營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)分布均勻,微生物能與營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)充分接觸,利用適合積累代謝產(chǎn)物。多用于生理研究和發(fā)酵工業(yè)生產(chǎn)中。7、合成培養(yǎng)基、天然培養(yǎng)基、半合成培養(yǎng)基的特點(diǎn)。合成培養(yǎng)基:營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的成分及其濃度完全清楚,重復(fù)性強(qiáng),適合定量研究工作,但微生物生長(zhǎng)緩慢。天然培養(yǎng)基:生物組織、浸出物或生物制品配制而成;化學(xué)成分復(fù)雜、不詳、營(yíng)養(yǎng)豐富,不穩(wěn)定、不精確。微生物生長(zhǎng)良好,成本低廉,適于生產(chǎn)。半合成培養(yǎng)基:天然培養(yǎng)基中加入某種已知的無(wú)機(jī)鹽類或合成培養(yǎng)基中加入某些天然有機(jī)成分。能更有效的滿
35、足微生物的營(yíng)養(yǎng)要求,應(yīng)用廣泛。8、不同種類微生物的常用培養(yǎng)基。細(xì)菌培養(yǎng)基:LB、 牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基等;放線菌培養(yǎng):高氏一號(hào)培養(yǎng)基等; 霉菌培養(yǎng)基:查氏培養(yǎng)基,土豆蔗糖培養(yǎng)基等;酵母培養(yǎng)基:麥芽,YPD培養(yǎng)基等。9、微生物的營(yíng)養(yǎng)類型及特點(diǎn)。自養(yǎng)微生物光能自養(yǎng)微生物(光能無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)型)、化能自養(yǎng)微生物;異養(yǎng)微生物(有機(jī)營(yíng)養(yǎng)型)光能異養(yǎng)微生物、化能異養(yǎng)微生物(化能有機(jī)營(yíng)養(yǎng)型)10、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的功能。11、如何理解生理酸性、生理堿性氮源?生理酸性氮源:有機(jī)氮源,氨鹽; 生理堿性氮源:硝酸鹽。第六章、微生物代謝名詞解釋初級(jí)代謝,通過(guò)分解和合成代謝,生成維持生命活動(dòng)物質(zhì)和能量的過(guò)程次級(jí)代謝,以初級(jí)代謝產(chǎn)物為
36、前體,合成一些對(duì)生命活動(dòng)無(wú)明確功能的物質(zhì)過(guò)程。生物氧化,微生物在細(xì)胞內(nèi)酶的催化下,把獲得的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)氧化,產(chǎn)生能量的過(guò)程。工業(yè)發(fā)酵,利用微生物的代謝作用,把底物轉(zhuǎn)化成中間產(chǎn)物,獲得某種工業(yè)產(chǎn)品或進(jìn)行有益的過(guò)程。發(fā)酵,發(fā)酵是指微生物細(xì)胞將有機(jī)物氧化釋放的電子直接交給底物本身未完全氧化的某種中間產(chǎn)物,同時(shí)釋放能量并產(chǎn)生各種不同的代謝產(chǎn)物。有氧呼吸,以分子氧為最終電子受體的生物氧化過(guò)程。無(wú)氧呼吸。以無(wú)機(jī)物為最終電子受體的生物氧化過(guò)程。問(wèn)答題1、 次級(jí)代謝的特點(diǎn)及調(diào)節(jié)方式。特點(diǎn): 通常在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)后期產(chǎn)生,與生長(zhǎng)不偶聯(lián); 催化反應(yīng)的酶專一性不高; 易受環(huán)境條件的影響; 初級(jí)代謝產(chǎn)物是前體;物種不同,代謝產(chǎn)
37、物不同。調(diào)節(jié)方式:謝對(duì)次級(jí)代謝的調(diào)節(jié):酶活性調(diào)節(jié)、酶量調(diào)節(jié); 碳、氮代謝物的調(diào)節(jié)-生長(zhǎng)與代謝物形成不偶聯(lián); 膜透性調(diào)節(jié); 能荷調(diào)節(jié); 誘導(dǎo)作用:類似物誘導(dǎo); 磷酸鹽調(diào)節(jié)。2、 分支合成途徑的調(diào)節(jié)方式。1)、同功酶調(diào)節(jié)2)協(xié)同反饋抑制(末端產(chǎn)物均過(guò)量3)積累反饋抑制:末端產(chǎn)物過(guò)量時(shí),有抑制作用;均過(guò)量時(shí),抑制作用累加。4)順序反饋抑制3、 酶活性的調(diào)節(jié)方式。(1)變構(gòu)調(diào)節(jié)(2)共價(jià)修飾(3)酶原激活(4)同功酶調(diào)節(jié)4、 微生物CO2的同化方式。乙醛酸循環(huán) 丙酮酸羧化支路 甘油酸途徑:乙醇酸、草酸、甘氨酸底物,轉(zhuǎn)化為乙醛酸,縮合成羥基丙酮酸半醛,還原成甘油酸進(jìn)入EMP途徑。5、 固氮微生物的種類。
38、自生固氮菌:好氧自生固氮菌(固氮菌屬);兼性厭氧自生固氮菌;厭氧自生固氮菌(巴氏芽孢梭菌)。 共生固氮菌:根瘤(豆科植物);植物(地衣,滿江紅,魚腥藻)聯(lián)合固氮菌:根際、葉面、動(dòng)物腸道等處的固氮微生物。6、 微生物CO2的固定方式。 爾文循環(huán) 還原性三羧酸循環(huán)固定CO2 還原單酸循環(huán)7、 能量轉(zhuǎn)換方式。(1)底物水平磷酸化(substrate level phosphorylation):物質(zhì)在生物氧化過(guò)程中,生成一些含有高能鍵的化合物直接偶聯(lián)ATP或GTP的合成;存在與發(fā)酵過(guò)程中及呼吸過(guò)程中。 (2)氧化磷酸化 生物氧化過(guò)程與電子傳遞鏈偶聯(lián)產(chǎn)生ATP的過(guò)程。 (3)光合磷酸化 環(huán)式光合磷酸化
39、:只有一個(gè)光反應(yīng)系統(tǒng),有光反應(yīng)和暗反應(yīng);不放氧;產(chǎn)生ATP不產(chǎn)還原劑NADH2,固定CO2所需NADH2來(lái)自電子傳遞。8、同型乳酸發(fā)酵與異型乳酸發(fā)酵的異同點(diǎn)。同型乳酸發(fā)酵:EMP途徑,產(chǎn)物只有乳酸; 異型乳酸發(fā)酵:己糖,HMP途徑, HK途徑產(chǎn)生3-磷酸甘油醛、乙酰磷酸,終產(chǎn)物乙酸、乳酸;戊糖, HMP途徑, PK途徑產(chǎn)生3-磷酸甘油醛、乙酰磷酸。9、底物脫氫的四種途徑。EMP、HMP、ED、磷酸解酮酶途徑。10、細(xì)菌酒精發(fā)酵與酵母酒精發(fā)酵的異同。11、酵母發(fā)酵類型。酵母一型發(fā)酵:產(chǎn)物為乙醇; 酵母二型發(fā)酵:甘油發(fā)酵(磷酸二羥丙酮);酵母三型發(fā)酵;乙醇、乙酸(歧化反應(yīng))、甘油。第七章、微生物的
40、生長(zhǎng)繁殖及其控制名詞解釋:微生物生長(zhǎng),微生物通過(guò)代謝作用,將不斷吸收的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)變成細(xì)胞物質(zhì),原生質(zhì)量增加,體積增大的生物學(xué)過(guò)程。微生物繁殖,微生物個(gè)體數(shù)目增加的生物學(xué)過(guò)程。微生物發(fā)育,微生物生長(zhǎng)到微生物繁殖這一量變到質(zhì)變的過(guò)程。微生物群體生長(zhǎng),在一定時(shí)間和一定條件下細(xì)胞數(shù)量的增加。微生物生長(zhǎng)曲線,分批培養(yǎng)過(guò)程中,以細(xì)胞數(shù)的對(duì)數(shù)或增長(zhǎng)速率為縱坐標(biāo),以培養(yǎng)時(shí)間為橫坐標(biāo)繪制的反映細(xì)胞增值規(guī)律的曲線。同步培養(yǎng)使群體中微生物轉(zhuǎn)換成同時(shí)進(jìn)行生長(zhǎng)或分裂群體細(xì)胞的培養(yǎng)方法。同步生長(zhǎng):群體細(xì)胞處于同一生長(zhǎng)階段,并同時(shí)進(jìn)行分裂的生長(zhǎng)方式。連續(xù)培養(yǎng),在微生物的整個(gè)培養(yǎng)期間,通過(guò)一定的方式使微生物以恒定的比生長(zhǎng)速率生
41、長(zhǎng)并能持續(xù)下去的培養(yǎng)方法。品溫,發(fā)酵工業(yè)培養(yǎng)微生物的溫度。微生物最適(最低、最高)生長(zhǎng)溫度,最低生長(zhǎng)溫度:微生物群體能進(jìn)行生長(zhǎng)繁殖的最低溫度界限。最適生長(zhǎng)溫度:微生物群體生長(zhǎng)繁殖速度最快的溫度。致死溫度,在一定時(shí)間內(nèi)(10分鐘)完全殺死某一微生物的最低溫度。致死時(shí)間,在一定基質(zhì)中, 121.1,加熱殺死一定數(shù)量微生物所需的最短時(shí)間。嗜熱微生物,化學(xué)療劑,能直接干擾病原微生物的生長(zhǎng)繁殖,用于治療感染性疾病的化學(xué)藥物。 特點(diǎn):選擇性毒性。抗代謝物,結(jié)構(gòu)上與生物必須的代謝物類似,可以和特定的酶結(jié)合,阻礙酶的功能;只有正常代謝物量少時(shí),才有效??股ň┧?,微生物產(chǎn)生的,具有特異性抗生作用的一類次生代
42、謝產(chǎn)物。滅菌,殺死物體上全部微生物的方法。商業(yè)滅菌,經(jīng)過(guò)殺菌處理后,按規(guī)定的微生物檢驗(yàn)方法,無(wú)活微生物檢出,或僅能檢出非病原微生物,但符合衛(wèi)生要求。消毒,殺死或消除物體上的病原微生物的方法;消毒劑。防腐,用理化方法防止、抑制微生物生長(zhǎng)繁殖的方法;防腐劑。化療,利用對(duì)病源菌具有高度毒力而對(duì)宿主基本無(wú)毒的化學(xué)物質(zhì)來(lái)抑制宿主體內(nèi)病源微生物的生長(zhǎng)繁殖。巴斯德滅菌法,61.762.8º處理30min或71.6º度處理15min;是食品(牛奶)釀造(啤酒)工業(yè)中常用的方法。酚價(jià)(石炭酸系數(shù)):定時(shí)間內(nèi),殺死全部供試微生物的最高稀釋度與達(dá)到同樣效果的石炭酸最高稀釋度的比值。是微生物學(xué)的殺
43、菌力標(biāo)準(zhǔn)。問(wèn)答題:1、 直接計(jì)數(shù)法與平皿菌落計(jì)數(shù)法的異同直接計(jì)數(shù);利用特定的細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血球計(jì)數(shù)板,在顯微鏡下計(jì)數(shù)一定容積里的樣品中微生物數(shù)量。 特點(diǎn):總數(shù),不分死活平皿菌落計(jì)數(shù),也稱活菌計(jì)數(shù):每個(gè)活細(xì)胞在適宜的培養(yǎng)基和良好的生長(zhǎng)條件下生長(zhǎng)形成一個(gè)菌落。 特點(diǎn):活細(xì)胞數(shù),污染,燙死,未長(zhǎng)出,不適合絲狀微生物。2、 細(xì)菌的群體生長(zhǎng)規(guī)律及特點(diǎn)。延滯期(特點(diǎn):生長(zhǎng)速率常數(shù)等于零,體積增長(zhǎng)快,代謝活力強(qiáng),RNA含量增加,對(duì)不良條件抵抗能力降低。)、指數(shù)期(特點(diǎn): 活菌數(shù)和總菌數(shù)接近; 酶系活躍,代謝旺盛。生長(zhǎng)速率最大,generation time最短; 細(xì)胞的化學(xué)組成及形態(tài),生理特性比較一致。)、穩(wěn)
44、定期(活菌數(shù)保持相對(duì)穩(wěn)定,總菌數(shù)達(dá)最高水平;初級(jí)代謝物積累達(dá)到最高峰;芽孢桿菌這時(shí)開始形成芽孢。細(xì)胞及初級(jí)代謝生產(chǎn)收獲時(shí)期)、衰亡期(細(xì)菌死亡數(shù)大于增殖數(shù),活菌數(shù)明顯減少,群體衰落;細(xì)胞出現(xiàn)多形態(tài),大小不等的 畸形,變成衰退型;細(xì)胞死亡,出現(xiàn)自溶現(xiàn)象。)3、 微生物同步培養(yǎng)的方法及特點(diǎn)。(1)選擇法,或稱機(jī)械法(密度梯度離心法 過(guò)濾分離法 硝酸纖維素濾膜法特點(diǎn):不影響菌體代謝,生命活動(dòng)正常;同一生長(zhǎng)階段大小不一致的微生物不適宜。)(2)誘導(dǎo)法,也稱調(diào)節(jié)生理?xiàng)l件法(溫度誘導(dǎo)、 營(yíng)養(yǎng)成分控制、DNA合成控制、光照與暗培養(yǎng),芽孢菌的培養(yǎng)與加熱。 特點(diǎn):影響菌體代謝,生命活動(dòng)不正常;同一生長(zhǎng)階段大小不
45、一致的微生物較適宜。)4、 連續(xù)培養(yǎng)的方法及特點(diǎn)。恒化連續(xù)培養(yǎng) 恒濁連續(xù)培養(yǎng) 優(yōu)點(diǎn):縮短發(fā)酵周期;便于自動(dòng)控制;產(chǎn)物質(zhì)量均一; 缺點(diǎn):菌種易退化;易染雜菌。5、 微生物高密度培養(yǎng)的目的及措施。目的主要是用于基因工程菌生產(chǎn)多肽類藥物 措施:微生物在液體培養(yǎng)基中細(xì)胞群體密度超過(guò)常規(guī)培養(yǎng)10倍以上時(shí)的生長(zhǎng)狀態(tài)或培養(yǎng)技術(shù)。6、 絲狀真菌的生長(zhǎng)繁殖方式。斷裂繁殖、無(wú)性孢子繁殖、有性孢子繁殖7、 絲狀真菌的無(wú)性及有性孢子種類。無(wú)性孢子:分生孢子(曲霉、青霉);孢囊孢子(根霉、毛霉;游動(dòng)孢子,水霉);節(jié)孢子(白地霉);后垣孢子(總狀毛霉)。有性孢子:卵孢子(同絲水霉);接合孢子(根霉、毛霉;同宗配合,異宗配
46、合);子囊孢子(子囊菌綱);擔(dān)孢子(擔(dān)子菌綱)。8、 酵母菌的生長(zhǎng)繁殖方式、孢子種類。無(wú)性繁殖 芽殖:主要繁殖方式; 裂殖:八孢裂殖酵母;無(wú)性孢子:擲孢子(擲孢酵母);節(jié)孢子(白地霉);厚垣孢子(假絲酵母)。有性繁殖 子囊孢子:酵母菌生長(zhǎng)后期,通過(guò)細(xì)胞核的減數(shù)分裂,在細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生兩種性質(zhì)不同的四個(gè)單倍體細(xì)胞-子囊孢子,含有兩個(gè)細(xì)胞,兩個(gè)細(xì)胞的酵母菌稱子囊。9、 微生物生長(zhǎng)測(cè)定有哪些方法?10、 黃胺類藥物抗菌的機(jī)制。11、 在微生物培養(yǎng)中,如何縮短其生長(zhǎng)的延遲期,可以在菌種培養(yǎng)基和其他方面采取哪些措施?12乙醇?xì)⒕鷻C(jī)理?脫水劑、蛋白質(zhì)變性劑、脂溶劑;70乙醇?xì)⒕Ч詈?。濃?0%以下只能抑菌;
47、濃度高使蛋白凝固于菌體表面形成膜;抑制乙醇進(jìn)入細(xì)胞。13影響滅菌消毒的因素?菌種特性:種類、菌齡、數(shù)量; 環(huán)境因素:溫度、時(shí)間、介質(zhì)成分、pH值等; 消毒、防腐劑特性:種類、濃度。14、常用滅菌方法及特點(diǎn)。高溫滅菌、熱滅菌、焚燒滅菌法、烘烤(干熱空氣)滅菌法:、火焰滅菌:接種工具、濕熱滅菌、間歇滅菌法15、常用消毒劑、防腐劑種類及特點(diǎn)。 機(jī)理:改變膜透性,影響物質(zhì)交換;氧化作用;原生質(zhì)凝固、沉淀。要求:殺菌、抑菌能力強(qiáng);有效期長(zhǎng);價(jià)格便宜;溶解度大;無(wú)腐蝕性;無(wú)毒或刺激性小。 種類 重金屬鹽:HgCL2(升汞),常用0.1%,但腐蝕性強(qiáng);有機(jī)汞,硫柳汞、袂塔酚(metaphon)等用于血清、疫
48、苗保存。 AgNO3,0.1%-1%用于皮膚消毒,防止淋球菌。16、抗藥性產(chǎn)生的原因。菌體內(nèi)產(chǎn)生了鈍化或分解藥物的酶;改變細(xì)胞膜的透性而導(dǎo)致抗藥性;救護(hù)途徑;泵出機(jī)制;細(xì)胞內(nèi)被藥物作用的部位發(fā)生了改變,目前典型的例子是核糖體發(fā)生了改變。 抗生素 核糖體結(jié)合 蛋白質(zhì)不能合成氧化劑 K2MnO4,0·13用于皮膚,果品、餐具消毒。 H2O2,3%用于清洗傷口、口腔粘膜消毒。 鹵素:氯,碘是常用的消毒劑。 碘,殺菌力強(qiáng),37碘溶于7083的乙醇中成碘酒。機(jī)理:Tyr+I2二碘酪氨酸。氯及氯化物常用于水及食品消毒,與水結(jié)合放出原子氧(O)用于消毒; 次氯酸鈣0.5-1%用于飲水、廁所糞便處理
49、,堿性強(qiáng); 氯,0.2-1ppm用于飲水消毒。 氟,30%硒氟酸,可防止霉菌的生長(zhǎng)。表面活性劑: 新潔爾滅,0.05-0.1%用于皮膚、器械表面消毒。 杜滅酚, 0.05-0.1%也用于消毒。其他消毒防腐劑 硫磺,還原作用,2-3g/m3直接燃燒。 石灰,CaO+水(4:1)。影響滅菌消毒的因素17、主要抗菌素的抑菌機(jī)制。青霉素:抑制細(xì)胞壁合成; 多粘菌素、制霉菌毒:影響膜透性; 鏈霉素、氯霉素:抑制蛋白質(zhì)合成;爭(zhēng)光霉素、博來(lái)霉素:與DNA結(jié)合,干擾DNA復(fù)制;絲裂(自力)霉素:與DNA交聯(lián),破壞DNA復(fù)制;放線菌素D(更生):與DNA結(jié)合,阻止轉(zhuǎn)錄。18、實(shí)驗(yàn)室及生產(chǎn)中常用的微生物培養(yǎng)方法及
50、特點(diǎn)。19、理化因素對(duì)微生物生長(zhǎng)繁殖的影響。第八章 微生物遺傳變異及育種名詞解釋:遺傳性,親代生物通過(guò)傳遞給子代的一套遺傳信息而保持其相同形狀的特性,遺傳是相對(duì)穩(wěn)定的。變異性,在遺傳物質(zhì)水平上發(fā)生改變,而引起相應(yīng)性狀發(fā)生改變的特性,變異是可以遺傳的?;蛐停ㄟz傳型、因子型),決定生物遺傳性的物質(zhì)基礎(chǔ)特征,即全部遺傳因子特征?;颍哂刑囟ê塑账嵝蛄?,能自我復(fù)制的遺傳功能單位;結(jié)構(gòu)基因、調(diào)節(jié)基因。密碼子,遺傳的信息單位,核苷酸的排列順序,三聯(lián)密碼;64種。質(zhì)粒,核外環(huán)狀小型DNA,獨(dú)立復(fù)制穩(wěn)定遺傳突變,生物體表型突然發(fā)生了可遺傳的變化;包括基因突變和染色體畸變基因突變,DNA鏈上的一對(duì)或少數(shù)幾對(duì)
51、堿基發(fā)生改變而引起的表型改變;分為自發(fā)突變和誘變自發(fā)突變,某些微生物在沒(méi)有人工參與下所發(fā)生的突變。染色體畸變,某些理化因子,如射線,紫外線,亞硝酸等,除能引起點(diǎn)突變外,還會(huì)引起DNA分子大損傷,包括染色體易位,倒位,缺失,重復(fù)等,即為染色體畸變。誘變,突變率,一個(gè)細(xì)胞在每一世代中發(fā)生突變的機(jī)率,或單位群體繁殖一代過(guò)程中所形成突變體的個(gè)數(shù);移碼突變,由于誘變劑引起DNA分子中缺失或增加少數(shù)幾個(gè)堿基對(duì),造成突變點(diǎn)以后全部遺傳密碼轉(zhuǎn)錄與轉(zhuǎn)釋發(fā)生錯(cuò)誤。誘變育種,利用理化因素處理微生物細(xì)胞群體,促使突變頻率大幅度提高,然后選出少數(shù)優(yōu)良性狀的菌株,供科研及生產(chǎn)使用基本培養(yǎng)基,完全培養(yǎng)基,補(bǔ)充培養(yǎng)基,野生型
52、,原養(yǎng)型,菌種退化,是群體中一個(gè)從量變到質(zhì)變的逐步演變過(guò)程菌種復(fù)壯,狹義:菌種已退化,通過(guò)純種分離、性能測(cè)定等方法,找出未退化少數(shù)個(gè)體,恢復(fù)菌種原有典性狀。廣義:未退化菌種的純化分離、性能測(cè)定工作,以便性能提高?;蛑亟M(遺傳重組),把兩個(gè)不同性狀個(gè)體細(xì)胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)移到一個(gè)個(gè)體細(xì)胞內(nèi)并使之發(fā)生遺傳變異的過(guò)程。轉(zhuǎn)化,受體細(xì)胞直接吸收來(lái)自供體細(xì)胞的DNA片斷,并把它整合到自己的基因組中,從而獲得供體細(xì)胞部分遺傳性狀。感受態(tài),受體細(xì)胞能接受轉(zhuǎn)化的生理狀態(tài)。轉(zhuǎn)化因子,游離的片斷;由供體提供;自然情況下可由細(xì)菌細(xì)胞自行裂解產(chǎn)生;實(shí)驗(yàn)室里通過(guò)提取獲得;雙鏈有轉(zhuǎn)化能力,單鏈沒(méi)有。轉(zhuǎn)導(dǎo),遺傳物質(zhì)通過(guò)噬菌體
53、攜帶而轉(zhuǎn)移的基因重組。普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo),噬菌體DNA不結(jié)合到寄主染色體;噬菌體蛋白質(zhì)包裹寄主任何一部分DNA片段。局限性轉(zhuǎn)導(dǎo),噬菌體DNA整合到寄主染色體上;噬菌體DNA與寄主染色體特定基因發(fā)生交換轉(zhuǎn)染,用噬菌體或病毒(包括載體)去感染感受態(tài)細(xì)胞,進(jìn)而產(chǎn)生后代溶源轉(zhuǎn)變,溫和噬菌體的基因整合到宿主核基因組上,而使宿主獲得除免疫外的新性狀現(xiàn)象接合,供體、受體完整細(xì)胞直接接觸而傳遞遺傳物質(zhì),進(jìn)行基因重組有性雜交,性細(xì)胞接合后隨之發(fā)生染色體重組,并產(chǎn)生遺傳性后代的一種基因重組方式。準(zhǔn)性生殖,:同生物不同來(lái)源的體細(xì)胞融合后,不通過(guò)減數(shù)分裂而導(dǎo)致低頻率的基因重組。性導(dǎo),原生質(zhì)體融合. 通過(guò)人工方法,使遺傳性狀不
54、同細(xì)胞的原生質(zhì)體發(fā)生融合,并產(chǎn)生重組子的過(guò)程。1、什么是菌種衰退?衰退有哪些表現(xiàn)?應(yīng)如何預(yù)防菌種衰退?見名詞解釋,表現(xiàn)措施:菌種保藏方法;傳代次數(shù);單細(xì)胞分離純化等。2、-BU;亞硝酸如何引起點(diǎn)突變?3、從野生型和營(yíng)養(yǎng)缺陷型混合菌液中,如何檢出營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌珠?介紹四種方法,說(shuō)明其共同原理。夾層培養(yǎng)法;逐個(gè)檢出法;影印接種法;菌絲過(guò)濾法;限量補(bǔ)充培養(yǎng)法 4、證明核酸是遺傳基礎(chǔ)的三個(gè)經(jīng)典實(shí)驗(yàn)的過(guò)程.1928年,Griffith 發(fā)現(xiàn)肺炎雙球菌間的轉(zhuǎn)化現(xiàn)象。1952年,Hershey和Chase噬菌體的感染試驗(yàn)1956年,F(xiàn)raenkel-Conrat病毒的拆開及重建實(shí)驗(yàn)5、轉(zhuǎn)化,接合,轉(zhuǎn)導(dǎo)各有何特
55、點(diǎn)?轉(zhuǎn)化:不需兩個(gè)細(xì)胞直接接觸,供體DNA提取出來(lái),注入受體即可。接合:? 轉(zhuǎn)導(dǎo):需要噬菌體做媒介,不需要細(xì)胞間直接接觸7、 普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)和局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)各有何特點(diǎn)?7、原生質(zhì)體融合的過(guò)程。親本菌株的選擇;原生質(zhì)體制備;原生質(zhì)體融合;融合子再生;融合子檢出。8、 大腸桿菌的接合類型及接合結(jié)果。9、 重組與雜交有何異同?重組:分子水平上的概念;不僅限于雜交一種;雜交:細(xì)胞水平上的概念;雜交必然重組。10、營(yíng)養(yǎng)缺陷型篩選的四個(gè)環(huán)節(jié)?誘變;淘汰野生型;檢出營(yíng)養(yǎng)缺陷型;鑒定營(yíng)養(yǎng)缺陷型。11、 DNA損傷的修復(fù)方式?光復(fù)活、切補(bǔ)修復(fù)、重組修復(fù)、SOS修復(fù)。12、 基因突變規(guī)律?不對(duì)應(yīng)性,稀有性,獨(dú)立性,誘變性
56、,穩(wěn)定性,可逆性,自發(fā)性13、 基因突變類型?堿基對(duì)置換,移碼突變,染色體畸變 14、 證明基因突變結(jié)果與原因不對(duì)應(yīng)的三個(gè)經(jīng)典試驗(yàn)。15、 如何理解微生物是遺傳學(xué)研究的最好材料和對(duì)象?16、已完成基因組測(cè)序工作的第一個(gè)獨(dú)立生活生物是什么?第一個(gè)真核生物?第一個(gè)自養(yǎng)生物?17、誘變育種的過(guò)程。出發(fā)菌株的選擇菌懸液的制備誘變劑及處理的劑量和方法變異菌株的分離和篩選第九章 微生物生態(tài)名詞解釋:生態(tài)系統(tǒng),一定空間內(nèi)生物成分和非生物成分通過(guò)物質(zhì)循環(huán)和能量流動(dòng)互相作用、互相依存而構(gòu)成的一個(gè)生態(tài)學(xué)功能單位。微生物生態(tài),環(huán)境中的微生物及與各種環(huán)境因子的相互作用。生物地球化學(xué)循環(huán),生物圈中各種化學(xué)元素,經(jīng)生物化學(xué)作用在生物圈中的轉(zhuǎn)化和運(yùn)動(dòng)。固氮,大氣中的氮被轉(zhuǎn)化成氨的生化過(guò)程氨化作用,有機(jī)氮化物轉(zhuǎn)化成氨的過(guò)程。硝化作用,無(wú)機(jī)化能硝化細(xì)菌在好氧條件下將氨氧化成硝酸鹽的過(guò)程。同化硝酸鹽還原,硝酸鹽
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