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1、實驗二 抗菌藥物敏感性試驗實驗二 抗菌藥物敏感性試驗張衛(wèi)軍張衛(wèi)軍 趙趙 卓卓顧顧 江江 曾曾 浩浩teltel:753591753591臨床微生物學(xué)和微生物檢驗實驗驗證性實驗驗證性實驗 臨床微生物學(xué)教研室臨床微生物學(xué)教研室1. 紙片擴(kuò)散法2. 稀釋法3. e試驗4 .聯(lián)合藥敏實驗藥敏試驗常用方法 臨床微生物學(xué)教研室臨床微生物學(xué)教研室v了解:了解: 1 1稀釋法、稀釋法、e-teste-test的原理、方法的原理、方法 2 2聯(lián)合藥敏試驗的結(jié)果判讀和臨床意義聯(lián)合藥敏試驗的結(jié)果判讀和臨床意義v理解:理解: 紙片擴(kuò)散法(紙片擴(kuò)散法(k-bk-b法)原理和注意事項法)原理和注意事項v掌握:掌握: 紙片

2、擴(kuò)散法(紙片擴(kuò)散法(k-bk-b法)的操作方法、結(jié)果的判讀和臨法)的操作方法、結(jié)果的判讀和臨床意義床意義 目的要求 臨床微生物學(xué)教研室臨床微生物學(xué)教研室實驗材料菌株菌株大腸埃希菌大腸埃希菌培養(yǎng)基培養(yǎng)基水解酪蛋白瓊脂(水解酪蛋白瓊脂(mhmh瓊脂)瓊脂)紙片紙片環(huán)丙沙星、頭孢唑啉、萬古霉素環(huán)丙沙星、頭孢唑啉、萬古霉素其他其他載玻片、無菌生理鹽水、鑷子、無菌棉簽、游載玻片、無菌生理鹽水、鑷子、無菌棉簽、游標(biāo)卡尺(毫米尺)標(biāo)卡尺(毫米尺) 臨床微生物學(xué)教研室臨床微生物學(xué)教研室ciz50ug/ml ciz50ug/ml實驗原理貼藥敏紙片貼藥敏紙片藥物擴(kuò)散藥物擴(kuò)散形成抑菌圈形成抑菌圈 臨床微生物學(xué)教研室

3、臨床微生物學(xué)教研室實驗內(nèi)容一、操作方法一、操作方法挑混比涂貼量 臨床微生物學(xué)教研室臨床微生物學(xué)教研室實驗內(nèi)容二、紙片擴(kuò)散法結(jié)果判讀及臨床意義二、紙片擴(kuò)散法結(jié)果判讀及臨床意義用游標(biāo)卡尺量取抑菌圈直徑用游標(biāo)卡尺量取抑菌圈直徑參照標(biāo)準(zhǔn)解釋結(jié)果,按抗菌藥物敏感性分為敏感、參照標(biāo)準(zhǔn)解釋結(jié)果,按抗菌藥物敏感性分為敏感、中介和耐藥。中介和耐藥??咕幬锟咕幬锖幜亢幜恳志睆剑ㄒ志睆剑╩mmm) 耐藥耐藥中介中介敏感敏感頭孢唑林頭孢唑林30ug30ug1414151715171818慶大霉素慶大霉素10ug10ug1212131413141515環(huán)丙沙星環(huán)丙沙星50ug50ug151516201620

4、2121 臨床微生物學(xué)教研室臨床微生物學(xué)教研室實驗內(nèi)容三、注意事項三、注意事項1 1、培養(yǎng)基的質(zhì)量,如、培養(yǎng)基的質(zhì)量,如phph、厚度、表面濕度和保存等均會、厚度、表面濕度和保存等均會影響抑菌圈大??;影響抑菌圈大小;2 2、藥敏紙片的藥量、吸水性、直徑、保存等會影響測定、藥敏紙片的藥量、吸水性、直徑、保存等會影響測定結(jié)果;結(jié)果;3 3、接種菌量也是影響結(jié)果的重要因素;、接種菌量也是影響結(jié)果的重要因素;4 4、采用標(biāo)準(zhǔn)菌株同時進(jìn)行藥敏試驗作為質(zhì)控;、采用標(biāo)準(zhǔn)菌株同時進(jìn)行藥敏試驗作為質(zhì)控;5 5、操作因素、操作因素 臨床微生物學(xué)教研室臨床微生物學(xué)教研室24mm15mm 臨床微生物學(xué)教研室臨床微生物

5、學(xué)教研室思 考 題1.1.如何評價抗生素的敏感性?如何評價抗生素的敏感性?2.2.常用體外藥敏試驗方法的比較。常用體外藥敏試驗方法的比較。 臨床微生物學(xué)教研室臨床微生物學(xué)教研室稀釋法 臨床微生物學(xué)教研室臨床微生物學(xué)教研室稀釋法 臨床微生物學(xué)教研室臨床微生物學(xué)教研室結(jié)合稀釋法和擴(kuò)散法原理對微生物藥敏試驗直接定量的技術(shù)結(jié)合稀釋法和擴(kuò)散法原理對微生物藥敏試驗直接定量的技術(shù)e-test 臨床微生物學(xué)教研室臨床微生物學(xué)教研室e-test 臨床微生物學(xué)教研室臨床微生物學(xué)教研室聯(lián)合藥敏試驗 臨床微生物學(xué)教研室臨床微生物學(xué)教研室聯(lián)合藥敏試驗 臨床微生物學(xué)教研室臨床微生物學(xué)教研室聯(lián)合藥敏試驗實驗二 抗菌藥物敏感

6、性試驗 臨床微生物學(xué)教研室臨床微生物學(xué)教研室抗菌藥物敏感試驗的意義v可預(yù)測抗菌治療的效果可預(yù)測抗菌治療的效果; ;v指導(dǎo)抗菌藥物的臨床應(yīng)用指導(dǎo)抗菌藥物的臨床應(yīng)用; ; v監(jiān)測細(xì)菌耐藥性監(jiān)測細(xì)菌耐藥性, ,分析耐藥菌的變遷分析耐藥菌的變遷, ,掌握耐藥菌感掌握耐藥菌感染的流行病學(xué)染的流行病學(xué), ,以控制和預(yù)防耐藥菌感染的發(fā)生和流以控制和預(yù)防耐藥菌感染的發(fā)生和流行。行。 臨床微生物學(xué)教研室臨床微生物學(xué)教研室 將定量抗菌藥敏紙片貼在已接種的測試菌將定量抗菌藥敏紙片貼在已接種的測試菌的的mhmh瓊脂平板上,紙片所含藥物吸收瓊瓊脂平板上,紙片所含藥物吸收瓊脂水分溶解并不斷向紙片周圍擴(kuò)散形成遞脂水分溶解并不斷向紙片周圍擴(kuò)散形成遞減的梯度濃度,在紙片周圍抑菌范圍內(nèi)測減的梯度濃度,在紙片周圍抑菌范圍內(nèi)測試菌生長被抑制而形成的無菌生長抑菌圈,試菌生長被抑制而形成的無菌生長抑菌圈,抑菌圈大小反應(yīng)測試菌對測定藥物的敏感抑菌圈大小反應(yīng)測試菌對測定藥物的敏

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