分解纖維素的微生物的分離

1、一、基礎(chǔ)知識(shí)一、基礎(chǔ)知識(shí) 纖維素是地球上含量最豐富的多糖類物質(zhì)，纖維素是地球上含量最豐富的多糖類物質(zhì)，植物每年產(chǎn)生的纖維素超過(guò)植物每年產(chǎn)生的纖維素超過(guò)7070億噸，其中億噸，其中40%-40%-60%60%能被土壤中能產(chǎn)生纖維素酶的微生物所利用，能被土壤中能產(chǎn)生纖維素酶的微生物所利用，不會(huì)大量積累。不會(huì)大量積累。 在草食性動(dòng)物等的消化道內(nèi)，也在草食性動(dòng)物等的消化道內(nèi)，也共生有共生有分解纖維素的微生物分解纖維素的微生物，其原理也是產(chǎn)生纖維，其原理也是產(chǎn)生纖維素酶而分解纖維素，而人沒(méi)有分解纖維素的素酶而分解纖維素，而人沒(méi)有分解纖維素的能力。能力。纖維二糖纖維二糖C C1 1酶、酶、CxCx酶酶葡萄

2、糖苷酶葡萄糖苷酶葡萄糖葡萄糖纖維素纖維素取二支取二支20mL20mL的試管的試管實(shí)驗(yàn)：纖維素酶分解纖維素的實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)：纖維素酶分解纖維素的實(shí)驗(yàn)各加入一張濾紙條各加入一張濾紙條各加入各加入pH4.8pH4.8，物質(zhì)量為，物質(zhì)量為0.1mol/L0.1mol/L的醋酸醋酸鈉緩沖液的醋酸醋酸鈉緩沖液11ml11ml和和10ml10ml甲甲 乙乙在乙試管中加入在乙試管中加入1mL1mL纖維素酶纖維素酶兩支試管固定在錐形瓶中，放在兩支試管固定在錐形瓶中，放在140r/min140r/min的搖床上振蕩的搖床上振蕩1h1h結(jié)果：乙試管的濾紙條消失結(jié)果：乙試管的濾紙條消失 討論討論：乙試管的濾紙條為什么會(huì)消失

3、？甲試管的作用是：乙試管的濾紙條為什么會(huì)消失？甲試管的作用是什么？什么？提示：提示： 本實(shí)驗(yàn)的本實(shí)驗(yàn)的自變量是纖維素酶的有無(wú)自變量是纖維素酶的有無(wú)，自變，自變量的操縱方法是：在一支試管中添加適量（量的操縱方法是：在一支試管中添加適量（1mL1mL）的纖維素酶溶液，在另一支試管不添加纖維素的纖維素酶溶液，在另一支試管不添加纖維素酶，但需加入等量的緩沖液，不能加入蒸餾水，酶，但需加入等量的緩沖液，不能加入蒸餾水，否則會(huì)影響溶液的否則會(huì)影響溶液的pHpH。實(shí)驗(yàn)分析：實(shí)驗(yàn)分析：P P2727的小實(shí)驗(yàn)是如何構(gòu)成對(duì)照的小實(shí)驗(yàn)是如何構(gòu)成對(duì)照的？的？ 剛果紅能與纖維素形成紅色復(fù)合物剛果紅能與纖維素形成紅色復(fù)合

4、物，而不與，而不與纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。 （二）纖維素分解菌的篩選（二）纖維素分解菌的篩選 當(dāng)我們?cè)诤欣w維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅當(dāng)我們?cè)诤欣w維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅時(shí)，剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成時(shí)，剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)紅色復(fù)合物合物。當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅。當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅- -纖纖維素的復(fù)合物就無(wú)法形成，培養(yǎng)基中就會(huì)出現(xiàn)維素的復(fù)合物就無(wú)法形成，培養(yǎng)基中就會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈以纖維素分解菌為中心的透明圈，這樣我們就，這樣我們就可以通過(guò)是否產(chǎn)生透明圈來(lái)篩選纖維素分解菌?？梢酝ㄟ^(guò)是否產(chǎn)生透明圈來(lái)篩

5、選纖維素分解菌。二、實(shí)二、實(shí) 驗(yàn)驗(yàn) 設(shè)設(shè) 計(jì)計(jì) 請(qǐng)你根據(jù)實(shí)驗(yàn)流程圖和提供的三個(gè)資料以及請(qǐng)你根據(jù)實(shí)驗(yàn)流程圖和提供的三個(gè)資料以及“操作操作提示提示”，在思考有關(guān)問(wèn)題的基礎(chǔ)上，設(shè)計(jì)出一個(gè)詳細(xì)的，在思考有關(guān)問(wèn)題的基礎(chǔ)上，設(shè)計(jì)出一個(gè)詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案。實(shí)驗(yàn)方案。土壤取樣土壤取樣選擇培養(yǎng)選擇培養(yǎng)梯度稀釋梯度稀釋 將樣品涂布在鑒別纖將樣品涂布在鑒別纖 維素分解菌的培養(yǎng)基上維素分解菌的培養(yǎng)基上 篩選產(chǎn)生透篩選產(chǎn)生透 明圈的菌落明圈的菌落 生物與環(huán)境的互相依存關(guān)系，在富含纖維素生物與環(huán)境的互相依存關(guān)系，在富含纖維素的環(huán)境中纖維素分解菌的含量相對(duì)提高，因此從的環(huán)境中纖維素分解菌的含量相對(duì)提高，因此從這種土壤中獲得目的

6、微生物的幾率要高于普通環(huán)這種土壤中獲得目的微生物的幾率要高于普通環(huán)境。境。將濾紙埋在土壤中能使纖維素分解菌相對(duì)將濾紙埋在土壤中能使纖維素分解菌相對(duì)集中，實(shí)際上是人工設(shè)置纖維素分解菌生存的集中，實(shí)際上是人工設(shè)置纖維素分解菌生存的適宜環(huán)境。一般應(yīng)將濾紙埋于深約適宜環(huán)境。一般應(yīng)將濾紙埋于深約10cm10cm左右的左右的土壤中。土壤中。 培養(yǎng)基成分分析培養(yǎng)基成分分析培養(yǎng)基組成培養(yǎng)基組成提供主要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)提供主要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)纖維素粉纖維素粉 5g碳源（能源）碳源（能源）NaNO3 1g氮源、無(wú)機(jī)鹽氮源、無(wú)機(jī)鹽KCl 0.5g Na2HPO47H2O 1.2gKH2PO4 0.9g MgSO4 7H2O 0

7、.5g無(wú)機(jī)鹽無(wú)機(jī)鹽酵母膏酵母膏 0.5g生長(zhǎng)因子、碳源、氮源生長(zhǎng)因子、碳源、氮源水解酵素水解酵素 0.5g氮素、生長(zhǎng)因子氮素、生長(zhǎng)因子溶解后，蒸餾水定容至溶解后，蒸餾水定容至1000mL水水提示：自變量為培養(yǎng)基的種類，即普通培養(yǎng)基和選擇提示：自變量為培養(yǎng)基的種類，即普通培養(yǎng)基和選擇培養(yǎng)基。可用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基與之對(duì)照培養(yǎng)基。可用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基與之對(duì)照,或者將纖或者將纖維素改為葡萄糖。維素改為葡萄糖。有選擇作用，本配方中纖維素作為主要碳源，只有能有選擇作用，本配方中纖維素作為主要碳源，只有能分解纖維素的微生物可以大量繁殖。分解纖維素的微生物可以大量繁殖。比較項(xiàng)目比較項(xiàng)目分解尿素的細(xì)菌分解尿

8、素的細(xì)菌纖維素分解菌纖維素分解菌選選擇擇培培養(yǎng)養(yǎng)基基原理原理培養(yǎng)基培養(yǎng)基類型類型目的目的鑒鑒定定培培養(yǎng)養(yǎng)基基原理原理現(xiàn)象現(xiàn)象方法方法將細(xì)菌涂布在只有將細(xì)菌涂布在只有尿素做氮源的選擇尿素做氮源的選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)基上將細(xì)菌涂布在只有將細(xì)菌涂布在只有纖維素粉做碳源的纖維素粉做碳源的選擇培養(yǎng)基上選擇培養(yǎng)基上固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基篩選菌株篩選菌株選擇培養(yǎng)選擇培養(yǎng)酚酞遇氨顯紅色酚酞遇氨顯紅色剛果紅顯色法剛果紅顯色法思考：本實(shí)驗(yàn)的流程與課題思考：本實(shí)驗(yàn)的流程與課題2 2中的實(shí)驗(yàn)流程有哪些中的實(shí)驗(yàn)流程有哪些異同？異同？ 本實(shí)驗(yàn)流程與課題本實(shí)驗(yàn)流程與課題2 2的流程的區(qū)別如下。課的流程的區(qū)別如

9、下。課題題2 2是將土樣制成的菌懸液直接涂布在是將土樣制成的菌懸液直接涂布在以尿素為以尿素為唯一氮源的選擇性培養(yǎng)基上，直接分離唯一氮源的選擇性培養(yǎng)基上，直接分離得到菌得到菌落。本課題通過(guò)落。本課題通過(guò)選擇培養(yǎng)，使纖維素分解菌得選擇培養(yǎng)，使纖維素分解菌得到增殖后，到增殖后，再將菌液涂布在選擇培養(yǎng)基上。其再將菌液涂布在選擇培養(yǎng)基上。其他步驟基本一致。他步驟基本一致。 101102103104105106培養(yǎng)基組成培養(yǎng)基組成提供的主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)提供的主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)CMC-Na 510g碳源碳源酵母膏酵母膏 1g碳源、氮源、生長(zhǎng)因子碳源、氮源、生長(zhǎng)因子KH2PO4 0.25g無(wú)機(jī)鹽無(wú)機(jī)鹽土豆汁土豆汁 10

10、0mL碳源、生長(zhǎng)因子碳源、生長(zhǎng)因子瓊脂瓊脂 15g凝固劑凝固劑上述物質(zhì)溶解后，加蒸上述物質(zhì)溶解后，加蒸餾水定容至餾水定容至1000mL氫元素、氧元素氫元素、氧元素鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基(水溶性羧甲基纖維素鈉水溶性羧甲基纖維素鈉)比較比較項(xiàng)目項(xiàng)目分解尿素的細(xì)菌分解尿素的細(xì)菌纖維素分解菌纖維素分解菌選選擇擇培培養(yǎng)養(yǎng)原理原理培養(yǎng)基類培養(yǎng)基類型型目的目的鑒鑒定定培培養(yǎng)養(yǎng)基基原原理理現(xiàn)現(xiàn)象象方方法法在細(xì)菌分解尿素的化學(xué)反應(yīng)在細(xì)菌分解尿素的化學(xué)反應(yīng)中，細(xì)菌合成的脲酶將尿素中，細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解成了氨，氨會(huì)使培養(yǎng)基分解成了氨，氨會(huì)使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)，的堿性增強(qiáng)，pHpH升高。

11、在培升高。在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，如養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，如果果pHpH升高指示劑會(huì)變紅升高指示劑會(huì)變紅剛果紅可以與纖維素形成剛果紅可以與纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被纖維素酶催化分解后紅色纖維素酶催化分解后紅色復(fù)合物無(wú)法形成，培養(yǎng)基復(fù)合物無(wú)法形成，培養(yǎng)基上就會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解上就會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈菌為中心的透明圈觀察菌落周圍是否有著色的觀察菌落周圍是否有著色的環(huán)帶出現(xiàn)來(lái)鑒定尿素分解菌環(huán)帶出現(xiàn)來(lái)鑒定尿素分解菌觀察菌落周圍是否出現(xiàn)觀察菌落周圍是否出現(xiàn)透明圈來(lái)篩選纖維素分解菌透明圈來(lái)篩選纖維素分解菌脲酶檢測(cè)法脲酶檢測(cè)法剛果紅染色法剛果紅染色法方法一中方法一

12、中NaCl溶液的作用？溶液的作用？思考：思考： 漂洗作用漂洗作用，洗去與纖維素結(jié)合不牢的剛果紅，洗去與纖維素結(jié)合不牢的剛果紅，以免出現(xiàn)的透明圈不夠清晰。用這方法可以判斷酶以免出現(xiàn)的透明圈不夠清晰。用這方法可以判斷酶活力的大小，實(shí)際上剛果紅是結(jié)合到培養(yǎng)基的多糖活力的大小，實(shí)際上剛果紅是結(jié)合到培養(yǎng)基的多糖底物，但分解纖維素的細(xì)菌可以產(chǎn)生纖維素酶，能底物，但分解纖維素的細(xì)菌可以產(chǎn)生纖維素酶，能分解這個(gè)多糖底物成為單糖，這樣剛果紅就不能結(jié)分解這個(gè)多糖底物成為單糖，這樣剛果紅就不能結(jié)合上去了，氯化鈉溶液就可以使結(jié)合不牢的剛果紅合上去了，氯化鈉溶液就可以使結(jié)合不牢的剛果紅洗去，這樣就留下大大小小的透明圈，

13、大的透明圈洗去，這樣就留下大大小小的透明圈，大的透明圈當(dāng)然分解纖維素的能就強(qiáng)！當(dāng)然分解纖維素的能就強(qiáng)！ 四、結(jié)果分析與評(píng)價(jià)四、結(jié)果分析與評(píng)價(jià) 1.1.培養(yǎng)基的制作是否合格以及選擇培養(yǎng)基是否篩選培養(yǎng)基的制作是否合格以及選擇培養(yǎng)基是否篩選出菌落出菌落 對(duì)照的培養(yǎng)基在培養(yǎng)過(guò)程中沒(méi)有菌落生長(zhǎng)則說(shuō)明對(duì)照的培養(yǎng)基在培養(yǎng)過(guò)程中沒(méi)有菌落生長(zhǎng)則說(shuō)明培養(yǎng)基制作合格。培養(yǎng)基制作合格。 如果觀察到產(chǎn)生透明圈的菌落，則說(shuō)明可能獲得如果觀察到產(chǎn)生透明圈的菌落，則說(shuō)明可能獲得了分解纖維素的微生物。了分解纖維素的微生物。 2.2.分離的結(jié)果是否一致分離的結(jié)果是否一致 由于在土壤中細(xì)菌的數(shù)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于真菌和放線菌由于在土壤中細(xì)菌

14、的數(shù)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于真菌和放線菌的數(shù)量，因此最容易分離得到的是細(xì)菌。但由于所取的數(shù)量，因此最容易分離得到的是細(xì)菌。但由于所取土樣的環(huán)境不同，不同同學(xué)也可能得到真菌和放線菌土樣的環(huán)境不同，不同同學(xué)也可能得到真菌和放線菌等不同的分離結(jié)果。等不同的分離結(jié)果。 為了確定分離得到的是纖維素分解菌，為了確定分離得到的是纖維素分解菌，還需要進(jìn)行還需要進(jìn)行_實(shí)驗(yàn)，纖維素酶的實(shí)驗(yàn)，纖維素酶的發(fā)酵方法有發(fā)酵方法有_ _ 發(fā)酵和發(fā)酵和_ _ 發(fā)酵。纖發(fā)酵。纖維素酶測(cè)定方法是對(duì)纖維素酶分解濾紙等纖維素酶測(cè)定方法是對(duì)纖維素酶分解濾紙等纖維素所產(chǎn)生的維素所產(chǎn)生的_ _ 含量進(jìn)行定量測(cè)定。含量進(jìn)行定量測(cè)定。發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶發(fā)酵產(chǎn)纖

15、維素酶 液體液體 固體固體 五、課題延伸五、課題延伸分解分解纖維纖維素的素的微生微生物的物的分離分離纖維素酶纖維素酶種類、作用、催化活力種類、作用、催化活力剛果紅染色剛果紅染色篩選原理篩選原理實(shí)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)設(shè)設(shè)計(jì)計(jì)土壤取樣土壤取樣選擇培養(yǎng)選擇培養(yǎng)涂布培養(yǎng)涂布培養(yǎng)純化培養(yǎng)純化培養(yǎng)前置染色法前置染色法后置染色法后置染色法富含纖維素土壤富含纖維素土壤增大分解菌含量增大分解菌含量染色鑒別染色鑒別分離出分解菌分離出分解菌課堂總結(jié)課堂總結(jié)高考真題高考真題(2011新課標(biāo)全國(guó)新課標(biāo)全國(guó)I卷卷)有些細(xì)菌可分解原油，從而消除由原有些細(xì)菌可分解原油，從而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同學(xué)欲從污染的土壤中篩油泄漏造成的

16、土壤污染。某同學(xué)欲從污染的土壤中篩選出高效降解原油的菌株?；卮饐?wèn)題：選出高效降解原油的菌株?；卮饐?wèn)題：在篩選過(guò)程中，應(yīng)將土壤樣品稀釋液接種于以在篩選過(guò)程中，應(yīng)將土壤樣品稀釋液接種于以 為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上，從功能上講，該培養(yǎng)為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上，從功能上講，該培養(yǎng)基屬于基屬于 培養(yǎng)基。培養(yǎng)基。純化菌種時(shí)，為了得到單菌落，常采用的接種方法有純化菌種時(shí)，為了得到單菌落，常采用的接種方法有兩種，即兩種，即 和和 。 為了篩選出高效菌株，可比較單菌落周圍為了篩選出高效菌株，可比較單菌落周圍透明透明圈的大圈的大小，小，透明透明圈大說(shuō)明該菌株的降解能力圈大說(shuō)明該菌株的降解能力 。通常情況下，在微生

17、物培養(yǎng)過(guò)程中實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌通常情況下，在微生物培養(yǎng)過(guò)程中實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法有灼燒滅菌、方法有灼燒滅菌、 和和 。無(wú)。無(wú)菌技術(shù)要求試驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈菌技術(shù)要求試驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈 附近進(jìn)行附近進(jìn)行，以避免周圍環(huán)境中微生物的污染。，以避免周圍環(huán)境中微生物的污染。原油原油 選擇選擇平板劃線法平板劃線法 稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法強(qiáng)強(qiáng)干熱滅菌干熱滅菌高壓蒸汽滅菌高壓蒸汽滅菌火焰火焰(2016新課標(biāo)全國(guó)新課標(biāo)全國(guó)I卷卷) 生物生物選修選修1：生物技術(shù)實(shí)踐：生物技術(shù)實(shí)踐（15分）分） 空氣中的微生物在重力等作用下，可以一定程度地沉降。某研究空氣中的微生物在重力等作用下，可以一定程度地沉降。某研究小組欲

18、用平板收集教室空氣中的微生物，以了解教室內(nèi)不同高度小組欲用平板收集教室空氣中的微生物，以了解教室內(nèi)不同高度空氣中微生物的分布情況。實(shí)驗(yàn)步驟如下：空氣中微生物的分布情況。實(shí)驗(yàn)步驟如下：配置培養(yǎng)基（成分：牛肉膏、蛋白胨、配置培養(yǎng)基（成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O）; 制作無(wú)菌平板；制作無(wú)菌平板； 設(shè)置空白對(duì)照組和若干實(shí)驗(yàn)組，進(jìn)行相關(guān)操作；設(shè)置空白對(duì)照組和若干實(shí)驗(yàn)組，進(jìn)行相關(guān)操作； 將各組平板置于將各組平板置于37恒溫箱中培養(yǎng)一段時(shí)間，統(tǒng)計(jì)各組平板上恒溫箱中培養(yǎng)一段時(shí)間，統(tǒng)計(jì)各組平板上菌落的平均數(shù)。菌落的平均數(shù)。 回答下列問(wèn)題回答下列問(wèn)題:（1）該培養(yǎng)基中微生物所需的氮來(lái)源于）該培養(yǎng)基中

19、微生物所需的氮來(lái)源于_。若要完成步驟，該培養(yǎng)基中的成分若要完成步驟，該培養(yǎng)基中的成分X通常是通常是_。 牛肉膏、蛋白胨牛肉膏、蛋白胨瓊脂瓊脂配置培養(yǎng)基（成分：牛肉膏、蛋白胨、配置培養(yǎng)基（成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O）; 制作無(wú)菌平板；制作無(wú)菌平板； 設(shè)置空白對(duì)照組和若干實(shí)驗(yàn)組，進(jìn)行相關(guān)操作；設(shè)置空白對(duì)照組和若干實(shí)驗(yàn)組，進(jìn)行相關(guān)操作； 將各組平板置于將各組平板置于37恒溫箱中培養(yǎng)一段時(shí)間，統(tǒng)計(jì)各組平板上恒溫箱中培養(yǎng)一段時(shí)間，統(tǒng)計(jì)各組平板上菌落的平均數(shù)。菌落的平均數(shù)。 回答下列問(wèn)題回答下列問(wèn)題:（1）該培養(yǎng)基中微生物所需的氮來(lái)源于）該培養(yǎng)基中微生物所需的氮來(lái)源于_。若要完成步驟，該培

20、養(yǎng)基中的成分若要完成步驟，該培養(yǎng)基中的成分X通常是通常是_。 （2）步驟中，實(shí)驗(yàn)組的操作是）步驟中，實(shí)驗(yàn)組的操作是_。 （3）若在某次調(diào)查中，某一實(shí)驗(yàn)組平板上菌落平均數(shù)為）若在某次調(diào)查中，某一實(shí)驗(yàn)組平板上菌落平均數(shù)為36個(gè)個(gè)/平平板，而空白對(duì)照組的一個(gè)平板上出現(xiàn)了板，而空白對(duì)照組的一個(gè)平板上出現(xiàn)了6個(gè)菌落，這種結(jié)果說(shuō)明在個(gè)菌落，這種結(jié)果說(shuō)明在此次調(diào)查中出現(xiàn)了此次調(diào)查中出現(xiàn)了_現(xiàn)象。若將現(xiàn)象。若將30（即（即36-6）個(gè)）個(gè)/平平板作為本組菌落數(shù)的平均值，該做法板作為本組菌落數(shù)的平均值，該做法_（填（填“正正確確”或或“不正確不正確”）。）。 將各實(shí)驗(yàn)組平板分別放置在教室不同高度的位置將各實(shí)驗(yàn)組

21、平板分別放置在教室不同高度的位置上，開蓋暴露一段時(shí)間上，開蓋暴露一段時(shí)間污染污染不正確不正確牛肉膏、蛋白胨牛肉膏、蛋白胨瓊脂瓊脂（20152015新課標(biāo)卷新課標(biāo)卷，39，15分）分）39.生物生物選修選修1：生物技術(shù)實(shí)踐：生物技術(shù)實(shí)踐已知微生物已知微生物A可以產(chǎn)生油脂，微生物可以產(chǎn)生油脂，微生物B可以產(chǎn)生脂肪酶。脂肪酶和油可以產(chǎn)生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生產(chǎn)?；卮鹩嘘P(guān)問(wèn)題：脂可用于生物柴油的生產(chǎn)?；卮鹩嘘P(guān)問(wèn)題：（1）顯微觀察時(shí)，微生物）顯微觀察時(shí)，微生物A菌體中的油脂通?？捎糜诰w中的油脂通?？捎糜?染色。微染色。微生物生物A產(chǎn)生的油脂不易揮發(fā)，可選用產(chǎn)生的油脂不易揮發(fā)，可選用 （

22、填（填“萃取法萃取法”或或“水蒸水蒸氣蒸餾法氣蒸餾法”）從菌體中提取。）從菌體中提取。（2）為了從自然界中獲得能產(chǎn)生脂肪酶的微生物）為了從自然界中獲得能產(chǎn)生脂肪酶的微生物B的單菌落，可從的單菌落，可從含有油料作物種子腐爛物的土壤中取樣，并應(yīng)選用以含有油料作物種子腐爛物的土壤中取樣，并應(yīng)選用以 為唯一碳為唯一碳源的固體培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。源的固體培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。（3）若要測(cè)定培養(yǎng)液中微生物）若要測(cè)定培養(yǎng)液中微生物B的菌體數(shù)，可在顯微鏡下用的菌體數(shù)，可在顯微鏡下用 直直接計(jì)數(shù)；若要測(cè)定其活菌數(shù)量，可選用接計(jì)數(shù)；若要測(cè)定其活菌數(shù)量，可選用 法進(jìn)行計(jì)數(shù)。法進(jìn)行計(jì)數(shù)。（4）為了確定微生物）為了確定微生物B產(chǎn)

23、生的脂肪酶的最適溫度，某同學(xué)測(cè)得相同產(chǎn)生的脂肪酶的最適溫度，某同學(xué)測(cè)得相同時(shí)間內(nèi)，在時(shí)間內(nèi)，在35、40、45溫度下降解溫度下降解10g油脂所需酶量依次為油脂所需酶量依次為4mg、1mg、6mg，則上述三個(gè)溫度中，則上述三個(gè)溫度中， 條件下該酶活力最小條件下該酶活力最小。為了進(jìn)一步確定該酶的最適溫度，應(yīng)圍繞。為了進(jìn)一步確定該酶的最適溫度，應(yīng)圍繞 設(shè)計(jì)后續(xù)實(shí)驗(yàn)。設(shè)計(jì)后續(xù)實(shí)驗(yàn)。蘇丹蘇丹（或蘇丹（或蘇丹） 萃取法萃取法油脂油脂血細(xì)胞計(jì)數(shù)板血細(xì)胞計(jì)數(shù)板 稀釋涂布平板稀釋涂布平板45 40（20142014課標(biāo)課標(biāo)卷）卷）39.39.生物生物選修選修1 1：生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)：生物技術(shù)實(shí)驗(yàn) （1515分）分）

24、植物秸稈中的纖維素可被某些微生物分解?；卮鹣铝袉?wèn)題植物秸稈中的纖維素可被某些微生物分解?；卮鹣铝袉?wèn)題: :（1 1）分解秸稈中纖維素的微生物能分泌纖維素酶，該酶是由）分解秸稈中纖維素的微生物能分泌纖維素酶，該酶是由3 3種種組分組成的復(fù)合酶，其中的葡萄糖苷酶可將組分組成的復(fù)合酶，其中的葡萄糖苷酶可將 分解成分解成 。（2 2）在含纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅（）在含纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅（CRCR）時(shí)，）時(shí)，CRCR可與纖維可與纖維素形成素形成 色復(fù)合物。用含有色復(fù)合物。用含有CRCR的該種培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解的該種培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時(shí)，培養(yǎng)基上會(huì)出現(xiàn)以該菌的菌落為中心的菌時(shí)，培養(yǎng)基上會(huì)

25、出現(xiàn)以該菌的菌落為中心的 。 纖維二糖纖維二糖 葡萄糖葡萄糖紅紅 透明圈透明圈（3 3）為從富含纖維素的土壤中分離獲得纖維素分解菌）為從富含纖維素的土壤中分離獲得纖維素分解菌的單菌落，某同學(xué)設(shè)計(jì)了甲、乙兩種培養(yǎng)基（成分見(jiàn)下的單菌落，某同學(xué)設(shè)計(jì)了甲、乙兩種培養(yǎng)基（成分見(jiàn)下表）：表）：注：注：“+”+”表示有，表示有，“”表示無(wú)。表示無(wú)。據(jù)表判斷，培養(yǎng)基甲據(jù)表判斷，培養(yǎng)基甲 （填（填“能能”或或“不能不能”）用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是）用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是 ；培養(yǎng)基乙；培養(yǎng)基乙 （填（填“能能”或或“不能不能”）用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因）用于分離和鑒別纖維素分解菌，原

26、因是是 ；酵母膏酵母膏無(wú)機(jī)鹽無(wú)機(jī)鹽淀粉淀粉纖維素粉纖維素粉 瓊脂瓊脂CRCR溶液溶液水水培養(yǎng)基甲培養(yǎng)基甲+ + + + +- -+ + +培養(yǎng)基乙培養(yǎng)基乙+ + + +- -+ + + +不能不能液體培養(yǎng)基不能用于分離單菌落液體培養(yǎng)基不能用于分離單菌落不能不能乙培養(yǎng)基中沒(méi)有纖維素，不會(huì)形成乙培養(yǎng)基中沒(méi)有纖維素，不會(huì)形成CR-CR-纖維素紅色復(fù)合物，即使出現(xiàn)單菌落也纖維素紅色復(fù)合物，即使出現(xiàn)單菌落也不能確定其為纖維素分解菌不能確定其為纖維素分解菌(2016(2016四川卷四川卷)10.)10.（1212分）分）圖甲是從土壤中篩選產(chǎn)脲酶細(xì)菌的過(guò)程，圖乙是脲酶基圖甲是從土壤中篩選產(chǎn)脲酶細(xì)菌的過(guò)程，圖

27、乙是脲酶基因轉(zhuǎn)錄的因轉(zhuǎn)錄的mRNAmRNA部分序列部分序列（1）圖中選擇培養(yǎng)基應(yīng)以）圖中選擇培養(yǎng)基應(yīng)以 為唯一氮源；鑒別培養(yǎng)基為唯一氮源；鑒別培養(yǎng)基還需添加還需添加 作指示劑，作指示劑，產(chǎn)脲酶細(xì)菌在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng)一產(chǎn)脲酶細(xì)菌在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng)一段時(shí)間后，其菌落周圍的指示劑將變成段時(shí)間后，其菌落周圍的指示劑將變成 色。色。（2）在）在5個(gè)細(xì)菌培養(yǎng)基平板上，均接種稀釋倍數(shù)為個(gè)細(xì)菌培養(yǎng)基平板上，均接種稀釋倍數(shù)為105 的土壤樣品液的土壤樣品液0.1mL，培養(yǎng)一段時(shí)間后，平板上長(zhǎng)出的細(xì)，培養(yǎng)一段時(shí)間后，平板上長(zhǎng)出的細(xì)菌菌落數(shù)分別為菌菌落數(shù)分別為13、156、462、178和和191。該過(guò)程采取的接種方法

28、是該過(guò)程采取的接種方法是 ，每克土壤樣品中的細(xì)菌，每克土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)量為數(shù)量為 108個(gè)；與血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)法相比，此計(jì)數(shù)個(gè)；與血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)法相比，此計(jì)數(shù)方法測(cè)得的細(xì)菌數(shù)較方法測(cè)得的細(xì)菌數(shù)較 。 尿素尿素酚紅酚紅紅紅稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法1.751.75少少（3）現(xiàn)有一菌株的脲酶由于基因突變而失活，突變后基）現(xiàn)有一菌株的脲酶由于基因突變而失活，突變后基因轉(zhuǎn)錄的因轉(zhuǎn)錄的mRNAmRNA在圖乙箭頭所示位置增加了在圖乙箭頭所示位置增加了7070個(gè)核苷酸，使個(gè)核苷酸，使圖乙序列中出現(xiàn)終止密碼（終止密碼有圖乙序列中出現(xiàn)終止密碼（終止密碼有UAGUAG、UGAUGA和和UAAUAA）。突變基

29、因轉(zhuǎn)錄的。突變基因轉(zhuǎn)錄的mRNAmRNA中，終止密碼為中，終止密碼為 ，突變基因表，突變基因表達(dá)的蛋白質(zhì)含達(dá)的蛋白質(zhì)含 個(gè)氨基酸。個(gè)氨基酸。UGAUGA115115(2016全國(guó)卷全國(guó)卷III)39某同學(xué)用新鮮的泡菜濾液為實(shí)驗(yàn)材料純化乳酸某同學(xué)用新鮮的泡菜濾液為實(shí)驗(yàn)材料純化乳酸菌。分離純化所用固體培養(yǎng)基中因含有碳酸鈣而不透明，乳酸菌產(chǎn)菌。分離純化所用固體培養(yǎng)基中因含有碳酸鈣而不透明，乳酸菌產(chǎn)生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣?；卮鹣铝袉?wèn)題：生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣。回答下列問(wèn)題：（1）分離純化乳酸菌時(shí)，首先需要用）分離純化乳酸菌時(shí)，首先需要用_對(duì)泡菜濾對(duì)泡菜濾液進(jìn)行梯度稀釋，進(jìn)行梯度稀釋的理

30、由是液進(jìn)行梯度稀釋，進(jìn)行梯度稀釋的理由是_。（2）推測(cè)在分離純化所用的培養(yǎng)基中加入碳酸鈣的作用有）推測(cè)在分離純化所用的培養(yǎng)基中加入碳酸鈣的作用有_和和_。分離純化時(shí)應(yīng)挑選出。分離純化時(shí)應(yīng)挑選出_的菌落作為候選菌。的菌落作為候選菌。（3）乳酸菌在）乳酸菌在-20長(zhǎng)期保存時(shí)，菌液中常需要加入一定量的長(zhǎng)期保存時(shí)，菌液中常需要加入一定量的_（填（填“蒸餾水蒸餾水”、“甘油甘油”或或“碳酸鈣碳酸鈣”）。）。無(wú)菌水無(wú)菌水在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的乳酸菌將被分散在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的乳酸菌將被分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落成單個(gè)細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落

31、中和乳酸菌代謝過(guò)程中產(chǎn)生的乳酸中和乳酸菌代謝過(guò)程中產(chǎn)生的乳酸 鑒別能產(chǎn)生乳酸的鑒別能產(chǎn)生乳酸的乳酸菌乳酸菌產(chǎn)生透明產(chǎn)生透明圈圈甘油甘油（20142014課標(biāo)課標(biāo)卷）卷）3939 生物生物選修選修1 1：生物技術(shù)實(shí)踐：生物技術(shù)實(shí)踐 （1515分）分）為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況，某研究小組測(cè)定了該河流水樣中的細(xì)菌含量，并為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況，某研究小組測(cè)定了該河流水樣中的細(xì)菌含量，并進(jìn)行了細(xì)菌的分離等工作。回答下列問(wèn)題：進(jìn)行了細(xì)菌的分離等工作。回答下列問(wèn)題：（1）該小組采用）該小組采用 法檢測(cè)水樣中的細(xì)菌含量。在涂布接種前，隨機(jī)法檢測(cè)水樣中的細(xì)菌含量。在涂布接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空平板先行培

32、養(yǎng)了一段時(shí)間，這樣做的目的是取若干滅菌后的空平板先行培養(yǎng)了一段時(shí)間，這樣做的目的是 ；然后，將然后，將1mL水樣稀釋水樣稀釋100倍，在倍，在3個(gè)平板上用涂布法分別接入個(gè)平板上用涂布法分別接入0.1mL稀釋液；經(jīng)稀釋液；經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，適當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為39、38和和37。據(jù)此可得出每升水樣中的。據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為活菌數(shù)為 。（2）該小組采用平板劃線法分離水樣中的細(xì)菌。操作時(shí)，接種環(huán)通過(guò)酒精燈）該小組采用平板劃線法分離水樣中的細(xì)菌。操作時(shí)，接種環(huán)通過(guò)酒精燈火焰進(jìn)行火焰進(jìn)行 滅菌，在第二次及以后劃線時(shí)，總是從上一次的末端開始劃線。滅菌，在第二次及

33、以后劃線時(shí)，總是從上一次的末端開始劃線。這樣做的目的是這樣做的目的是 。（3）示意圖）示意圖A和和B中，中， 表示的是用稀釋涂布平板法表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。（4 4）該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻，一部分進(jìn)行靜置培養(yǎng)）該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻，一部分進(jìn)行靜置培養(yǎng)，另一部分進(jìn)行振蕩培養(yǎng)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長(zhǎng)速，另一部分進(jìn)行振蕩培養(yǎng)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長(zhǎng)速度快。分析其原因是：振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液的度快。分析其原因是：振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液的 的含量，同時(shí)可的含量，同時(shí)可以使菌體與

34、培養(yǎng)液充分接觸，提高以使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高 的利用率。的利用率。稀釋涂布平板稀釋涂布平板檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格3.8107灼燒灼燒將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個(gè)菌落將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個(gè)菌落B 溶解氧溶解氧營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) （20142014四川卷）四川卷）10.10.有機(jī)農(nóng)藥苯磺隆是一種除草劑，長(zhǎng)期使用會(huì)污染環(huán)境。研有機(jī)農(nóng)藥苯磺隆是一種除草劑，長(zhǎng)期使用會(huì)污染環(huán)境。研究發(fā)現(xiàn)，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分離降解苯磺隆的菌株和探索其降究發(fā)現(xiàn)，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分離降解苯磺隆的菌株和探索其降解機(jī)制的實(shí)驗(yàn)過(guò)程如圖甲、乙所示。解機(jī)制的

35、實(shí)驗(yàn)過(guò)程如圖甲、乙所示。（1 1）微生物生長(zhǎng)繁殖所需的主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有碳源、水、）微生物生長(zhǎng)繁殖所需的主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有碳源、水、_四類，該實(shí)四類，該實(shí)驗(yàn)所用的選擇培養(yǎng)基只能以苯磺隆作為唯一碳源，其原因是驗(yàn)所用的選擇培養(yǎng)基只能以苯磺隆作為唯一碳源，其原因是_。（2 2）與微生物培養(yǎng)基相比，植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基常需添加生長(zhǎng)素和）與微生物培養(yǎng)基相比，植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基常需添加生長(zhǎng)素和_，這些植物激素一般需要事先單獨(dú)配置成，這些植物激素一般需要事先單獨(dú)配置成_保存?zhèn)溆谩１４鎮(zhèn)溆?。? 3）純化菌株時(shí)，通常使用的劃線工具是）純化菌株時(shí)，通常使用的劃線工具是_ _ _ _。劃線的某個(gè)平板培養(yǎng)后。劃線的某個(gè)平

36、板培養(yǎng)后，第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長(zhǎng)滿了菌，第二劃線區(qū)域的第一條線上無(wú)菌，第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長(zhǎng)滿了菌，第二劃線區(qū)域的第一條線上無(wú)菌落，其它劃線上有菌落。造成劃線無(wú)菌落可能的操作失誤有可能是落，其它劃線上有菌落。造成劃線無(wú)菌落可能的操作失誤有可能是_。（4 4）為探究苯磺隆的降解機(jī)制，將該菌種的培養(yǎng)液過(guò)濾離心，取上清液做圖）為探究苯磺隆的降解機(jī)制，將該菌種的培養(yǎng)液過(guò)濾離心，取上清液做圖乙所示實(shí)驗(yàn)。該實(shí)驗(yàn)的假設(shè)是乙所示實(shí)驗(yàn)。該實(shí)驗(yàn)的假設(shè)是_，該實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)是否合理？為什么？，該實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)是否合理？為什么？_。 氮源和無(wú)機(jī)鹽氮源和無(wú)機(jī)鹽 只有能利用苯磺隆的微生物能正常生長(zhǎng)和繁殖只有能利用

37、苯磺隆的微生物能正常生長(zhǎng)和繁殖細(xì)胞分裂素細(xì)胞分裂素母液母液接種環(huán)接種環(huán)接種環(huán)灼燒后未冷卻接種環(huán)灼燒后未冷卻目的菌株能分泌降解苯磺隆的酶目的菌株能分泌降解苯磺隆的酶 不合理，缺少空白對(duì)照不合理，缺少空白對(duì)照（江蘇卷）（江蘇卷）30.（8分）為了獲得分）為了獲得-胡蘿卜素產(chǎn)品，某小組開展了產(chǎn)胡蘿卜素產(chǎn)品，某小組開展了產(chǎn)-胡蘿胡蘿卜素酵母的篩選與色素提取實(shí)驗(yàn)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：卜素酵母的篩選與色素提取實(shí)驗(yàn)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：（1）實(shí)驗(yàn)用的培養(yǎng)皿常用的兩種滅菌方法是）實(shí)驗(yàn)用的培養(yǎng)皿常用的兩種滅菌方法是 ；為了減少滅；為了減少滅菌后器皿被污染，滅菌前應(yīng)該菌后器皿被污染，滅菌前應(yīng)該。（2）為了篩選出酵母菌，培

38、養(yǎng)基中添加了青霉素，其目的是）為了篩選出酵母菌，培養(yǎng)基中添加了青霉素，其目的是。（3）右圖是滅菌鍋及其局部剖面示意圖，圖中甲、乙、丙指示的依次是）右圖是滅菌鍋及其局部剖面示意圖，圖中甲、乙、丙指示的依次是。（填序號(hào)）。（填序號(hào)）安全閥、放氣閥、壓力表安全閥、放氣閥、壓力表放氣閥、安全閥、壓力表放氣閥、安全閥、壓力表安全閥、放氣閥、溫度表安全閥、放氣閥、溫度表放氣閥、安全閥、溫度表放氣閥、安全閥、溫度表（4）為了將分離到的菌株純化，挑取了菌落在）為了將分離到的菌株純化，挑取了菌落在3塊相同平板上劃線，結(jié)果塊相同平板上劃線，結(jié)果其中一塊平板的各劃線區(qū)均未見(jiàn)菌生長(zhǎng)，最可能的原因是其中一塊平板的各劃線

39、區(qū)均未見(jiàn)菌生長(zhǎng)，最可能的原因是。（5）為增加）為增加-胡蘿卜素提取量，在研磨酵母細(xì)胞時(shí)，添加石英砂的目的是胡蘿卜素提取量，在研磨酵母細(xì)胞時(shí)，添加石英砂的目的是；研磨時(shí)（填；研磨時(shí)（填“需要需要”或或“不需要不需要”）添加）添加CaCO3，理由是，理由是 。干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌用報(bào)紙包扎器皿用報(bào)紙包扎器皿抑制細(xì)菌（放線菌）生長(zhǎng)抑制細(xì)菌（放線菌）生長(zhǎng) 接種環(huán)溫度過(guò)高，菌種被殺死接種環(huán)溫度過(guò)高，菌種被殺死不需要不需要 -胡蘿卜素較耐酸胡蘿卜素較耐酸（2013新課標(biāo)新課標(biāo)II卷）卷）39.生物生物選修選修1：生物技術(shù)實(shí)踐：生物技術(shù)實(shí)踐（15分）分）臨床使用抗生素前，有時(shí)需要做細(xì)

40、菌耐藥實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)時(shí)，首先要臨床使用抗生素前，有時(shí)需要做細(xì)菌耐藥實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)時(shí)，首先要從病人身上獲取少量樣本，然后按照一定的實(shí)驗(yàn)步驟操作，以確定從病人身上獲取少量樣本，然后按照一定的實(shí)驗(yàn)步驟操作，以確定某致病菌對(duì)不同抗生素的敏感性。回答下列問(wèn)題：某致病菌對(duì)不同抗生素的敏感性。回答下列問(wèn)題：（1）為了從樣本中獲取致病菌單菌落，可用）為了從樣本中獲取致病菌單菌落，可用 法或法或 法法將樣本接種于固體培養(yǎng)基表面，經(jīng)過(guò)選擇培養(yǎng)、鑒別等步驟獲得。將樣本接種于固體培養(yǎng)基表面，經(jīng)過(guò)選擇培養(yǎng)、鑒別等步驟獲得。（2）取該單菌落適當(dāng)稀釋，用）取該單菌落適當(dāng)稀釋，用 法接種于固體培養(yǎng)基表面法接種于固體培養(yǎng)基表面，在，在

41、37培養(yǎng)箱中培養(yǎng)培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h，使其均勻生長(zhǎng)，布滿平板。，使其均勻生長(zhǎng)，布滿平板。（3）為了檢測(cè)該致病菌對(duì)于抗生素的敏感性，將分別含有）為了檢測(cè)該致病菌對(duì)于抗生素的敏感性，將分別含有A、B、C、D四種抗生素的濾紙片均勻至于該平板上的不同位置，培養(yǎng)四種抗生素的濾紙片均勻至于該平板上的不同位置，培養(yǎng)一段時(shí)間后，含一段時(shí)間后，含A的濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈，說(shuō)明該致病菌對(duì)抗生的濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈，說(shuō)明該致病菌對(duì)抗生素素A ；含；含B的濾紙片周圍沒(méi)有出現(xiàn)透明圈，說(shuō)明該致病菌對(duì)的濾紙片周圍沒(méi)有出現(xiàn)透明圈，說(shuō)明該致病菌對(duì)抗生素抗生素B ；含；含C的濾紙片周圍的透明圈比含的濾紙片周圍的透明圈比含A的小，說(shuō)

42、明的小，說(shuō)明 ；含；含D的濾紙片周圍的透明圈也比含的濾紙片周圍的透明圈也比含A的小，且透明圈中的小，且透明圈中出現(xiàn)了一個(gè)菌落，在排除雜菌污染的情況下，此菌落很可能是抗生出現(xiàn)了一個(gè)菌落，在排除雜菌污染的情況下，此菌落很可能是抗生素素D的的 。（4）根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果，為達(dá)到抗菌目的，最好應(yīng)選用抗生素）根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果，為達(dá)到抗菌目的，最好應(yīng)選用抗生素 。平板劃線平板劃線稀釋涂布稀釋涂布平板平板涂布涂布敏感敏感不敏感不敏感該致病菌對(duì)該致病菌對(duì)C的敏感性比對(duì)的敏感性比對(duì)A的弱的弱 耐藥菌耐藥菌A（2013四川卷）四川卷）10（12分）由于酵母菌直接利用淀粉的能力分）由于酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，有人將地衣芽孢桿菌的很弱，有人將地衣芽孢桿菌的-淀粉酶基因轉(zhuǎn)入酵母菌中經(jīng)篩選淀粉酶基因轉(zhuǎn)入酵母菌中經(jīng)篩選得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌種（過(guò)程如圖甲所示）。得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌種（過(guò)程如圖甲所示）。（1）圖甲中，過(guò)程需要的酶有）圖甲中，過(guò)程需要的酶有_。為達(dá)到篩選目。為達(dá)到篩選目的，平板內(nèi)