神經(jīng)干動(dòng)作電位的記錄與觀察

1、神經(jīng)干動(dòng)作電位神經(jīng)干動(dòng)作電位目的目的o通過(guò)記錄神經(jīng)干的復(fù)合動(dòng)作電位，掌握生物電記錄的一般原則和方法。o學(xué)會(huì)利用刺激器誘發(fā)組織興奮的方法；掌握設(shè)定刺激參數(shù)的方法。o學(xué)習(xí)分析辨別動(dòng)作電位，了解其產(chǎn)生的基本原理，加強(qiáng)對(duì)興奮性和閾強(qiáng)度的了解。實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理o用電刺激神經(jīng)，在刺激電極的負(fù)極下神經(jīng)纖維膜內(nèi)用電刺激神經(jīng)，在刺激電極的負(fù)極下神經(jīng)纖維膜內(nèi)產(chǎn)生去極化，當(dāng)去極化達(dá)到閾電位，膜上產(chǎn)生一次產(chǎn)生去極化，當(dāng)去極化達(dá)到閾電位，膜上產(chǎn)生一次可傳導(dǎo)的快速電位反轉(zhuǎn)，即可傳導(dǎo)的快速電位反轉(zhuǎn)，即動(dòng)作電位動(dòng)作電位。o神經(jīng)干由許多神經(jīng)纖維組成。其動(dòng)作電位是以神經(jīng)干由許多神經(jīng)纖維組成。其動(dòng)作電位是以膜外膜外記錄方式記錄方式

2、記錄到的記錄到的復(fù)合動(dòng)作電位復(fù)合動(dòng)作電位。o如果兩個(gè)引導(dǎo)電極置于興奮性正常的神經(jīng)干表面，如果兩個(gè)引導(dǎo)電極置于興奮性正常的神經(jīng)干表面，興奮波先后通過(guò)兩個(gè)電極處，便引導(dǎo)出兩個(gè)方向相興奮波先后通過(guò)兩個(gè)電極處，便引導(dǎo)出兩個(gè)方向相反的電位波形，稱反的電位波形，稱雙相動(dòng)作電位雙相動(dòng)作電位。雙相動(dòng)作電位雙相動(dòng)作電位 biphasic action potential興奮區(qū)細(xì)胞外引導(dǎo)電極檢流計(jì)刺激偽跡(stimulus artifact)刺激器刺激器放大器放大器+地地刺激電流i-i+r+r-地地刺激偽跡是刺激電流通過(guò)導(dǎo)電介質(zhì)擴(kuò)散至刺激偽跡是刺激電流通過(guò)導(dǎo)電介質(zhì)擴(kuò)散至兩引導(dǎo)電極而形成的電位差信號(hào)。兩引導(dǎo)電極而形

3、成的電位差信號(hào)。刺激偽跡ap屏蔽盒用有機(jī)玻璃制成，盒內(nèi)有兩根導(dǎo)軌，導(dǎo)軌上有屏蔽盒用有機(jī)玻璃制成，盒內(nèi)有兩根導(dǎo)軌，導(dǎo)軌上有7個(gè)裝有銀絲電極個(gè)裝有銀絲電極的有機(jī)玻璃滑塊，每個(gè)電極滑塊通過(guò)導(dǎo)線與標(biāo)本盒側(cè)壁的一個(gè)接的有機(jī)玻璃滑塊，每個(gè)電極滑塊通過(guò)導(dǎo)線與標(biāo)本盒側(cè)壁的一個(gè)接線柱相聯(lián)，其中一對(duì)作刺激電極，線柱相聯(lián)，其中一對(duì)作刺激電極，l2對(duì)作記錄電極，記錄電極對(duì)作記錄電極，記錄電極與刺激電極間的電極接地。與刺激電極間的電極接地。屏蔽盒內(nèi)要保持一定的濕度，但電極間不要短路，電極的銀絲必需保持清潔；屏蔽盒內(nèi)要保持一定的濕度，但電極間不要短路，電極的銀絲必需保持清潔；實(shí)驗(yàn)時(shí)標(biāo)本應(yīng)經(jīng)常保持濕潤(rùn)，標(biāo)本兩端的扎線要懸空

4、；實(shí)驗(yàn)時(shí)標(biāo)本應(yīng)經(jīng)常保持濕潤(rùn)，標(biāo)本兩端的扎線要懸空； 神經(jīng)的近中樞端置于刺激電極一側(cè)，外周端置于記錄電極側(cè)。神經(jīng)的近中樞端置于刺激電極一側(cè)，外周端置于記錄電極側(cè)。 地0123456刺激通道2通道1實(shí)驗(yàn)材料實(shí)驗(yàn)材料o動(dòng)物動(dòng)物蟾蜍蟾蜍o器械器械常用手術(shù)器械、蛙板、毀髓針、玻璃解剖針、常用手術(shù)器械、蛙板、毀髓針、玻璃解剖針、神經(jīng)屏蔽盒神經(jīng)屏蔽盒、大頭針、任氏液、燒杯、培養(yǎng)皿。、大頭針、任氏液、燒杯、培養(yǎng)皿。rm6240b生理信號(hào)記錄儀。生理信號(hào)記錄儀。操作過(guò)程操作過(guò)程o坐骨神經(jīng)干的制備坐骨神經(jīng)干的制備o雙毀髓雙毀髓 （錄像）（錄像）o制備下肢標(biāo)本制備下肢標(biāo)本 （錄像）（錄像）o制備坐骨神經(jīng)標(biāo)本制備坐骨

5、神經(jīng)標(biāo)本 （錄像）（錄像）2. 連接實(shí)驗(yàn)裝置連接實(shí)驗(yàn)裝置地0123456刺激通道2通道1o實(shí)驗(yàn)操作實(shí)驗(yàn)操作進(jìn)入實(shí)驗(yàn)?zāi)K進(jìn)入實(shí)驗(yàn)?zāi)K：“實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)” 肌肉神經(jīng)肌肉神經(jīng)神經(jīng)神經(jīng)干動(dòng)作電位干動(dòng)作電位 彈出彈出刺激器對(duì)話框，并處刺激器對(duì)話框，并處于示波狀態(tài)于示波狀態(tài) 在刺在刺激器對(duì)話框中選擇同激器對(duì)話框中選擇同步觸發(fā)。步觸發(fā)。o測(cè)量坐骨神經(jīng)干的閾強(qiáng)度、最適刺激強(qiáng)度測(cè)量坐骨神經(jīng)干的閾強(qiáng)度、最適刺激強(qiáng)度：調(diào)整刺：調(diào)整刺激強(qiáng)度從激強(qiáng)度從0mv遞增，求得遞增，求得閾強(qiáng)度、最適刺激強(qiáng)度閾強(qiáng)度、最適刺激強(qiáng)度。o在最適刺激強(qiáng)度下，在最適刺激強(qiáng)度下，觀察動(dòng)作電位形狀，觀察動(dòng)作電位形狀，測(cè)量其測(cè)量其時(shí)時(shí)程程及及幅度幅度。

6、 根據(jù)波形幅度可調(diào)節(jié)位于屏幕根據(jù)波形幅度可調(diào)節(jié)位于屏幕上顯示通道右側(cè)的上顯示通道右側(cè)的靈敏度靈敏度。 參數(shù)調(diào)節(jié)后，應(yīng)再次點(diǎn)擊參數(shù)調(diào)節(jié)后，應(yīng)再次點(diǎn)擊“開(kāi)開(kāi)始刺激始刺激”鍵，以刷新波形。鍵，以刷新波形。 可用可用“pgup”與與“pgdn”翻頁(yè)查翻頁(yè)查找波形。找波形。o神經(jīng)損傷對(duì)復(fù)合動(dòng)作電位的影響神經(jīng)損傷對(duì)復(fù)合動(dòng)作電位的影響 在第一對(duì)記錄電在第一對(duì)記錄電極間用鑷子夾傷神經(jīng)干，記錄動(dòng)作電位。觀察復(fù)合極間用鑷子夾傷神經(jīng)干，記錄動(dòng)作電位。觀察復(fù)合動(dòng)作電位有何變化。動(dòng)作電位有何變化。+ - r1-r1 +r2-r2 +peripheral endcentral end注意事項(xiàng)注意事項(xiàng)o制作標(biāo)本過(guò)程中應(yīng)盡量

7、減少對(duì)神經(jīng)的牽拉，以免損傷制作標(biāo)本過(guò)程中應(yīng)盡量減少對(duì)神經(jīng)的牽拉，以免損傷神經(jīng)。神經(jīng)。o實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，要經(jīng)常保持標(biāo)本濕潤(rùn)。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，要經(jīng)常保持標(biāo)本濕潤(rùn)。o神經(jīng)干應(yīng)與每個(gè)使用的電極密切接觸。神經(jīng)干應(yīng)與每個(gè)使用的電極密切接觸。o實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，神經(jīng)屏蔽盒應(yīng)清洗、擦干，以防止殘留實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，神經(jīng)屏蔽盒應(yīng)清洗、擦干，以防止殘留的鹽液常腐蝕電極。的鹽液常腐蝕電極。坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本的制備坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本的制備 方法與步驟：方法與步驟：1. 雙毀髓雙毀髓： 毀髓針自枕骨大孔分別進(jìn)入顱腔和椎管搗毀腦和脊髓；毀髓針自枕骨大孔分別進(jìn)入顱腔和椎管搗毀腦和脊髓；2. 剝制后肢標(biāo)本剝制后肢標(biāo)本：剪去頭、前肢和內(nèi)臟，剩余脊柱和后肢；剪去頭、前肢和內(nèi)臟，剩余脊柱和后肢；3. 分離兩后肢分離兩后肢：左右兩后肢分開(kāi)，勿損傷兩側(cè)坐骨神經(jīng)；左右兩后肢分開(kāi)，勿損傷兩側(cè)坐骨神經(jīng)；4. 分離坐骨神經(jīng)分離坐骨神經(jīng)：玻璃分針，保留一段脊柱骨；玻璃分針，保留一段脊柱骨；5. 游離腓腸肌游離腓腸肌：跟腱結(jié)扎跟腱結(jié)扎6. 分離股骨頭分離股骨頭7. 檢驗(yàn)標(biāo)本檢驗(yàn)標(biāo)本：鋅銅弓電極鋅銅弓電極完整標(biāo)本完整標(biāo)本坐骨神經(jīng)坐骨神經(jīng)腓腸肌腓腸肌股骨頭股骨頭一段脊柱骨一段脊柱骨注意事項(xiàng)注意事項(xiàng)：.操作過(guò)程中切勿