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文檔簡介
1、抄記背果膠酶在果汁生產(chǎn)中的作用1 .基礎(chǔ)知識1. 1果膠是植物細(xì)胞壁和胞間層的主要組成成分之一。1. 2在果汁加工中,果膠的存在易導(dǎo)致果汁出汁率低,果汁渾濁。1.3果膠酶分解果膠的作用是: 瓦解 植物的細(xì)胞壁及胞間層 ;祈取果汁更容易, 把果膠分解為 可溶性的半乳糖醛酸 ,使渾濁的果汁變得澄清,因此可以解決果汁加工 中出現(xiàn)的問題。1. 4果膠酶是一類酶的總稱,包括:多聚半乳糖醛酸 酶、 果膠分解 酶和 果膠酯 酶。在植物細(xì)胞工程中果膠酶的作用是與纖維素酶二除去植物細(xì)胞的細(xì)胞壁。一T. 5酶的活性是指:酶催化 一定化學(xué)反應(yīng) 的能力。1. 6酶的活性高低可用一定條件下的酶促應(yīng)速度 來表示,即單位時
2、間、單位體積 內(nèi)反應(yīng)物消耗量或產(chǎn)物生成量來表示。1. 7影響酶活性的因素有:溫度 、PH 、 激活劑 和 抑制劑 等。1.8 食品工業(yè)生產(chǎn)中最常用的果膠酶是通過霉菌發(fā)酵 產(chǎn)生:1.9 根據(jù)影響酶活性的因素,在實際生產(chǎn)中通過確定果膠酶的最適溫度、最適PH等條件獲得果膠酶的最高活性。2.實驗設(shè)計2. 1實驗?zāi)康模憾繙y定溫度或 pH對果膠酶活性的影響。該實驗與必修I中探究“影響酶活性的條件”實驗有何不同?前者屬于是定量分析實驗,后者屬于定性分析實驗。3. 2實驗原理:果膠酶瓦解細(xì)胞壁和胞間層增大果汁產(chǎn)量;果膠酶催化分解果膠增大果汁澄清度。4. 3變量設(shè)計與控制:你確定的溫度梯度(或 pH梯度)為1
3、0 C或5 c (或0.5、1.0 )。實驗的自變量是溫度(或pH),控制自變量的方法是利用恒訴浴鍋(或滴加酸堿等) 。一藪胎的因變量是酶的活性 ,檢測因變量的方法是測定果汁的產(chǎn)出量或澄清度_。果汁與果膠酶在混合之前,分裝在不同試管中用同一恒溫處理的目的是保證果汁與 果膠酶混合前后的溫度相同,避免因混合導(dǎo)致溫度變化而影響果膠酶活性。該實驗中不同的溫度設(shè)置之間相互對照。控制PH和其他因素相同,保證只有溫度一個變量對果膠酶的活性產(chǎn)生影響。3.操作提示3. 1制備果泥:用榨汁機(jī)榨制果泥。在榨制橙子汁時不必去橙皮3. 2在探究不同 PH對果膠酶活性的影響時,可以用 0.1%的NaOHB液和鹽酸 調(diào)節(jié)
4、pHo5. 3在果膠酶處理果泥時,為了果膠酶能充分地催化反應(yīng),用玻璃棒不時攪拌。6. 結(jié)果分析與評價將以下某同學(xué)實驗數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換成曲線圖。將實驗數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換成曲線圖的方法以自變量為橫坐標(biāo)、以因變量為縱坐標(biāo)建立直角坐標(biāo)系。注明坐標(biāo)軸名的名稱、單位、坐標(biāo)原點以及曲線名稱。每個坐標(biāo)軸上的取值單位要相等。將實驗數(shù)據(jù)標(biāo)在坐標(biāo)系中,并用各種線型連接起來。溫度C101520253035404550果汁量/ml124654321探討加酶洗衣粉的洗滌效果一、基礎(chǔ)知識1.加酶洗衣粉是指含有酶制劑的洗衣粉,目前常用的酶制劑有四類:蛋白酶、脂肪酶、其粉酶和纖維素酶。其中,應(yīng)用最廣泛、效果最明顯的是堿性蛋白酶 和堿性脂肪酶。堿
5、性至一m能將血漬、奶漬等含有的大分子蛋白質(zhì)水解成可溶性的氨基酸或小分子的肽,使污跡從 衣物上脫落。同樣道理,其他酶也是將大分子物質(zhì)分解為 小分子物質(zhì),從而使洗衣粉具有更 好的去污能力。2、使用加酶洗衣粉時,影響酶活性的因素有叱、酸堿度、表面活性劑等,為此,科學(xué)家通過基因工程生產(chǎn)出了特殊的酶,并制成酶制劑n裱了這個問題。3、加酶洗衣粉可以降低 表面活性劑 和三聚磷酸鈉 的用量,使洗滌劑朝 低磷無磷的方向發(fā)展, 減少對環(huán)境的污染。二、實驗設(shè)計實例1.探究普通洗衣粉和加酶洗衣粉對衣物污漬的洗滌效果實驗原理:加酶洗衣粉中含有一種或多種酶,可以將相應(yīng)的大分子物質(zhì)分解為小分子物質(zhì),從而使 污跡容易從衣物上
6、脫落,這是普通洗衣粉難以做到的。實驗思路:自變量:加酶洗衣粉、普通洗衣粉;因變量:相同時間污跡殘留量或洗去污跡所需的時間。除自變量不同外,其它因素要完全相同。實例2.探討溫度對加酶洗衣粉洗滌的影響實驗原理:酶的活性受溫度影響, 在最適溫度時,酶的活性最高,高于或低于 最適溫度時,酶的活 性下降。實驗思路:自變量:不同溫度;因變量:相同時間污跡殘留量或洗去污跡所需的時間。除自 變量不同外,其它因素要完全相同。實例3.不同種類的加酶洗衣粉對同一污漬的洗滌效果實驗原理:不同種類的加酶洗衣粉所加的酶不同,而酶具有專一性,所以對不同污漬的洗滌效果不同。設(shè)計不同類型洗衣粉對不同污漬的洗滌效果記錄表格(自己
7、在草稿紙上列表)。4酵母細(xì)胞的固定化一、基礎(chǔ)知識(一)固定化酶的應(yīng)用實例1、高果糖漿是指果糖含量為42吐右的糖漿,能將葡萄糖轉(zhuǎn)化為果糖的酶是葡萄糖異構(gòu)酶。2、使用固定化酶技術(shù),將這種酶固定在一種顆粒狀的載體上,再將這些酶顆粒裝到一個反應(yīng)柱內(nèi),柱子底端裝上分布著許多小孔的篩板廠而順粒無法通過篩板的小孔,而反應(yīng)溶液卻 可以自由出入。生產(chǎn)過程中,將葡萄糖溶液從反應(yīng)柱的 上端注入,使葡萄糖溶液流過反應(yīng)柱, 與固定化葡萄糖異構(gòu)酶 接觸,轉(zhuǎn)化成果糖,從反應(yīng)柱的T端流出。反應(yīng)柱能連續(xù)使用半年, 大大降低了生產(chǎn)成本,提高了果糖的產(chǎn)量和質(zhì)量。(二)固定化細(xì)胞技術(shù)1、固定化酶和固定化細(xì)胞是利用 物理或化學(xué)方法將酶
8、或細(xì)胞固定在一定空間內(nèi)的技術(shù),包 括包埋法、化學(xué)結(jié)合法和物理吸附廠2、一般來說,酶更適合采用一化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法固定,而細(xì)胞多采用 包埋法固定化。 這是因為細(xì)胞體積比酶分子的體積大; 體積大的細(xì)胞難以被 吸附或結(jié)合,而個小的酶容易從 包埋材料中漏出。3、包埋法法畫如花細(xì)胞,即將微生物細(xì)胞均勻地包埋在不溶于水的載體中。常用的載體有明膠、瓊脂糖、海藻酸鈉、醋酸纖維素和聚丙烯酰胺等。二、實驗操作(一)制備固定化酵母細(xì)胞:1.酵母細(xì)胞的活化: 休眠狀態(tài)恢復(fù)正常生活狀態(tài)。2,配制物質(zhì)的量的濃度為 0.05mol/L的CaCl2溶液3.配制海藻酸鈉溶液:操作中最重交.的一環(huán)。加熱溶化海藻酸鈉時要注意
9、小火間斷加熱, 重復(fù)幾次,并不斷攪拌,直到海藻酸鈉融化為止。如果加熱太快,海藻酸鈉會發(fā)生 焦糊。 4rli藻酸鈉溶液與麗鬲細(xì)胞混合:將海疝麗溶液冷卻至筐退,加入已活化的海疝麗溶液,進(jìn)行充分?jǐn)嚢?,使其混?均包,在轉(zhuǎn)移至注射器中。5.固定化酵母細(xì)胞:以恒定的速度緩慢地將注射器中溶液滴加到剛配制好CaCl2溶液中,浸泡30min左右。(二)用固定化酵母細(xì)胞發(fā)酵:酵母細(xì)胞凝膠珠蒸儲水沖洗- 25 c下發(fā)酵24h三、結(jié)果分析與評價(一)制作凝膠珠過淺、呈白色,說明海藻酸鈉濃度濃度 硬匚 包埋的酵母細(xì)胞數(shù)目 少,影 響實驗效果;如果形成的凝膠珠不是圓形或橢圓形, 則說明海藻酸鈉濃度濃度倜魚,制作失 敗,
10、需要再作嘗試。(二)固定的酵母細(xì)胞發(fā)酵產(chǎn)生酒精,可以看到產(chǎn)生了很多色涅,同時會聞到 酒味。工業(yè)生產(chǎn)中,細(xì)胞的固定化技術(shù)是在 嚴(yán)格無菌 的條件下進(jìn)行的。直接使用酶、固定化酶和固定化細(xì)胞催化的優(yōu)缺點如下表所示?;貎?yōu)點不足直接使用 酶催化效率高,低耗能、低 污染等。對環(huán)境條件非常 鑲感,容易雋近;溶液中的酶 很難回收,不能被再次利用,提高了生產(chǎn)成本; 反應(yīng)后酶會混在產(chǎn)物中,可能影響產(chǎn)品質(zhì)量。固定化酶酶既能與反應(yīng)物接觸,又 能與產(chǎn)物分離,同時,固 定在載體上的酶還口以被 反復(fù)利用。一種酶只能催化一種化學(xué)反應(yīng),而在生產(chǎn)實踐 中,很多產(chǎn)物形成都通過一系列的酶促反應(yīng)才 能得到的。固定化細(xì) 胞成本低,操作更容
11、易。固定后的酶或細(xì)胞與反應(yīng)物不容易接近,可能 導(dǎo)致反應(yīng)效果卜降 等。血紅蛋白的提取和分離一、基礎(chǔ)知識(一)凝膠色譜法1、凝膠色譜法也稱做 分配色譜法,是根據(jù) 相對分子質(zhì)量大小 分離蛋白質(zhì)的有效方法。2、凝膠實際上是一些微小的 多孔球體,這些小球體大多數(shù)是由 多糖類化合物構(gòu)成的,如葡 聚糖或瓊脂糖。3、在小球體內(nèi)部有許多貫穿的通道,相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)分子通過凝膠時速度不同,相對分子質(zhì)量處的蛋白質(zhì)容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道, 路程較長,移動速度較慢;而相對分 子質(zhì)量較大的面:質(zhì)無法進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道, 只能在 凝膠外部 移動,路程較短,移動速度 較快。麗芬子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)分子因此得以分離。丁5
12、緩沖溶液1、緩沖溶液的作用是 能夠抵制外界酸或堿對溶液PH的影響,維持 PH基本不變。2、緩沖溶液通常由12種緩沖劑 溶解于水中配制而成的。3、生物體內(nèi)進(jìn)行的各種生物化學(xué)反應(yīng)都是在一定的pH下進(jìn)行的,為了能夠在實驗條件下準(zhǔn)確模擬生物體內(nèi)的過程 ,必須保持體外的 pH與體內(nèi)的 基本一致。(三)電泳1、電泳是指 帶電粒子在電場的作用下發(fā)生遷移的過程。2、許多重要的生物大分子,如多肽、核酸等都具有可解離的基團(tuán),在一定的 pH下,這些基 團(tuán)會帶上正電或負(fù)電。在電場的作用下,這些帶電分子會向著與其所帶電荷 相反的電極移動。 電泳利用了待分離樣品中各分子 帶電性質(zhì) 的差異以及分子本身的 大小、形而說同,使
13、帶電 分子產(chǎn)生不同的遷移速度,從而實現(xiàn)樣品中各種分子的分離。3、兩種常用的電泳方法是 瓊脂糖凝膠電泳 和聚丙烯酰胺凝膠電泳,在凝膠中加入 SDS電 泳速率完全取決于分子大小,因此,在測定蛋白質(zhì)分子量時通常使用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳。二、實驗操作蛋白質(zhì)的提取和分離一般分為四步:樣品處理、粗分離、純化和純度鑒定。(一)樣品處理1、紅細(xì)胞的洗滌: 洗滌紅細(xì)胞的目的是去除雜蛋白,采集的血樣要及時分離紅細(xì)胞,分 離時采用低速短時間離心( 500r/min ),然后用膠頭吸管吸出上層透明的黃色血漿,將下層暗紅色的 紅細(xì)胞倒入燒杯,再加入五倍體積的生理鹽水(質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 09%),緩慢攪拌10min, 低速短時間 離心,如此重復(fù)洗滌三次,直至 上清液中沒有黃色,表明紅細(xì)胞已洗滌干凈。2、血紅蛋白的釋放:在蒸儲水和甲苯作用下,紅細(xì)胞破裂釋放出血紅蛋白。3、分離血紅蛋白溶液:將攪拌好的混合溶液離心(2000r/min )后,試管中的溶液分為 4層。第一層為無色透明的 甲苯層,第2層為白色薄層固體,是 脂溶性物質(zhì)的沉淀層,第3 層是紅色透明液體, 這是血紅蛋白的水溶液,第4層是其他雜質(zhì)
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