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文檔簡介

1、TB-PPTB-PP體內(nèi)診斷試劑體內(nèi)診斷試劑結(jié)核菌素試驗結(jié)核菌素試驗 結(jié)核菌素試驗結(jié)核菌素試驗(也稱為芒圖試驗芒圖試驗、PPDPPD試驗試驗)是一種診斷結(jié)核的工具。它是世界上兩個主要結(jié)核菌素皮膚試驗之一。一、原理簡介一、原理簡介 結(jié)核菌素試驗,是基于型變態(tài) 反應原理的一種皮膚試驗,是遲 發(fā)型細胞超敏反應,用來檢測機 體有無感染過結(jié)核桿菌。 凡感染過結(jié)核桿菌的機體,會產(chǎn)生 相應的致敏淋巴細胞,具有對結(jié)核 桿菌的識別能力。當再次遇到少量 的結(jié)核桿菌或結(jié)核菌素時,致敏 T淋巴細胞受相同抗原再次刺激會 引起變態(tài)反應性炎癥,釋放出多種可溶性淋巴因子,導致血管通透性增加,巨噬細胞在局部集聚,導致浸潤。約在

2、4872小時內(nèi),局部出現(xiàn)紅腫硬節(jié)的陽性反應。若受試者未感染過結(jié)核桿菌,則注射局部無變態(tài)反應發(fā)生。二、歷史二、歷史 1890年羅伯特科赫首先公布發(fā)現(xiàn)結(jié)核菌素。該年4月4日柯赫在第10屆世界醫(yī)學會上表示,發(fā)現(xiàn)一種可以預防豚鼠結(jié)核病,并有治療作用的物質(zhì)。 1891年柯赫明確這種物質(zhì)是結(jié)核菌的培養(yǎng)濾液,并命名為結(jié)核菌素(OT)。 1908年芒圖(C.Mantoux)發(fā)現(xiàn)結(jié)核菌素試驗方法,也稱為芒圖試驗、PPD試驗。 1928年美國塞伯爾(P.B.Seibert)從結(jié)核菌培養(yǎng)液中制成了一種純蛋白衍生物結(jié)核菌素(PPD)。 1939年,原蘇聯(lián)的MA林尼科娃創(chuàng)建了一種修改版的PPD,PPD-L。在1954年

3、,原蘇聯(lián)開始批量生產(chǎn)PPD-L。 1941年美國研制成功一種標準純蛋白衍生物結(jié)核菌素(PPD-S)。 1958年丹麥研制成了更純、更濃的純蛋白衍生物結(jié)核菌素(PPD-RT23),為WHO推薦制劑。(50年代中期,UNICEF(聯(lián)合國國際兒童基金會)委托丹麥血清研究所生產(chǎn)一大批PPD-RT23,共有650.5g,其中500g約330億人份供各國使用至今。)三、常用種類三、常用種類結(jié)核菌素是結(jié)核桿菌的菌體成分,有兩種: 1、舊結(jié)核菌素(old tuberculin,OT)是羅伯特柯赫(R.Koch)首先發(fā)明的。是從生長過結(jié)核分枝桿菌的甘油肉湯培養(yǎng)基中提煉出來的結(jié)核菌代謝產(chǎn)物,經(jīng)過滅菌、濃縮形成原液

4、,使用時再稀釋成一定倍數(shù)(通常是2000倍),使每0.1ml含1U。 主要成分有:(1)結(jié)核分枝桿菌蛋白;(2)菌體自溶成分;(3)菌體代謝產(chǎn)物;(4)培養(yǎng)基成分。三、常用種類三、常用種類 2、結(jié)核菌素純蛋白衍生物(purified protein derivative,PPD)則是由塞伯爾(Seibert)首先制備。PPD菌素是一種由結(jié)核菌培養(yǎng)濾液制成、只含結(jié)核菌蛋白、不含結(jié)核菌體的生物制品。 結(jié)核菌素純蛋白衍生物(PPD)更為精純,為純結(jié)素,不產(chǎn)生非特異性反應。其制作過程:菌株培養(yǎng)滅菌、濾過濃縮鹽析、脫鹽干燥、保存分裝。 PPD-RT23是由丹麥制造供應世界許多國家使用,已經(jīng)取代OT。我國

5、從人型結(jié)核菌制成PPD(PPD-C;BT-PPD),又從卡介苗制成BCG-PPD。四、試驗目的四、試驗目的 (1)為接種卡介苗提供依據(jù),如結(jié)核菌素試驗陽性時,表明體內(nèi)已感染過結(jié)核菌,無需再接種卡介苗。陰性者是卡介苗的接種對象。 (2)為測定免疫效果提供依據(jù):一般在接種卡介苗3個月以后,應做結(jié)核菌素試驗,了解機體對卡介苗是否產(chǎn)生免疫力。假如結(jié)核菌素陽性,表示卡介苗接種成功,反之需重新再進行卡介苗接種。 (3)用于診斷與鑒別診斷:結(jié)核菌素試驗對青少年、兒童及老年人的結(jié)核病的診斷和鑒別有重要作用,是普遍運用的輔助檢查手段,是測定是否感染結(jié)核菌的一種傳統(tǒng)方法。四、試驗目的四、試驗目的 (4)結(jié)核菌素試

6、驗還可作為嬰幼兒結(jié)核病診斷的參考,測定腫瘤患者的非特異性細胞免疫功能及在未接觸過卡介苗的人群中調(diào)查結(jié)核病的流行情況。 結(jié)核菌素試驗廣泛應用于:結(jié)核菌感染的流行病學調(diào)查、結(jié)核病流行情況監(jiān)測、尋找高發(fā)人群(主要是兒童、少年)、選擇化學預防對象、考核卡介苗接種質(zhì)量、了解機體細胞免疫功能等方面。 卡介苗:卡介苗:“出生第一針”。 接種的主要對象是新生嬰幼 兒,接種后可預防發(fā)生兒童 結(jié)核病,特別是能防止那些 嚴重類型的結(jié)核病,如結(jié)核 性腦膜炎。如果出生時沒能 及時接種,在1歲以內(nèi)一定 要補種。五、試驗程序五、試驗程序 結(jié)核菌素試驗方法很多,常用的是芒圖(Mantoux)氏法,即將PPD用無菌生理鹽水稀釋

7、成不同濃度,取0.1毫升注射于左前臂掌側(cè)前1/3中央皮內(nèi)(注意:左手),72(48h96h)小時檢查反應情況,應注意局部有無硬節(jié),不可單獨以紅暈為標準。五、試驗程序五、試驗程序 我國規(guī)定以72小時為觀察反應時間,48-96小時內(nèi)皆可測量反應,常用的記錄方法是將測得的硬結(jié)用平均直徑(橫徑毫米數(shù)+縱徑毫米數(shù))2表示,如有水泡、硬結(jié)、壞死和淋巴結(jié)炎時,應作記錄。五、試驗程序五、試驗程序 陰性反應:陰性反應:無硬結(jié)或硬結(jié)平均直徑5mm,15mm。六、結(jié)果分析六、結(jié)果分析 測試結(jié)果的解釋應慎重,因技術(shù)原因或有少數(shù)免疫力低下的人(約5%),試驗也會出現(xiàn)假陰性或假陽性結(jié)果。1 1、陽性、陽性 結(jié)素試驗陽性反

8、應僅表示機體對結(jié)核桿菌有變態(tài)反應,但不表示一定患病,它雖表明休內(nèi)已有結(jié)核菌,但也說明機體對結(jié)核病已產(chǎn)生了一定免疫力。 我國城市成年居民的結(jié)核感染率在60%以上,故用5IU結(jié)素進行檢查,其一般陽性結(jié)果意義不大。但如用高稀釋度(1IU)作皮試呈強陽性者,常提示體內(nèi)有活動性結(jié)核灶。 結(jié)素試驗對嬰幼兒的診斷價值比成年人大,因為年齡越小,自然感染率越低;對3歲以下的嬰幼兒未接種過卡介苗而結(jié)素反應陽性者,應考慮有新近感染的活動性結(jié)核病,須給予治療。 結(jié)素反應陽性也是接種卡介苗后所產(chǎn)生 變態(tài)反應的表現(xiàn),在流行病學上常用來 考核卡介苗的接種效果。 成年人強陽性反應表明可能有活動性感 染,應進一步檢查是否有結(jié)核

9、病。2 2、陰性、陰性 結(jié)素試驗陰性反應除提示沒有結(jié)核菌感染外,還見于以下情況: 結(jié)核菌感染后需48周有變態(tài)反應充分建立;在這變態(tài)反應前期,結(jié)素試驗可為陰性。 在應用糖皮質(zhì)激素等免疫抑制劑者,或營養(yǎng)不良及麻疹、百日咳等病人,結(jié)素反應也可暫時消失。 嚴重結(jié)核病和各種危重病人對結(jié)素無反應,或僅為弱陽性,這都是由于人體免疫力連同變態(tài)反應暫時受到抑制的結(jié)果;待病情好轉(zhuǎn),又會轉(zhuǎn)為陽性反應。 其他如淋巴細胞免疫系統(tǒng)缺陷(如淋巴瘤、白血病、結(jié)節(jié)病、艾滋病等)病人和老年人的結(jié)素反應也常為陰性。 對3歲以下的嬰幼兒未接種過卡介 苗而結(jié)素試驗陰性,應予接種卡 介苗,促使機體產(chǎn)生對結(jié)核病的 抵抗能力,使結(jié)素試驗陽轉(zhuǎn)

10、。3 3、兩步測試、兩步測試 對于免疫功能健全的人來說,只要有一個結(jié)核菌進入肺泡內(nèi)造成感染,則結(jié)素反應可呈陽性。反之,沒有被結(jié)核菌感染的人幾乎對結(jié)核菌沒有抵抗能力,結(jié)素反應也就呈陰性。 有些以前感染結(jié)核病的人在感染后數(shù)年進行測試時可能呈陰性,因為免疫系統(tǒng)的反應可能會逐漸減弱。這一初步皮膚試驗,雖然是陰性的,但可能刺激身體的免疫系統(tǒng),使后來的測試結(jié)果呈陽性。 使用兩個步驟進行初步測試,將確保今后如果試驗呈陽性,可以解釋為一個新的感染,而不是一個老的感染的簡單的反應。 第一次注射后48至72小時檢查結(jié)果 呈陽性,考慮感染者 呈陰性,在1至3周后給予第二次測試 第二次注射后48至72小時檢查結(jié)果 呈

11、陽性,考慮以前的感染 呈陰性,考慮未感染七、結(jié)核菌素問答七、結(jié)核菌素問答1、提問:我的小孩現(xiàn)在是一歲 多了,前幾天我發(fā)現(xiàn)她脖子 好象有長幾個淋巴結(jié),所以 帶她去看醫(yī)生。結(jié)果發(fā)現(xiàn)結(jié) 核菌素反應呈陽性,請問現(xiàn) 在有沒有什么辦法可以很好 地解決這個問題。我急切地 想知道答案,懇請醫(yī)生能否 早日給我建議。 2、提問:我在懷孕35天時注射了結(jié)核菌素,是否會對嬰兒有影響? 3、提問:我的太子寶寶接種卡介苗后三個月要做結(jié)核菌素實驗,是怎么做的?還有寶寶今天有點呼吸道感染,可以做實驗嗎? 4、提問:我的孩子三個多月了,打第三個月疫苗針的時候醫(yī)生也沒告訴我們要做這個結(jié)核菌素實驗。結(jié)果回家發(fā)現(xiàn)有這么一個小通知單說滿三個月要做這個實驗,我不知道該不該再去做。七、結(jié)核菌素問答七、結(jié)核菌素問答5、提問:我的女兒在1歲接種卡介苗時做結(jié)核菌素試驗呈陽性,說是已經(jīng)感染了,我該注意些什么?我有必要去給孩子做相關(guān)的檢查嗎?6、提問:寶寶接種卡介苗前需要做實驗嗎?7、提問:卡介苗接種后沒有成功怎么辦?8、提問:為何一出生就要接種卡介苗?9、提問:出生時未接種卡介苗,現(xiàn)在2歲可 以接種嗎?若不接種

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