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1、1第二章 染色體與DNAn 染色體n DNA的結(jié)構(gòu)n DNA的復(fù)制n DNA的修復(fù)n DNA的轉(zhuǎn)座2一、與分子生物學(xué)有關(guān)的細(xì)胞生物學(xué)知識(shí) n1 1、細(xì)胞的基本概念、細(xì)胞的基本概念 細(xì)胞是生命活動(dòng)的基本單位細(xì)胞是生命活動(dòng)的基本單位 細(xì)胞是構(gòu)成有機(jī)體的基本單位細(xì)胞是構(gòu)成有機(jī)體的基本單位 細(xì)胞是代謝與功能的基本單位細(xì)胞是代謝與功能的基本單位 細(xì)胞是有機(jī)體生長(zhǎng)與發(fā)育的基礎(chǔ)細(xì)胞是有機(jī)體生長(zhǎng)與發(fā)育的基礎(chǔ) 細(xì)胞是遺傳的基本單位，細(xì)胞核具有遺傳細(xì)胞是遺傳的基本單位，細(xì)胞核具有遺傳的的全能性全能性 沒(méi)有細(xì)胞就沒(méi)有完整的生命沒(méi)有細(xì)胞就沒(méi)有完整的生命3n2 2、細(xì)胞的共性、細(xì)胞的共性 細(xì)胞表面都有細(xì)胞膜細(xì)胞表面都有

2、細(xì)胞膜(磷脂雙分子層與蛋白質(zhì)磷脂雙分子層與蛋白質(zhì)) 細(xì)胞都含有兩種核酸細(xì)胞都含有兩種核酸(DNA與與RNA) 細(xì)胞細(xì)胞蛋白質(zhì)合成的機(jī)器蛋白質(zhì)合成的機(jī)器核糖體核糖體 細(xì)胞細(xì)胞增殖的方式增殖的方式43、細(xì)胞的種類真核細(xì)胞亞顯微結(jié)構(gòu)模式圖123456原核細(xì)胞亞顯微結(jié)構(gòu)模式圖5較?。?m10m）較大（10m100）沒(méi)有成形的細(xì)胞核，組成核的物質(zhì)集中在核區(qū)。無(wú)核膜，無(wú)核仁。有成形的、真正的細(xì)胞核。有核膜，有核仁。含纖維素、果膠主要含肽聚糖 由蛋白質(zhì)和DNA分子組成 只是裸露的環(huán)狀DNA分子和少許蛋白質(zhì)原核細(xì)胞原核細(xì)胞真核細(xì)胞真核細(xì)胞細(xì)胞大小細(xì)胞核細(xì)胞壁 染色體原核細(xì)胞與真核細(xì)胞的比較原核細(xì)胞與真核細(xì)胞的

3、比較6動(dòng)物細(xì)胞亞顯微結(jié)構(gòu)模式圖植物細(xì)胞亞顯微結(jié)構(gòu)模式圖7二、染色體（Chromosome) 內(nèi)容提要：染色體與染色質(zhì)細(xì)胞周期染色體的結(jié)構(gòu)和組成（ 原核生物 、 真核生物）核小體原核生物和真核生物基因組結(jié)構(gòu)特點(diǎn)比較 8（一）染色體與染色質(zhì)染色體（染色體（chromosome）是細(xì)胞在有絲分裂時(shí)遺傳物質(zhì)是細(xì)胞在有絲分裂時(shí)遺傳物質(zhì)存在的特定形式，是間期細(xì)胞染色質(zhì)結(jié)構(gòu)緊密包裝的結(jié)存在的特定形式，是間期細(xì)胞染色質(zhì)結(jié)構(gòu)緊密包裝的結(jié)果。果。真核生物的染色體在細(xì)胞生活周期的大部分時(shí)間里都是真核生物的染色體在細(xì)胞生活周期的大部分時(shí)間里都是以染色質(zhì)以染色質(zhì)(chromatin)的形式存在的。的形式存在的。染色質(zhì)是

4、一種纖維狀結(jié)構(gòu)，叫做染色質(zhì)絲，它是由最基染色質(zhì)是一種纖維狀結(jié)構(gòu)，叫做染色質(zhì)絲，它是由最基本的單位本的單位核小體核小體(nucleosome)成串排列而成的。成串排列而成的。9（二）細(xì)胞周期10（三）染色體的結(jié)構(gòu)和組成原核生物(prokaryote) 因?yàn)樵松餂](méi)有真正的細(xì)胞核，因?yàn)樵松餂](méi)有真正的細(xì)胞核，DNA一般位于一個(gè)一般位于一個(gè)類似類似“核核”的結(jié)構(gòu)的結(jié)構(gòu)稱為類核體上。細(xì)菌稱為類核體上。細(xì)菌DNA是一條相對(duì)是一條相對(duì)分子質(zhì)量在分子質(zhì)量在109左右的共價(jià)、閉合雙鏈分子，通常也稱為左右的共價(jià)、閉合雙鏈分子，通常也稱為染色體。細(xì)菌染色體外裹著稀疏的蛋白質(zhì)，這些蛋白質(zhì)有染色體。細(xì)菌染色體外裹

5、著稀疏的蛋白質(zhì)，這些蛋白質(zhì)有些與些與DNA的折疊有關(guān)，另一些則參與的折疊有關(guān)，另一些則參與DNA的復(fù)制、重組的復(fù)制、重組及轉(zhuǎn)錄過(guò)程。一般情況下，原核生物細(xì)胞中染色體都是單及轉(zhuǎn)錄過(guò)程。一般情況下，原核生物細(xì)胞中染色體都是單倍體的。倍體的。1112（三）染色體的結(jié)構(gòu)和組成n真核生物染色體的組成n真核細(xì)胞的細(xì)胞核比原核細(xì)胞的類核體在結(jié)構(gòu)和功能真核細(xì)胞的細(xì)胞核比原核細(xì)胞的類核體在結(jié)構(gòu)和功能上都復(fù)雜得多，細(xì)胞核含有大部分的上都復(fù)雜得多，細(xì)胞核含有大部分的DNA，只有一小，只有一小部分部分DNA存在于線粒體或葉綠體中。在真核細(xì)胞中，存在于線粒體或葉綠體中。在真核細(xì)胞中，染色體位于核仁內(nèi)。染色體位于核仁內(nèi)。

6、 n真核細(xì)胞基因組很大，形成許多個(gè)染色體，每個(gè)染色真核細(xì)胞基因組很大，形成許多個(gè)染色體，每個(gè)染色體都含有一個(gè)完整的體都含有一個(gè)完整的DNA分子，并且此分子，并且此DNA分子是線分子是線形、不具分枝，所有染色體上的形、不具分枝，所有染色體上的DNA共同構(gòu)成整個(gè)基共同構(gòu)成整個(gè)基因組，因組， 13組蛋白： H1 H2A H2B H3 H4非組蛋白核小體DNA蛋白質(zhì)染色體真核生物染色體的組成14組蛋白的一般特性： 進(jìn)化上的保守性保守程度：H1 H2A、H2B H3 、H41、組蛋白 上海生化所分子遺傳學(xué)1998年試題： 在真核生物核內(nèi)。五種組蛋白（H1 H2A H2B H3 和H4）在進(jìn)化過(guò)程中，H4

7、極為保守，H2A最不保守（ ）15無(wú)組織特異性:肽鏈氨基酸分布的不對(duì)稱性 堿性氨基酸集中分布在N端的半條鏈上。大部分疏水基團(tuán)都分布在C端。 到目前為止，僅發(fā)現(xiàn)鳥(niǎo)類、魚(yú)類及兩棲類紅細(xì)胞染色體不含H1而帶有H5，精細(xì)胞染色體的組蛋白是魚(yú)精蛋白。16 H5組蛋白的特殊性：富含賴氨酸（24%） 組蛋白的可修飾性 賴氨酸24%、丙氨酸16%、絲氨酸13%、精氨酸11%。 鳥(niǎo)類、兩棲類、魚(yú)類紅細(xì)胞分離的H5均有種的特異性。 17 在細(xì)胞周期特定時(shí)間可發(fā)生甲基化、乙酰化、磷酸化和ADP核糖基化等。H3、H4修飾作用較普遍，H2B有乙酰化作用、H1有磷酸化作用。所有這些修飾作用都有一個(gè)共同的特點(diǎn)，即降低組蛋白

8、所有這些修飾作用都有一個(gè)共同的特點(diǎn)，即降低組蛋白所攜帶的正電荷。所攜帶的正電荷。這些組蛋白修飾的意義：一是改變?nèi)旧w的結(jié)構(gòu)，直接影響轉(zhuǎn)錄活性；二是核小體表面發(fā)生改變，使其他調(diào)控蛋白易于和染色質(zhì)相互接觸，從而間接影響轉(zhuǎn)錄活性。組蛋白的可修飾性18簡(jiǎn)述真核生物染色體上組蛋白的種類，組蛋白修飾的種類及其生物學(xué)意義中國(guó)科學(xué)院2003年碩士研究生入學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)試題19非組蛋白的特性n1、非組蛋白的多樣性、非組蛋白的多樣性n非組蛋白的量大約是組蛋白的非組蛋白的量大約是組蛋白的60%70%，但它的，但它的種類卻很多，約在種類卻很多，約在20-100種之間，其中常見(jiàn)的有種之間，其中常見(jiàn)的有15-20

9、種。種。 n2、非組蛋白的專一性和種屬專一性、非組蛋白的專一性和種屬專一性201) DNA的變性和復(fù)性 變性（Denaturation) DNA雙鏈的氫鍵斷裂，最后完全變成單鏈的過(guò)程稱為變性。 增色效應(yīng)(Hyperchromatic effect)在變性過(guò)程中，260nm紫外線吸收值先緩慢上升，當(dāng)達(dá)到某一溫度時(shí)驟然上升，稱為增色效應(yīng)。2、DNA21融解溫度（Melting temperature Tm ) 變性過(guò)程紫外線吸收值增加到中點(diǎn)時(shí)的溫度稱為融解溫度。 生理?xiàng)l件下為85-95影響因素：G+C含量，pH值，離子強(qiáng)度，尿素，甲酰胺等2223復(fù)性（Renaturation) 熱變性的DNA緩慢

10、冷卻，單鏈恢復(fù)成雙鏈。減色效應(yīng)（Hypochromatic effect) 隨著DNA的復(fù)性， 260nm紫外線吸收值降低的現(xiàn)象。 242) C值反?，F(xiàn)象（C-value paradox) C值矛盾 C值是一種生物的單倍體基因組DNA的總量。 從原核生物到真核生物基因組大小和從原核生物到真核生物基因組大小和DNA含量是隨著生含量是隨著生物進(jìn)化復(fù)雜程度的增加而穩(wěn)步上升的，隨著生物結(jié)構(gòu)和功物進(jìn)化復(fù)雜程度的增加而穩(wěn)步上升的，隨著生物結(jié)構(gòu)和功能復(fù)雜程度的增加，需要的基因數(shù)目和基因產(chǎn)物種類越多，能復(fù)雜程度的增加，需要的基因數(shù)目和基因產(chǎn)物種類越多，因而因而C值也越大。但在一些物種中值也越大。但在一些物種中

11、C值的大小并不能完全值的大小并不能完全說(shuō)明生物進(jìn)化的程度和遺傳復(fù)雜性的高低，也就是說(shuō)，物說(shuō)明生物進(jìn)化的程度和遺傳復(fù)雜性的高低，也就是說(shuō)，物種種C值與他進(jìn)化復(fù)雜性之間沒(méi)有嚴(yán)格的對(duì)應(yīng)關(guān)系，這種現(xiàn)值與他進(jìn)化復(fù)雜性之間沒(méi)有嚴(yán)格的對(duì)應(yīng)關(guān)系，這種現(xiàn)象稱為象稱為C值悖理或值悖理或C值反?，F(xiàn)象值反?，F(xiàn)象。 2526簡(jiǎn)述DNA的C值以及C值矛盾（C Value paradox）. 中科院上海生化所 98 年上海第二軍醫(yī)大： C值矛盾27n1974年年Kormberg等人根據(jù)染色質(zhì)的酶切降解等人根據(jù)染色質(zhì)的酶切降解和電鏡觀察，發(fā)現(xiàn)了染色質(zhì)基本結(jié)構(gòu)單位為核和電鏡觀察，發(fā)現(xiàn)了染色質(zhì)基本結(jié)構(gòu)單位為核小體（小體（nucl

12、eosome）。）。n核小體（核小體（nucleosome）定義：）定義：用于包用于包裝染色質(zhì)的結(jié)構(gòu)單位，是由裝染色質(zhì)的結(jié)構(gòu)單位，是由DNA鏈纏繞鏈纏繞一個(gè)組蛋白核構(gòu)成的。一個(gè)組蛋白核構(gòu)成的。 3、核小體2829核小體的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)n每個(gè)核小體單位包括每個(gè)核小體單位包括166bp的的DNA和一和一個(gè)組蛋白八聚體及一分子的組蛋白個(gè)組蛋白八聚體及一分子的組蛋白H1。n組蛋白八聚體構(gòu)成核小體的核心結(jié)構(gòu)，組蛋白八聚體構(gòu)成核小體的核心結(jié)構(gòu)，由由H2A、H2B、H3和和H4各兩分子組成，各兩分子組成，(H3)2、(H4)2四聚體構(gòu)成組蛋白八聚體四聚體構(gòu)成組蛋白八聚體的核心，核心頂部和底部各有一個(gè)的核心，核心頂

13、部和底部各有一個(gè)H2AH2B二聚體。二聚體。30核小體的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)nDNA分子以超螺旋的形式盤(pán)繞八聚體兩分子以超螺旋的形式盤(pán)繞八聚體兩圈，每圈圈，每圈83bp，共共166bp。n一分子的組蛋白一分子的組蛋白H1與與DNA結(jié)合，鎖住核結(jié)合，鎖住核小體小體DNA的進(jìn)出口，從而穩(wěn)定了核小體的進(jìn)出口，從而穩(wěn)定了核小體的結(jié)構(gòu)。的結(jié)構(gòu)。n兩個(gè)相鄰核小體之間以連接兩個(gè)相鄰核小體之間以連接DNA相連，相連，長(zhǎng)度為長(zhǎng)度為080bp不等。不等。31核小體的結(jié)構(gòu)3233中國(guó)科學(xué)院上海生化與細(xì)胞所2002年招收碩士研究生分子遺傳學(xué)入學(xué)考試：簡(jiǎn)述真核細(xì)胞內(nèi)核小體與核小體核心顆粒的結(jié)構(gòu)。Nucleosome、chromos

14、ome、genome 中科院2002年碩士學(xué)位研究生入學(xué)分子遺傳學(xué)試題34（四）、染色體的包裝超螺旋結(jié)構(gòu)（染色體DNA的分子長(zhǎng)度與細(xì)胞核直徑大小相差懸殊。例如，人的每條染色體DNA分子平均長(zhǎng)度為5cm，而細(xì)胞核直徑為5um，即：5x104 cm。這說(shuō)明了染色體在細(xì)胞核內(nèi)的包裝需壓縮近萬(wàn)倍。356.8:140:11000:18000:1DNA double helixNucleosome (10 nm fiber)30 nm FiberLoops ILoops IIchromosome363738（五）原核生物和真核生物基因組結(jié)構(gòu)特點(diǎn)比較n基因：表達(dá)一種蛋白質(zhì)或功能RNA的基本單位。n基因組：是

15、指某種生物所包含的全套基因。（單倍體） 人類基因組的C 值在3 x 109 bp ； 病毒含103105bp；細(xì)菌含105107bp；39 原核生物的基因組很小，大多只有一條染色體，且DNA含量少，如大腸桿菌DNA的相對(duì)分子質(zhì)量?jī)H為2.4x109,或4.6x106bp，其完全伸展總長(zhǎng)約為1.3mm，含4000個(gè)基因。病毒的基因組就更小一些。從基因組的組織結(jié)構(gòu)來(lái)看，原核細(xì)胞DNA有如下特點(diǎn)：1、原核生物基因組結(jié)構(gòu)特點(diǎn)40 基因組很小，大多只有一條染色體 結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)煉 存在轉(zhuǎn)錄單元(trnascriptional operon) 多順?lè)醋?polycistron)X174 D-E-J-F-G-H mR

16、NA 蛋白J、F、G H D EE.coli 組氨酸操縱子 9個(gè)順?lè)醋?9個(gè)酶 ( 第六章 )1、原核生物基因組結(jié)構(gòu)特點(diǎn)41n多順?lè)醋?polycistron)：原核生物DNA序列中功能相關(guān)的RNA和蛋白質(zhì)基因，往往叢集在基因組的一個(gè)或幾個(gè)特定部位，形成功能單位或轉(zhuǎn)錄單元，它們可被一起轉(zhuǎn)錄為含多個(gè)mRNA的分子，叫多順?lè)醋觤RNA。42 有重疊基因（Sanger 發(fā)現(xiàn)）n（即同一段DNA能攜帶兩種不同的蛋白質(zhì)的信息。）基因內(nèi)基因 部分重疊基因 一個(gè)堿基重疊432、真核生物基因組結(jié)構(gòu)特點(diǎn)真核基因組結(jié)構(gòu)龐大 3109bp、染色質(zhì)、核膜單順?lè)醋踊虿贿B續(xù)性 斷裂基因（interrupted gene

17、）、內(nèi)含子(intron)、 外顯子(exon)非編碼區(qū)較多 多于編碼序列(9:1) 含有大量重復(fù)序列44 不重復(fù)序列/單一序列：在基因組中有一個(gè)或幾個(gè)拷貝。真核生物的一些基因在單倍體中都是單拷貝的。如：蛋清蛋白、血紅蛋白等。這些序列一般只有一個(gè)或幾個(gè)拷貝，它占DNA總量的40%80%。不重復(fù)序列長(zhǎng)約7502000bp，相當(dāng)于一個(gè)結(jié)構(gòu)基因的長(zhǎng)度。 功能：主要是編碼蛋白質(zhì)。重復(fù)序列45 中度重復(fù)序列：在基因組中的拷貝數(shù)為101104。占總DNA的10%40%。各種rRNA、tRNA 及組蛋白基因等都屬這一類。 一般是不編碼蛋白質(zhì)的序列，在調(diào)控基因表達(dá)中起重要作用 46 高度重復(fù)序列：拷貝數(shù)達(dá)到幾

18、百個(gè)到幾百萬(wàn)個(gè)。又稱為衛(wèi)星DNA：A T含量很高的簡(jiǎn)單高度重復(fù)序列。 這類DNA只在真核生物中發(fā)現(xiàn)，占基因組的10%60%，由6100個(gè)堿基組成，在DNA鏈上串聯(lián)重復(fù)幾百萬(wàn)次。由于堿基的組成不同，在CsCl密度梯度離心中易與其他DNA分開(kāi)，形成含量較大的主峰及高度重復(fù)序列小峰，后者又稱衛(wèi)星區(qū)帶（峰）。47n高度重復(fù)序列常稱為高度重復(fù)序列常稱為衛(wèi)星衛(wèi)星DNA ?；蚪M。基因組DNA中的中的G ：C堿基對(duì)的分布是不均一堿基對(duì)的分布是不均一的，在的，在CsCl等密度梯度超離心分離后，等密度梯度超離心分離后，出現(xiàn)一個(gè)主峰和出現(xiàn)一個(gè)主峰和12個(gè)小峰，這種小峰對(duì)個(gè)小峰，這種小峰對(duì)主峰而言尤似主峰的衛(wèi)星，所

19、以稱衛(wèi)星主峰而言尤似主峰的衛(wèi)星，所以稱衛(wèi)星DNA。 484950根據(jù) DNA復(fù)性動(dòng)力學(xué)研究，DNA序列可以分成哪幾種類型？并加以舉例說(shuō)明。(2001年上海生化所）上海第二軍醫(yī)大碩士研究生入學(xué)考試試題：基因組的特點(diǎn)（真核、原核比較 ）51第二章 染色體與DNAn 染色體n DNA的結(jié)構(gòu)n DNA的復(fù)制n DNA的修復(fù)n DNA的轉(zhuǎn)座52三、DNA的結(jié)構(gòu)1 1） 概念概念 指4種脫氧核苷酸的連接及其排列順序，表示了該DNA分子的化學(xué)組成， DNA序列是這一概念的簡(jiǎn)稱。堿基序列1、 DNA的一級(jí)結(jié)構(gòu)532）特征：雙鏈反向平行配對(duì)而成脫氧核糖和磷酸交替連接，構(gòu)成DNA骨架，堿基排在內(nèi)側(cè)內(nèi)側(cè)堿基通過(guò)氫鍵

20、互補(bǔ)形成堿基對(duì)（A：T，C：G）。54553）DNA結(jié)構(gòu)的表示法562 2、DNA DNA 的二級(jí)結(jié)構(gòu)的二級(jí)結(jié)構(gòu)1）定義：指兩條多核苷酸鏈反向平行盤(pán)繞所產(chǎn)生的雙螺旋結(jié)構(gòu)。 5758繞DNA雙螺旋表面上出現(xiàn)的螺旋槽（溝），寬的溝稱為大溝，窄溝稱為小溝。大溝，小溝都、是由于堿基對(duì)堆積和糖-磷酸骨架扭轉(zhuǎn)造成的。 59Watson-Crick雙螺旋結(jié)構(gòu)模型雙螺旋結(jié)構(gòu)模型(B-DNA) 兩條反平行的多核苷酸鏈繞同一中心軸相兩條反平行的多核苷酸鏈繞同一中心軸相纏繞，形成右手雙股螺旋，一條纏繞，形成右手雙股螺旋，一條5 533，另一條另一條3 355 磷酸與脫氧核糖彼此通過(guò)磷酸與脫氧核糖彼此通過(guò)3 3、5

21、5- -磷酸磷酸二酯鍵相連接，構(gòu)成二酯鍵相連接，構(gòu)成DNADNA分子的骨架。分子的骨架。磷酸與脫氧核糖在雙螺旋外側(cè)，嘌呤與嘧磷酸與脫氧核糖在雙螺旋外側(cè)，嘌呤與嘧啶堿位于雙螺旋的內(nèi)側(cè)。啶堿位于雙螺旋的內(nèi)側(cè)。堿基平面與縱軸垂直，糖環(huán)平面與縱軸平堿基平面與縱軸垂直，糖環(huán)平面與縱軸平行行60 兩條兩條脫氧脫氧核苷酸鏈之間依靠堿基間的氫鏈結(jié)核苷酸鏈之間依靠堿基間的氫鏈結(jié)合在一起。合在一起。螺圈之間主要靠堿基平面間的堆積力維持螺圈之間主要靠堿基平面間的堆積力維持 每圈螺旋含每圈螺旋含1010個(gè)核苷酸，堿基堆積距離個(gè)核苷酸，堿基堆積距離0.340.34nmnm，雙螺旋平均直徑雙螺旋平均直徑2 2nmnm，大

22、溝：寬大溝：寬1.21.2nm nm ，深深0.850.85nmnm， 小溝小溝 ：寬：寬0.60.6nmnm，深深0.750.75nmnm61 DNA雙螺旋模型是哪年由誰(shuí)提出的?簡(jiǎn)述其基本內(nèi)容.為什么說(shuō)該模型的提出是分子生物學(xué)發(fā)展史上的里程碑,具有劃時(shí)代的貢獻(xiàn)? 浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院2003生物化學(xué)（碩士） 622）分類：右手螺旋：A-DNA，B-DNA左手螺旋：Z-DNA63ABZ64ABZ653、DNA的高級(jí)結(jié)構(gòu)1）定義：指DNA雙螺旋進(jìn)一步扭曲盤(pán)繞所形成的特定空間結(jié)構(gòu)。是一種比雙螺旋更高層次的空間構(gòu)象。2）主要形式：超螺旋結(jié)構(gòu)（正超螺旋和負(fù)超螺旋）6667線狀DNA形成的超螺旋68環(huán)狀DNA

23、形成的超螺旋69拓?fù)洚悩?gòu)酶or溴化乙錠拓?fù)洚悩?gòu)酶or溴化乙錠DNA扭曲與雙螺旋相同（擰緊）DNA扭曲與雙螺旋相反（松開(kāi)）負(fù)超螺旋松弛DNA正超螺旋70第二章 染色體與DNAn 染色體n DNA的結(jié)構(gòu)n DNA的復(fù)制n DNA的修復(fù)n DNA的轉(zhuǎn)座71四、DNA的復(fù)制DNARNA蛋白質(zhì)復(fù)制轉(zhuǎn)錄翻譯逆轉(zhuǎn)錄RNA復(fù)制72內(nèi)容提要： DNA的半保留復(fù)制與DNA復(fù)制有關(guān)的物質(zhì) DNA的復(fù)制過(guò)程（大腸桿菌為例） DNA復(fù)制的其它方式真核生物中DNA的復(fù)制特點(diǎn)73（一）DNA的半保留復(fù)制（semi-conservative replication）n1、基本概念n1）復(fù)制（replication）：即DNA

24、的生物合成，以DNA為模板指導(dǎo)合成相同的DNA分子，使遺傳信息從親代傳遞到子代的過(guò)程。 RNA病毒的遺傳信息儲(chǔ)存于RNA分子中，可進(jìn)行RNA復(fù)制并反轉(zhuǎn)錄合成DNA。74n關(guān)于DNA復(fù)制機(jī)理的假說(shuō)有以下三種： 1、半保留復(fù)制假說(shuō) 2、全保留復(fù)制假說(shuō) 3、發(fā)散式復(fù)制假說(shuō)75Semi-conservative Conservative Dispersive76772、實(shí)驗(yàn)證據(jù)（1958 Meselson 和Stahl ）： Matthew Messelson Franklin Stahl78：n 58年Meselson和Stahl利用氮標(biāo)記技術(shù)試驗(yàn)證實(shí)：n 含有15N標(biāo)記的培養(yǎng)基中培養(yǎng)大腸桿菌得到1

25、5N-DNA；n 將15N-DNA轉(zhuǎn)移到含有14N標(biāo)記的培養(yǎng)基中培養(yǎng)不同代數(shù)時(shí)，CsCl密度梯度離心,觀察DNA所處的位置；n 15N-DNA的密度比14N-DNA的大，在密度梯度離心時(shí)，兩種密度不同的DNA分布在不同的區(qū)帶。79808182n半保留復(fù)制的實(shí)驗(yàn)結(jié)果半保留復(fù)制的實(shí)驗(yàn)結(jié)果：n 15N- DNA顯示為一條重密度帶位于離心管的管底。n 15N- DNA和14N- DNA的雜交分子中密度帶。n 第二代有中密度帶及低密度帶兩個(gè)區(qū)帶，這表明它們分別為15N 14N DNA和14N -DNA。n 在14N培養(yǎng)基中培養(yǎng)代數(shù)的增加，低密度帶增強(qiáng)，而中密度帶逐漸減弱。8384n半保留復(fù)制進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)

26、證椐：n 15N-DNA、14N- DNA雜交分子經(jīng)加熱變性，對(duì)于變性前后的DNA分別進(jìn)行CsCl密度梯度離心。結(jié)果變性前的雜交分子為一條中密度帶，變性后則分為兩條區(qū)帶，即重密度帶(15N- DNA)及低密度帶(14N- DNA)。8586 中國(guó)科學(xué)院上海生化與細(xì)胞所2002年招收碩士研究生分子遺傳學(xué)入學(xué)考試： 請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)一個(gè)實(shí)驗(yàn)來(lái)證明DNA復(fù)制是以半保留方式進(jìn)行的（8分）。 87“Heavy” DNA“Hybrid” DNA“l(fā)ight” DNA “Hybrid” DNA88n2）半保留復(fù)制（semiconservative replication）：DNA復(fù)制時(shí)，親代DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)解開(kāi)，分別

27、以解開(kāi)的兩股單鏈為模板，以dNTP(dATP、 dGTP 、dTTP 、dCTP)為原料，按照堿基互補(bǔ)的原則，合成與模板鏈互補(bǔ)的新鏈，從而形成兩個(gè)子代DNA雙鏈，其結(jié)構(gòu)與親代DNA雙鏈完全一致。因子代DNA雙鏈中的一股單鏈源自親代，另一股單鏈為合成的新鏈，形成的雙鏈與親代雙鏈的堿基序列完全一致，故稱為半保留復(fù)制。893、DNA半保留復(fù)制的生物學(xué)意義： 新DNA分子雙鏈為“一母一子”；因此復(fù)制更為精確，致使遺傳信息更加穩(wěn)定。穩(wěn)定的遺傳信息從親代傳遞給子代，從而使生物的前后代保持了一定的連續(xù)性。 90（二）與DNA復(fù)制有關(guān)的物質(zhì)1、原料：四種脫氧核苷三磷酸（dATP、dGTP、 dCTP、dTTP

28、) dNTP2、模板：以DNA的兩條鏈為模板鏈，合成子代DNA3、引物：DNA的合成需要一段RNA鏈作為引物91n4、引物合成酶（引發(fā)酶）：是一種RNA聚合酶，在復(fù)制的起始點(diǎn)處以DNA為模板，催化合成一小段互補(bǔ)的RNA。實(shí)質(zhì)是以DNA為模板的RNA聚合酶。DNA聚合酶不能催化兩個(gè)游離的dNTP聚合反應(yīng)，若沒(méi)有引物就不能起始DNA合成。引物酶能直接在單鏈DNA模板上催化游離的NTP合成一小段RNA，作為合成DNA的引物（Primer)，并由這一小段RNA引物提供3-OH， 經(jīng)DNA聚合酶催化鏈的延伸。 92 5、 DNA聚合酶:以DNA為模板的DNA合成酶以四種脫氧核苷酸三磷酸為底物反應(yīng)需要有模

29、板的指導(dǎo)反應(yīng)需要有3-OH存在DNA鏈的合成方向?yàn)? 3 93性質(zhì) 聚合酶聚合酶 聚合酶3 5 外切活性+ + + +5 3 外切活性+-5 3 聚合活性+ 中+ 很低+ 很高新生鏈合成-+主要是對(duì)主要是對(duì)DNADNA損傷的修損傷的修復(fù)；以及在復(fù)；以及在DNADNA復(fù)制時(shí)復(fù)制時(shí)切除切除RNARNA引物并填補(bǔ)其引物并填補(bǔ)其留下的空隙。留下的空隙。修復(fù)紫外修復(fù)紫外光引起的光引起的DNADNA損傷損傷DNA DNA 復(fù)制的主要復(fù)制的主要聚合酶，還具有聚合酶，還具有3 3-5-5 外切酶的外切酶的校對(duì)功能，提高校對(duì)功能，提高DNADNA復(fù)制的保真性復(fù)制的保真性原核生物中的DNA聚合酶(大腸桿菌）94

30、定位 細(xì)胞核 細(xì)胞核 線粒體 細(xì)胞核 細(xì)胞核3-5外切 - - + + +酶活性功能引物引物 合成合成修復(fù)修復(fù)作用作用線粒體線粒體DNADNA的復(fù)制的復(fù)制核核DNADNA的復(fù)制的復(fù)制？真核生物中的DNA聚合酶95 6、DNA連接酶（1967年發(fā)現(xiàn)）：若雙鏈DNA中一條鏈有切口，一端是3-OH，另一端是5-磷酸基，連接酶可催化這兩端形成磷酸二酯鍵，而使切口連接。 但是它不能將兩條游離的DNA單鏈連接起來(lái) DNADNA連接酶連接酶在在DNADNA復(fù)制、損傷修復(fù)、重組等過(guò)程復(fù)制、損傷修復(fù)、重組等過(guò)程中起重要作用中起重要作用3535OHOHP P967、DNA 拓?fù)洚悩?gòu)酶(DNA Topisomera

31、se)： 拓?fù)洚悩?gòu)酶：使DNA一條鏈發(fā)生斷裂和再連接，作用是松解負(fù)超螺旋。主要集中在活性轉(zhuǎn)錄區(qū)，同轉(zhuǎn)錄有關(guān)。例：大腸桿菌中的蛋白 拓?fù)洚悩?gòu)酶：該酶能暫時(shí)性地切斷和重新連接雙鏈DNA，作用是將負(fù)超螺旋引入DNA分子。同復(fù)制有關(guān)。 例：大腸桿菌中的DNA旋轉(zhuǎn)酶97上海生化所1998年分子遺傳學(xué)試題：拓?fù)洚悩?gòu)酶988、DNA 解螺旋酶 /解鏈酶（DNA helicase) 通過(guò)水解ATP獲得能量來(lái)解開(kāi)雙鏈DNA。 E.coli中的rep蛋白就是解螺旋酶，還有解螺旋酶I、II、III。reprep蛋白沿蛋白沿3 3 5 5移動(dòng)，而解螺旋酶移動(dòng)，而解螺旋酶I I、IIII、IIIIII沿沿5 5 3 3

32、移動(dòng)。移動(dòng)。991009、單鏈結(jié)合蛋白單鏈結(jié)合蛋白(SSBP-single-strand binding protein)：穩(wěn)定已被解開(kāi)的穩(wěn)定已被解開(kāi)的DNA單鏈，阻止復(fù)單鏈，阻止復(fù)性和保護(hù)單鏈不被核酸酶降解。性和保護(hù)單鏈不被核酸酶降解。101（三）DNA的復(fù)制過(guò)程（大腸桿菌為例）n 雙鏈的解開(kāi)雙鏈的解開(kāi)n RNARNA引物的合成引物的合成n DNADNA鏈的延伸鏈的延伸n 切除切除RNARNA引物，填補(bǔ)缺口，連接相鄰的引物，填補(bǔ)缺口，連接相鄰的DNADNA片段片段102n復(fù)制是從DNA分子上的特定部位開(kāi)始的，復(fù)制起始點(diǎn)(originof replication)常用ori或o表示，稱為復(fù)制子

33、或復(fù)制單元復(fù)制子或復(fù)制單元(replicon)。n在原核細(xì)胞中只有一個(gè)復(fù)制起始點(diǎn)，一個(gè)復(fù)制子。n在真核生物中復(fù)制是從許多起始點(diǎn)同時(shí)開(kāi)始的，即有多個(gè)復(fù)制子。1 1、雙鏈的解開(kāi)、雙鏈的解開(kāi)1031 1、雙鏈的解開(kāi)、雙鏈的解開(kāi) DNA的復(fù)制有特定的起始位點(diǎn)，叫做復(fù)制原點(diǎn)。 ori(或o）、富含A、T的區(qū)段。基本概念： 上海生化所1998年分子遺傳學(xué)試題：真核生物復(fù)制起始點(diǎn)的特征包括（ ）A富含GC區(qū) B富含AT區(qū) C Z DNA D無(wú)明顯特征104 從復(fù)制原點(diǎn)到終點(diǎn)，組成一個(gè)復(fù)制單位，叫從復(fù)制原點(diǎn)到終點(diǎn)，組成一個(gè)復(fù)制單位，叫復(fù)制子復(fù)制子復(fù)制時(shí)，解鏈酶等先將DNA的一段雙鏈解開(kāi)，形成復(fù)制點(diǎn)，這個(gè)復(fù)制點(diǎn)

34、的形狀象一個(gè)叉子，故稱為復(fù)制叉105復(fù)制叉復(fù)制叉復(fù)制叉復(fù)制叉106雙鏈解開(kāi)、復(fù)制起始大腸桿菌中的復(fù)制起始位點(diǎn)是Ori C，全長(zhǎng)245Bp，該序列在所有細(xì)菌復(fù)制起始位點(diǎn)中都是保守的。107108大約20個(gè)DnaA蛋白在ATP的作用下與oriC處的4個(gè)9bp保守序列相結(jié)合109在HU蛋白和ATP的共同作用下,Dna復(fù)制起始復(fù)合物使3個(gè)13bp直接重復(fù)序列變性,形成開(kāi)鏈110解鏈酶六體分別與單鏈DNA相結(jié)合(需DnaC幫助),進(jìn)一步解開(kāi)DNA雙鏈1111122 2、RNARNA引物的合成引物的合成DnaB蛋白活化引物合成酶，引發(fā)RNA引物的合成。引物長(zhǎng)度約為幾個(gè)至10個(gè)核苷酸，基因組DNA復(fù)制時(shí)，先

35、導(dǎo)鏈的引物是DNA，后隨鏈的引物是RNA (-) 2002年上海生化與細(xì)胞所113nDNA的復(fù)制實(shí)際上就是以DNA為模板在DNA聚合酶作用下，將四種dNTP聚合成DNA的過(guò)程。n主要包括兩個(gè)不同但相互有聯(lián)系的事件，即前導(dǎo)鏈和滯后鏈的合成。n由于DNA雙螺旋的兩條鏈?zhǔn)欠聪蚱叫械模虼嗽趶?fù)制叉附近解開(kāi)的DNA鏈一條是53，另一條是35方向，兩個(gè)模板極性不同。所有已知DNA聚合酶的合成方向都是53，那么DNA反向平行的兩條鏈?zhǔn)侨绾瓮瑫r(shí)完成復(fù)制的呢？3 3、DNADNA鏈的延伸鏈的延伸114DNA的半不連續(xù)復(fù)制（semi-discontinuous replication) DNA復(fù)制時(shí)其中一條子鏈的

36、合成是連續(xù)的，而另一條子鏈的合成是不連續(xù)的，故稱半不連續(xù)復(fù)制。在DNA復(fù)制時(shí)，合成方向與復(fù)制叉移動(dòng)的方向一致并連續(xù)合成的鏈為前導(dǎo)鏈；合成方向與復(fù)制叉移動(dòng)的方向相反，形成許多不連續(xù)的片段，最后再連成一條完整的DNA鏈為滯后鏈。3 3、DNADNA鏈的延伸鏈的延伸115 在DNA復(fù)制過(guò)程中，前導(dǎo)鏈能連續(xù)合成，而滯后鏈只能是斷續(xù)的合成53 的多個(gè)短片段，這些不連續(xù)的小片段稱為岡崎片段。116117118119120華中科技大學(xué)2004年生物化學(xué)與分子生物學(xué)碩士研究生入學(xué)試題名詞解釋 ：岡崎片段（3分）武漢大學(xué)2003年碩士研究生入學(xué)分子生物學(xué)試題：Replicon、 semi-conservativ

37、e replication 121華中科技大學(xué)2004年生物化學(xué)與分子生物學(xué)碩士研究生入學(xué)試題 原核DNA合成酶中（ ）的主要功能是合成前導(dǎo)鏈和岡崎片段A、DNA聚合酶 B、DNA聚合酶 C、DNA聚合酶 D、引物酶 1224 4、切除、切除RNARNA引物，填補(bǔ)缺口，連接相鄰的引物，填補(bǔ)缺口，連接相鄰的DNADNA片段片段 （復(fù)制終止）（復(fù)制終止）在DNA聚合酶催化下切除RNA引物；留下的空隙由DNA聚合酶催化合成一段DNA填補(bǔ)上；在DNA連接酶作用下，連接相鄰的DNA鏈大腸桿菌DNA具有復(fù)制終止位點(diǎn)，此處可以結(jié)合一種特異的蛋白質(zhì)分子叫做Tus，通過(guò)阻止解鏈酶(Helicase)的解鏈活性而

38、終止復(fù)制。123（四）DNA復(fù)制的方式1、線性DNA雙鏈的復(fù)制 單一起點(diǎn)的單向及雙向，和多個(gè)起始點(diǎn)的雙向幾種，復(fù)制叉處呈“眼”型。2、環(huán)狀DNA雙鏈的復(fù)制1）、雙鏈環(huán)狀、型復(fù)制、雙向等速 2) 、滾環(huán)型：?jiǎn)蜗驈?fù)制的特殊方式如：174的雙鏈環(huán)狀DNA復(fù)制型（RF）3）、D環(huán)復(fù)制 124 單單起點(diǎn)、起點(diǎn)、雙雙向等速向等速多多起點(diǎn)、起點(diǎn)、雙雙向等速向等速125雙鏈環(huán)狀、型復(fù)制、雙向等速126（1）模板鏈和新合成的鏈分開(kāi);（2）不需RNA引物，在正鏈3OH上延伸（3）只有一個(gè)復(fù)制叉; 127D環(huán)復(fù)制單向復(fù)制的特殊方式如：動(dòng)物線粒體DNA128（五）真核生物中DNA的復(fù)制特點(diǎn)1、真核生物每條染色體上有多

39、個(gè)復(fù)制起點(diǎn)，多復(fù)制子2、真核生物染色體在全部復(fù)制完之前,各個(gè)起始點(diǎn)不再重新開(kāi)始DNA復(fù)制；而在快速生長(zhǎng)的原核生物中，復(fù)制起點(diǎn)可以連續(xù)開(kāi)始新的復(fù)制(多復(fù)制叉)。真核生物快速生長(zhǎng)時(shí)，往往采用更多的復(fù)制起點(diǎn)。3、真核生物有多種DNA聚合酶。129第二章 染色體與DNAn 染色體n DNA的結(jié)構(gòu)n DNA的復(fù)制n DNA的修復(fù)n DNA的轉(zhuǎn)座130五、DNA的修復(fù)（一）基因突變和基因的損傷n1 1、基因突變的分類：n 點(diǎn)突變：DNA分子中單個(gè)堿基的改變，同類堿基之間取代，稱轉(zhuǎn)換；否則稱顛換。n 堿基的插入突變：插入一個(gè)或一個(gè)以上的堿基。n 堿基丟失突變：缺失一個(gè)或一個(gè)以上的堿基。131n2 2、突變可

40、能造成的后果n 可能使生物更有利適應(yīng)環(huán)境，引起生物進(jìn)化。n 導(dǎo)致生物體的死亡，屬致死突變。n 引起結(jié)構(gòu)、形態(tài)和功能的異常，產(chǎn)生疾病。n 引起細(xì)胞的癌變。n 不發(fā)生任何變化和影響。132n3、基因的損傷n 一切使DNA結(jié)構(gòu)和功能發(fā)生改變的DNA變化，都可稱為基因的損傷。n 突變也是DNA損傷的一種，還包括：a、堿基損傷。b、DNA鏈斷裂，有單鏈斷裂和雙鏈斷裂。133n4、引起基因損傷的因素：n1 1）物理因素n 紫外線：可引起DNA兩個(gè)相鄰的胸腺嘧啶發(fā)生聚合反應(yīng)，形成T二聚體，阻止DNA的復(fù)制和轉(zhuǎn)錄。n 電離輻射：X、射線引起DNA的損傷。包括DNA的主鏈斷裂，堿基聚合，糖苷鏈的斷裂，造成染色體

41、畸變、基因突變、細(xì)胞死亡等。134n2 2）化學(xué)因素：n 烷化劑：可生成烷基化堿基，引起配對(duì)錯(cuò)誤。n 核苷酸類似物：如5-溴尿嘧啶，引起堿基置換。n 黃曲霉毒素、蘇丹紅等。n3）生物因素n DNA病毒和RNA病毒感染、質(zhì)粒轉(zhuǎn)移、基因重組、轉(zhuǎn)座子的轉(zhuǎn)位等都可能使DNA發(fā)生改變，引起基因突變。135n4 4）自發(fā)損傷或突變n 生物體不接觸任何致突變劑，也可能自發(fā)的發(fā)生基因突變。包括：DNA復(fù)制時(shí)的堿基錯(cuò)誤配對(duì)；堿基的互變異構(gòu)；脫氨基。136（二）DNA的修復(fù)DNA修復(fù)系統(tǒng)功能錯(cuò)配修復(fù)恢復(fù)錯(cuò)配堿基切除修復(fù)切除突變的堿基核甘酸切除修復(fù)修復(fù)被破壞的DNADNA直接修復(fù)修復(fù)嘧啶二體或甲基化DNA 扼要說(shuō)明

42、細(xì)胞中DNA修復(fù)系統(tǒng)有哪幾種（8分） 中國(guó)科學(xué)院2002年碩士學(xué)位研究生入學(xué)分子遺傳學(xué)試題1371、錯(cuò)配修復(fù)Dam甲基化酶使母鏈位于5GATC序列中腺苷酸甲基化甲基化緊隨在DNA復(fù)制之后進(jìn)行根據(jù)復(fù)制叉上DNA甲基化程度，切除尚未甲基化的子鏈上的錯(cuò)配堿基138 根據(jù)母鏈甲基化原則找出錯(cuò)配堿基的示意圖發(fā)現(xiàn)錯(cuò)配堿基在水解ATP的作用下，MutS， MutL與堿基錯(cuò)配點(diǎn)的DNA雙鏈結(jié)合MutS-MutL在DNA雙鏈上移動(dòng)，發(fā)現(xiàn)甲基化DNA后由MutH切開(kāi)非甲基化的子鏈139 甲基化指導(dǎo)的錯(cuò)配修復(fù)示意圖錯(cuò)配堿基位于切口3下游端，錯(cuò)配堿基位于切口5上游端，1402、堿基切除修復(fù)一些堿基在自發(fā)或誘變下會(huì)發(fā)生

43、脫酰胺，然后改變配對(duì)性質(zhì)，造成氨基轉(zhuǎn)換突變n腺嘌呤變?yōu)榇吸S嘌呤與胞嘧啶配對(duì)n鳥(niǎo)嘌呤變?yōu)辄S嘌呤與胞嘧啶配對(duì)n胞嘧啶變?yōu)槟蜞奏づc腺嘌呤配對(duì)141胞嘧啶去氨基生成尿嘧啶142如果復(fù)制發(fā)生就會(huì)產(chǎn)生一個(gè)突變143.糖苷水解酶識(shí)別改變了的堿基，把堿基從N-糖苷鍵處切下來(lái)，在DNA鏈上形成去嘌呤或去嘧啶位點(diǎn)，統(tǒng)稱為AP位點(diǎn)。144由AP磷酸內(nèi)切酶將受損核苷酸的糖苷-磷酸鍵切開(kāi)145。DNA連接酶連接利用DNA聚合酶I切除損傷部位，補(bǔ)上核苷酸1463、核苷酸切除修復(fù)1）通過(guò)特異的核酸內(nèi)切酶識(shí)別損傷部位2）由酶的復(fù)合物在損傷的兩邊切除幾個(gè)核苷酸3） DNA 聚合酶以母鏈為模板復(fù)制合成新子鏈4）DNA連接酶將切口

44、補(bǔ)平147識(shí)別損傷部位損傷的兩邊切除幾個(gè)核苷酸DNA 聚合酶以母鏈為模板復(fù)制合成新子鏈DNA連接酶將切口補(bǔ)平1484 、DNA的直接修復(fù)在DNA光解酶的作用下將環(huán)丁烷胸腺嘧啶二體和6-4光化物還原成為單體甲基轉(zhuǎn)移酶使O6-甲基鳥(niǎo)嘌呤脫甲基生成鳥(niǎo)嘌呤，防止G-T配對(duì)149150 上海生化所1998年分子遺傳學(xué)試題： DNA修復(fù)系統(tǒng)的作用是保證DNA序列不發(fā)生任何變化（） 151第二章 染色體與DNAn 染色體n DNA的結(jié)構(gòu)n DNA的復(fù)制n DNA的修復(fù)n DNA的轉(zhuǎn)座152六、 DNA的轉(zhuǎn)座（一）基本概念：DNA的轉(zhuǎn)座：由可移位因子介導(dǎo)的遺傳物質(zhì)重排現(xiàn)象。轉(zhuǎn)座子（transposon）：存在

45、與染色體DNA上可自主復(fù)制和位移的基本單位。153（二）轉(zhuǎn)座子的類型和結(jié)構(gòu)特征原核生物轉(zhuǎn)座子的類型：1、插入序列(insertional sequence,IS)2、復(fù)合轉(zhuǎn)座子(composite transposon)3、TnA家族1541、插入序列(IS)IS是最簡(jiǎn)單的轉(zhuǎn)座子，不含有任何宿主基因，它們是細(xì)菌染色體或質(zhì)粒DNA的正常組成部分。 ：IS1 155156 復(fù)合轉(zhuǎn)座子是一類帶有某些抗藥性基因（或其他宿主基因）的轉(zhuǎn)座子，其兩翼往往是兩個(gè)相同或高度同源的IS序列 ,表明IS序列插入到某個(gè)功能基因兩端時(shí)就可能產(chǎn)生復(fù)合轉(zhuǎn)座子。2、復(fù)合轉(zhuǎn)座子(composite transposon)157

46、1583、TnA家族n除了末端帶有IS序列的復(fù)合轉(zhuǎn)座子以外，還存在一些沒(méi)有IS序列的、體積龐大的轉(zhuǎn)座子（5000bp以上）TnA家族。這類轉(zhuǎn)座子帶有3個(gè)基因，其中一個(gè)編碼內(nèi)酰胺酶（AmpR），另兩個(gè)則是轉(zhuǎn)座作用所必須的。所有TnA類轉(zhuǎn)座子兩翼都帶有38bp的倒置重復(fù)序列。159(三）轉(zhuǎn)座作用的機(jī)制n轉(zhuǎn)座時(shí)發(fā)生的插入作用有一個(gè)普遍的特征，就是受體轉(zhuǎn)座時(shí)發(fā)生的插入作用有一個(gè)普遍的特征，就是受體分子中有一段很短的（分子中有一段很短的（3 31212bpbp）、）、被稱為靶序列的被稱為靶序列的DNADNA會(huì)被復(fù)制，使插入的轉(zhuǎn)座子位于兩個(gè)重復(fù)的靶序會(huì)被復(fù)制，使插入的轉(zhuǎn)座子位于兩個(gè)重復(fù)的靶序列之間。列之間

47、。n轉(zhuǎn)座分為：復(fù)制性轉(zhuǎn)座和非復(fù)制性轉(zhuǎn)座兩大類。轉(zhuǎn)座分為：復(fù)制性轉(zhuǎn)座和非復(fù)制性轉(zhuǎn)座兩大類。160(三）轉(zhuǎn)座作用的機(jī)制161復(fù)制性轉(zhuǎn)座子n顧名思義，在復(fù)制性轉(zhuǎn)座中，整個(gè)轉(zhuǎn)座子被復(fù)制顧名思義，在復(fù)制性轉(zhuǎn)座中，整個(gè)轉(zhuǎn)座子被復(fù)制了，所移動(dòng)和轉(zhuǎn)位的僅僅是原轉(zhuǎn)座子的拷貝。轉(zhuǎn)了，所移動(dòng)和轉(zhuǎn)位的僅僅是原轉(zhuǎn)座子的拷貝。轉(zhuǎn)座酶（座酶（transposase）和解離酶（和解離酶（resolvase）分別作用于原始轉(zhuǎn)座子和復(fù)制轉(zhuǎn)座子。分別作用于原始轉(zhuǎn)座子和復(fù)制轉(zhuǎn)座子。nTnA類轉(zhuǎn)座主要是這種形式。類轉(zhuǎn)座主要是這種形式。162復(fù)制性轉(zhuǎn)座子163非復(fù)制性轉(zhuǎn)座子n與復(fù)制性轉(zhuǎn)座相對(duì)應(yīng)，在非復(fù)制性轉(zhuǎn)座中，原始轉(zhuǎn)座與復(fù)制性轉(zhuǎn)座相對(duì)應(yīng)，在非復(fù)制性轉(zhuǎn)座中，原始轉(zhuǎn)座子作為一個(gè)可移動(dòng)的實(shí)體直接被移位。子作為一個(gè)可移動(dòng)的實(shí)體直接被移位。nIS序列、序列、Mu及及Tn5等的轉(zhuǎn)座方式屬于此類。等的轉(zhuǎn)座方式屬于此類。164非復(fù)制性轉(zhuǎn)座子165 上海生化所1998年分子遺傳學(xué)試題： 轉(zhuǎn)座過(guò)程通常是指DNA中的一段特殊序列（轉(zhuǎn)座元）在轉(zhuǎn)座酶以及其它蛋白因子的作用下，從DNA分子中的一個(gè)位置被搬移到另一位置或另一DNA分子中（ ）166 Tn10轉(zhuǎn)座到一個(gè)新的DNA靶點(diǎn)時(shí)，在靶點(diǎn)兩 側(cè)形成倒轉(zhuǎn)重復(fù)序列。 (-) 2002年上海生化與細(xì)胞所167華中科