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1、2021/6/161肥達(dá)試驗(yàn)肥達(dá)試驗(yàn)n原理:用已知的原理:用已知的傷寒傷寒沙門菌沙門菌菌體(菌體(O)抗原抗原和和鞭毛(鞭毛(H)抗原,以及引起副傷寒的抗原,以及引起副傷寒的甲型甲型副傷寒沙門菌、副傷寒沙門菌、乙型乙型副傷寒沙門菌副傷寒沙門菌H抗原抗原的的診斷菌液與受檢血清做試管或微孔板凝集診斷菌液與受檢血清做試管或微孔板凝集實(shí)驗(yàn),測(cè)定受檢血清中有無(wú)相應(yīng)抗體及其實(shí)驗(yàn),測(cè)定受檢血清中有無(wú)相應(yīng)抗體及其效價(jià)的試驗(yàn)。效價(jià)的試驗(yàn)。2021/6/162肥達(dá)試驗(yàn)(試管凝集反應(yīng))肥達(dá)試驗(yàn)(試管凝集反應(yīng))n器材:試管器材:試管6支支/人,試管架人,試管架1個(gè)個(gè)/2人人 吸管吸管1支支/人,標(biāo)簽人,標(biāo)簽1個(gè)個(gè)/人

2、人 乳膠頭乳膠頭1個(gè)個(gè)/人人n已知:已知: 傷寒桿菌傷寒桿菌H菌液菌液 傷寒桿菌傷寒桿菌O菌液菌液 (4人人/組)組) 甲型副傷寒甲型副傷寒H菌液菌液 乙型副傷寒乙型副傷寒H菌液菌液n待檢:病人血清(待檢:病人血清(1:10稀釋)稀釋)2021/6/163方法:方法:1. 每管加每管加N生理鹽水生理鹽水0.5ml(編號(hào)、標(biāo)記)編號(hào)、標(biāo)記) 2. 第一管加診斷血清第一管加診斷血清0.5ml,混勻混勻 從第一管取從第一管取0.5ml加入第二管,混勻加入第二管,混勻 從第二管取從第二管取0.5ml加入第三管,混勻加入第三管,混勻 從第三管取從第三管取0.5ml加入第四管,混勻加入第四管,混勻 從第四

3、管取從第四管取0.5ml加入第五管,混勻加入第五管,混勻 從第五管取從第五管取0.5ml,棄在污物盆里棄在污物盆里 3. 每管加菌液每管加菌液0.5ml ,混勻混勻 4. 第一管貼標(biāo)簽,放一排,第一管貼標(biāo)簽,放一排,45水箱,孵育水箱,孵育1.5h 2021/6/1641:20 1:40 1:80 1:160 1:3201:40 1:80 1 :160 1 :320 1 :6400.5ml0.5ml0.5ml0.5ml加完菌液加完菌液血清稀釋度血清稀釋度棄棄血清血清NS注意!注意! (1)每人只有一根吸管,先加)每人只有一根吸管,先加NS,再用之加血清,再用之加血清, 用完后拔掉吸頭,放進(jìn)用完

4、后拔掉吸頭,放進(jìn)鉛桶鉛桶里里 (2)加菌液時(shí),最好從)加菌液時(shí),最好從第第6管管往前加,避免將高濃度血清往前加,避免將高濃度血清 帶到低濃度試管里,導(dǎo)致結(jié)果不準(zhǔn)帶到低濃度試管里,導(dǎo)致結(jié)果不準(zhǔn) (3)觀察完結(jié)果,將有菌的)觀察完結(jié)果,將有菌的試管放進(jìn)鍋試管放進(jìn)鍋里。里。2021/6/165n以出現(xiàn)凝集的血清最高稀釋倍數(shù)為該血清抗體效價(jià)以出現(xiàn)凝集的血清最高稀釋倍數(shù)為該血清抗體效價(jià)nO達(dá)到達(dá)到1:80,H達(dá)到達(dá)到1:160 H甲甲或或H乙乙達(dá)到達(dá)到1:80或以上有診斷意義或以上有診斷意義結(jié)果判斷結(jié)果判斷 記錄結(jié)果記錄結(jié)果:第第6管管 均勻混濁均勻混濁 少量凝集少量凝集 細(xì)菌部分沉于管底,液體半澄清,凝集細(xì)菌部分沉于管底,液體半澄清,凝集 呈顆粒狀呈顆粒狀 大部分凝集,液體輕度混濁,凝集塊較大大部分凝集,液體輕度混濁,凝集塊較大 全部凝集,液體澄清,大片凝集塊全部凝集,液體澄清,大片凝集塊2021/6/166 血清稀釋度血清稀釋度 菌液菌液 1:40 1:

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