p16和ki-67雙染檢測助力宮頸癌前病變診斷6頁

1、p16和Ki-67雙染檢測，助力宮頸癌前病變診斷 研究發(fā)現(xiàn)，全球絕大部分宮頸癌病例都是由人乳頭瘤病毒（HPV）所引起，只有長期持續(xù)感染高危型HPV病毒才會導致高級別宮頸上皮內(nèi)瘤變（CIN），進而發(fā)展為宮頸癌。宮頸癌防治的關鍵在于篩查出高風險人群，找出高級別CIN 患者，及時干預。采用免疫組化雙染技術在宮頸上皮細胞或組織中檢測兩種生物標志物p16和Ki-67以輔助診斷宮頸癌前病變已成為當前各國研究的重點。日前，在中華醫(yī)學會第十四屆全國細胞病理學會議暨細胞病理學讀片會上，中山大學附屬第一醫(yī)院病理科主任余俐教授同與會病理及腫瘤領域的專家深入交流并探討了CINtec?PLUS p16 和Ki-67 免

2、疫細胞化學雙染檢測對于輔助宮頸癌前病變診斷的重要性。p16和Ki-67雙染檢測輔助細胞學診斷，有效降低陰道鏡轉(zhuǎn)診率細胞學在很多國家是標準的宮頸癌篩查方法，但在臨床實際操作中存在諸多問題：由于敏感性較低、重復性差，檢測結果存在一定的假陰性率和假陽性率；針對無明確意義的非典型鱗狀上皮細胞（ASC-US），不能明確是癌前病變還是反應性細胞改變；實驗室間的結果差異大；對腺癌不敏感；篩查間隔頻繁，至少每23年就要進行一次檢測。余俐教授指出，較為理想的宮頸癌篩查手段應該是在提高細胞學檢測敏感性的同時，能夠不損失其特異性或者可以通過客觀的生物標志物，標記出高級別病變的細胞，以輔助細胞學檢測結果的判讀和診斷。

3、2012年，美國病理學家協(xié)會（CAP）和美國陰道鏡和宮頸病理學會（ASCCP）聯(lián)合發(fā)布了下生殖道HPV相關的鱗狀病變的命名標準化計劃（LAST）指南，最終認定p16是唯一有足夠的臨床研究數(shù)據(jù)證實其可用于宮頸癌前病變診斷的生物標志物。對于正常細胞的HPV一過性感染，免疫組化檢測不能檢測到p16表達，而HPV轉(zhuǎn)化性感染則會引起p16的過度表達，并被免疫組化檢測到。因此，p16可作為HPV感染的間接標志物，廣泛應用于宮頸癌前病變診斷。LAST 指南建議使用特定克隆號（E6H4）的p16INK4a抗體作為檢測HPV感染是否影響到細胞周期調(diào)控的生物標志物，該克隆號是我國唯一獲得國家食品藥品監(jiān)督管理總局（

4、CFDA）認證的p16INK4a 抗體。2015 年11 月26 日，CFDA 批準羅氏診斷CINtec PLUS 細胞學試劑盒抗p16（E6H4）和Ki-67（274-11AC3）單克隆抗體雞尾酒試劑（免疫細胞化學法）用于宮頸脫落細胞學診斷。p16在細胞周期的阻滯期具有抑制細胞增殖的功能，而另一種生物標志物Ki-67則指示細胞增殖。在同一個細胞周期中，如二者同時表達則提示細胞周期失調(diào)。CINtec PLUS細胞學雙染檢測能夠同時檢測出HPV持續(xù)感染后過表達的p16和Ki-67。如雙染陽性，強烈提示CIN2+病變，需立即進行陰道鏡檢查；如雙染陰性，可隨訪一年后復查，顯著降低陰道鏡轉(zhuǎn)診率，減少患

5、者不必要的檢查與治療。2015 年Besthesda 指南推薦免疫細胞化學可輔助細胞學診斷。指南指出，在檢出高度鱗狀上皮內(nèi)病變（HSIL）中，p16 和Ki-67雙染與細胞學檢測的特異性相當，且具有高敏感性。余俐教授表示，CINtec PLUS 檢測能更準確地發(fā)現(xiàn)潛在高級別病變患者，提高宮頸癌前病變檢出率，彌補現(xiàn)有宮頸癌細胞學檢測的不足，降低漏診率，減少過度診斷。研究證實雙染檢測靈敏度與特異性高美國食品與藥物管理局（FDA）注冊的美國本土最大型的前瞻性宮頸癌篩查臨床試驗ATHENA 研究，對47208例受試者進行了基于cobas HPV初篩策略和以細胞學為基礎篩查策略的3年隨訪試驗。結果顯示，

6、針對HPV16和18型以外的12種高危型HPV陽性患者，CINtec PLUS檢測能夠得到簡單、客觀的結果，明確提示患者風險以及是否需轉(zhuǎn)診陰道鏡。CINtec PLUS陽性患者在3年內(nèi)進展為CIN3+病變的風險遠高于細胞學ASC-US以上的患者，具有更好的陽性預測值，需要轉(zhuǎn)診陰道鏡以減少漏診。CINtec PLUS陰性患者，3年內(nèi)發(fā)生CIN3+病變的風險低于細胞學未見上皮內(nèi)病變或惡性病變（NILM）的患者，具有更好的陰性預測值，不需要轉(zhuǎn)診陰道鏡，幫助減少過度治療。前瞻性PALMS研究入組來自5個歐洲國家的27349例病例。大量臨床數(shù)據(jù)顯示，CINtec PLUS雙染檢測具有高靈敏度與高特異性（以CIN2+為終點），可用于ASC-US分流、低度鱗狀上皮內(nèi)病變（LSIL）分流、HPV初篩后對高危型HPV陽性者分流、對細胞學陰性但高危型HPV陽性患者進行分流。該研究2015年發(fā)表在癌癥細胞病理學（CancerCytopathol）雜志。最新數(shù)據(jù)顯示，對于細胞學ASC-US 患者的分流中，CINtec PLUS 檢測和HC2HPV檢測的陰道鏡轉(zhuǎn)診率分別為26%與42%；對于細胞學LSIL患