工業(yè)微生物菌種制備課件

1、工業(yè)微生物菌種制備第二章 工業(yè)微生物菌種制備第一節(jié) 微生物菌種的選育第二節(jié) 菌種的培養(yǎng)工業(yè)微生物菌種制備第一節(jié) 微生物菌種的選育 一、發(fā)酵工業(yè)菌種的要求 二、常用的菌種二、常用的菌種 三、菌種的選育三、菌種的選育 四、菌種保藏四、菌種保藏工業(yè)微生物菌種制備一、發(fā)酵工業(yè)菌種的要求一、發(fā)酵工業(yè)菌種的要求 (1)所需原料廉價。所需原料廉價。 (2)培養(yǎng)條件易于控制。培養(yǎng)條件易于控制。 (3)生長快，發(fā)酵周期短。生長快，發(fā)酵周期短。 (4)滿足代謝控制的要求。滿足代謝控制的要求。工業(yè)微生物菌種制備一、發(fā)酵工業(yè)菌種的要求一、發(fā)酵工業(yè)菌種的要求 (5)抗噬菌體和雜菌能力強?？故删w和雜菌能力強。 (6)菌

2、種遺傳穩(wěn)定，不易退化。菌種遺傳穩(wěn)定，不易退化。 (7)發(fā)酵中泡沫要少。發(fā)酵中泡沫要少。 (8)菌種安全。菌種安全。工業(yè)微生物菌種制備工業(yè)微生物菌種制備三、菌種的選育三、菌種的選育 （一）菌種的分離（一）菌種的分離 （二）（二）菌種的選育菌種的選育工業(yè)微生物菌種制備（一）菌種的分離（一）菌種的分離 一是可以直接索取或購買。一是可以直接索取或購買。 二是從大自然中分離篩選。二是從大自然中分離篩選。工業(yè)微生物菌種制備分離思路分離思路 菌種分離依照生產(chǎn)要求、菌種的特菌種分離依照生產(chǎn)要求、菌種的特性，采用各種篩選方法。性，采用各種篩選方法。 快速、準(zhǔn)確把需要菌種挑選出來。快速、準(zhǔn)確把需要菌種挑選出來。

3、實驗室或生產(chǎn)用菌種若不慎污染了實驗室或生產(chǎn)用菌種若不慎污染了雜菌，也必須進行分離純化。雜菌，也必須進行分離純化。工業(yè)微生物菌種制備新種分離與篩選的步驟新種分離與篩選的步驟 定方案：查資料，菌種的特性。定方案：查資料，菌種的特性。 采樣：針對性。采樣：針對性。 增殖：增殖培養(yǎng)，數(shù)量占優(yōu)。增殖：增殖培養(yǎng)，數(shù)量占優(yōu)。 分離：利用分離技術(shù)得到純種。分離：利用分離技術(shù)得到純種。 性能測定：菌種、發(fā)酵、提取等。性能測定：菌種、發(fā)酵、提取等。工業(yè)微生物菌種制備（二）（二）菌種的選育菌種的選育 1、自然選育、自然選育 2、誘變育種、誘變育種 3、雜交育種、雜交育種 4、原生質(zhì)體融合、原生質(zhì)體融合 5、基因工程

4、育種、基因工程育種工業(yè)微生物菌種制備1、自然選育、自然選育 自然選育是最古老、最簡便、應(yīng)自然選育是最古老、最簡便、應(yīng)用廣的選種方法。用廣的選種方法。 利用菌種自發(fā)突變選擇優(yōu)良菌。利用菌種自發(fā)突變選擇優(yōu)良菌。工業(yè)微生物菌種制備2、誘變育種、誘變育種 目的：通過物理或化學(xué)等誘變目的：通過物理或化學(xué)等誘變劑的處理，使誘變對象細(xì)胞內(nèi)劑的處理，使誘變對象細(xì)胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)發(fā)生變化。的遺傳物質(zhì)發(fā)生變化。工業(yè)微生物菌種制備變異菌的篩選方法條件抗性突變型的篩選條件抗性突變型的篩選抗藥性突變株的篩選抗藥性突變株的篩選抗生素抗性變異株的篩選抗生素抗性變異株的篩選營養(yǎng)缺陷型的篩選營養(yǎng)缺陷型的篩選工業(yè)微生物菌種制備3、

5、雜交育種、雜交育種 原核微生物：接合、轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)原核微生物：接合、轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo) 真核微生物：有性生殖、準(zhǔn)性生殖真核微生物：有性生殖、準(zhǔn)性生殖工業(yè)微生物菌種制備四、菌種保藏四、菌種保藏菌種退化菌種退化 菌種復(fù)壯菌種復(fù)壯 菌種保藏菌種保藏工業(yè)微生物菌種制備1、菌種退化、菌種退化 表現(xiàn)：發(fā)酵力或繁殖力表現(xiàn)：發(fā)酵力或繁殖力(如孢子如孢子的產(chǎn)生的產(chǎn)生)下降，發(fā)酵產(chǎn)品的得率下降，發(fā)酵產(chǎn)品的得率降低等。降低等。工業(yè)微生物菌種制備退化的原因退化的原因菌種保藏不當(dāng)。菌種保藏不當(dāng)。菌種生長的要求沒有得到滿足，菌種生長的要求沒有得到滿足，或是遇到某些不利條件，或是或是遇到某些不利條件，或是失去某些需要的條件。失去某些

6、需要的條件。經(jīng)誘變得來的新菌株發(fā)生回復(fù)經(jīng)誘變得來的新菌株發(fā)生回復(fù)突變，從而喪失新的特性的情突變，從而喪失新的特性的情況。況。工業(yè)微生物菌種制備退化的原因退化的原因 基因方面：突變、連續(xù)傳代等基因方面：突變、連續(xù)傳代等 環(huán)境方面：溫度、濕度、培養(yǎng)環(huán)境方面：溫度、濕度、培養(yǎng)條件等。條件等。工業(yè)微生物菌種制備防止退化措施防止退化措施控制傳代次數(shù)控制傳代次數(shù)選擇合適的培養(yǎng)條件選擇合適的培養(yǎng)條件利用不同類型細(xì)胞進行傳代利用不同類型細(xì)胞進行傳代選擇合適的菌種保藏方法選擇合適的菌種保藏方法工業(yè)微生物菌種制備2、菌種復(fù)壯、菌種復(fù)壯 單細(xì)胞分離純化。單細(xì)胞分離純化。 通過誘變再篩選。通過誘變再篩選。 改變培養(yǎng)條

7、件等。改變培養(yǎng)條件等。工業(yè)微生物菌種制備3、菌種保藏、菌種保藏 將菌種處于低溫、干燥、無氧將菌種處于低溫、干燥、無氧和缺乏營養(yǎng)的條件下，可以使和缺乏營養(yǎng)的條件下，可以使菌種暫時處于休眠狀態(tài)。菌種暫時處于休眠狀態(tài)。工業(yè)微生物菌種制備3、菌種保藏方法、菌種保藏方法 斜面低溫保藏法 液體石蠟保藏法液體石蠟保藏法 砂土管保藏法砂土管保藏法 冷凍干燥保藏法冷凍干燥保藏法 超低溫冷凍藏法超低溫冷凍藏法工業(yè)微生物菌種制備第二節(jié)第二節(jié) 菌種的培養(yǎng)菌種的培養(yǎng) 種子條件：種子條件： 菌量適宜菌量適宜 菌齡適宜菌齡適宜 性能穩(wěn)定性能穩(wěn)定 無雜污染無雜污染菌種制備任務(wù)菌種制備任務(wù)工業(yè)微生物菌種制備第二節(jié)第二節(jié) 菌種的

8、培養(yǎng)菌種的培養(yǎng)種子制備過程種子制備過程發(fā)酵工業(yè)種子培養(yǎng)發(fā)酵工業(yè)種子培養(yǎng)影響種子的因素影響種子的因素工業(yè)微生物菌種制備一一 種子制備過程種子制備過程實驗室種子培養(yǎng)實驗室種子培養(yǎng)生產(chǎn)車間種子培養(yǎng)生產(chǎn)車間種子培養(yǎng)工業(yè)微生物菌種制備1 實驗室種子培養(yǎng)實驗室種子培養(yǎng) 斜面菌種保藏斜面菌種保藏 固體擴大培養(yǎng)：茄子瓶、培養(yǎng)皿等固體擴大培養(yǎng)：茄子瓶、培養(yǎng)皿等 搖瓶培養(yǎng)搖瓶培養(yǎng)工業(yè)微生物菌種制備2 生產(chǎn)車間種子培養(yǎng)生產(chǎn)車間種子培養(yǎng) 種子罐種子罐 接種接種 種子罐級數(shù)種子罐級數(shù) 種齡和接種量種齡和接種量工業(yè)微生物菌種制備二二 發(fā)酵種子培養(yǎng)方法發(fā)酵種子培養(yǎng)方法表面培養(yǎng)表面培養(yǎng)固體培養(yǎng)固體培養(yǎng)載體培養(yǎng)載體培養(yǎng)液體深層培養(yǎng)液體深層培養(yǎng)工業(yè)微生物菌種制備影響種子的因素影響種子的因素 (1)培養(yǎng)基培養(yǎng)基 (2)種齡與接種量種齡與接種量 (3)溫度溫度 (4)pH值值 (5)通風(fēng)攪拌通風(fēng)攪拌 (6)泡沫泡沫 (7)