蛋白質(zhì)分子的電子顯微鏡觀察與制樣技術(shù).

1、蛋白質(zhì)分子的電子顯微鏡觀察與制樣技術(shù)近十幾年嘯.人門歡過屯于蟲京慢這一工 n %JSfT多存葫活主命佰總気在牛創(chuàng)塔程中 總玉大乍川的生物高分子孩補(bǔ)和3?小質(zhì)分 子釣形右.這是人們?cè)诹私庾匀籌A識(shí)需用 世畀的里程上又向前辺進(jìn)了一歩 mrt代科 #的邊步.anw人的感itwtf之危，jsasiTttc -店弄得持格更mar 生命疏鐵貝竹去正的物曆堆a(bǔ)t充分旺先了客 視世界，從無機(jī)界到右況畀，一宜制生余蚩揮的 勃質(zhì)弊。正如無產(chǎn)濟(jì)那的桶大導(dǎo)師凰熔斯所 已的？ “註界的屬正的規(guī)一性豪在千它n扁 tt, IWiiWttMIt不1M術(shù)師的三m句譴事 U明的.BH1由包學(xué)WBftlH*的長(zhǎng)期的和幷 盤的*展舉

2、II咱的氏比，應(yīng)勺先子見*忱觀 臬生物肛分子的科孚成妥也為用匹唯粉上文覆 供丁有力的武需。豊然矩遲一傾城內(nèi)，無胞從報(bào) 水方法上或在貝體技術(shù)上.i在不少mtlc Mil, ffr9f的生物玄 力十市7f丘罰缶樹佯去件旳護(hù)衲.同對(duì)丈脫 底T它總悵用時(shí)所凍圧的口球!5雜的環(huán)HL而 加為琢?xí)r、掙右的化合軻麗加以研立尊爭(zhēng). 列嚴(yán)i出？ 44原口対迂交叉奎決認(rèn)為日衛(wèi) 發(fā)巖的人拓科學(xué)在UUR自必界上的這一切里程 確密典宥時(shí)的，相對(duì)的、近St討性J#號(hào)轄主 XU為世界比它旳顯現(xiàn)更豐富、更生動(dòng)、更多 禪化因?yàn)榭茖W(xué)赫向附發(fā)展一步荻會(huì)炭51它的 新檢方麗廣生觀込分子主子 it Hfftt萬以上幕苓逝白煩箝民足M終

3、復(fù)flk.比分于珥兇R+萬衛(wèi)魏百如大 場(chǎng)桿陽(yáng)的曠鬲戊二*農(nóng)址降x分r撫為 2,300.lWo大的桿世旳丙SI馥晚14分子廉達(dá) 000,000,根聖計(jì)算，分子玄鋰與 分干淪有血下的關(guān)系？at 自 fi r 1 I.50D3.K U.COO 51.0 400. ODOJ.5O0.0M3Z.DOG.OOOSfi D分子應(yīng)&變）nM50ICO2003(Qa vftKnofli脫華陵衙核皴和槁循枚般殉是伍狀鬲分 于。觀卑恢瓶酸的分rst也在百萬以匕。雙 松 1境性廢的甲溝展為6沙7通爾 。如膽“醫(yī)枚的分子為2 * 1用 其分子駁8T町達(dá)10, UP 10徹并左右。由此可 見.上現(xiàn)療列血個(gè)魚白06或紋故分

4、f酌影姦和 兀小，片不要求分屛那做石的電3b BIW.3W 式電鏡的分操屮滋住:匕達(dá)2埃左右岡此龍全 應(yīng)洗觀銖劉巨人的叱釣戲力化麗且込白握衣 到分于中的細(xì)節(jié).排列題情況 応去電憶所以不緒親和達(dá)些大分于,咸者侃 備觀疾罰它們的相罰輪主5?的IRfrf還JI柜 Tttmtt*方面俯週列的不列o Ritt 第技從制樣蟲荒的1益發(fā)展，這莖何Ifl段事 或少RWTM決.但長(zhǎng)電喪的海分粹也領(lǐng)和釗 絆技術(shù)的限執(zhí)，特別是住樹樣骷衍冊(cè)樣技術(shù)方 曲的注片呂前仍肚17在。圧加白衣和樑笨力r 樣品之間它rns#天同的問風(fēng)出耳各n的靜貞。子的制祁技術(shù)和m鏈現(xiàn)京.前 xerr介如叫本文將對(duì)張白欣分于的電tn取 茫和樣&K

5、務(wù)恆術(shù)于以論述。一、觀察蛋白質(zhì)草個(gè)分散分子的因難準(zhǔn)物樣品的電子畋対力很伍.這左由構(gòu)成 生樹物質(zhì)御主翌無素SL製、氐IK竽本硏所決 宜。如果不怪過揮品的科加處用，如金雖投影 BB站常曲稅h的反&(KJD,旻廿一 皺旳生物址娠給構(gòu)8肖價(jià)大b 單個(gè)敷百埃攙至數(shù)+埃的蚤白16分孑01取車不 可堂。粟取一JR的點(diǎn)樣方法，當(dāng)稈叢在干H時(shí)， 直射聚合成堆，這Q需5?找到袋蛋白質(zhì)分于能 很折危力It于支蔚談上約條件，輿此要求型口 SUMUHT 適哥的UK. ftKTBS 和 Mi 在榕品千井M,豪白|檢裁申一施的尢機(jī) 冬類會(huì)以結(jié)品詼恣祈出，這也堆阿樣和現(xiàn)農(nóng)帶 臬爼。M*U分$的 妾匠和變性，片以還需彥慮適登的

6、也度和總和 的髓樣條件番白貞分于從形ifi上可以宙分為纖堆伏和 球伏兩大JS折謂球伏真“也井不人冇真近的 球快形它常術(shù)&由不只數(shù)口的限林合成 近于球狀的立方肚.Am. +二面體；廿庇 龍彎。僵一料處有s個(gè)以上的對(duì)彌他，口罰甘無 注快st白質(zhì)分于在支持蟆上定向.因而同一分 于由于歌向不Fh在混聚科，可以用對(duì)不同的形 態(tài)。升千的結(jié)枸念丸條，對(duì)稱柚和對(duì)冰面點(diǎn)多 就金出現(xiàn)敵鄉(xiāng)購(gòu)黑不祖冋的分子形;K.因而酪 觀奏焙味妁解釋帶來一定的冊(cè)靈s礙“電徴的 分本的不斷發(fā)展和炎高，功臺(tái) 其它的物議化學(xué)力崔和生物化學(xué)力払.對(duì)蛍白 討結(jié)樹轉(zhuǎn)別是對(duì)疋基的效呂和冷列四和 分于的聚合廉解離符性.分于的對(duì)誓性轉(zhuǎn)豹了 解債馮上

7、述一生展難左不目輕度上科列克腋. 俞以近年來強(qiáng)用電技術(shù)來研丸豪白貫分子詩(shī) 砂烹U(xiǎn)別員對(duì)夬衍31白俞子的形贏站杓，翌 基的殂礎(chǔ)及分于的對(duì)*Mt方 mttJEttWKA 的ififtGWi得廠一些峻為妥的結(jié)累劉研克俠 蚯白和分子的姑構(gòu)與j力能之問的關(guān)系開陽(yáng)r- 施91白賞分于的im算技術(shù)而堂.主5?可俞并仇染飲術(shù)和分于云(B S電技術(shù)卅 種。二、負(fù)棗技術(shù)L負(fù)姿拽術(shù)在瑕察屠白JK分手方面的進(jìn)懇 直用魚食枝龍 triewTtts白的單6 為于, F孚崩阿愿dDrtMA冊(cè)體叫 58白就分于療右旳*11 務(wù)。ditm-Lncn在1962邯報(bào)遇了蝕色水 的卅#老總餅丸。竝年來，由于徴4技術(shù)的進(jìn) 一步改遙.對(duì)

8、分子結(jié)杭紐乍的網(wǎng)泉不斷獲冉新 的姑果從而建立T-些折的IK.ftl對(duì)浜JU白 分于的9(白脈外龍菇枸的熨棗找冇恨3U曰 urbroik収滋電俛觀聚圧其遲化字研江的證局 也必了 一個(gè)m 2o個(gè)hi同旳亞加鉤必旳u而體 的樓51o iun應(yīng)用云2分孑復(fù)電技禾鴨觀京列 血?dú)瀎ftat白is分子具有串珮狀形總，KYppc應(yīng) 用蟲廉技術(shù)進(jìn)一歩炭祭血纖境蛍占16分/的 串祕(mì)1WJ處 發(fā)段其為一個(gè)十二面 體,18帰扶三根對(duì)徹!I的不啊位盤，可以極況出 不問的形査和分子大小.luZini-fWJI為 E大小角M（分于的”6,幷血兩個(gè)賽肚15掏仇 電發(fā)星衣到達(dá)一購(gòu)的分子罡-個(gè)由6個(gè)例宋休 ftwHIA04goo

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10、2IO.UOUI.W樣伏分于 tt wnr生懵化伊T生笛協(xié)璟字丘S.八191.3.N上山.040x1 JrrJ.酣人triply.l細(xì)2.llftlClP喚MXHKM文力傕4Fi/f A. /ib*vw. Cor. E M. Ilr 7人X.佬占卩67StISOB *&個(gè)二tdB.p 2(M 70.各9Ltt令成06沁（*14012/W 7. 2I4J. If化 3 *4R2.3W.0W9 ffi *“r s：中iv zii,丹丹R站FHW4.DCO.OCOWO K a上& 3 二X辛KKItJBHUBi.tco.Z120W*IIH上i? /U. rHHZBB死叫g(shù)o-IS *an上R0ISX

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13、利 兼色師樽層內(nèi)時(shí),彷円皮阪出對(duì)扯高,細(xì)節(jié)格 外清崽Marchakm,崔4品申加人石制胸， AI1MIKWKIA，目時(shí)萬檢還具宵7.3如 .65埃的冊(cè)林對(duì)于觀痙為于樣篇一販工 放大績(jī)敷討亞適合于校疋放大Ignx用布觀奈a白琉分f樣品時(shí).twcwiK mil!性!*尺討快用憂污染抽象故,2ift冷 ft55KWWSM*Wftfto從現(xiàn)邸霽貼 時(shí)電子貶電徨不嚏Jk大思相時(shí)枚火話Jtt股 程，萬（S以上。A負(fù)饗的分辨0隈及禪在鴿何越奐公方袪址!紀(jì)電于顯曲仗的制ftttXtt 點(diǎn)到一個(gè)祈的水華伯是兔卄忻岀在這一方法 中鋰還肚在不少冋SL吃先鎚日前廣泛使用 finftftl.由于KSK4R3E的毆?jiǎng)⒁訳

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16、艇卜坯亂 歐冏它所雖現(xiàn)的形態(tài)但會(huì)仔所不軻 B前也有 快用樣晶碩斡黃JL侵品儉軻不同加文來觀 找懇擊燮化，以枚正朝比較也立的分Tttfle 斷宵上述的一些情況.加上關(guān)的為 世，在解具細(xì)節(jié)時(shí)徉別莊鮮俸小于20埃的!HtBL 結(jié)構(gòu)時(shí)應(yīng)當(dāng)三分子云母復(fù)型枚術(shù)1.分扌云Qtsttt*的JM和以點(diǎn)HilP1 ffi&W的云曲H那疣術(shù)與戈較鼻JK tamm投影轉(zhuǎn)榜拽宋0為相似空臺(tái)了準(zhǔn)影及 一!SM繪披術(shù)。但就其末質(zhì)來uu所躍侶的腹 寮樣品井*豎型，而僅（1.捋膜上而已所以也有*之為擬.術(shù)。云耳 嗨枝術(shù)東與岐方面姻為成功址克戰(zhàn)rwa* 分子樣品的困3。如尉金U投證方法鮮決了H 品的反雄間，沖 載中MXMttA何

17、Bh MUH卿相訊 綁分殲的云2我面鮮決了 *9爪技術(shù)中比儀關(guān)K 旳分子分故旳問:!。云*的蛋奈水性便瑕到其 表茴的溶波立即分散斥易聚賤協(xié)粒，加上仗用 iRMJ3t）WS.逛免了分于間的柑互年用和 眾合敎勢(shì)伏得分贏的除個(gè)口由分子但達(dá)一 飲術(shù)也予在RrrjA,皆先顯由于依廉 si 僉授來*#加反繪，F(xiàn)的 外影和戻小,而分于拎內(nèi)邯站住，所以禿生利劇.対于分： 小的),特別是不劉揀陽(yáng)怨找或纖蛙狀長(zhǎng)分 于的ffM定存在一定的卅雜所五迖一歿忒 近邙來有謹(jǐn)涉諛?biāo)渭夹g(shù)伺試的0勢(shì)，但龜殍 于或奈一些科堆狀分于(因KSaft!,fi處不 易觀來和務(wù)卿啊節(jié))及貝有所3T開放?！敝防?的分于，砒然於種辦用的力袪.

18、在個(gè)別情況 ! 16R&用iJKP梅弭!旳分于円那姑構(gòu)，則嘰理36 白倉(cāng)干的取貝分風(fēng)形召。也用圧儀置生牧木凰 象討的瑕白曲什子冇血如JH白“(&釬維E白底、 猱跤凰.肌球蛋白、胃雄白Mijai白尊圖 3圖 4 (ULttKin, i-4)L1 分號(hào)云(1) 的云片.劉虞平方 木左右的小ttS!5J&WK中創(chuàng)分開欣人書 林m內(nèi)，鶴弄血戊鄒燥一 12曲凈酒堆，注j旣鋒 分開的山毎比內(nèi)艮*:不喪癸污。(2) 鴨姜龍疾的fi白質(zhì)悔于易岸岌的維沖 液內(nèi)通第使用為酚諛條碇找龍貸務(wù)掖也可訊 老覗合便用。在硏憲利空療過程中應(yīng)不斷m 廉帚液的dh偵、離于洶度及is白歷的滾it, a 殂白質(zhì)分子莊潔浪內(nèi)達(dá)對(duì)乞怪分

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21、啟龍即進(jìn)汗列誌 比0暫時(shí)小映碘會(huì)目動(dòng)僥FQ靜寧冰 暢住其曰I況下，flia于蠢加悅fiuttuutf f,冉用佔(zhàn)申炯飄撈齟左HUTF理秦時(shí)必如tJt電子?xùn)| 電庚不宜丸光,為支持孩上蔚 所以受到電于束齒機(jī)曷產(chǎn)生熱修動(dòng)。也 可以在vm ftffi小旳放大fGttH 屈聯(lián)強(qiáng)附 電子來把廉個(gè)戈持HJSHr故甘靜進(jìn)?r總億” iJHiliTftft均勺，廣生熱館3的W也性粧吋四、應(yīng)用電子顯微鏡測(cè)定玉白質(zhì)的分子量及分子分布耀利用電他黴現(xiàn)察玻白間分子妁及fill 上，可以測(cè)獨(dú)空門廣的分了從帥卜分布。 口白皴分于11的應(yīng)定主雯依尊廣宦噩iSE佔(zhàn) 度擴(kuò)Ift. JMkltlUaJV心0M毫4Ht方法血 達(dá)豈方送

22、禪有一定的出制.符坍足分極比 時(shí),準(zhǔn)詭次做賈酵低。帀故鏈研充剛相反力卩 盤大.規(guī)翳金容期.冊(cè)溟羌準(zhǔn)滋小利用作閣 法，逐可作出分孑大小、分子長(zhǎng)度礎(chǔ)分子的 分布統(tǒng)計(jì)側(cè)，ttiX-ifc電矗役術(shù)疝號(hào)育陰処 的優(yōu)點(diǎn)月為任何或它樹化方法 個(gè)乎絢的JSURTo 53球伏更白的分于It M可從下式爐算中暫flM 丄N 丿龍中，2為闞克加彼羅箱Bt0為蠱。質(zhì)分子密度 r為球錄白分于的半匝對(duì)于纖維狀忙分于.計(jì)算升于Utfc 力國(guó)尚療在一(3分TR/4的測(cè)取可以 比放詹張M -N */丈中文向上 r為分予工儀 I為分于長(zhǎng)度目阿戡用電鏡技術(shù)米附一股忘靠掬或生 物務(wù)分子進(jìn)訐分子尿的測(cè)定員有一生報(bào)謝但 還不是反用復(fù)廣。這上“曲于制4皮術(shù)比彼困 . i不如工用1定分子豆的一般物化方肚簡(jiǎn) 便卜為分于,必須甘呢工住血亀下觀白衍的力厳分于.這本身就咼要*犬能 的實(shí)齡*迓荷探案的譚Hh其次，卄于體枳的佔(zhàn) 卅,送白脫由皮的計(jì)解，郁足比fX近財(cái)，斯以 用電復(fù)來定殲:附1HR電并不+分 它可以用它方梏測(cè)馮夯孜期M廳比較 但朕能作力地對(duì)的依據(jù)，國(guó)為肖靄孝慮商在制 袖起中分干可施嚴(yán)生的形變；flt自