實(shí)驗(yàn)二-----血型鑒定與血紅蛋白含量測(cè)定完整版

1、u掌握凝集反應(yīng)的原理;u熟悉凝集反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)步驟和應(yīng)用;u掌握比色法測(cè)定血紅蛋白含量的方法。實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)?zāi)康膌凝集反應(yīng)：凝集反應(yīng)： 一定濃度的電解質(zhì)環(huán)境中，一定濃度的電解質(zhì)環(huán)境中， 抗原抗體凝集成為大小不等抗原抗體凝集成為大小不等肉眼可見的凝集塊肉眼可見的凝集塊。顆粒性抗原顆粒性抗原抗體抗體 凝集反應(yīng)凝集反應(yīng)ABO血型-以原定型l分型血清：抗分型血清：抗A血清、抗血清、抗B血清血清l采血針、酒精、棉簽、牙簽采血針、酒精、棉簽、牙簽l生理鹽水生理鹽水l載玻片載玻片l記錄并判斷結(jié)果記錄并判斷結(jié)果:三、三、Rh血型系統(tǒng)血型系統(tǒng) 人類紅細(xì)胞含有一種與恒河猴 Rhesus macacus的紅細(xì)胞相同的凝集

2、原稱為Rh 因子含Rh因子(8種，主要是D抗原)Rh陽性不含Rh因子Rh陰性Rh血型的臨床意義血型的臨床意義輸血溶血新生兒溶血分娩后分娩后72h內(nèi)進(jìn)內(nèi)進(jìn)行行Rh抗體被動(dòng)抗體被動(dòng)免疫免疫胎兒紅細(xì)胎兒紅細(xì)胞進(jìn)入母胞進(jìn)入母體即被破體即被破壞壞 （不能（不能誘導(dǎo)母親誘導(dǎo)母親抗抗Rh免疫免疫反應(yīng)）反應(yīng)）Rh+Rh初孕 健康新生兒 健康新生兒Rh再孕Rh+新生兒溶血的預(yù)防血紅蛋白含量測(cè)定的基本原理 l血紅蛋白是紅細(xì)胞的主要成分，包括珠蛋白和亞鐵血紅素。血紅蛋白除能與氧結(jié)合形成氧合血紅蛋白外，尚能與某些物質(zhì)作用形成多種血紅蛋白衍生物。它們具有特定的色澤和吸光譜，在臨床上，可用以診斷某些變性血紅蛋白血癥和血紅

3、蛋白的定量測(cè)定。l測(cè)定血紅蛋白含量的方法很多，實(shí)驗(yàn)常用比色法比色法。其原理是在一定量的血液中，血紅蛋白經(jīng)少量鹽酸的作用，使亞鐵血紅素變成高鐵血紅素，呈現(xiàn)較穩(wěn)定的棕色。用水稀釋后與標(biāo)準(zhǔn)色比較，求出每100ml血液中所含的血紅蛋白克數(shù)。正常成年男子每100ml血液平均含14.4g，女子為13.1g。 實(shí)驗(yàn)器材 血紅蛋白計(jì)、0.1 mol/L HCl、刺血針、濾紙片、酒精棉球、干棉球、蒸餾水。 方法與步驟 血紅蛋白計(jì)包括 標(biāo)準(zhǔn)比色架，架的兩側(cè)鑲有兩個(gè)棕色標(biāo)準(zhǔn)玻璃色柱。 血紅蛋白稀釋管，有方形也有圓形的。兩側(cè)有刻度，一側(cè)以g為計(jì)數(shù)單位，對(duì)側(cè)以百分率計(jì)，按我國(guó)情況，是以每100ml血液內(nèi)含血紅蛋白14.

4、5g為100%。20mm3血紅蛋白吸管，還有玻璃棒、滴管。用滴管加0.1mol/LHCl于血紅蛋白稀釋管內(nèi)，到刻度百分比刻度20處。用刺血針刺破指尖采血，血滴宜大些。用血紅蛋白吸管的尖端接觸血滴，吸血至刻度20 mm3處（0.02ml）。方法與步驟用濾紙片或棉球擦凈吸管口周圍的血液，將吸管插入血紅蛋白稀釋管的鹽酸內(nèi)，輕輕吹出血液至管底部，反復(fù)吸入并吹出稀釋管內(nèi)上層的鹽酸，洗滌吸管多次，使吸管內(nèi)的血液完全洗入稀釋管內(nèi)。搖勻或用小玻璃棒攪勻后，放置10 min，使鹽酸與血紅蛋白充分作用。把稀釋管插入標(biāo)準(zhǔn)比色架兩色柱中央的空格中，使無刻度的兩側(cè)面位于空格的前后方，便于透光和比色。用滴管向稀釋管內(nèi)逐滴加入蒸餾水（每加一滴要攪拌），邊滴邊觀察顏色，直至顏色與標(biāo)準(zhǔn)玻璃色柱相同為止。稀釋管上液面的刻度讀數(shù)即為每100 ml血液血紅蛋白的克數(shù)。注意事項(xiàng)吹血液入