1第33講高效作業(yè)知能提升

1、 高效作業(yè)知能提升1. （2020臨沂高三模擬）取9個(gè)潔凈培養(yǎng)皿，均分為三組 （I、n、川），各組分別加入 等量的不同培養(yǎng)基，每個(gè)平板均接種 0.1 mL大腸桿菌菌液，37 C培養(yǎng)36小時(shí)后，統(tǒng)計(jì)菌 落數(shù)（見(jiàn)表），以下相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）組別培養(yǎng)基各平板的菌落數(shù)123I瓊脂、C6H12O6、NH4NO3303127n瓊脂、C6H12O6、NH4NO3、維生素169178193出瓊脂、NH4NO3、維生素001A .1組和n組說(shuō)明維生素可以促進(jìn)大腸桿菌生長(zhǎng)繁殖 b .n組和川組說(shuō)明大腸桿菌正常生長(zhǎng)需要葡萄糖 c.三組實(shí)驗(yàn)均采用了稀釋涂布平板法，以便菌落計(jì)數(shù)D .三組實(shí)驗(yàn)所使用的培養(yǎng)基均需62 C

2、、30 min滅菌解析：選D。I組和n組培養(yǎng)基成分的差異是有無(wú)維生素，結(jié)果可以說(shuō)明維生素可以 促進(jìn)大腸桿菌的生長(zhǎng)繁殖，a正確；n組和川組的差異是有無(wú)葡萄糖，結(jié)果說(shuō)明，沒(méi)有葡萄糖大腸桿菌不能正常生長(zhǎng)，B正確；采用稀釋涂布平板法接種大腸桿菌便于菌落計(jì)數(shù) ，c正確； 對(duì)培養(yǎng)基加熱到62 C不能徹底滅菌，應(yīng)采用高壓蒸汽滅菌法滅菌，D錯(cuò)誤。2. （2020 東濰坊調(diào)研）下列有關(guān)使用高壓蒸汽滅菌鍋的操作，錯(cuò)誤的是（）A .加水時(shí)，水面應(yīng)與三角擱架平齊B 加蓋時(shí)，將排氣軟管插入內(nèi)層滅菌桶的排氣槽內(nèi)C.加熱時(shí)，待冷空氣完全排盡后關(guān)上排氣閥D 切斷電源后，打開(kāi)排氣閥使壓力表降到零后開(kāi)蓋解析：選D。在使用高壓蒸汽

3、滅菌鍋滅菌時(shí) ，加水時(shí)，水面應(yīng)與三角擱架平齊，A正確；加蓋時(shí)，應(yīng)該將排氣軟管插入內(nèi)層滅菌桶的排氣槽內(nèi)，B正確；加熱時(shí)，應(yīng)該等冷空氣完全排盡后再關(guān)上排氣閥，C正確；切斷電源后，應(yīng)該等壓力表降到零后再打開(kāi)排氣閥并開(kāi)蓋，D錯(cuò)誤。3下列關(guān)于“檢測(cè)土壤中細(xì)菌總數(shù)”實(shí)驗(yàn)操作的敘述，錯(cuò)誤的是（）A 用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板B .取104、105、106倍的土壤稀釋液和無(wú)菌水各0.1 mL,分別涂布于各組平板上C.將實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組平板倒置，37 C恒溫培養(yǎng)2448小時(shí)D 確定對(duì)照組無(wú)菌后，選擇菌落數(shù)在300以上的實(shí)驗(yàn)組平板進(jìn)行計(jì)數(shù)解析：選D。首先要進(jìn)行培養(yǎng)基的制備 ，用蒸餾水配

4、制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，經(jīng)高溫、 高壓滅菌后倒平板，A正確；取104、105、106倍的土壤稀釋液和無(wú)菌水各 0.1 mL，分別涂布于各組平板上，B正確；將實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組平板倒置，37 C恒溫培養(yǎng)2448小時(shí)，C正確；確定對(duì)照組無(wú)菌后，選擇菌落數(shù)在30300的實(shí)驗(yàn)組平板進(jìn)行計(jì)數(shù) ，求其平均值，再通 過(guò)計(jì)算得出土壤中細(xì)菌總數(shù)，D錯(cuò)誤。4. （2020四川攀枝花期末）下列有關(guān)微生物的培養(yǎng)或純化的敘述，錯(cuò)誤的是（）A .分離自養(yǎng)型微生物時(shí)，培養(yǎng)基中加入的瓊脂可作用碳源B 培養(yǎng)液中溶氧量的變化會(huì)影響酵母菌的繁殖和代謝途徑C.在培養(yǎng)微生物前要先對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌處理再接種D .菌種可接種在斜面固體培養(yǎng)基上，

5、培養(yǎng)后放在4C冰箱中臨時(shí)保藏解析：選A。本題主要考查微生物的培養(yǎng)和純化。自養(yǎng)型微生物能利用無(wú)機(jī)碳源，故分離的時(shí)候，培養(yǎng)基中應(yīng)不加入有機(jī)碳源，而瓊脂作為凝固劑，A錯(cuò)誤；酵母菌是兼性厭氧菌，所以培養(yǎng)液中溶氧量的變化會(huì)影響酵母菌的繁殖和代謝的途徑，B正確；在培養(yǎng)微生物前要先對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌處理再接種，防止雜菌污染，C正確；菌種可接種在斜面固體培養(yǎng)基上，培養(yǎng)后放在4 C冰箱中臨時(shí)保藏，D正確。5. （不定項(xiàng)）（2020濟(jì)南高三模擬）下圖所示的裝置可用于生物技術(shù)實(shí)踐的相關(guān)實(shí)驗(yàn)，下列有關(guān)敘述正確的是（）充g廣0撐氣1出料r - Jti屈P乙A 乙裝置可先用于果酒的制作，后用于果醋的制作B 利用裝置甲制作泡

6、菜時(shí)，應(yīng)按照清水與鹽的質(zhì)量比為4 ： 1的比例配制鹽水C.用裝置乙制作果酒時(shí)溫度應(yīng)控制在30 C左右，制作果醋時(shí)應(yīng)適當(dāng)降溫D 裝置乙的排氣口通過(guò)一個(gè)長(zhǎng)而彎曲的膠管，可防止空氣中微生物的污染解析：選ABD。乙裝置可先用于果酒的制作 ，后用于果醋的制作，先密封后通入空氣，A正確；利用裝置甲制作泡菜時(shí) ，應(yīng)按照清水與鹽的質(zhì)量比為4 : 1的比例配制鹽水，B正確；用裝置乙制作果酒時(shí)溫度應(yīng)控制在1825 C,制作果醋時(shí)溫度為 3035 C,制作果醋時(shí)應(yīng)適當(dāng)升溫，C錯(cuò)誤；裝置乙的排氣口通過(guò)一個(gè)長(zhǎng)而彎曲的膠管，排出果酒制備時(shí)產(chǎn)生的二氧化碳，而且能防止空氣中微生物的污染，D正確。6. （2020福建寧德一模）

7、乳酸菌是對(duì)人體有益的微生物之一，常用于生產(chǎn)酸奶，其發(fā)酵 產(chǎn)物為乳酸，能溶解周圍環(huán)境中的難溶性碳酸鈣。回答下列問(wèn)題：（1）為檢測(cè)某品牌酸奶中的乳酸菌含量是否達(dá)標(biāo)，檢驗(yàn)人員進(jìn)行了相關(guān)實(shí)驗(yàn)。配制培養(yǎng)基：培養(yǎng)基中除含水、無(wú)機(jī)鹽、碳源、氮源和瓊脂外，還需添加維生素和 稀釋樣品：取1 mL待測(cè)酸奶，用 進(jìn)行梯度稀釋。 接種培養(yǎng)：用 法接種，培養(yǎng)時(shí)控制的氣體條件是 。 觀察計(jì)數(shù)：菌落周圍出現(xiàn) 的就是乳酸菌的菌落，選擇菌落數(shù)在 的平板計(jì)數(shù)。每隔24小時(shí)統(tǒng)計(jì)一次菌落數(shù)目，選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的記錄作為結(jié)果，目的生產(chǎn)上不能用含有抗生素的牛奶發(fā)酵成酸奶，原因是 。解析：（1）乳酸菌的發(fā)酵產(chǎn)物乳酸 ，能溶解周圍環(huán)境中的

8、難溶性碳酸鈣，因此配制培養(yǎng)乳酸菌的培養(yǎng)基除加入水、無(wú)機(jī)鹽、碳源、氮源和瓊脂外，還需添加維生素和 CaCO3。計(jì)數(shù)乳酸菌前，需用無(wú)菌水將待測(cè)酸奶稀釋至合適濃度。計(jì)數(shù)乳酸菌需用稀釋涂布平板法接種，孚L酸菌是厭氧菌，培養(yǎng)時(shí)控制的氣體條件是無(wú)氧。乳酸能溶解周圍環(huán)境中的難溶性碳酸鈣，不透明的培養(yǎng)基上出現(xiàn)透明（溶鈣）圈的就是乳酸菌的菌落。 細(xì)菌計(jì)數(shù)時(shí)，常選擇菌落數(shù)在30300的平板計(jì)數(shù)。每隔24小時(shí)統(tǒng)計(jì)一次菌落數(shù)目，選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的記錄作為結(jié)果，目的是可以防止因培養(yǎng)時(shí)間不足而導(dǎo)致遺漏菌落的數(shù)目。（2）生產(chǎn)上不能用含有抗生素的牛奶發(fā)酵成酸奶 ，因?yàn)榭股貢?huì)抑制乳酸菌的繁殖。答案：（1）CaCO3無(wú)菌水稀

9、釋涂布平板無(wú)氧透明圈（或溶鈣圈）30300 可以防止因培養(yǎng)時(shí)間不足而導(dǎo)致遺漏菌落的數(shù)目抗生素會(huì)抑制乳酸菌（或細(xì)菌）的繁殖7酸奶的保質(zhì)期一般在 10天左右，其中乳酸活菌數(shù)的含量是衡量酸奶營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的一個(gè)重要指標(biāo)。某興趣小組擬探究溫度對(duì)酸奶中乳酸菌含量的影響，測(cè)得結(jié)果如下圖所示， 回答10Jtgio5S$ b Ti fl246A 1012（1）分離純化乳酸菌的培養(yǎng)基中含蛋白胨，蛋白胨提供的主要營(yíng)養(yǎng)有培養(yǎng)基滅菌常采用 法。(2) 培養(yǎng)乳酸菌一段時(shí)間后，培養(yǎng)基中的pH會(huì)下降，原因是 。(3) 通過(guò)稀釋涂布平板法測(cè)得的乳酸菌的菌落數(shù)比活菌實(shí)際數(shù)目低的原因是。(4) 根據(jù)結(jié)果推測(cè)乳酸菌更適合貯藏在溫度為 的

10、環(huán)境，依據(jù)是。解析：(1)培養(yǎng)基中蛋白胨的作用是為微生物提供碳源、氮源和維生素等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。對(duì)培養(yǎng)基的滅菌常采用高壓蒸汽滅菌法。(2)培養(yǎng)過(guò)程中乳酸菌可將葡萄糖分解成乳酸，乳酸積累會(huì)引起培養(yǎng)基的 pH下降。(3)由于兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，在培養(yǎng)基上只能形成一個(gè)菌落，所以通過(guò)稀釋涂布平板法測(cè)定的菌落數(shù)比活菌實(shí)際數(shù)目低。(4)由題圖曲線可知乳酸菌在7 C時(shí)比較適合貯藏，因?yàn)樵诖藴囟认?，乳酸?0天內(nèi)始終保持一定的活菌數(shù)。答案：碳源、氮源和維生素高壓蒸汽滅菌孚L酸菌通過(guò)無(wú)氧呼吸產(chǎn)生的乳酸進(jìn)入培養(yǎng)基中(3)當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落(4)7 C 在此溫度下，乳酸菌 10

11、d內(nèi)始終保持一定的活菌數(shù)& (2020湖南長(zhǎng)沙瀏陽(yáng)四中模擬)高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)中有很大的實(shí)用性。研 究者從熱泉中篩選出了能高效生產(chǎn)高溫淀粉酶的嗜熱菌，其篩選過(guò)程如下圖所示?；卮鹣铝袉?wèn)題：&$ 匚i：念:0(D“桃岀林、1呂塘養(yǎng)甚 0號(hào)坤養(yǎng)蘇(1) I號(hào)培養(yǎng)基從物理狀態(tài)來(lái)看，屬于固體培養(yǎng)基，配制時(shí)要加入 作為凝固劑,從用途來(lái)看屬于選擇培養(yǎng)基，應(yīng)以 作為唯一碳源。配制固體培養(yǎng)基的基本步驟是 。A 計(jì)算、稱量、倒平板、溶化、滅菌B 計(jì)算、稱量、溶化、倒平板、滅菌C.計(jì)算、稱量、溶化、滅菌、倒平板D 計(jì)算、稱量、滅菌、溶化、倒平板(3) 溶化時(shí)，燒杯中加入瓊脂后要不停地 ，防止瓊脂糊底引起燒杯

12、破裂。對(duì)培養(yǎng)基滅菌的方法一般為 。(4) 過(guò)程是 ，過(guò)程所使用的接種方法是 法。(5) 部分嗜熱菌在I號(hào)培養(yǎng)基上生長(zhǎng)時(shí)可釋放 分解培養(yǎng)基中的淀粉，在菌落周圍形成透明圈，挑選相應(yīng)的菌落，接種到n號(hào)培養(yǎng)基上進(jìn)一步分離純化后，再對(duì)菌種進(jìn)行 培養(yǎng)。解析：(1)固體培養(yǎng)基通常加入瓊脂作為凝固劑。本實(shí)驗(yàn)的目的是獲得產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌 ，故其選擇培養(yǎng)基中應(yīng)以淀粉作為唯一碳源。 (2)配制固體培養(yǎng)基的基本步驟是計(jì) 算、稱量、溶化、滅菌、倒平板。 (3) 配制培養(yǎng)基加熱溶化時(shí) ，燒杯中加入瓊脂后要不斷攪拌，防止瓊脂糊底引起燒杯破裂。對(duì)培養(yǎng)基的滅菌一般采用高壓蒸汽滅菌法。( 4)仔細(xì)觀察題圖可知 ，過(guò)程 是菌

13、液稀釋 ，過(guò)程 是采用稀釋涂布平板法接種。(5)能產(chǎn)生淀粉酶的部分細(xì)菌能分解利用淀粉 ，其菌落周圍會(huì)出現(xiàn)透明圈， 取這樣的菌落再分離純化可獲得相應(yīng)菌 種，以后可以擴(kuò)大培養(yǎng)用于生產(chǎn)。答案： (1)瓊脂 淀粉 (2)C (3)攪拌 高壓蒸汽滅菌法(4) 稀釋 稀釋涂布平板 (5)淀粉酶 擴(kuò)大9. (2019高考全國(guó)卷I )已知一種有機(jī)物 X(僅含有C、H兩種元素)不易降解，會(huì)造成環(huán) 境污染。某小組用三種培養(yǎng)基篩選土壤中能高效降解 X 的細(xì)菌 (目標(biāo)菌 )。I號(hào)培養(yǎng)基：在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中加入X(5 g/L)。n號(hào)培養(yǎng)基：氯化鈉(5 g/L)，硝酸銨(3 g/L)，其他無(wú)機(jī)鹽(適量),X(15 g

14、/L)。川號(hào)培養(yǎng)基：氯化鈉(5 g/L)，硝酸銨(3 g/L)，其他無(wú)機(jī)鹽(適量),X(45 g/L)?；卮鹣铝袉?wèn)題。(1) 在I 號(hào)培養(yǎng)基 中，為微生物提供氮源的是 n、川號(hào)培養(yǎng)基中為微生物提供碳源的有機(jī)物是 。若將土壤懸浮液接種在n號(hào)液體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)一段時(shí)間后，不能降解X的細(xì)菌比例會(huì)，其原因是 。(3) n號(hào)培養(yǎng)基加入瓊脂后可以制成固體培養(yǎng)基，若要以該固體培養(yǎng)基培養(yǎng)目標(biāo)菌并對(duì)菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)，接種時(shí)，應(yīng)采用的方法是 。(4) 假設(shè)從川號(hào)培養(yǎng)基中得到了能高效降解X的細(xì)菌，且該菌能將 X代謝為丙酮酸，則在有氧條件下，丙酮酸可為該菌的生長(zhǎng)提供 和 。解析：(1)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中，牛肉膏、蛋白胨

15、為微生物提供了氮源，而n號(hào)、川號(hào)培養(yǎng)基 中除 X 外的其他物質(zhì)均不含碳 ，所以能為微生物提供碳源的有機(jī)物是 X。 (2)因?yàn)?n號(hào)培養(yǎng)基中的碳源只有 X,相當(dāng)于選擇培養(yǎng)基，只有能降解 X的細(xì)菌才能增殖，而不能 降解 X 的細(xì)菌因缺乏碳源不能增殖。(3)要對(duì)菌落進(jìn)行計(jì)數(shù) ，應(yīng)采用稀釋涂布平板法進(jìn)行接種。 (4)在有氧條件下 ，丙酮酸參與細(xì)菌的有氧呼吸，可以為該菌的生長(zhǎng)提供能量和合成其 他物質(zhì)的原料。答案： (1)牛肉膏、蛋白胨 X(2) 下降不能降解X的細(xì)菌因缺乏碳源不能增殖，而能降解X的細(xì)菌能夠增殖( 3 )稀釋涂布平板法(4)能量 合成其他物質(zhì)的原料10. 果醋發(fā)酵菌種為醋酸菌，測(cè)定發(fā)酵液中

16、醋酸菌的數(shù)目有利于控制發(fā)酵進(jìn)程。下表是四個(gè)生物興趣小組測(cè)定醋酸菌數(shù)目的統(tǒng)計(jì)結(jié)果，分析回答下列問(wèn)題：組別平板個(gè)數(shù)菌落數(shù)*1240-二二3230、 250、 240三3210、 520、 250四4280、 31、 270、 290(1) 四個(gè)小組中，最合理的是第 組，理由是。(2) 分析第三組統(tǒng)計(jì)的結(jié)果， 可能出現(xiàn)的原因有 (答出兩條即可)。若進(jìn)一步分析原因，可以通過(guò)觀察 作出判斷。分析第四組統(tǒng)計(jì)的結(jié)果，出現(xiàn)這種結(jié)果可能的原因有 。解析：(1)微生物計(jì)數(shù)時(shí)，一定要涂布至少三個(gè)平板作為重復(fù)組，且每個(gè)平板上的菌落數(shù)應(yīng)為30300個(gè)。(2) 第三組統(tǒng)計(jì)的結(jié)果中，有一個(gè)平板上的菌落數(shù)過(guò)多，可能的原因：培

17、養(yǎng)基被雜菌污染、涂布用的菌液稀釋倍數(shù)錯(cuò)誤、接種過(guò)程被雜菌污染。若要進(jìn)一步分析原因，可通過(guò)觀察菌落的特征作出判斷，若菌落一致， 則可能是菌落稀釋倍數(shù)錯(cuò)誤， 若出現(xiàn)多種菌落，則可能 被雜菌污染。(3) 第四組統(tǒng)計(jì)的結(jié)果中，有一個(gè)平板上的菌落數(shù)過(guò)少，可能的原因：涂布用的菌液稀 釋倍數(shù)錯(cuò)誤、涂布平板時(shí)涂布器溫度過(guò)高，殺死菌種。答案：(1)二 在微生物計(jì)數(shù)時(shí)，一定要涂布至少三個(gè)平板作為重復(fù)組，且每個(gè)平板上 的菌落數(shù)應(yīng)為30300個(gè)(2) 培養(yǎng)基被雜菌污染、涂布用的菌液稀釋倍數(shù)錯(cuò)誤、接種過(guò)程被雜菌污染菌落特征(3) 涂布用的菌液稀釋倍數(shù)錯(cuò)誤；涂布平板時(shí)涂布器溫度過(guò)高，殺死菌種11. 家庭泡菜的制作過(guò)程：新

18、鮮的蔬菜經(jīng)過(guò)整理、清潔后，放入泡菜壇中，然后向壇中加入鹽水、香辛料及一些“陳泡菜水”，密封后置于溫度適宜的地方。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：(1) 加入蔬菜前要對(duì)泡菜壇進(jìn)行 。(2) 在家制作泡菜時(shí)，常發(fā)現(xiàn)泡菜壇內(nèi)長(zhǎng)一層白膜，這層白膜是形成的。為避免雜菌污染，向泡菜壇中加入了青霉素，結(jié)果發(fā)酵失敗，原因可能是 。(3) 有時(shí)制作的泡菜會(huì)“咸而不酸”，最可能的原因是 。(4) 對(duì)亞硝酸鹽含量測(cè)定的原理是在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸的反應(yīng)產(chǎn)物能與 偶聯(lián)成色化合物。測(cè)定亞硝酸鹽含量的操作流程是配制溶液T制備T制備樣品處理液T比色，其中，使濾液變得無(wú)色、澄清透明的是 。解析： (1)加入蔬菜前要對(duì)泡菜壇進(jìn)行徹底清洗并用白酒擦拭。(2)在家制作泡菜時(shí) ，常發(fā)現(xiàn)泡菜壇內(nèi)長(zhǎng)一層白膜， 這層白膜是產(chǎn)膜酵母繁殖形成的。 為避免雜菌污染， 向泡菜壇中 加入了青霉 素，結(jié)果發(fā)酵失敗，原因可能是