大孔吸附樹脂法PPT課件

1、大孔吸附樹脂法 Fractionation Merhods of Natural Drugs 天然藥物分離方法天然藥物分離方法 （2） 大孔樹脂吸附法大孔樹脂吸附法 大孔吸附樹脂法 概概 述述 中藥有效成分的不斷闡明中藥有效成分的不斷闡明 中藥現(xiàn)代化的要求中藥現(xiàn)代化的要求 當前用于中藥純化的主要技術：當前用于中藥純化的主要技術： 溶劑法：溶劑法： 沉淀法：沉淀法： 色譜法：大孔吸附樹脂、離子交換樹脂、色譜法：大孔吸附樹脂、離子交換樹脂、 聚酰聚酰 胺、葡聚糖凝膠等胺、葡聚糖凝膠等 超臨界流體萃取法：超臨界流體萃取法： 超濾法：超濾法： 結晶法：結晶法： 大孔吸附樹脂法 一、樹脂簡介一、樹脂簡介

2、 1、常用樹脂的類型、常用樹脂的類型 凝膠樹脂凝膠樹脂 大孔樹脂大孔樹脂 離子交換樹脂離子交換樹脂 大孔吸附樹脂法 2、離子交換樹脂、離子交換樹脂 CHCH2 SO3H CHCH2 SO3H CHCH2 mn CHCH2CHCH2CHCH2 SO3H CH SO3H SO3H CH2CH2CHCH SO3HSO3H 大孔吸附樹脂法 離子交換樹脂的種類離子交換樹脂的種類 種種 類類 活活 性性 基基 團團 1 強酸性強酸性 磺酸基磺酸基(SO3H) 2 弱酸性弱酸性 磷酸基磷酸基(PO3H2)、羧酸基、羧酸基(COOH) 3 強堿性強堿性 型：三甲基胺型：三甲基胺(-N+(CH3)3) 型：二甲

3、基乙醇胺型：二甲基乙醇胺(N+(CH3)2C2H4OH 4 弱堿性弱堿性 伯氨基伯氨基(-NH2)、仲氨基、仲氨基(-NHR)、叔氨基、叔氨基(-NR2) 5 兩性兩性 強堿弱酸強堿弱酸 弱堿弱酸弱堿弱酸 大孔吸附樹脂法 3、大孔吸附樹脂、大孔吸附樹脂 CHCH2CHCH2 CHCH2 mn CHCH2CHCH2CHCH2 CHCH2CH2CHCH 大孔吸附樹脂法 目前國產(chǎn)樹脂的主要類型目前國產(chǎn)樹脂的主要類型 致孔劑：甲苯、石蠟、溶劑汽油、煤油、碳醇、聚乙烯醇等致孔劑：甲苯、石蠟、溶劑汽油、煤油、碳醇、聚乙烯醇等 CH CH2 CO CN 或或 C C OCH3 CH2 CH3 O 聚聚合合

4、CHCH2 CHCH2 CHCH2 弱弱極極性性和和 極極性性樹樹脂脂 聚聚合合 CHCH2 CHCH2 CHCH2 非非極極性性樹樹脂脂 大孔吸附樹脂法 國產(chǎn)大孔吸附樹脂的主要型號、性能、生產(chǎn)企業(yè)國產(chǎn)大孔吸附樹脂的主要型號、性能、生產(chǎn)企業(yè) 型號型號 性能性能 生產(chǎn)企業(yè)生產(chǎn)企業(yè) D-101 非極性非極性 天津晶瑩提取樹脂有限責任公司天津晶瑩提取樹脂有限責任公司 D-201 弱極性弱極性 天津晶瑩提取樹脂有限責任公司天津晶瑩提取樹脂有限責任公司 D-301 極性極性 天津晶瑩提取樹脂有限責任公司天津晶瑩提取樹脂有限責任公司 HPD-100 非極性非極性 河北滄州寶恩化工有限公司河北滄州寶恩化工有

5、限公司 HPD-300 弱極性弱極性 河北滄州寶恩化工有限公司河北滄州寶恩化工有限公司 HPD-600 極性極性 河北滄州寶恩化工有限公司河北滄州寶恩化工有限公司 X-5 非極性非極性 南開大學化工廠南開大學化工廠 AB-8 弱極性弱極性 南開大學化工廠南開大學化工廠 NKA-9 極性極性 南開大學化工廠南開大學化工廠 大孔吸附樹脂法 三菱化學的大孔吸附樹脂三菱化學的大孔吸附樹脂 聚苯乙烯系列合成樹脂：聚苯乙烯系列合成樹脂： Diaion: HP20, HP21 Sepabeads: SP825, SP850 Sepabeads: SP70, SP700 修飾的聚苯乙烯系列合成樹脂修飾的聚苯乙

6、烯系列合成樹脂: Sepabeads: SP207 異丁烯系列合成樹脂異丁烯系列合成樹脂: Diaion: HP2MG BrBr BrBr Br Br C H3 C C O C H3 O O O C H3 C H3 CO O C H3 C H2 C H2 O CO C H3 C H3 CO O C H3 CO O C H3 C H3 大孔吸附樹脂法 大孔吸附樹脂的主要理化性質大孔吸附樹脂的主要理化性質 顏色：白色、乳白色至微黃顏色：白色、乳白色至微黃 物理化學性質穩(wěn)定，不溶于任何酸、物理化學性質穩(wěn)定，不溶于任何酸、 堿及有機溶劑，加熱不溶，可在堿及有機溶劑，加熱不溶，可在 150以下使用以下使

7、用 含水量：含水量：6080 堆積密度：堆積密度：0.60.9 大孔吸附樹脂法 影響樹脂性能的主要因素及國產(chǎn)樹脂存在的主影響樹脂性能的主要因素及國產(chǎn)樹脂存在的主 要問題要問題 交聯(lián)度交聯(lián)度 比表面積比表面積 吸附容量吸附容量 粒度分布粒度分布 強度強度 大孔吸附樹脂法 二、大孔吸附樹脂的預處理二、大孔吸附樹脂的預處理 大孔吸附樹脂法 1、樹脂預處理的方法、樹脂預處理的方法 回流提取法回流提取法 滲漉法滲漉法 水蒸氣蒸餾法水蒸氣蒸餾法 2、樹脂預處理的溶劑、樹脂預處理的溶劑 乙醇乙醇 丙酮丙酮 異丙醇異丙醇 25鹽酸鹽酸 25氫氧化鈉氫氧化鈉 大孔吸附樹脂法 3、滲漉法純化樹脂、滲漉法純化樹脂

8、色譜柱：不銹鋼柱；徑高比為色譜柱：不銹鋼柱；徑高比為1:31:7 裝柱：濕法裝柱裝柱：濕法裝柱 洗脫溶劑：洗脫溶劑： 乙醇乙醇25鹽酸鹽酸25NaOH 水水 甲醇甲醇25鹽酸鹽酸25NaOH 水水 混合溶劑混合溶劑25鹽酸鹽酸25NaOH 水水 洗脫方法：洗脫方法： 乙醇法：乙醇浸泡乙醇法：乙醇浸泡12h 2BV洗脫洗脫浸泡浸泡35h 2BV洗脫洗脫浸泡浸泡35h 35BV洗脫洗脫浸泡浸泡3 5h 35BV洗脫洗脫23BV鹽酸浸泡鹽酸浸泡24h 洗脫洗脫 水洗脫水洗脫23BV NaOH浸泡浸泡24h 洗脫洗脫水水 洗脫洗脫 OOOOOO OOOOOO OOOOOO OOOOOO OOOOOO

9、OOOOOO OOOOOO OOOOOO OOOOOO OOOOOO OOOOOO 大孔吸附樹脂法 混合溶劑法：混合溶劑法：混合溶劑浸泡混合溶劑浸泡12h 2BV洗脫洗脫浸浸 泡泡35h 2BV洗脫洗脫浸泡浸泡35h 35BV洗脫洗脫 23BV鹽酸浸泡鹽酸浸泡24h 洗脫洗脫水洗脫水洗脫2 3BV NaOH浸泡浸泡24h 洗脫洗脫水洗脫水洗脫 新方法：新方法：乙醇浸泡乙醇浸泡35h 35BV乙醇洗脫乙醇洗脫 23BV鹽酸浸泡鹽酸浸泡24h 洗脫洗脫水洗脫水洗脫2 3BV NaOH浸泡浸泡24h 洗脫洗脫水洗脫水洗脫 大孔吸附樹脂法 三、大孔吸附樹脂的再生三、大孔吸附樹脂的再生 再生溶劑的選擇再

10、生溶劑的選擇 乙醇：乙醇：5095 甲醇：甲醇：50100 異丙醇：異丙醇： 丙酮：丙酮：50100 堿性乙醇溶液：堿性乙醇溶液： 25鹽酸：鹽酸： 25NaOH： 洗脫方法洗脫方法 正洗脫：正洗脫： 逆流洗脫：逆流洗脫： 大孔吸附樹脂法 四、大孔吸附樹脂在新藥研究中四、大孔吸附樹脂在新藥研究中 的應用的應用 大孔吸附樹脂法 1、適用的新藥類型、適用的新藥類型 中藥有效成分的粗分和精制中藥有效成分的粗分和精制 單味中藥有效部位的制備單味中藥有效部位的制備 中藥復方有效部位的制備中藥復方有效部位的制備 注意：注意： 性質相似成分可混煎后一起制備性質相似成分可混煎后一起制備 各味藥所含成分性質差別

11、較大的復方應單各味藥所含成分性質差別較大的復方應單 獨提取后，再制備獨提取后，再制備 單味藥有效成分性質差別較大的應分別制單味藥有效成分性質差別較大的應分別制 備備 大孔吸附樹脂法 2、成分的類型與樹脂的選擇、成分的類型與樹脂的選擇 脂溶性成分包括甾體類、二萜、三萜、黃酮、木脂素、香豆素、脂溶性成分包括甾體類、二萜、三萜、黃酮、木脂素、香豆素、 生物堿等：生物堿等：應選擇非極性或弱極性的樹脂，如應選擇非極性或弱極性的樹脂，如D101、AB-8、 HPD100等等 皂苷和生物堿苷類成分：皂苷和生物堿苷類成分：應選擇弱極性或極性樹脂，如應選擇弱極性或極性樹脂，如D201、 D301、HPD300、

12、HPD600、AB-8、NKA-9等等 黃酮苷、蒽醌苷、木脂素苷、香豆素苷等黃酮苷、蒽醌苷、木脂素苷、香豆素苷等：應選擇合成原料中應選擇合成原料中 加有甲基丙烯酸甲酯或丙烯氰的樹脂，如加有甲基丙烯酸甲酯或丙烯氰的樹脂，如D201、D301、 HPD600、NKA-9等等 環(huán)烯醚萜苷類成分：環(huán)烯醚萜苷類成分：應選擇極性樹脂，如應選擇極性樹脂，如D301、HPD600、 NKA-9等等 大孔吸附樹脂法 3、樹脂用于新藥研究應考察的內(nèi)容、樹脂用于新藥研究應考察的內(nèi)容 (1)樹脂型號的選擇樹脂型號的選擇 比吸附值考察比吸附值考察 分離性能考察分離性能考察 (2)藥材樹脂比例的考察藥材樹脂比例的考察 (

13、3)色譜柱的徑高比考察色譜柱的徑高比考察 (4)洗脫溶劑的考察洗脫溶劑的考察 (5)吸附流速和洗脫流速考察吸附流速和洗脫流速考察 (6)收集洗脫液量考察收集洗脫液量考察 (7)樹脂的使用壽命考察樹脂的使用壽命考察 (8)工藝放大試驗工藝放大試驗 大孔吸附樹脂法 4、樹脂分離條件的正交試驗、樹脂分離條件的正交試驗 表頭的設計表頭的設計 因素因素 藥材樹脂藥材樹脂 色譜柱色譜柱 洗脫流速洗脫流速 收集洗脫收集洗脫 水平水平 比例比例 徑高比徑高比 BV/h 液量液量 1 1:1 1:3 1 3 2 1:2 1:5 2 5 3 1:3 1:7 3 7 大孔吸附樹脂法 實例一：某中藥中苯乙醇苷類成分的

14、分實例一：某中藥中苯乙醇苷類成分的分 離、精制離、精制 該中藥所含的成分：苯乙醇苷類、環(huán)烯醚該中藥所含的成分：苯乙醇苷類、環(huán)烯醚 萜及其苷類、木脂素及其苷類、多元醇、萜及其苷類、木脂素及其苷類、多元醇、 水溶性生物堿、單糖、雙糖、氨基酸等水溶性生物堿、單糖、雙糖、氨基酸等 大孔吸附樹脂法 1、樹脂型號的考察、樹脂型號的考察 大孔吸附樹脂法 2、樹脂用量和吸附次數(shù)的考察、樹脂用量和吸附次數(shù)的考察 大孔吸附樹脂法 3、洗脫液乙醇濃度的考察、洗脫液乙醇濃度的考察 乙醇濃度乙醇濃度 20 40 60 80 洗脫量洗脫量 9倍倍 5倍倍 4倍倍 3倍倍 檢出雜質檢出雜質 脂溶性脂溶性 脂溶性脂溶性 成分

15、成分 成分成分 大孔吸附樹脂法 4、收集洗脫液量的考察、收集洗脫液量的考察 第第 一一 次次 洗洗 脫脫 第第 二二 次次 洗洗 脫脫 洗脫溶劑洗脫溶劑 水洗脫水洗脫 40乙醇洗脫乙醇洗脫 收集量收集量 4 5 TLC檢測檢測 未檢出糖未檢出糖 難檢出苯乙醇苷難檢出苯乙醇苷 洗脫溶劑洗脫溶劑 水洗脫水洗脫 40乙醇洗脫乙醇洗脫 收集量收集量 3 4 TLC檢測檢測 未檢出糖未檢出糖 難檢出苯乙醇苷難檢出苯乙醇苷 大孔吸附樹脂法 實例二、某中藥中黃酮苷類成分的分離、精制實例二、某中藥中黃酮苷類成分的分離、精制 1、樹脂型號的考察、樹脂型號的考察 大孔吸附樹脂法 表表 6 因素水平表因素水平表 水

16、平水平 A 樣品濃度樣品濃度 （%） B 吸附流速吸附流速 （ml/min） C 洗脫流速洗脫流速 （ml/min） D 柱床徑高比柱床徑高比 1205101：7 25010201：10 310020301：12 3、洗脫條件的正交試驗、洗脫條件的正交試驗 大孔吸附樹脂法 大孔吸附樹脂法 5、成品中有機殘留物的限量檢、成品中有機殘留物的限量檢 查查 檢查方法：檢查方法：氣相色譜法氣相色譜法 檢查成分：檢查成分：應根據(jù)樹脂合成中所接觸的有機成分應根據(jù)樹脂合成中所接觸的有機成分 確定檢查成分確定檢查成分 測定方法：測定方法：頂空進樣或溶劑法頂空進樣或溶劑法 含量限度：含量限度：苯：苯：2ppm；其

17、它：；其它：20ppm 方法學考察：方法學考察： 溶劑的氣相色譜檢測溶劑的氣相色譜檢測 基線噪音和最低檢測限的測定基線噪音和最低檢測限的測定 對照品的測定對照品的測定 供試品的測定供試品的測定 大孔吸附樹脂法 標準的書寫格式標準的書寫格式 色譜條件和系統(tǒng)適用性試驗色譜條件和系統(tǒng)適用性試驗 對照品溶液的制備對照品溶液的制備 供試品溶液的制備供試品溶液的制備 測定法測定法 起草說明起草說明 大孔吸附樹脂法 五、大孔吸附樹脂在中藥及植物五、大孔吸附樹脂在中藥及植物 提取物生產(chǎn)中的應用提取物生產(chǎn)中的應用 大孔吸附樹脂法 1、槐花米中黃酮苷類成分的分離、純化、槐花米中黃酮苷類成分的分離、純化 槐花花穗槐花花穗 9.9kg MeOH提取提取 36L HP20 吸附吸附 MeOH溶解溶解 50-10L+100%-10L LH-20吸附吸附 MeOH溶解溶解 CHP20P吸附吸附 50%EtOH流份流份 ODS層析分離層析分離 45%MeOH洗脫洗脫 3,4,5,7-四羥基黃酮四羥基黃酮- 3-葡萄糖酸苷葡萄糖酸苷 大孔吸附樹脂