酶活性的影響因素課件

1、酶活性的影響因素1 酶活性的影響因素 VaneVane 酶活性的影響因素2 知識背景知識背景 pH、溫度、紫外線、重金屬鹽、抑制劑、激活劑 等通過影響酶的活性來影響酶促反應(yīng)的速率；酶 的濃度、底物的濃度等不會影響酶活性，但可以 影響酶促反應(yīng)的速率。 納氏試劑（Nessler）是指一種利用紅外可見分 光光度法原理用于測定空氣中、水體中氨氮含量 的試劑。 碘離子和汞離子在強(qiáng)堿性條件下，會與氨反應(yīng)生 成紅棕色膠態(tài)化合物，此顏色在波長420nm左右 會有強(qiáng)烈的吸收。而生成的這類紅棕色膠態(tài)化合 物的量會與其溶液的吸收值成正比，可用測試反 應(yīng)液的吸收值而測定氨氮的含量。 酶活性的影響因素3 實驗原理： 尿

2、素在酸、堿、酶作用下（酸、堿需加熱）能水解成氨和 二氧化碳 新鮮大豆中含有較高活性的尿素酶，可以水解尿素生成 NH3 CO(NH2)2 + H2O -2NH3 + CO2 尿素養(yǎng)在尿素酶作用下，在中性或酸性環(huán)境下生成碳酸胺， 在NaOH環(huán)境下生成Na2CO3和NH3、NH3與納氏試劑作 用，生成棕黃色碘化雙汞胺 尿素酶 NaOH CO(NH2)2 + H2O - ( NH4 )2CO3 - NH3 NH3 + 納氏試劑(HgI2.2KI) - NH2.Hg2I3 (棕 黃色) 酶活性的影響因素4 實驗材料： 器材： 控溫水浴鍋（每個實驗室3個），制冰機(jī)， 電磁灶，不銹鋼鍋，白瓷板，試管、滴管、

3、 移液管（1-2ml） 試劑： 蒸餾水，1%淀粉液，1%蔗糖液，0.1%尿素液， 大豆尿素酶溶液，0.1%CuSO4，0.1%HgCl2， 0.1%NaCl，1M NaOH，0.5M H2SO4，納氏 試劑，班氏試劑，各種pH緩沖液：5.0；6.8； 8.0 酶活性的影響因素5 酶活性的影響因素假設(shè)酶活性的影響因素假設(shè) 1、酶的活性受、酶的活性受pH的影響的影響 2、酶的活性受底物特異性的影響、酶的活性受底物特異性的影響 3、酶的活性受溫度的影響、酶的活性受溫度的影響 4、酶的活性受重金屬離子的影響、酶的活性受重金屬離子的影響 酶活性的影響因素6 酶活性的影響因素7 1、酶的活性受、酶的活性受

4、pH的影響的影響 步驟 1、向四支10ml試管，分別標(biāo)號1，2，3，4 2、將1%尿素液3ml分別倒入四支試管中 3、向前三支支試管中分別倒入1ml的pH為5.0， 6.8，8.0的緩沖液，四號試管加入1ml的蒸餾水 4、向四支試管中加入等量的大豆尿素酶溶液五滴， 輕搖后靜置3分鐘 5、向四支試管中加入等量的納氏試劑 2ml，搖勻。 6、觀察并記錄實驗現(xiàn)象 酶活性的影響因素8 實驗記錄 項目底物 （/ml） 加入的 pH和蒸 餾水 （/ml） 納氏試劑 （/ml） 實驗現(xiàn)象 試管1 試管2 試管3 試管4 酶活性的影響因素9 2、酶的活性受底物的特異性的影響、酶的活性受底物的特異性的影響 步驟

5、 1、向四支10ml試管，分別標(biāo)號1，2，3，4 2、向四支試管中分別加入3ml的蒸餾水， 1%淀粉液，1%蔗糖液， 0.1%尿素液 3、向四支試管中加入等量的大豆尿素酶溶 液五滴，輕搖后靜置3分鐘 4、向四支試管中加入等量的納氏試劑2ml， 搖勻。 5、觀察并記錄實驗現(xiàn)象 酶活性的影響因素10 實驗記錄 項目底物 （/ml） 大豆尿素 酶溶液 （/ml） 納氏試劑 （/ml） 實驗現(xiàn)象 試管1 試管2 試管3 試管4 酶活性的影響因素11 3、酶的活性受溫度的影響、酶的活性受溫度的影響 步驟 1、向四支10ml試管，分別標(biāo)號1，2，3，4 2、向四支試管中分別加入3ml0.1%尿素液 3、將

6、四支試管分別置于0C，30C，100C，室 溫的水浴中預(yù)溫10分鐘 3、向四支試管中加入等量的大豆尿素酶溶液五滴， 輕搖后靜置3分鐘 4、向四支試管中加入等量的納氏試劑2ml，搖勻。 5、觀察并記錄實驗現(xiàn)象 酶活性的影響因素12 實驗記錄 項目底物 （/ml） 溫度 （/C） 大豆尿素 酶溶液 （/ml） 納氏試 劑（/ml） 實驗現(xiàn) 象 試管1 試管2 試管3 試管4 酶活性的影響因素13 4、酶的活性受重金屬離子的影響、酶的活性受重金屬離子的影響 步驟 1、向六支10ml試管，分別標(biāo)號1，2，3，4，5，6 2、向六支試管中分別加入3ml0.1%尿素液 3、將六支試管分別加入0.1%CuSO4 0.1%HgCl2 0.1%NaCl 1M NaOH 0.5M H2SO4，蒸餾水各2ml 3、向六支試管中加入等量的大豆尿素酶溶液五滴， 輕搖后靜置3分鐘 4、向六支試管中加入等量的納氏試劑2ml，搖勻。 5、觀察并記錄實驗現(xiàn)象 酶活性的影響因素14 實驗記