《蛋白酶類》

1、第十章 蛋白酶類 蛋白酶：催化蛋白質(zhì)水解的一類酶。 存在：動(dòng)物內(nèi)臟 植物莖葉、果實(shí) 微生物細(xì)胞 第一節(jié) 蛋白酶的分類 第二節(jié) 堿性蛋白酶 第三節(jié) 中性蛋白酶 第四節(jié) 酸性蛋白酶 第一節(jié) 蛋白酶的分類 一、蛋白酶的分類 二、微生物蛋白酶的底物專一性 三、微生物蛋白酶生產(chǎn)的影響因素 一、蛋白酶的分類 （一）按蛋白酶水解蛋白質(zhì)的方式 分類 （二）按酶的來源分類 （三）按蛋白酶作用的最適pH值分 類 （四）按蛋白酶的活性中心分類 （一）按蛋白酶水解蛋白質(zhì)的 方式分類 1、內(nèi)肽酶 2、端肽酶 3、酯蛋白酶 （二）按酶的來源分類 1、動(dòng)物蛋白酶 2、植物蛋白酶 3、微生物蛋白酶 （三）按蛋白酶作用的最適p

2、H 值分類 1、酸性蛋白酶 2、中性蛋白酶 3、堿性蛋白酶 （四）按蛋白酶的活性中心分 類 1、絲氨酸蛋白酶 2、巰基蛋白酶 3、羧基蛋白酶 4、金屬蛋白酶 二、蛋白酶的底物專一性 （一）蛋白酶水解蛋白質(zhì)時(shí)它對(duì)水解部位（肽 鍵）有嚴(yán)格的選擇性，并不是所有的肽鍵均能 水解。 （二）蛋白酶底物專一性不僅受到水解肽鍵一 側(cè)或兩側(cè)相鄰氨基酸殘基影響，有時(shí)還受到相 鄰若干單位的氨基酸的影響。 三、微生物蛋白酶生產(chǎn)的影響因素 （一）營養(yǎng)條件對(duì)蛋白酶生產(chǎn)的影響 （二）培養(yǎng)條件對(duì)蛋白酶生產(chǎn)的影響 （三）菌種及其生長狀態(tài)對(duì)蛋白酶生產(chǎn) 的影響 （一）營養(yǎng)條件對(duì)蛋白酶生產(chǎn)的影響 1、N源的誘導(dǎo)與阻遏 2、C源和分解

3、代謝阻遏 3、無機(jī)鹽對(duì)蛋白酶生產(chǎn)的影響 4、產(chǎn)酶促進(jìn)劑 （二）培養(yǎng)條件對(duì)蛋白酶生產(chǎn)的影響 1、培養(yǎng)基pH 2、培養(yǎng)溫度 3、通風(fēng)量的影響 （三）菌種及其生長狀態(tài)對(duì)蛋白酶生 產(chǎn)的影響 1、遺傳育種和基因工程手段定向 改造微生物 2、誘變處理 3、培養(yǎng)方法及生長狀態(tài)對(duì)產(chǎn)酶的 影響 第二節(jié) 堿性蛋白酶 一、堿性蛋白酶的性質(zhì) 二、堿性蛋白酶的生產(chǎn) 一、堿性蛋白酶的性質(zhì) n （一）定義：是一類最適pH在9-11 范圍內(nèi)的蛋白酶，因他們的活性中心大 多含有絲氨酸，所以又稱絲氨酸蛋白酶。 （二）分子量：20000-34000；pI 8-9。 （三）對(duì)二異丙基氟磷酸敏感。 （四）比較能耐熱。 （五）由芽孢桿菌

4、產(chǎn)生的作用性質(zhì)相同 的堿性蛋白酶可分為兩種。 二、堿性蛋白酶的生產(chǎn) （一）微生物（菌種） 地衣芽孢桿菌、短小芽孢桿菌、嗜堿性芽孢桿菌、 灰色鏈霉菌、費(fèi)氏鏈霉菌等 （二） 舉例 1、短小芽孢桿菌289堿性蛋白酶的生產(chǎn) 2、地衣芽孢桿菌2709堿性蛋白酶的生產(chǎn) 3、嗜堿性芽孢桿菌生產(chǎn)堿性蛋白酶 第三節(jié) 中性蛋白酶 一、中性蛋白酶的性質(zhì) 二、中性蛋白酶的生產(chǎn) 一、中性蛋白酶的性質(zhì) （一）大多數(shù)是金屬酶；分子量35000-40000； pI8-9；不穩(wěn)定，易自溶。 （二）最適pH6.5-7.5，穩(wěn)定pH6-10。 （三）熱穩(wěn)定性較差。 （四）大多數(shù)生產(chǎn)中性蛋白酶的芽孢桿菌還產(chǎn) 生-淀粉酶。 二、中性蛋

5、白酶的生產(chǎn) （一）微生物（菌種） 枯草桿菌1.398（淀粉液化芽孢桿菌）、棲土曲 霉3. 942、放線菌166等。 （二） 舉例 1、A.S.1398中性蛋白酶的生產(chǎn) （1）菌種培養(yǎng) （2）種子制備 （3）發(fā)酵 發(fā)酵生產(chǎn)中性蛋白酶 過程變化曲線 中性蛋白酶提 取流程 2、棲土曲霉3. 942中性蛋白酶的生 產(chǎn)。 3、放線菌166中性蛋白酶的生產(chǎn)。 第四節(jié) 酸性蛋白酶 一、酸性蛋白酶的性質(zhì) 二、酸性蛋白酶的生產(chǎn) 一、酸性蛋白酶的性質(zhì) （一）酸性蛋白酶是一種羧基蛋白酶。 （二） pI3-5；分子量30000-40000；最適pH 3-4；穩(wěn)定 pH2-6； 。 （三）50以上不穩(wěn)定。 （四）抑制劑為重氮酮化合物。 （五）微生物酸性蛋白酶與胃蛋白酶有所不同。 （六）水解不同蛋白質(zhì)能力不同。 （七）霉菌產(chǎn)生的胞外酸性蛋白酶中，常夾有酸性羧肽 酶。 二、酸性蛋白酶的生產(chǎn) （一）微生物（菌種） 黑曲霉、齋藤曲霉、宇佐美曲霉、根霉、