毛細(xì)管氣相色譜法測定食品、中藥中五氯硝基苯農(nóng)藥

1、山東省疾病控制中山東省疾病控制中 心食品理化分析室心食品理化分析室 主講人：宋家玉主講人：宋家玉 毛細(xì)管氣相色譜法測定保健食品、毛細(xì)管氣相色譜法測定保健食品、 中藥材中的五氯硝基苯殘留中藥材中的五氯硝基苯殘留 五氯硝基苯殘留限量標(biāo)準(zhǔn)五氯硝基苯殘留限量標(biāo)準(zhǔn) 五氯硝基苯五氯硝基苯(PCNB，Quintozene）是一種專用于種）是一種專用于種 子、土壤消毒的有機(jī)氯殺菌劑子、土壤消毒的有機(jī)氯殺菌劑, 其化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定其化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定, 高殘高殘 留性和脂溶性嚴(yán)重污染環(huán)境并危害人類的健康留性和脂溶性嚴(yán)重污染環(huán)境并危害人類的健康 。 2010版中國藥典規(guī)定人參、黃芪等為版中國藥典規(guī)定人參、黃芪等為0.1mg

2、/kg。 現(xiàn)有標(biāo)準(zhǔn)以及存的問題 GB/T 16341-1996 中華人民共和國中華人民共和國 國家標(biāo)準(zhǔn)國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中五氯硝基苯殘留量食品中五氯硝基苯殘留量 的測定的測定 2GB/T 5009.136-2003 中華人民共中華人民共 和國國家標(biāo)準(zhǔn)和國國家標(biāo)準(zhǔn) 植物性食品中五氯硝植物性食品中五氯硝 基苯殘留量的測定基苯殘留量的測定 3GB/T 5009.19-2008 食品中有機(jī)食品中有機(jī) 氯農(nóng)藥多組分殘留量的測定氯農(nóng)藥多組分殘留量的測定 我國現(xiàn)行檢測標(biāo)準(zhǔn)1，2 色譜柱:內(nèi)徑3mm柱長1.5m玻璃柱，內(nèi) 裝涂以1.5%OV-17+2%QF-1固定液，擔(dān) 體為80-100目Chromsorb W

3、AW。使 用填充柱色譜分離五氯硝基苯受六六六 等組分干擾嚴(yán)重，糧食取樣5.0g時(shí)最低 檢出濃度為0.005mg/kg；蔬菜取樣1.0g 時(shí)最低檢出濃度為0.01mg/kg。 現(xiàn)行檢測標(biāo)準(zhǔn)3使用凝膠柱層析法 凈化樣液有操作煩瑣、成本高等實(shí)際問 題。 現(xiàn)有標(biāo)準(zhǔn)存在的問題 色譜柱色譜柱: HP-5 石英毛細(xì)管柱石英毛細(xì)管柱30m 0.32mm(i.d.)； 柱溫程序：初溫柱溫程序：初溫90保持保持2min后以后以40/min升溫至升溫至 1.70保持保持1min。后以。后以5/min升溫至升溫至230保持保持9min； 進(jìn)樣口進(jìn)樣口260，檢測器，檢測器300。載氣：高純氮，流量。載氣：高純氮，流量

4、 2.0ml/min，尾吹，尾吹28 ml/min；進(jìn)樣量為；進(jìn)樣量為1.0l，分流不，分流不 分流進(jìn)樣分流進(jìn)樣 ，分流比，分流比1：100；保留時(shí)間定性，外標(biāo)法定；保留時(shí)間定性，外標(biāo)法定 量。組分峰量。組分峰 9.36 min。 本研究方法技術(shù)特點(diǎn)1 五氯硝基苯標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖 檢出五氯硝基苯殘留樣品色譜圖 五氯硝基苯、六六六、滴滴涕農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)樣色譜圖 本研究方法技術(shù)特點(diǎn)2 五氯硝基苯不溶于水, 溶于有機(jī)溶劑, 化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定, 不易揮發(fā)、氧化和分解,也不易受陽光和酸堿的影響的特 點(diǎn), 故采用具有強(qiáng)氧化性的濃硫酸進(jìn)行凈化, 從而排除大 量雜質(zhì)對于檢測的影響。解決了標(biāo)準(zhǔn)(3)使用的凝膠柱層 析法凈

5、化樣液操作繁瑣的問題,同時(shí)節(jié)省了成本。用硫酸 凈化在離心管中進(jìn)行，損失少，使凈化方法簡便高效。 當(dāng)樣液成分復(fù)雜、顏色較深、色素和雜質(zhì)不易去除時(shí)可 重復(fù)磺化一次即可。樣液曾嘗試用過Florisil硅藻土小柱凈 化，回收率高與硫酸處理相近，因小柱成本較高、來源 困難而棄用。 標(biāo)準(zhǔn)曲線 精密稱取一定量的五氯硝基苯標(biāo)準(zhǔn)品，用異辛烷溶解并 逐步稀釋成0.10，0.05,0.02,0.01,0.005g/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶 液，依2.2色譜條件分析，測定峰面積，結(jié)果見表1 。計(jì) 算回歸方程為 Y=2081.1X-1.58 r=0.9996。 方法的檢出限 以陰性樣品北沙參中添加五氯硝基苯多個(gè)水平,按2.1 和

6、2.2方法提取、凈化、進(jìn)樣，從0.005、0.002、0.001至 0.0006 mg/kg 多個(gè)水平, 進(jìn)行測定。 五氯硝基苯檢出 限以取5g樣品定容5ml計(jì)為 0.0006mg/kg（S/N=3） 方法回收率 采用標(biāo)準(zhǔn)添加法分別進(jìn)行回收率實(shí)驗(yàn) 。取適量陰性北 沙參樣品加標(biāo)至0.02mg/kg和0.05mg/kg兩個(gè)水平，混勻； 稱取5g左右， 按2.1及2.2方法提取、凈化、測定、計(jì)算 回收率。每個(gè)水平測定6 次,結(jié)果見表2 。 兩水平回收率范圍分別為： 0.05 mg/kg水平90.2-95.2%； 0.02 mg/kg水平為91.0-97.5% 精密度試驗(yàn) 取陰性樣品搗碎加標(biāo)配成濃度為0.020和0.10mg/kg樣 品，混勻；取5g左右，按2.1方法處理，2.2條件測定，計(jì) 算RSD （n=6），精密度試驗(yàn)結(jié)果（n=6）1.20%和 2.79 % 精密度試驗(yàn)RSD均小于3% 。 方法應(yīng)用 我實(shí)驗(yàn)室使用本文建立的方法分別對2009年、2010年山 東省內(nèi)日常檢測的部分保健食品及中藥材進(jìn)行五氯硝基 苯殘留分析，56份樣品有10份檢出，最高一份五氯硝基 苯殘留樣品為人參海狗丸0.066mg/kg。 檢出范圍 保健食品 0.0006 0.066 （mg/kg） 中藥材 0.0010.0192 （mg