實驗3_光和K__對氣孔運動的調(diào)節(jié)

1、實驗三 氣孔狀態(tài)觀察及K+對氣孔 開度的影響 長7-40m (H2O-0.54nm; CO2-0.46nm) 多數(shù)植物下表皮氣孔數(shù) 目多于上表皮。 腎型： 雙子葉植物, 啞鈴型：單子葉植物 保衛(wèi)細胞運動的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ) 1 (腎型）外壁薄，內(nèi)壁厚 2 壁中存在徑向排列的微纖絲 微纖絲 難以伸長。以氣孔口為中心，限 制了保衛(wèi)細胞沿短軸方向直徑的 擴大 吸水后，作用于外壁上的 （凈）壓力通過微纖絲傳到 內(nèi)壁，成為作用于內(nèi)壁、背 離氣孔口方向的拉力 1 掌握測定氣孔密度和開度的方法； 2 學(xué)會分析外界因素對氣孔運動的調(diào)節(jié)； 3 學(xué)會利用物鏡測微尺標定目鏡測微尺及測定視野 直徑的方法。 1、 實驗原理 1)

2、 印跡法 原理：以有機物質(zhì)的溶膠涂在植物的表面，膠體風(fēng)干后就凝成薄膜，這 層膜就印有表皮組織各細胞的邊界痕跡。除用來觀察氣孔狀況外，還 可用于觀測植物表皮上的細胞、茸毛以及蜜腺、蜜盤、刺鱗片等。 優(yōu)點: 非破壞性取樣，方便快捷； 缺點: 邊界痕跡不明顯的樣品印跡模糊，凹陷氣孔難以取到印跡，清晰 薄膜制作有難度。 2) 固定法 原理：無水酒精能使植物細胞迅速脫水死亡，因而細胞壁硬化、細胞形 狀固定，氣孔也得以保持原樣，有利于以后鏡檢研究，植物材料還可 長期保存。 優(yōu)點: 鏡下觀察較印跡法的醒目， 植物材料可長期保存，凹陷氣孔仍可 觀察； 缺點: 破壞性取樣，不適用于下表皮難以剝離的樣品觀察。 （

3、）氣孔狀態(tài)的觀察 3) 氣孔密度的測定 原理：氣孔密度（單位面積上氣孔的數(shù)目）可用顯微鏡視野面 積（S=r2，r可用40倍鏡下物鏡測微尺量?。﹥?nèi)觀測到的氣 孔數(shù)求得。 注意：目鏡測微尺刻度的大小是隨顯微鏡放大的倍數(shù)而不同的， 必須用物鏡測微尺來決定放大時目鏡測微尺刻度的大小。 2. 實驗器材 （1） 材料：蠶豆葉（洗凈） （2） 儀器：顯微鏡、物鏡測微尺 （3） 試劑：無水乙醇、膠棉液 3. 實驗步驟 定性： 1）固定法：取蠶豆葉下表皮，迅速放入無水乙 醇，固定2-3min，取出鏡檢。 2）印跡法：蠶豆葉下表皮涂一層膠棉液，用鑷 子取下，在稍有濕潤的載玻片上此膜就能粘貼牢 固，即可鏡檢 。 定

4、量： 3）氣孔密度測定： A 標定目鏡測微尺，并利用物鏡測微尺計算 視野的直徑 B 鏡檢，隨機取3 個視野，觀察氣孔數(shù)；并算 出單位面積氣孔數(shù)= a/s = a/r2 目鏡測微尺 物鏡測微尺 目鏡測微尺的標定 注：物鏡每格注：物鏡每格 為為10m 17格目尺對格目尺對 6格物尺格物尺 目尺每格目尺每格 610/17m 測氣孔大小測氣孔大小 物鏡測微尺物鏡測微尺6格格 目鏡測微尺目鏡測微尺17格格 4. 數(shù)據(jù)記錄及處理 方方 法法 固定法固定法 印跡法印跡法 1 2 3 1 2 3 視野內(nèi)氣孔數(shù)目視野內(nèi)氣孔數(shù)目 視野半徑視野半徑r 單位面積上氣孔數(shù)目單位面積上氣孔數(shù)目 單位面積上氣孔數(shù)目平均值單

5、位面積上氣孔數(shù)目平均值 6. 思考題 固定、印跡法兩種方法測定結(jié)果是否一樣？ 哪一種方法觀察到的氣孔數(shù)較多？為什么？ 5. 分析與討論 （） K+對氣孔開度的影響 1.實驗原理 保衛(wèi)細胞的滲透系統(tǒng)受K+調(diào)節(jié)，Na+一定程度上 可代替K+ ，但不如K+有效。 2. 實驗材料、儀器和試劑 （1） 材料：蠶豆葉 （2） 儀器：顯微鏡、溫箱、培養(yǎng)皿等 （3） 試劑：0.5%KNO3、0.5NaNO3、蒸餾水 3. 實驗步驟 取3 個培養(yǎng)皿編號，分別放入15ml 0.5%KNO3、 0.5%NaNO3、蒸餾水。 撕蠶豆葉下表皮分別放入3 個培養(yǎng)皿。 將3 個培養(yǎng)皿放入人工光照條件下，保溫1 小時。 分別取出葉表皮放在載玻 片上，蓋上蓋玻片，在顯微 鏡下觀察氣孔的開度。 開度開度 不同溶液處理后的氣孔開度 方方 法法 KNO3 NaNO3 水水 1 2 3 4 5 1 2 3 4 5 1 2 3 4 5 氣孔開度氣孔開度 氣孔平均開度氣孔平均開度 4. 數(shù)據(jù)記錄及處理 5. 分析與討論 6. 思考題 比較何種溶液中氣孔開度最大？為什么？ 1.首先確定顯微鏡好用 2.膠棉液涂均勻、超薄一層 3.葉表皮取下后迅速投入乙醇 4.物鏡測微尺安全使用，切勿壓破 5.先低倍鏡找視野,后高倍觀察氣孔數(shù)目、大小或標定目尺 6.物