八氯苯乙烯、多溴聯(lián)苯醚等多鹵代有機(jī)污染物的半抗原合成及免疫分析

1、八氯苯乙烯、 多溴聯(lián)苯醚等多鹵代有機(jī)污染物的半抗原合成及免疫分析隨著環(huán)境污染的日益嚴(yán)重 , 許多新型的多鹵代有機(jī)污染物不斷被報(bào)道和檢測(cè) 出來(lái)。八氯苯乙烯（OCS）多溴聯(lián)苯醚（PBDEs和三（2,3-二溴丙基）異氰酸酯（TBC） 都是具有持久性、耐光耐熱、生物累積性的多鹵代有機(jī)污染物 , 并能對(duì)周邊環(huán)境 和人體健康構(gòu)成危害。由于缺乏相應(yīng)的半抗原和抗體 , 目前對(duì)這三種有機(jī)污染物 的檢測(cè)分析仍依賴于常規(guī)的儀器分析方法。因此本論文針對(duì)這三種多鹵代有機(jī)污染物的結(jié)構(gòu)特點(diǎn) , 設(shè)計(jì)與合成了多種半 抗原化合物 , 為后續(xù)的免疫分析奠定了物質(zhì)基礎(chǔ)；同時(shí)本文還通過(guò)動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn) 獲取了八氯苯乙烯的多克隆抗體 ,

2、并建立了能選擇性識(shí)別八氯苯乙烯的酶聯(lián)免疫 分析方法。本論文的主要內(nèi)容如下： 1. 通過(guò)對(duì)八氯苯乙烯進(jìn)行結(jié)構(gòu)分析 , 設(shè)計(jì)了 兩條合成路線來(lái)合成保留不同特征結(jié)構(gòu)的八氯苯乙烯半抗原。 第一條合成路線是 以五氯硝基苯為原料 , 通過(guò)還原、重氮化、 Sonogashira 等多步反應(yīng) , 制備了含醇 羥基和烯丙基溴的前驅(qū)體化合物 4 和 5, 繼而通過(guò)對(duì)這兩個(gè)化合物進(jìn)行衍生 , 得到 了保留多氯代苯乙烯基結(jié)構(gòu)的八氯苯乙烯半抗原Os1Os6:而第二條合成路線是以間硝基苯甲醛為原料 ,利用親電加成、消除、硝基還原等反應(yīng) ,獲得了保留三 氯代乙烯基結(jié)構(gòu)的八氯苯乙烯半抗原 Os7和Os8所有的八氯苯乙烯半抗原

3、前驅(qū)體和目標(biāo)化合物 ,均進(jìn)行了 1 HNM、R 1 3C NMR 和MS表征,并得到了結(jié)構(gòu)確認(rèn)2.第三章的主要研究?jī)?nèi)容是建立八氯苯乙烯的酶 聯(lián)免疫分析方法。作者首先篩選出了三種八氯苯乙烯半抗原 , 并通過(guò)活性酯法制 備了人工抗原 , 然后對(duì)新西蘭大白兔進(jìn)行免疫實(shí)驗(yàn)以獲取相應(yīng)的多克隆抗體；繼 而經(jīng)過(guò)對(duì)抗體和包被原的篩選以及免疫方法的條件優(yōu)化 , 最終建立了能選擇性檢 測(cè)八氯苯乙烯的間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA分析方法。在此基礎(chǔ)上，再利用所建立的酶聯(lián)免 疫分析方法 , 不僅對(duì)不同濃度的八氯苯乙烯標(biāo)準(zhǔn)液和多種干擾物進(jìn)行了檢測(cè)分析 而且對(duì)不同樣品體系的加標(biāo)回收率進(jìn)行了考察 ,同時(shí)還將回收率結(jié)果與氣相分析 進(jìn)行了

4、比較。3. 第四章中主要討論了多溴聯(lián)苯醚半抗原的設(shè)計(jì)與合成。 作者首先利用親電 取代反應(yīng)和重氮化反應(yīng)合成了多種多溴代酚化合物,然后通過(guò)Chan-Lam偶聯(lián)反 應(yīng),將多溴代酚與化合物 26進(jìn)行偶聯(lián), 得到了相應(yīng)的二苯基醚化合物； 再進(jìn)-步通 過(guò)脫保護(hù)和溴素的親電取代反應(yīng) , 制備了含酚羥基的半抗原前驅(qū)體；最后通過(guò) Williamson 成醚反應(yīng)、 水解或氧化等反應(yīng) , 獲得了多種含脂肪羧基和不同連接臂 的PBDEs半抗原分子。這些PBDEs半抗原都通過(guò)了結(jié)構(gòu)表征，而且都很好的保留 了多溴聯(lián)苯醚的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。4. 第五章闡述了 TBC半抗原的設(shè)計(jì)與合成。本項(xiàng)研究是通過(guò)以2,4,6-三（烯 丙氧基）-1,3,5-三嗪為原料，利用Claisen重排反應(yīng)及與NaOH勺成鹽反應(yīng)制得了 重要中間體化合物 33。再通過(guò)以 2-溴乙酸乙酯 （4- 溴丁酸乙酯或 6-溴己酸乙酯 ） 為原料, 經(jīng)過(guò)親核取代反應(yīng)、溴化加成及鹽酸的酸性水解反應(yīng) ,成功合成了含有脂 肪羧基功能基及不同連接臂的TBC半抗原化合物；而含有脂肪氨基的TBC半抗原 是通過(guò) Gabriel 氨基合成法來(lái)獲得的。含芳香羧基和芳香胺基的TBC半抗原則是分別以對(duì)羥基苯甲醛、對(duì)羥基苯甲 酸叔丁基酯或?qū)ο趸椒訛樵?, 經(jīng)過(guò)多步反應(yīng)后 , 最終利用了醛基的氧化反應(yīng)、 叔丁基酯的脫保護(hù)反應(yīng)或硝基