烏蕨不同部位總黃酮分析論文

1、烏蕨不同部位總黃酮分析論文烏蕨Stenolomachusanum(L.)Ching為鱗始蕨科植物烏蕨的全草，又名野雞尾、金花草、中華金粉蕨，具有清熱、解毒、利濕、止血的功效1。本文就烏蕨全草、根、莖、葉等不同部位的總黃酮和微量元素含量進行比較分析，為烏蕨的進一步研究和資源開發(fā)提供依據(jù)。 1儀器與試藥 1.1儀器 WND200A型高速中藥粉碎機（上海微型電機廠），BS224S精密電子天平(北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司)，TU1900雙光束紫外可見分光光度計（北京普析通用儀器有限公司），IRIS/AP型電感耦合等離子體發(fā)射光譜儀(美國TJA公司)，全自動回流消化儀(重慶南岸玻璃儀器廠)。 1.2試

2、藥 蘆丁標準品(中國藥品生物制品檢定所，批號為0080-9705)；硝酸、高氯酸均為優(yōu)級純，其他試劑均為分析純，測微量元素用水為雙蒸水。烏蕨藥材于2008年10月采于杭州九溪，經(jīng)熊耀康教授鑒定為烏蕨Stenolomachusanum(L.)Ching的地上部分，陰干，粉碎，備用。 2實驗方法與結(jié)果 2.1總黃酮含量測定4 2.1.1對照品溶液的制備：精密稱取105干燥恒重的蘆丁對照品16.50mg，加60%乙醇溶解定容于50ml容量瓶，得濃度為0.33mg/ml對照品溶液，備用。 2.1.2供試品溶液的制備：定量稱取烏蕨干燥粗粉5.0g，加16倍量0.1HCl-60乙醇回流提取4h，提取1次，

3、提取液減壓濃縮，加60%乙醇定容至25ml，作為供試品溶液備用。 2.1.3標準曲線的制作：精密吸取標準品溶液0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0ml，分別置25ml容量瓶中，加入5%NaNO21.0ml，搖勻，放置6min后加入10%Al(NO3)31.0ml，搖勻，放置6min后加入4%NaOH10ml，再加60%乙醇稀釋至刻度，混勻，靜置15min，于510nm處，以相應試劑作空白，測定吸光度，以蘆丁濃度為縱坐標，以吸光度值為橫坐標，繪制標準曲線，得回歸方程：Y=2.778X-0.0775（r=0.9991），結(jié)果表明蘆丁在0.0160.99mg范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。 2.1

4、.4精密度實驗：取蘆丁對照品溶液2.0ml，置25ml容量瓶中，按“2.1.3”項操作，平行測定5次，結(jié)果其RSD為0.21，表明精密度良好。 2.1.5重復性實驗：取同1份樣品溶液5份，分別按“2.1.3”項操作，結(jié)果RSD為0.72%。 2.1.6穩(wěn)定性實驗：取1份樣品溶液，按上述實驗方法在顯色完全后0、10、20、30、45、60min分別測定吸光度，結(jié)果RSD為1.08%。實驗表明：供試品溶液在1.0h內(nèi)穩(wěn)定的。 2.1.7加樣回收率實驗：取已知總黃酮含量的烏蕨樣品6份，分別精密添加已知濃度的蘆丁對照品適量。按供試品溶液制備方法制備，按“2.1.3”項操作，測定總黃酮含量，計算測定回收

5、率，結(jié)果平均回收率為99.34，RSD為1.82。 2.1.8烏蕨不同部位總黃酮含量的測定：精密吸取提取液適量，按“2.1.3”項操作，測定吸光度A，結(jié)果見表1。表1烏蕨根、莖、葉、全草等不同部位總黃酮含量測定結(jié)果（略） 2.2微量元素含量的測定5 2.2.1供試品溶液的制備：各取藥材約0.5g，精密稱定，置50ml凱氏燒瓶，加8.0ml消化液V(HNO3)V(HClO4)=41，靜置過夜，加熱回流消化至無色透明，冷卻后，定量轉(zhuǎn)移至100mL容量瓶中，加超純水稀釋至刻度，搖勻，備用。取相同體積的消化液，同法消化，制備空白溶液。 2.2.2混合標準溶液的制備：分別取各重金屬元素標準品溶液適量，用

6、5%硝酸溶液制成混合溶液，梯度稀釋，作為混合標準品溶液備用。 2.2.3測定方法：儀器工作參數(shù)：檢測器CID的低波段（265nm）積分時間：15s；高波段（265nm）積分時間：5s；進樣蠕動泵轉(zhuǎn)速：100r/min；進樣霧化器氬氣壓力：28psi；輔助氣流量：1.0L/min；高頻發(fā)生器功率：1500W；樣品沖洗時間：5s；測定波長范圍：193.7407.7nm。 依次將儀器的進樣管插入各個濃度的混合標準品溶液中進行測定，以每一濃度測得的3次讀數(shù)的平均值為縱坐標，相應元素標準溶液濃度為橫坐標，作標準曲線，并進行方法學考察。由各元素的標準曲線計算微量元素的含量，測定結(jié)果見表2。表2烏蕨根、莖、

7、全草、葉等不同部位微量元素含量測定結(jié)果（略） 3討論 3.1由實驗可知，烏蕨全草、根、莖、葉等不同部位總黃酮含量分別11.89%、4.47、3.46和11.75%，總黃酮含量在葉中較高，而根與莖中總黃酮含量較低。烏蕨富含黃酮類化合物，而黃酮類化合物在臨床上具有預防血液類疾病、治療冠狀動脈硬化、抗癌、抗菌、抗衰老、抗糖尿病等作用，食品上作為甜味劑、天然色素等食品添加劑。因此提取烏蕨中的黃酮類化合物，不單可以用于臨床藥物的研究，也可用于食品與工業(yè)方面。 3.2元素測定結(jié)果表明，烏蕨全草、根、莖、葉等不同部位均含有豐富的微量元素，其中含B、Ca、K、Na、P、S等多種常量元素；此外還含Cu、Fe、Z

8、n、Cr、Co等多種人體必需的微量元素。其中K、Fe、Ca、Na等元素含量均較高，其次為Mn、Zn、Cu。而有害元素Pb、As、Cu在地上部分含量較低，根中Pb、As、Cu含量都高出了藥用植物及制劑進口綠色行業(yè)標準（Hg0.2g/g、Pb5.0g/g、As2.0g/g、Cd0.3g/g和Cu20.0g/g），可能是由于本身的沉積或者土壤受到污染造成。 【參考文獻】 1江蘇新醫(yī)學院.中藥大辭典(上冊)S.上海:上海人民出版社,1985：157158. 2馬鶯,王靜.功能性食品活性成分測定M.北京:化學工業(yè)出版社,2005:253. 3吳巧鳳,曾曉艷.蘇州薺苧總黃酮與微量元素含量的測定J.廣東微量元素科學，2004,11(9):3437. 【摘要】：目的比較烏蕨全草、根、莖、葉等不同部位總黃酮和元素的含量差異。方法采用可見分光光度法測定不同部位總黃酮的含量；采用電感耦合等離子體原子發(fā)射光譜法(ICPA