植物組織培養(yǎng)知識(shí)點(diǎn)總結(jié)

1、植物組織培養(yǎng)知識(shí)點(diǎn)總結(jié)第一、二章1 植物組織培養(yǎng)概念、分類、應(yīng)用、創(chuàng)始人、奠基人2 實(shí)驗(yàn)室各分室名稱、主要設(shè)備、主要功能3 無菌操作技術(shù)流程4 表面消毒劑種類及作用效果5 培養(yǎng)基成分及各成分的作用6 植物組織培養(yǎng)三大難題7 那些成分要抽濾滅菌第三、四章8 植物細(xì)胞全能性原理9 名詞解釋：愈傷組織、脫分化、體細(xì)胞胚、人工種子10 體細(xì)胞胚的特點(diǎn)11 愈傷組織形成發(fā)育的三個(gè)時(shí)期，兩種類型，良好愈傷組織的特點(diǎn)12 植物離體微繁，一般過程，各階段注意事項(xiàng)13 褐變，影響褐變的因素，克服褐變的措施；玻璃化，無糖培養(yǎng)技術(shù)第五、六、七章14 植物脫毒方法、原理15 脫毒率包括兩種方面含義16 人工誘導(dǎo)單倍體

2、的三種途徑17 花藥培養(yǎng)得到的再生植株倍性如何，為什么18 花藥培養(yǎng)的應(yīng)用，花藥培養(yǎng)力，一般培養(yǎng)過程。19 離體幼胚培養(yǎng)，胚發(fā)育有幾種類型？各有何特點(diǎn)？20 離體授粉 離體受精21 簡述胚乳培養(yǎng)的意義第八、九章22 原生質(zhì)體概念，兩種分離方法，純化方法。23 酶法分離植物原生質(zhì)體的酶液組成及作用24 簡述植物原生質(zhì)體培養(yǎng)基的特點(diǎn)25 原生質(zhì)體融合，融合的主要方法26 體細(xì)胞雜交過程27 融合產(chǎn)物的種類及特點(diǎn)28 植物細(xì)胞無性系變異，特點(diǎn)29 提高植物細(xì)胞無性系變異頻率的方法30 細(xì)胞突變體的類型及對(duì)應(yīng)的篩選方法植物組織培養(yǎng)知識(shí)點(diǎn)總結(jié)第一、二章1植物組織培養(yǎng)概念、分類、應(yīng)用、創(chuàng)始人、奠基人概念：

3、是一種將植物的器官、組織或細(xì)胞在適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基上進(jìn)行無菌培養(yǎng)， 并重新再生細(xì)胞或植株的 技術(shù)。分類：（1）按外植體來源和特性分：植株培養(yǎng) 胚胎培養(yǎng) 器官培養(yǎng) 組織或愈傷組織培養(yǎng) 細(xì)胞或原生 質(zhì)體培養(yǎng)；（2）按培養(yǎng)方法分：固體培養(yǎng) 液體培養(yǎng) 固體液體兩相培養(yǎng)應(yīng)用：（1）克服遠(yuǎn)緣雜交中雜種不育性，種子無活力或配發(fā)育不全的植物獲得后代，一年多代育種（2）培育三倍體（3）單倍體育種（4）提高突變頻率，篩選變異類型（5）經(jīng)過細(xì)胞融合得到體細(xì)胞 雜種（6）種質(zhì)資源保存2實(shí)驗(yàn)室各分室名稱、主要設(shè)備、主要功能化學(xué)實(shí)驗(yàn)室（準(zhǔn)備室）無菌操作室（接種室）培養(yǎng)室高壓滅菌室細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)室3無菌操作技術(shù)流程4表面消毒劑種類及

4、作用效果漂白粉 飽和溶液10-30m效果很好氯化汞0.1-0.2% 3-12m效果最好酒精70-75% 10-30S 效果好5培養(yǎng)基成分及各成分的作用水提供水分，營造環(huán)境無機(jī)鹽大量微量提供細(xì)胞生長所需元素有機(jī)化合物 碳源：提供能源、維持滲透壓；維生素參與代謝；氨基酸，促進(jìn)芽根 胚狀體生長和分化植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)調(diào)節(jié)細(xì)胞生長天然復(fù)合物其他成分活性炭吸附；抗生素防止內(nèi)生菌污染6植物組織培養(yǎng)三大難題污染褐變玻璃化7那些成分要抽濾滅菌熱不穩(wěn)定成分如：IAA ABA ZT GA3第三、四章8 植物細(xì)胞全能性原理植物的每一個(gè)細(xì)胞都具有該植物的全部遺傳信息和發(fā)育成完整植株的能力。9 名詞解釋：愈傷組織、脫分化

5、、體細(xì)胞胚、人工種子 愈傷組織：原指植物體的局部受到創(chuàng)傷刺激后，在傷口表面新生的組織。它由活的薄壁細(xì)胞組成，可 起源于植物體任何器官內(nèi)各種組織的活細(xì)胞。脫分化：改變細(xì)胞原來的結(jié)構(gòu)和功能，而回到無結(jié)構(gòu)的分生組織狀態(tài)即愈傷組織狀態(tài)。體細(xì)胞胚： 在離體或活體條件下， 由除合子外是孢子體細(xì)胞形成的胚， 其經(jīng)歷的發(fā)育階段與合子胚相 似。人工種子： 所謂人工種子就是將組織培養(yǎng)產(chǎn)生的體細(xì)胞胚和性細(xì)胞胚包裹在能提供養(yǎng)分的膠囊里，再膠囊外包上一層具有保護(hù)功能和防止機(jī)械損傷的外模，形成一種類似于種子的結(jié)構(gòu)。10 體細(xì)胞胚的特點(diǎn)11 愈傷組織形成發(fā)育的三個(gè)時(shí)期，兩種類型，良好愈傷組織的特點(diǎn)啟動(dòng)期，分裂期，形成期；

6、胚性愈傷組織和非胚性愈傷組織 良好愈傷組織的特點(diǎn)： 1 高度的胚性或再分化能力； 2 容易散碎； 3 旺盛的自我增值能力；4 進(jìn)過長期的繼代培養(yǎng)不喪失胚性或再分化能力。12 植物離體微繁，一般過程，各階段注意事項(xiàng)1 無菌培養(yǎng)物的建立；選擇木本植物和較大的草本植物的莖段；草本植物的葉片、葉柄、花瓣。2 誘導(dǎo)外植體生長與分化； 選擇適宜的外植體頂芽、 側(cè)芽或帶有芽的莖切斷； 頂端優(yōu)勢較強(qiáng)的植物3 促進(jìn)中間繁殖體的增值；不同激素水平對(duì)中間繁殖體增值有影響。4 壯苗與生根；調(diào)節(jié)培養(yǎng)基礦質(zhì)營養(yǎng)組成、激素種類濃度、滲透壓和光照。5 試管苗出瓶與苗期管理。保持試管苗水分供需平衡；選擇合適種植基質(zhì)；防止菌類滋

7、生；掌握溫度 和光照條件。13 褐變，影響褐變的因素，克服褐變的措施；玻璃化，無糖培養(yǎng)技術(shù) 褐變：由于組織中的多酚氧化酶被激活， 使細(xì)胞的代謝發(fā)生變化， 酚類物質(zhì)被氧化后產(chǎn)生增褐色的醌 類物質(zhì)，它們會(huì)逐漸擴(kuò)散到培養(yǎng)基中，抑制其他酶的活性，毒害培養(yǎng)的外植體材料。 營養(yǎng)因素：基因型；材料的生理狀態(tài)和取材時(shí)間；培養(yǎng)基成分；外植體大小和培養(yǎng)時(shí)間?？朔肿兊拇胧?選擇分生能力強(qiáng)的外植體和培養(yǎng)時(shí)間：低溫、液體、低鹽、低 PH初代暗培養(yǎng)。2 抗氧化作用 ； 3 連續(xù)轉(zhuǎn)移、低溫處理。玻璃化：過度含水化，特有的一種整理失調(diào)和生理病變。 莖尖和莖切斷培養(yǎng)物不定芽難恢復(fù)； 難生根。無糖培養(yǎng)技術(shù)：又稱光自養(yǎng)微繁。在

8、一個(gè)相對(duì)大的培養(yǎng)空間，采用人工環(huán)境控制手段，用CO2替代糖作為碳源，提供植物生長適宜的光、溫、水、氣、營養(yǎng)條件，促進(jìn)植物的光合作用，從何 促進(jìn)植物增 值、生長和發(fā)育的技術(shù)。第五、六、七章14 植物脫毒方法、原理1 熱處理 原理：在高于正常溫度下，病毒被部分或完全鈍化，但是很少甚至不傷害寄住植物。2 莖尖培養(yǎng) 原理：病毒在植物體內(nèi)分布是不均勻的，頂端分生組織一般無毒或病毒濃度很低。沒有維管系統(tǒng)不利于病毒移動(dòng)；旺盛分裂的分生細(xì)胞代謝活性高，病毒無法復(fù)制；具高活性的病毒鈍化系統(tǒng)；存在高水平的內(nèi)源生長素抑制病毒增值。15 脫毒率包括兩種方面含義16 人工誘導(dǎo)單倍體的三種途徑1 植物性器官或性細(xì)胞培養(yǎng)；

9、 2 染色體消失法； 3 孤雌生殖。17 花藥培養(yǎng)得到的再生植株倍性如何，為什么 花藥培養(yǎng)是通過誘導(dǎo)花藥中的小孢子的雄核發(fā)育，產(chǎn)生單倍體，通過染色體加倍產(chǎn)生加倍單倍體的 技術(shù)。18 花藥培養(yǎng)的應(yīng)用，花藥培養(yǎng)力，一般培養(yǎng)過程。應(yīng)用于：植物單倍體育種；構(gòu)建 HD群體；遺傳工程的受體與基礎(chǔ)材料；創(chuàng)建染色體工程的基本材料； 轉(zhuǎn)移異源染色體或基因?；ㄋ幣囵B(yǎng)力：愈傷組織誘導(dǎo)率和綠苗分化率。 培養(yǎng)一般過程：取材表面消毒接種和培養(yǎng)花粉植植株的誘導(dǎo)壯苗和移栽單倍體植株二倍化19 離體幼胚培養(yǎng)，胚發(fā)育有幾種類型？各有何特點(diǎn)？幼胚培養(yǎng)：子葉期以前具有胚結(jié)構(gòu)的幼小胚胎類型 1 正常發(fā)育成成熟胚；適用于遠(yuǎn)緣雜交2 不繼

10、續(xù)胚性生長，而是在培養(yǎng)基上迅速萌發(fā)，形成畸形幼苗；應(yīng)用于一年多代育種 3脫分化形成愈傷組織。常用來建立細(xì)胞無性系20 離體授粉 離體受精指未授粉的胚珠或子房從母體上分離下來進(jìn)行無菌培養(yǎng)， 并以一定的方式授以無菌花粉， 使之在試管 內(nèi)實(shí)現(xiàn)受精的技術(shù)，又稱離體受精。21 簡述胚乳培養(yǎng)的意義 創(chuàng)造三倍體植物；為極幼齡胚生長提供營養(yǎng)；研究某些天然產(chǎn)物如淀粉、蛋白質(zhì)和脂類等生物合成 第八、九章22 原生質(zhì)體概念，兩種分離方法，純化方法。脫去細(xì)胞壁的細(xì)胞叫原生質(zhì)體 分離方法：機(jī)械法；酶法 純化方法：過濾離心法；漂浮法；23 酶法分離植物原生質(zhì)體的酶液組成及作用酶液組成：酶 - 纖維素酶 +果膠酶；纖維素酶

11、 +蝸牛酶滲透穩(wěn)定劑 - 糖醇系統(tǒng)：甘露醇、山梨醇、葡萄糖和蔗糖； 鹽類系統(tǒng)：氯化鈣、硫酸鎂、氯化鉀、 PDS 作用：促進(jìn)酶解作用，保持原生質(zhì)體的完整性24 簡述植物原生質(zhì)體培養(yǎng)基的特點(diǎn)含有高濃度甘露醇；Ca+ 、Mg+增加；大量元素濃度低；廣泛使用2,4-D ;碳源以葡萄糖較好，最可靠；氮源（谷氨酰胺），銨根離子不能過高，硝酸鹽有毒害作用25 原生質(zhì)體融合，融合的主要方法自然界具細(xì)胞結(jié)構(gòu)的生物都具有相似的細(xì)胞結(jié)構(gòu)， 按照相似相容的原理， 通過細(xì)胞膜的融合， 就可以 達(dá)到同一生物或不同種、屬、生物、甚至遺傳關(guān)系更遠(yuǎn)生物間的細(xì)胞融合，形成細(xì)胞雜種。 主要的融合方法：自發(fā)融合誘導(dǎo)融合：1離子誘導(dǎo)融

12、合；2高Ca-高pH值法；3聚乙二醇PEG法26 體細(xì)胞雜交過程原生質(zhì)體制備 - 原生質(zhì)體融合 - 雜種細(xì)胞選擇雜種細(xì)胞培養(yǎng) - 雜種細(xì)胞再生植株 - 雜種植株鑒定27 融合產(chǎn)物的種類及特點(diǎn)1 親和的細(xì)胞雜種；雙親的親緣關(guān)系較近，雜交植株可育，具雙親的細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)2 部分親和的細(xì)胞雜種；雜種以一個(gè)親本細(xì)核物質(zhì)為主，只有少量的另一親本核，胞質(zhì)是雙親的。3 胞質(zhì)雜種：含有一個(gè)親本的核物質(zhì)，細(xì)胞質(zhì)是雙親的28 植物細(xì)胞無性系變異，特點(diǎn)是指植物的組織、細(xì)胞、原生質(zhì)體在離體培養(yǎng)條件下所得的培養(yǎng)物及再生植株的變異。特點(diǎn)： 1 是植物組織與細(xì)胞培養(yǎng)中一種廣泛存在的現(xiàn)象；2 變異設(shè)計(jì)的形狀廣泛，包括數(shù)量性狀、質(zhì)量性狀、染色體數(shù)目、生理生化特性等方面3 細(xì)胞無性系變系是可遺傳的4 無性系變異的頻率高低與外植體的來源及培養(yǎng)的時(shí)間的長短有關(guān)5 變異幅度大二畸變率低，單個(gè)或