熒光顯微鏡操作手冊

1、熒光顯微鏡操作手冊O(shè)lympusX51關(guān)N機(jī)g施款張丿JVIB壞I巖尤軾髙度矚TH!J理境甕曲訓(xùn)節(jié)曙K起怡蠱 miWDKfttt00ICAUPftftSHhutterT目I*u物鏡:熒光濾色塊轉(zhuǎn)盤:4 X 0.16 （無 DIC） 10X 0.4020 X 0.7540 X 1.00 oil100X 1.40 oil1. WU 藍(lán)2. WIB綠（長通）3. WIBA綠（帶通）4. WIG紅5. CFP青6. YFP黃操作步驟：（注意：樣品須在低倍鏡下放置和取下）DIC觀察：1. 打開明場電源開關(guān)（“丨”為開，“O”為關(guān)）2. 將樣品置于載物臺上，用樣品夾夾好3. 將起偏器、檢偏器、 DIC 棱

2、鏡推入光路，熒光濾塊轉(zhuǎn)盤撥到“ 1 ”位置， DIC 棱鏡應(yīng) 與相應(yīng)的物鏡倍數(shù)相匹配4. 先選用低倍物鏡（“ 10 X”）5. 調(diào)節(jié)透射光的強(qiáng)度，調(diào)節(jié)焦距，找到視野6. 換到高倍鏡頭，觀察樣品7. DIC 觀察時，光路選擇拉桿拉到中間位置，既可觀察，也可拍照熒光觀察：1. 打開明場電源開關(guān)2. 打開汞燈電源開關(guān)3. 將樣品置于載物臺上，用樣品夾夾好4. 檢偏器、 DIC 棱鏡在光路外5. 將熒光光路shutter打開（“O”為開，”為關(guān)），需保護(hù)樣品時關(guān)閉 shutter6. 光路選擇拉桿推至最里邊7. 根據(jù)樣品的標(biāo)記情況將熒光濾塊轉(zhuǎn)盤轉(zhuǎn)到相應(yīng)的位置8. 通過兩組減光濾片調(diào)節(jié)激發(fā)光強(qiáng)度9. 從

3、低倍鏡開始觀察，調(diào)焦，找到預(yù)觀察視野，10. 依次換到高倍鏡頭，觀察樣品11. 拍照時光路選擇拉桿完全拉出普通明場觀察：1. 打開明場電源開關(guān)（“丨”為開，“O”為關(guān)）2. 將樣品置于載物臺上，用樣品夾夾好3. 起偏器、檢偏器、 DIC 棱鏡在光路外，熒光濾塊轉(zhuǎn)盤撥到“ 1”位置， DIC 棱鏡撥到 明場（BF）位置4. 先選用低倍物鏡（ “ 4X”）5. 調(diào)節(jié)透射光的強(qiáng)度，調(diào)節(jié)焦距，找到視野6. 依次換到高倍鏡頭，觀察樣品7. 光路選擇拉桿拉到中間位置既可觀察，也可拍照 關(guān)機(jī)：1. 關(guān)閉汞燈電源（注意：汞燈需使用半小時以上方可關(guān)閉，關(guān)閉半小時以后方可再次 開啟）2. 將透射光調(diào)到最小，關(guān)閉明

4、場電源開關(guān)3. 將鏡頭轉(zhuǎn)到低倍鏡，取出樣品，若使用過油鏡用干凈的擦鏡紙擦拭鏡頭4. 確認(rèn)數(shù)據(jù)已經(jīng)保存，關(guān)閉軟件5. 使用光盤拷貝數(shù)據(jù)（禁止使用移動儲存設(shè)備拷貝數(shù)據(jù)）6. 關(guān)閉電腦，登記使用時間、熒光數(shù)字等使用情況Olympus 1X711ttfeXMiWW物鏡:Utt畫路逸拝按制機(jī)調(diào)他檢昭料力壞 銳調(diào)範(fàn)脂祖 掘謂滋護(hù)囲眾対電嫌開蕪至開黃畑站頤進(jìn)応潺衰光變高擺梅覺環(huán)乩艷光關(guān)調(diào)書環(huán)CTUCTltR中有曲申普TA 3朮略申卅連斤敏AAftshutterO開關(guān)102040604 X 0.13PHLX 0.30PH1X 0.45PH1X 0.60PH2X 1.35oil（無相差）物鏡倍數(shù)相差環(huán)熒光濾色塊

5、轉(zhuǎn)盤：1. WU藍(lán)2. WIB綠（長通）3. WIBA綠（帶通）4. WIGA紅5. CFP6. YFP操作步驟：相差觀察：1. 打開明場電源開關(guān)（“丨”為開，“O”為關(guān)）2. 將樣品置于載物臺上3. 將光路選擇旋鈕調(diào)至觀察位置4. 從低倍鏡開始觀察，調(diào)節(jié)到與鏡頭相匹配的相差環(huán)，熒光濾塊轉(zhuǎn)盤撥到“ 1 ”的位置5. 調(diào)節(jié)透射光光強(qiáng)，調(diào)節(jié)焦距，找到預(yù)觀察視野6. 依次換到高倍鏡， （注意調(diào)節(jié)相差環(huán)）觀察樣品7. 拍照時將光路選擇旋鈕調(diào)至相機(jī)位置熒光觀察：1. 打開明場電源開關(guān)2. 打開汞燈開關(guān)3. 將樣品置于載物臺上4. 將熒光光路shutter打開（“O”為開，”為關(guān)），需保護(hù)樣品時關(guān)閉 sh

6、utter5. 將光路選擇旋鈕調(diào)至觀察位置6. 根據(jù)樣品的標(biāo)記情況將熒光濾塊轉(zhuǎn)盤轉(zhuǎn)到相應(yīng)的位置7. 通過兩組減光濾片調(diào)節(jié)激發(fā)光強(qiáng)度8. 從低倍鏡開始觀察，調(diào)焦，找到預(yù)觀察視野，9. 依次換到高倍鏡頭，觀察樣品10. 拍照時將光路選擇旋鈕調(diào)至相機(jī)位置普通明場觀察：1. 打開明場電源開關(guān)（“丨”為開，“O”為關(guān)）2. 將樣品置于載物臺上3. 將光路選擇旋鈕調(diào)至觀察位置4. 從低倍鏡開始觀察，相差環(huán)撥到明場（ BF）位置，熒光濾色塊轉(zhuǎn)盤撥到“1”的位置5. 調(diào)節(jié)透射光光強(qiáng)，調(diào)焦，找到預(yù)觀察視野6. 依次換到高倍鏡，觀察樣品7. 拍照時將光路選擇旋鈕調(diào)至相機(jī)位置關(guān)機(jī)：1. 關(guān)閉汞燈電源（注意：汞燈需使

7、用半小時以上方可關(guān)閉，關(guān)閉半小時以后方可再次開啟）2. 將透射光強(qiáng)調(diào)到最小，透射光選擇按鈕按出3. 關(guān)閉明場電源開關(guān)4. 將鏡頭轉(zhuǎn)到低倍鏡，取出樣品，若使用過油鏡用干凈的擦鏡紙擦拭鏡頭5. 確認(rèn)數(shù)據(jù)已經(jīng)保存，關(guān)閉軟件6. 使用光盤拷貝數(shù)據(jù)（禁止使用移動儲存設(shè)備拷貝數(shù)據(jù)）7. 關(guān)閉電腦，登記使用時間、熒光數(shù)字等使用情況Olympus SZX16lift冷摩黑開黃粗f像虞鈕毒CT卅義光鼻審師底光海畀餐應(yīng)充洋海軽調(diào)節(jié)星刖ww反光朋嗣池軌片關(guān)綁比廈控:WT物鏡：1 X變倍：0.711.5熒光濾色塊轉(zhuǎn)盤：UV藍(lán)GFPHQ 綠RFP2 紅操作步驟：明場觀察：1. 將樣品置于載物臺上2. 推入光路選擇拉桿，

8、熒光濾塊轉(zhuǎn)盤撥到空位3. 選擇合適的光源冷光源觀察使用不透明的底板（黑或白），打開環(huán)形光電源開關(guān)（“丨”為開，“O”為 關(guān)）,調(diào)節(jié)光強(qiáng)度，找到預(yù)觀察視野，調(diào)節(jié)變倍比，觀察樣品底光源觀察使用透明玻璃底板，打開底座電源開關(guān)（“丨”為開，“O”為關(guān)），將LBD濾片推入光路，調(diào)節(jié)反光鏡方向、對比度和光強(qiáng)度，找到預(yù)觀察視野，調(diào) 節(jié)變倍比，觀察樣品4. 拍照時將光路選擇拉桿拉出熒光觀察：1. 將樣品置于載物臺上2. 一般選擇黑色不透明底板3. 打開汞燈電源開關(guān)4. 熒光光路擋板推出5. 根據(jù)樣品的標(biāo)記情況將熒光濾塊轉(zhuǎn)盤轉(zhuǎn)到相應(yīng)的位置6. 找到預(yù)觀察視野，調(diào)節(jié)變倍比7. 觀察樣品8. 拍照時將光路選擇拉桿拉

9、出關(guān)機(jī)：關(guān)閉半小時以后方可再次1. 關(guān)閉汞燈電源 （注意： 汞燈需使用半小時以上方可關(guān)閉， 開啟）2. 將明場光強(qiáng)調(diào)到最小，關(guān)閉明場電源開關(guān)3. 取出樣品，將變倍比調(diào)到最小4. 確認(rèn)數(shù)據(jù)已經(jīng)保存，關(guān)閉軟件5. 使用光盤拷貝數(shù)據(jù)（禁止使用移動儲存設(shè)備拷貝數(shù)據(jù)）6. 關(guān)閉電腦，登記使用時間、熒光數(shù)字等使用情況軟件應(yīng)用預(yù)覽鍵拍照鍵軟件介紹1. 雙擊打開DP Controller軟件2. 點(diǎn)擊預(yù)覽鍵，選擇 image size（ 般 1360 X 1024）、objective 、ISO sensitivity（明場拍照選擇ISO200,熒光拍照選擇ISO400）、exposure mode（ 一般選

10、擇 manual），調(diào)節(jié) exposure time3. 調(diào)節(jié)黑/白平衡（明場拍照用白平衡，熒光拍照用黑平衡）。點(diǎn)擊color面板，點(diǎn)擊onetouch在圖片背景位置選個小框，軟件自動做好平衡4. 若需添加標(biāo)尺，點(diǎn)擊scale面板，選中show scale，選擇標(biāo)尺顯示模式和長度，選中free size ，改變標(biāo)尺長度5. 若需調(diào)整圖象色階，點(diǎn)擊level面板，拖動小滑塊調(diào)整色階，可以改變圖象對比度6. 點(diǎn)擊capture面板，還可再次調(diào)節(jié)曝光時間、圖象亮度及對比度。點(diǎn)擊拍照鍵，獲取圖 象7. 此時彈出DP manager軟件，選擇保存圖象格式保存圖象到硬盤上8. 若需將不同通道圖象合成，可點(diǎn)擊DP manager軟件中image宀image composition ，選擇需合成圖片的名稱，點(diǎn)擊apply , merging image生成，保存合成圖象9. 若需拍攝Timelapse,點(diǎn)擊Timelapse/Movie 面板，選擇拍攝模式，選擇拍攝時間、間隔 時間等參數(shù)，再點(diǎn)擊