Digitoxin作業(yè)指導書

1、文件編號：LAB OP- MY020第1頁，共1頁版本：A/0生效日期：2008-02-011. 分析原理競爭原理?？倻y定時間：18分鐘第一次孵育：15g L標本和一份生物素抗洋地黃毒苷特異性單克隆抗體一起孵育，反應形成復合體，復合體量取決于標本中反應物濃度。第二次孵育：添加釘復合體a標記洋地黃毒苷和鏈酶親和素包被的微粒后，生物素抗體空閑位點結(jié)合抗原，反應生成一 “抗體-半抗原”樣復合體，并在生物素和鏈酶親和素的相互作用下形成固相。.將反應液吸入檢測池中，檢測池中的微粒通過電磁作用吸附在電極表面。未結(jié)合的物質(zhì)通過ProCell除去。在電極上加以一定的電壓，使復合體化學發(fā)光，用光電倍增器檢測發(fā)光

2、的強度。.通過檢測儀的定標曲線得到最后的檢測結(jié)果，定標曲線是通過2點定標點和試劑條形碼上獲得的主曲線生成的。2. 標本要求洋地黃毒苷檢測的樣本須在用藥后 8 24個小時內(nèi)收集。只有按如下方法收集的標本才適合用本試劑盒檢測。血清必須用標準試管收集。內(nèi)有分離膠的試管不適用于治療藥物監(jiān)測。請注意廠商提供的數(shù)據(jù)。肝素鋰、肝素鈉、肝素胺、K3-EDTA檸檬酸鈉血漿。（原則：回收率 90110%;斜率0.9 1.1 ;相關(guān)系數(shù)0.95 ; 2X分析敏感度（LDL,最低檢測水平）+相關(guān)因子0.95 ）.穩(wěn)定性：2毛。（可保存一周；在-20 可保存6月，只可凍溶一次14。3. 試劑、校準品、質(zhì)控品和其他所需材

3、料采用羅氏原裝配套試劑。試劑：Elecsys Digitoxin 試劑盒，產(chǎn)品目錄號03002659 T00測試。M鏈酶親和素包被的微粒（透明瓶蓋）每瓶 6.5ml。鏈酶親和素包被的微粒，0.72mg/ml ;結(jié)合力：470ng生物素/mg微粒； 微粒經(jīng)過防腐處理。R1生物素化洋地黃毒苷特異性抗體（灰色瓶蓋）每瓶 9ml。生物素化單克隆抗洋地黃毒苷抗體（綿羊）：0.5 mg/L;磷酸鹽緩 沖液：100 mmol/L，PH值6.8 ;經(jīng)過防腐處理。R2釘復合物標記的洋地黃毒苷（黑色瓶蓋）每瓶9ml。釘復合物標記的洋地黃毒苷:4.0 gg/L ;磷酸鹽緩沖液：100 mmol/L， PH值6.8

4、;經(jīng)過防腐處理。校準品：Cal 1陰性定標液（白蓋），2瓶，1.0ml/瓶，人血清基質(zhì)Cal 2陽性定標液（黑蓋），2瓶，1.0ml/瓶,人血清基質(zhì)質(zhì)控品：Elecsys PreciControl Cardiac，貨號 03530477文件編號：LAB OP- MY020 第2頁，共2頁版本：A/0生效日期：2008-02-01PC CARD:2 瓶，2X2.0ml 質(zhì)控血清PC CARD:2 瓶，2 2.0ml 質(zhì)控血清其他所需材料：Elecsys通用稀釋液貨號11732277Elecsys1010 或2010分析儀Elecsys 系統(tǒng)緩沖液（ProCell ）貨號 11662988Elec

5、sys 測量池清洗液（CleanCell ）貨號 11662970Elecsys 添加劑液（SysWash 貨號 11930346Elecsys 系統(tǒng)清洗液（SysClean）貨號 112985004. 儀器和校準使用儀器：瑞士羅氏診斷公司生產(chǎn) Elecsys 2010/E 170/E 411全自動電化學發(fā)光免疫自動分析儀儀器校準：每批Digitoxin試劑盒必須用新鮮試劑和 Digitoxin Cal 1,Cal 2定標一次。另外，以下情況需要再次定標：Elecsys2010 : 一個月（同一批號試劑） 7天（放置儀器上的同一試劑盒）各種分析儀均適用的情況：根據(jù)要求進行標定：如質(zhì)控結(jié)果超出范

6、圍時；根據(jù)規(guī)定進行多次標定。5. 操作步驟（以E 170為例）5.1校準操作步驟：在編緝各項目的參數(shù)時，已經(jīng)在 Application Calib菜單中定義好了定標類型和幾點定標。因此在對各項目進行定標時，只需在定標菜單Calibration中進行即可。3.2進入Calibration Status菜單，用鼠標選擇需定標的項目，再根據(jù)需要點單點定標（BLANK建）或兩點定標（TWGPOINT鍵）、跨距定標（SPAN建）、多點定標（FULL鍵），再選擇其它項目進行相應選擇，最 后點SAVE將定標物放入在 Calibration Calibrator 中定義好的位置，點 Start，再點Start

7、，儀器開始定標。在Calibration Status菜單中看定標結(jié)果，點 Calibration Result鍵看定標結(jié)果，點 Reaction Monitor鍵看每個定標物的反應曲線。5.2樣本檢測程序：單個樣本輸入，在主菜單下選擇Workplace- Testslection，在Sequenee No欄輸入標本號，然后選擇該標本所需做的單個項目或組合項目點 SAVE建，樣本號自動累加。批量常規(guī)標本的輸入，在主菜單下選擇Workplace- Testslection ，在Sequenee No欄輸入起始標本號，然后選擇該標本所需做的單個項目或組合項目點REPEAT輸入該批標本的最后一個標本

8、號，點0K即可。進樣分析，將標本按在 Workplace菜單中輸入的標本號順序在樣本架上排好，放入進樣盤內(nèi)，按START鍵，輸入該批上機標本的起始標本號，再點 START鍵，儀器自動開始推架檢測標本。 文件編號：LAB OP- MY020 第3頁，共3頁版本：A/0生效日期：2008-02-016. 質(zhì)量控制用Elecsys Digitox in質(zhì)控品1和2 （PreciCo ntrol Cardiac ）。質(zhì)控品1和質(zhì)控品2至少每24小時或每一次定標后測定一次。質(zhì)控間隔期應適用于各實驗室的具體要求。檢測值應落在確定的范圍內(nèi)，如出現(xiàn)質(zhì)控值落在范圍以外，應采取校正措施。7. 計算方法分析儀自動計

9、算得出每份標本的測定濃度（單位可為nmol/L或ng/mL）.換算公式 nmol/L x 0.76 = ng/mLn g/mL x 1.31= nmol/L8. 參考范圍文獻中洋地黃毒苷治療血清濃度為13-39nmol/L或10-30ng/mL3。由于治療和中毒血清濃度范圍存在重疊，因此必須考慮糖苷濃度監(jiān)測和臨床發(fā)現(xiàn)以判斷洋地黃中毒可能。參見“干擾因素”章節(jié)。每個實驗室必須調(diào)查各自患者群體的參考范圍變異性， 必要時根據(jù)具體情況制訂自己的參考范圍。9. 分析性能10. 干擾因素下列情況不影響測定結(jié)果：黃疸（膽紅素濃度小于 633umol/l或37 mg/dL ），溶血（血紅蛋白小于0.683mm

10、ol/L或1.1 g/dL ），脂血（脂類乳劑小于 1500 mg/dL），和生物素（小于205 nmol/L 或50n g/mL）。標準：回 收率土 10 %初始值。對于因某些疾病需要而接受高劑量生物素治療的患者（ 5mg/天），必須在末次生物素治療 8小時后采集標本。濃度達1500IU/ml的風濕因子對測定無影響。體外對39種常用藥物進行試驗未發(fā)現(xiàn)有藥物影響檢測結(jié)果。烏扎拉可能會導致假性洋地黃毒苷結(jié)果偏高。由于存在1.1 %的交叉反應，烏本苷會導致洋地黃毒苷測定結(jié)果偏高。某些情況下，糖苷濃度與藥物劑量所對應的濃度值不相關(guān)。其原因可能是患者 依從性不好，或者是沒有考慮以往用藥情況。腎衰、肝臟

11、衰竭患者和懷孕晚期婦女血中存在地高辛類似免疫反應物質(zhì)（DLIS）。研究發(fā)現(xiàn)使用商業(yè)免疫試劑測定地高辛時，標本中DLIS會使地高辛檢測結(jié)果偏高。DLIS也會干擾洋地黃毒苷測定。檢測中通過添加合適的物質(zhì)盡量減小檢測成分和罕見 血清之間出現(xiàn)的免疫交叉反應的干擾。少數(shù)病例中極高濃度的鏈霉抗生物素蛋白和釘抗體會影響測定結(jié)果。必須結(jié)合患者病史， 各項實驗室檢查及其它臨床資料來綜合評估測定結(jié)果。11. 臨床意義洋地黃毒苷是一種作用于心臟的糖苷類藥物。其確切作用機理仍不完全清楚。洋地黃毒苷使細胞內(nèi)鈣離子濃度升高，鈣離子對 心機功能而言極其重要。最后，心臟收縮能力增強，收縮幅度增大，從而使心臟每次搏動輸出的血量

12、增加。洋地黃毒苷常用于 治療心功能不全。其他治療指征包括老年患者明顯動脈高血壓治療，伴有冠狀動脈功能不全的高血壓患者的外科術(shù)前治療，以 及伴有心臟肥大和心室舒張壓有升高趨勢的心絞痛患者的治療。洋地黃毒苷治療不當患者會引起嚴重的室性心律不齊和某些特 定類型的心包炎。洋地黃毒苷治療濃度范圍約為13-39nmoll/L（10-30 ng/mL）3。這種情況下，洋地黃毒苷較地高辛有更強的蛋白質(zhì)結(jié)合力。由于洋地黃作用與多種因素有關(guān)，故治療和中毒范圍會發(fā)生重疊2。因此，血清值必須結(jié)合整個臨床表現(xiàn)進行解釋。洋地黃毒苷半衰期為6-8天，主要在肝臟代謝。文件編號：LAB OP- MY020 第4頁，共4頁版本：

13、A/0生效日期：2008-02-01在這過程中，產(chǎn)生大約10%給予劑量的地高辛。約30%給予的洋地黃毒苷被真正清除。下列情況需確定其血清濃度：監(jiān)測患者攝 入劑量，確定患者中毒可能，患者藥物動力學改變或術(shù)前用藥未知，以及ECG (心電圖)中未觀察洋地黃反應的患者。12 .參考文獻1. Oellerich M. Pharmaka (Drug monitoring). In: Thomas L (ed.). Labor und Diagnose, TH-Books, Frankfurt, 5. edition, 1998:1174. Englisch: Clinical Laboratory. 1s

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