富勒烯及其衍生物在生物方面的應用

1、武漢大學學報 (自然科學版)j. w uh an u n iv. (n a t. sc i. e d. )v o l146 n o 12a p r. 2000, 133 136第 46 卷 第 2 期2000 年 4 月文章編號: 0253, 9888 (2000) 02 一 0137 一 05富勒烯及其衍生物在生物方面的應用肖春華, 吳采櫻(武漢大學化學學院, 武漢 430072)摘要: 介紹了富勒烯及其衍生物對人體免疫缺陷病毒酶 (h iv p - 1) 的抑制、dn a 的裂解、消除自由基和對生物膜的雙重作用等方面的應用, 及可能存在的作用機理 1關 鍵 詞: 富勒烯; 富勒烯衍生物;

2、應用中圖分類號: o 634. 5文獻標識碼: a富勒烯 (c 60 ) 是除金剛石、石墨以外碳的第三種同素異形體, 自 1990 年 h u ffm an 和 k ra t schm e r 等 找到克量級制備方法以來 c 60 的研究得到了飛速發(fā)展. c 60 是由 12 個五元環(huán)和 20 個六元環(huán)組成的三十 二面體結構, 有 30 個共軛雙鍵, 它提供了制備不同化學或生物化合物的機會, 并具有廣闊的應用前景,其中最有前景的應用領域之一是建立在它們的生物是一種病毒, 稱為 h iv , 這種病毒侵犯人的 t 淋巴細胞, 引起大量 t 細胞死亡, 從而導致嚴重的細胞 免疫缺陷, 人體兔疫缺陷

3、病毒酶的活性部位, 可被大致描述為一個周圍全部排列著疏水氨基酸的無底圓 筒形 1 與這種疏水趨勢明顯例外的是在活性部位尚 存在兩個能催化水進攻底物使肽鍵斷裂的天冬氨酸(a sp 25, a sp l25). f r iedm an 等人4 假設 c 60 分子半 徑與所描述的人體兔疫缺陷病毒酶活性部位的圓筒形 有相同的半徑, 由于 c 60 ( 及其衍生物中 c 60 的部 分) 主要是疏水性的, 因而 c 60 和人體兔疫缺陷病毒酶活性部位存在著一個強的疏水相互作用 1 這種相互作用使得 c 60 衍生物成為 h iv p 的抑制劑, 動力學 分析也支持了 h lv p 和 c 60 衍生物

4、結合的驅動力是病毒酶中非極性活性表面和 c 60 表面的疏水相互作 用 1 除此, 通過引入獨特的靜電相互作用, 可以增加兩者的結合能 1 在病毒酶的活性部位, 催化性的天冬氨酸鹽和 c 60 表面上陽離子之間的鹽橋具有明顯 的靜電相互作用 1 已經(jīng)發(fā)現(xiàn)幾種二價金屬陽離子是h lv p 的抑制劑, 通過在 c 60 上引入一個酰胺鹽橋可 使配體和受體的結合能增加約 17kj m o l, 使 c 60 與h iv p 的結合能力增大 1 000 倍, 大大加強了 c 60 的 抑制活性 1特性基礎之上1 , 如具有細胞毒性2, 能促使 dn a的選擇性分裂3 , 抗病毒活性4 和藥理學特性5

5、等 1直接將富勒烯和生物活性物質相連, 研究其在生理 學上的應用前景也十分誘人, 然而, 由于富勒烯固有 的疏水性, 無法與人體內“靶分子”作用, 使得它們在生物化學領域中的研究和應用受到很大的限制 1 近 年來, 對合成水溶性富勒烯衍生物方面的突破和成功, 大大加速和擴寬了 c 60 衍生物在生物方面的應用 范圍 1 本文針對 c 60 及其衍生物在對細菌的抑制、 dn a 的裂解、消除自由基和對生物膜的雙重作用等方面的應用作一簡要評述 1對人體免疫缺陷病毒酶 ( h ivp ) 和1細菌的抑制51993 年 s ijb e sm a 等人 又設計合成了水溶性的 具 有 生 物 活 性 的

6、二 氨 基 二 酸 二 苯 基 c 60 的 衍 生 物, 設計考慮要求這些化合物一端有極性官能團, 對對人體免疫缺陷病毒酶 (h iv p 21) 的抑制, 是抗病毒療法的一個可行的目標, 也是治療艾滋病的關 鍵 1 艾滋病是一種新傳染病, 1984 年證明它的病原 收槁日期: 1999- 07 一 10基金項目: 教育部博士點基金資助項目作者簡介: 肖春華 ( 1972) 女, 博士研究生, 現(xiàn)從事固相微萃取涂層的研究 1年 r o s 和 p ra to 8 將 n 2取代的甘氨酸、醛和 c 60 縮合h iv p 而 言, 則 含 有 正 離 子 更 好.合 成 的 化 合 物 1(見

7、圖 1) 溶于 ph 7 的水中, 使其成為一個評估 c 60衍 生 物 的 生 理 和 藥 理 活 性 的 理 想 底 物 1 它 既 是h iv p 的抑制劑, 在低濃度范圍內又是人體兔疫缺陷 病毒 h iv 21 和 h iv 22 反轉錄酶的抑制劑, 化合物 1的合成, 為探索 c 60 衍生物在生物醫(yī)學方面的實際應 用獲得了突破性進展, 該化合物對 h iv p 的抑制為人們展示了極為廣闊的前景, 從分子結構上看, 化合物 1 鍵連的極性梭基一端是其水溶性的物質基礎 1而衍生物中 c 60 母體又是其疏水性的依賴, c 60 表面 和 h lv p 中非極性的活性表面的疏水相互作用,

8、 有效地阻斷了病毒酶的活性, 而化合物 1 結構的 c 60 衍 生物的極性鏈段部分, 因其水溶而具有較好的生物化學特征 1 因而它是人們合成有潛在應用前景的抗病毒 c 60 衍生物的一個很好的借鑒 1得到新穎 c 60 稠合功能化的吡咯烷 2 4 (圖 2). 與富勒烯尼古丁相比, 這些化合物在比率為 9: 1 的水2二甲 亞礬 (dm so ) 中顯示了適宜的溶解性, 其中 4 的溶解性優(yōu)于 2 和 3. 在初步的生物測試中, 發(fā)現(xiàn) 4 對一系列微生物有活性 1 在修飾的瓊脂擴散測試中,不同種的細菌和霉菌菌種均被殺死 1圖 2 化合物 2 4 的分子式2 致使 d na 裂解核酸含有生物遺

9、傳信息, 是一類重要的生物分子 1 它包括脫氧核糖核酸 dn a 和核糖核酸 rn a兩大類, dn a 構成遺傳信息物質, rn a 直接參與蛋白質的合成, 而 dn a的裂變將引起細胞調亡, 致使生物體變異 1 富勒烯具有光物理特性, 有很深的顏色, 在 u v 和可見光區(qū)顯示了豐富的光化學行為,圖 1 化合物 1 的分子式研究人員認為, 在 c 60 衍生物作為人體免疫缺 陷病毒酶抑制劑時, 含肽的抑制劑比非肽抑制劑有 更 強的活性, 前者在亞毫微摩爾范圍 ( 10 212) 有活 性, 后者在毫微摩爾范圍 ( 1029 ) 有活性 1 將 1, 22二在光的激發(fā)下, 三線態(tài) c 60可

10、產(chǎn)生約一個單位能量,1o 2 .通過能量轉換, 可形成高產(chǎn)量的單線態(tài)氧 (三線態(tài)也能氧化富電子底物.)而t o k u yam a 等人比較了幾個 c 60 衍生物 (圖 3) 的氫21, 22亞甲基富勒烯 602612梭酸共價連接到肽 t的親水的 4 8 序列 (h 2t h r2t h r2a sn 2t y r2t h r2o h ) 上, 一方面使其更易溶于水; 另一方面在人的單 核細胞趨藥性檢測中能顯示出活性 1t o n io lo 等報道了該富勒烯肽的生物活性: 6 , 并評價了富勒烯2肽的 4 8 序列, 通過 cd 4 t 4 抗原激活單核細胞趨 藥性和對 h iv 21 蛋

11、白酶的活性抑制 1 結果表明, 由 于肽 t 是一個有效的人的單核細胞趨藥性的興奮 劑, 使得與肽相連的富勒烯也顯示了高的向化特性1 抑制劑 xm 323 ( 即 d pm 323) 抗 h iv 21 蛋白酶的 活性與二甲亞礬 (dm so ) 水溶液中的富勒烯2五肽相比, 從峰面積積分計算的抑制率看, xm 323 可達55% , 而富勒烯2五肽則可達 40%.p ra to 等也報道了具有潛在生物活性片段的 c 60 肽的衍生物7 , 并對其生物活性進行了表征, 在對細菌的抑制方面, 1996 1994-2013 china academic journal electronic pub

12、lishing house. all rights reserved. 圖 3 化合物 5 8 的分子式光 誘 導 生 物 活 性2 , 發(fā) 現(xiàn) 將 化 合 物 7 和 超 螺 旋位置裂解 1y i2zho n g a n 等 人10pbr 322dn a一 起 在 黑 暗 中 和 可 見 光 照 射 下 保 溫通 過 實 驗 證 實 鳥 嘌 呤時, 光 照 射 下 的 保 溫 使 共 價 鍵 緊 密 聯(lián) 合 的 超 螺 旋dn a 產(chǎn)生裂紋, 在同樣實驗條件下, 化合物 6 顯示和3c 60 之間是單電子轉移造成了 dn a的選擇性裂解 1 通過連接極性官

13、能團到 c 60 結構上可得到一些水溶性 c 60 衍生物如化合物 10 12 (圖 5) , 這些二氫 富勒烯類的光物理和化學特性與 c 601 相似 1低的 dn a裂解能力, 而部分溶于極性溶劑的化合物 5 和缺少富勒烯片段的參考化合物 8 則不能裂解dn a 1y am ako sh i 等人將 c 60 和化合物 9 (圖 4) 分別和pv p 一起溶于水中, 研究 c 60 及帶有吖啶基的 c 60 衍裂解活性9 . 發(fā)現(xiàn)化合物 9 顯生物的光誘導 dn a示了比 c 60 更強的對 dn a 的裂解能力 1 他們據(jù)此推測 dn a 的裂解可能是由于化合物 9 的 c 60 部分

14、產(chǎn)生的單線態(tài)氧引起的, 而活性的增強可歸于吖啶部分對 dn a 分子的親和力的作用 1圖 5 化合物 9 的分子式由化合物 12, 他們得到了二氫富勒烯2脫氧低聚 核苷酸 (d h f 2don 21). 這個共軛化 合 物 雜 化 到互補的單鏈 dn a上, 該體系和光及氧反應只破壞單鏈中最靠近 c 60 的鳥嘌呤. 通過與曙紅連接的脫氧低 聚核苷酸 (eo sin 2don 21) 的對比實驗發(fā)現(xiàn), 雖然 與曙紅和與 c 60 相連的脫氧低聚核苷酸都引起單鏈 鳥嘌呤的特定修飾, 但兩者在 d 2o 中光解反應卻明顯不同, 通常在 d 2o 中光解能加強1o 2 的反應, 假如c 602脫氧

15、低聚核苷酸修飾的鳥嘌呤產(chǎn)生的選擇性位 置 裂 解 是 由 單 線 態(tài) 氧1o 2 致 活, 則 其 裂 解 產(chǎn) 率 在d 2o 光 解 中 應 顯 著 增 加. 實 際 情 況 卻 相 反, eo sin 2don 21 對被修飾的鳥嘌呤的裂解產(chǎn)率顯著增加, 而 對 d h f 2d od on 21 修飾的鳥嘌呤的裂解產(chǎn)率卻沒有 明顯影響, 而且反應中也不被1o 2 的猝滅劑所抑制 1圖 4 化合物 9 的分子式用低能量的光照射 dn a 和 c 60 羧酸的混合物時可產(chǎn)生選擇性含鳥嘌呤鏈的裂解 1 實驗證實 c 60 羧酸在含水 dm so 中產(chǎn)生單線態(tài)氧, 并發(fā)現(xiàn)它對細 胞生長和酶的活性

16、有抑制作用, 此水溶性的 c 60 衍生物在可見光的照射下在鳥嘌呤的位置破壞 dn a的行為, 最開始被認為是在溶液中單線態(tài)氧和 dn a的反應 1 即單線態(tài)氧通過 4+ 2 或 2+ 2 環(huán)加成, 加成到嘌呤堿的五元咪唑環(huán)上修飾鳥嘌呤, 這種修 飾 將 極 大 地 增 強 dn a 中 磷 酸 二 酯 鍵 的 堿 水 解 速率. 低聚核苷酸結合到 rn a 或 dn a 上, 能阻塞靶 rn a 的翻譯或通過與 dn a 形成三鏈螺旋結構阻 止靶基因的轉錄 1bou t o r in e 等人3 認為含鳥嘌呤1這表明 c 60 衍生物和 單 鏈 鳥 嘌 呤 的 反 應 不 是 靠 o 2傳遞

17、的, 也即 c 60 衍生物對單鏈 dn a 的光誘導, 位1置選擇性修飾不是通過 o 2 作為活化劑, 而是鳥嘌3呤和 c 60 之間的單電子轉移機理. c 60 誘導鳥嘌呤裂解的高選擇性和與其它增敏劑相比的高活性使它成鏈的隨機裂解, 很有可能由于 c 60 分子對 dn a的非選擇性的疏水結合, 并認為若將有識別能力的基團連到 c 60 核上, 可增強對鳥嘌呤裂解位置的選擇性 1為驗證這個想法, 他們合成了有機官能化 c 60 支承的142m e r 低 聚 核 苷 酸 側 鏈, 它 可 通 過 w a t so n 2c r ick氫鍵相互作用結合到單鏈靶 rn a 上, 或通過由形為

18、dn a 裂解反應中的選擇試劑 1 dn a裂解也會使有病或異常增殖的細胞調亡, 通過連接靶向性的官能團, 可能使富勒烯的作用發(fā)生在特定的部位, 這 為治療某些癌癥和一些疑難雜癥提供了一條新途 徑, 而從單線態(tài)氧1o 2 到單電子轉移機理, 標志著對 作用機理認識的深入, 隨著富勒烯作用機理的進一 步揭示, 必將會給富勒烯及其衍生物在 dn a 裂解 方面的應用帶來深遠的影響 1成h oo g steen 氫鍵結合到雙鏈靶 dn a上 1 實驗證明裂解發(fā)生在限定的鳥嘌呤堿基位置 1 這類富勒烯2低聚核苷酸共軛物具有較高位置特定性, 能通過形 成雙或三鏈螺旋結構有效地修飾 dn a , 致使其特

19、定結合入微粒中, 暴露在 u v的類脂過氧化物 1光下, 誘導產(chǎn)生了顯著3除去自由基k am a t 等的研究顯示由 c 60 (o h ) 18 光敏化作用產(chǎn)生了顯著的膜過氧化作用, 并用不同參數(shù)評價和某些情況下生物體需要活性氧來完成生理過程, 如吞噬細菌, 前列腺素合成, 凝血酶原合成, 肝臟 對外來毒物的解毒等 1 但許多情況下, 活性氧積累過剩時, 又會產(chǎn)生損傷作用, 如氧自由基和 h 2o 2 能研究了膜的過氧化作用鳥嘌呤機理 1 認為這種作用是基于l 型和 型的反應 1 在l 型反應期間, 是在敏化劑的三線態(tài)狀態(tài)和底物產(chǎn)生的基團離子之間的除氫或電子轉移, 從激發(fā)的敏化劑到分子氧的能

20、量夠損傷細胞中 dn a和膜, 致使一些細胞壞死, 人們1轉移導致了 02 的產(chǎn)生, 形成了 型反應, 試驗顯示已經(jīng)發(fā)現(xiàn)許多疾病是由氧自由基觸發(fā)的, 機體衰老也與此密切相關. c h ian g 等人最近報道水溶性的 多羥基富勒烯衍生物 (fu lle reno ls) 對消除由黃嘌呤由單線態(tài)氧粹滅劑 2胡蘿卜素, 疊氮化鈉等產(chǎn)生的抑制百分率非常低 ( 10% 11% ) , 這意味著在氧化1產(chǎn) 物 的 形 成 中, o 2 的 作 用 是 微 不 足 道 的; 另 一 方和黃嘌呤氧化酶產(chǎn)生的超氧基o -2 有很好的效果11面, 自由基清除劑叔了醇、甘露糖醇 ( 對- o h 起作該富勒烯醇化

21、合物比母體 c 60 減少了它們固有的生物毒性 1 一些具有電子親和力的富勒醇成為合適的 試劑, 用于生物體系的自由基去除和水溶性的抗氧化劑以減少有病血液中的自由基的濃度和抑制不正?；蛴胁〖毎纳L, 實驗表明, 當溶液中富勒醇的2用) 和超氧化物的歧化酶 ( 對 o 2 起作用) 在相當程度上 ( 30% 50% ) 抑制了過氧化的破壞, 過氧化氫酶, h 2o 2 的抑制劑也顯著地抑制了過氧化作用 1 這說明膜破壞發(fā)生主要由l 型機理支配 1對蛋白質的氧化破壞以蛋白質氧化作用和膜酶濃 度 為 50 m g l 21 時, 對 o -基 的 清 除 率 可 近 達2損失為例也是由 c 60

22、(o h ) 18 誘導的, 這個現(xiàn)象獨立80% 1 同時通過光譜吸收實驗和化學發(fā)光技術實驗還顯示富勒烯醇的存在對由黃瞟呤氧化而產(chǎn)生的尿 酸的量沒有影響, 這意味著它對黃嘌呤氧化酶沒有于類脂過氧化作用之外, 直接地影響細胞的蛋白質和細胞的完整, 因此 k am a t 等認為這個富勒烯衍生物具有誘導生物體系決定性分子破壞的能力 1 同抑制作用, 而直接對 o -2 起抑制作用 1時, 類脂過氧化作用也產(chǎn)生了穩(wěn)定和有毒的產(chǎn)物 1李文鑄、黃文棟等采用逆相蒸發(fā)技術得到了水對生物膜的雙重作用4溶性的 c 602脂質體包結物, 當該包結物與體外培養(yǎng)的人子宮頸癌細胞融合后, 用鹵素燈照射, 發(fā)現(xiàn)對癌生物膜

23、與眾多生命過程密切相關, 而它是由雙層脂和蛋白質組成, 最常見的是卵磷脂. u v 、敏化 劑和氧的光敏作用, 因能產(chǎn)生大量破壞不同決定性生物分子的反應性氧, 造成了生物體系里潛在的破 壞 反 應 1 例 如 在 光 敏 化 作 用 中 產(chǎn) 生 的 過 氧 化 氫(roo ) , 羥基 (o h ) 和單線態(tài)氧 (1o 2 ) 都具有誘導類 脂過氧化作用的能力, 而類脂的過氧化作用能驚人地改變膜的結構和功能, 對有機物產(chǎn)生嚴重后果 1除了膜類脂的過氧化作用, 蛋白質的氧化作用也是 具有強破壞性, 它能夠改變細胞膜的完整, 引起流動性的損失, 膜效能的降低, 對離子滲透性的增加, 這種破壞性的積

24、累最終將導致細胞及細胞中類脂質含 量的釋放等等 1研究表明富勒烯能傳遞電子通過類脂雙層; 能致鈍病毒的被膜和調節(jié)免疫效果. se ra 等人最近報 道富勒烯誘導鼠肝臟微粒體的誘變是通過形成類脂過氧化物產(chǎn)生的 1k am a t 等使用鼠肝臟微粒體作為 模型體系, 評估了由 c 60 (o h ) 18 誘導的對類脂和蛋白質的生物化學的改變12 . 結果表明, 將 c 60 (o h ) 18細胞具有很強的殺傷力13 . 對其殺傷機理的研究,認為同時存在單線態(tài)氧和自由基兩種機制14 . 這一結果使人們有可能用 c 60 及其衍生物修飾的生物膜體系作為癌癥早期診斷和治療的手段 1 因為癌是由于一種

25、以膜為基礎的組織、生物膜在細胞分裂、游動和增殖的過程中起著極其重要的作用, 研究認為, 來自初生腫瘤的轉移細胞進入血液中, 雖然絕大部分都被天然殺傷細胞殺死, 但極少數(shù)癌細胞作為信號細胞在循環(huán)中或在凝塊的癌細胞中游走, 當發(fā)現(xiàn)了適當?shù)倪M攻位置之后, 轉移癌細胞侵入內皮和膜之間的區(qū)域 1 在穿過膜時, 轉移細胞倍增并成為新的腫瘤, 對于長成直徑 0. 5 cm大小的腫瘤, 大約需要910 個細胞, 其中大部分都是潛在性轉移來的, 到這時, 對于有效的治療來說就太晚了, 因此, 治愈癌癥的難題之一就是早期診斷 1c 60 及其衍生物在這方面將具有潛在應用前景 1從以上的例子不難看出, 富勒烯及其衍

26、生物在生物方面的應用, 始終伴隨著溶解性的要求 1 只有 1994-2013 china academic journal electronic publishing house. all rights reserved. 有效地溶解 c 60 或得到可溶性的 c 60 衍生物, 才可能產(chǎn)生理想的生物活性. 同時, 生物體也是一個復雜的 有機體, 從各方面的相互協(xié)調, 相互制約中達到平衡c 60 對 h iv 病毒的抑制, 對自由基的清除, 及對癌細 胞的殺傷等有有利的影響, 亦可能對生物體產(chǎn)生不 利甚至是有害的負作用, 如何最大程度地利用富勒烯及其衍生物趨

27、利避害, 仍然是化學家和生物學家一個挑戰(zhàn)性的任務 14562.p ra to m , b ianco a , m agg in i m7,et a l . syn the sis andcha racte r iza t io n o f the f ir st f u lle rene2p ep t ide. j o rgc h em ,1993, 58: 557825580.8ro s t d , p ra to m , n o ve llo f , et a l. ea sy a cce ss tow a te r2so lub le f u lle rene d e r iva t i

28、ve s v ia 1, 32d ipo la r cyclo add it io n s o f a zom e th ine y lide s to c 60. j o rg c h em , 1996, 61: 907029072.yam ako sh i y n , yagam i t , sueyo sh i s, et a l . a cr i2d inea dduct o f 60 f u lle rene w ith enhanced dn a 2cleav ing9參考文獻:, 1996 , 61: 723627237.a ct iv ity. j o rg c h ema

29、n y z, chen c h b , a nde r so n j l , et a l . se2quence2sp ecif ic m o d if ica t io n o f guano sine in dn a by a c 60 2linked d eo xyo ligo nucleo t ide: ev idence fo r a n o n 2sing le t101ku rz a , h a lliw e ll c m , d av is j j , et a l.a f u lle rene2m o d if ied p ro te in. j c h em s oc c

30、 h em c om m u n, 1998, ( 3) : 4332434.to kuyam a h , yam ago s, n akam u ra e. p ho to inducedb io chem ica l a ciiv ity o f f u lle rene ca rbo xy lic a cid. j1996 , 52 ( 14 ) :o xygen m echan ism. t etrah ed ron,517925189.211ch iang l y , l u f j , l in j t. f ree r ad ica l scaveng2inga ct iv it

31、y o f w a te r2so lub le f u lle reno ls. j c h em s occ h em c om m u n, 1995, (12) : 128321284.kam a t j p , d eva sagayam t p a , m o han h , et a l. effect o f c 60 (o h ) 18 o n m em b rane s o f r a t l ive r m i2 cro som e s d u r ing p ho to sen sit iza t io n. f u l l s ci and t ech ,1998,

32、6 (4) : 663.l iw z, q ia n k x , hu a n g w d , et a l. w a te r so l2ub le c 60 2lipo som e and the b io lo g ica l effect o f c 60 , to h um an ce rv ix cance r ce lls. c h in p hy s l eu , 1994, 11 ( 4 ) :2072210 (ch ).lu c y , ya o s d , zha n g d d. sup ram o lecu la r1993, 115: 791827919.a m c

33、 h em s oc ,3bo u to r ine a s, to kuyam a h , t aka sug i m , et a l .f u lle rene2o ligo nucleo t ideco n juga te s:p ho to induced12sequence2sp ecif ic dn a c leavage. a ng ew c h em in t e de ng 1 , 1994, 33: 246222465.f r iedm an s h , d e cam p d l , s ijbe sm a r p , et a l. inh ib it io n o

34、f the h iv 21 p ro tea se by f u lle rene d e r iva2 t ive s : m o de l b u ild ing s tud ie s and exp e r im en ta l v e r if i2ca t io n. j a m c h em s oc, 1993 , 115: 650626509.s ijbe sm a r , s rdano v g, w ud l f , et a l. syn the sis o f af u lle rene d e r iva t ive fo r the inh ib it io n o

35、 f h iv en 24135141993, 115: 651026512.zym e s. j a m c h em s oc ,chem ist ry o f f u lle rene c 60、c 70.1998, (1) : 126 (ch ).h u a x u e t ong b ao,6to n io lo c , b ianco a , m agg in i m , et a l. a b io act ive, 1994, 37: 45582f u lle rene p ep t ide. j m ed c h ema pp l ica t ion of fulleren e an d its d er iva t ive s in b io logyx iao chun - hua , w u ca i- y in g(co llege o f c h em ist ry and e nv iro nm en t sc ience , w uh an u n ive r si