海南大學(xué)《土壤農(nóng)化分析》實(shí)驗(yàn)步驟.doc

1、土壤農(nóng)化分析實(shí)驗(yàn)操作步驟實(shí)驗(yàn)一：植物樣品的采集根據(jù)單一差異原則，依據(jù)植株的大小、葉片的長(zhǎng)勢(shì)長(zhǎng)相、生長(zhǎng)發(fā)育情況確定適宜 采集的植株。在有效區(qū)分后，在不同的植株的不同方向依次采集樣品N (小/中/大葉采樣量30-50/20-30/15-20 )株。用干凈的毛巾擦凈植物樣品表面的灰塵，剪 掉葉柄，在90C殺青、70C烘干。實(shí)驗(yàn)二：土壤肥力樣品的采集依據(jù)單一差異原則及相應(yīng)的采樣單元的采樣路線在待采樣的土地上進(jìn)行采樣。按 照棋盤(pán)式的采樣路線采集 12個(gè)點(diǎn)位置的土壤(每個(gè)點(diǎn)采樣 100200g)并剔除其 中的有機(jī)物。將12個(gè)位置的土壤樣品混合均勻并稱(chēng)重(約 1.5kg)、風(fēng)干。實(shí)驗(yàn)三：植物樣品的消化稱(chēng)取v

2、 1mm風(fēng)干樣品0.2000 0.2500g于干燥的100mL消煮管中，潤(rùn)濕樣品后加 入濃硫酸8.00mL，低溫消煮至黑色溶液時(shí)去下稍冷卻，加入雙氧水10-15d，繼續(xù)加熱10min，取下重復(fù)以上操作至溶液清亮后繼續(xù)加熱10min取下，冷卻定容。實(shí)驗(yàn)四：植物含氮的測(cè)定比色法：吸取待測(cè)液1.00mL與50mL容量瓶中，加入10%酒石酸鈉2.00mL,搖勻 后，用指示劑外加入法調(diào)節(jié)酸度，加水至約 40mL,搖勻后加入奈氏試劑 2.50mL, 定容，30min后，410nm比色，同時(shí)做空白。標(biāo)準(zhǔn)曲線： 0; 0.25; 0.5; 1.0; 1.5;2.0計(jì)算：N ( %) =p *V*ts*0.00

3、01 /m蒸餾法：吸取待測(cè)液 10.00mL, 10M NaOH 8.0mL , 2% H3B03 5.0mL，蒸餾至 60 70mL,標(biāo)準(zhǔn)酸滴定。計(jì)算：N (%) =( V-V0) *c (1/2H2SO4) *14.0*0.001 /m) *1000 實(shí)驗(yàn)五：植物磷鉀的測(cè)定磷：吸取待測(cè)液2.00mL于50mL容量瓶中，加水至約 30mL，加3滴2, 6-二硝基 酚，用4N NaOH調(diào)至剛顯黃色，加入鉬銻抗5.0mL,定容后30min, 700nm比色。標(biāo)準(zhǔn)曲線：0; 0.05; 0.10.0.20; 0.40; 0.60; 0.80 計(jì)算：P(%) = p *V*ts*0.0001 /m

4、鉀：吸取待測(cè)液2.00mL于50mL容量瓶中，用蒸餾水定容，在火焰光度計(jì)上測(cè)定。標(biāo)準(zhǔn)曲線：0; 1.0; 2.0; 4.0; 8.0 計(jì)算：K (%) = p *V*ts*0.0001 /m實(shí)驗(yàn)六：土壤樣品的制備及含水量的測(cè)定土壤樣品的制備(物理性樣品)：將風(fēng)干的土壤樣品混勻，用四分法分取約250300g 土樣并稱(chēng)量。讓土樣通過(guò)1mm篩子，并對(duì)沒(méi)有通過(guò)1mm篩子的土樣進(jìn)行反 復(fù)研磨。重復(fù)上述步驟，直到土樣中的土粒全部通過(guò)篩子。稱(chēng)量1mm的石砰，記錄重量后棄去。稱(chēng)量v 1mm的土粒，記錄重量后用方格法取10g左右土樣，并使之全部通過(guò)0.25mm的篩子。含水量的測(cè)定：取小型鋁盒在105 C恒溫箱中

5、烘烤約2h,移入干燥器內(nèi)冷卻至室溫。用分析天平稱(chēng)量小型鋁盒的質(zhì)量，稱(chēng)取土樣4.5* 5.5*g于鋁盒中，把鋁盒置于已預(yù)熱至105 2C的烘箱中烘烤6h,取出鋁盒移入干燥器內(nèi)冷卻至室溫， 立即稱(chēng)重。M0烘干鋁盒；M1烘前鋁土； M2烘后鋁土水分(分析基),%= ( M1-M2 ) / ( M1-M0 ) *100水分(干基),%= (M1-M2 ) / (M2-M0 ) *100實(shí)驗(yàn)七：土壤有機(jī)質(zhì)的測(cè)定(K2Cr2O7外加熱法)稱(chēng)取v 0.25mm風(fēng)干土 0.7* 0.8*g于干燥的硬質(zhì)試管中，潤(rùn)濕樣品后加入0.4mol L-1的K2Cr26H2SQ混合液10.00mL,要分散后放入已開(kāi)至 20

6、0C左右的 油浴中(使溫度下降至170180C),準(zhǔn)確煮沸5min，取出稍冷，擦拭試管外油 污，冷卻后，完全轉(zhuǎn)移到 250 300mL三角瓶中(使總體積 6070mL)加鄰啡羅 啉指示劑3d,用標(biāo)準(zhǔn)FeSQ滴定，同時(shí)做空白。計(jì)算：風(fēng)干土換算烘干土：k=1/ (1+w干基)土壤有機(jī)碳：C (g/kg) = (c*10) /V0 ) * (V0-Va) *0.001*3.0*1.1 ) / ( m*k) *1000土壤有機(jī)質(zhì)：M (g/kg ) =C*1.724實(shí)驗(yàn)八：土壤速效磷的測(cè)定(0.03M NH4F 0.025M HCl)稱(chēng)取2.00g風(fēng)干土于干燥的塑料瓶中， 加20.00mL浸提劑(鹽酸

7、一氟化銨)，加塞， 振蕩30min，振蕩結(jié)束后應(yīng)立即干過(guò)濾。吸取濾液 5.00mL于50mL容量瓶中，加0.8M H3B03 10.0mL,搖勻后加水至約 30mL,力口 2, 6-二硝基酚3d,用稀酸或稀堿 調(diào)節(jié)酸度至剛顯黃色，加入鉬銻抗 5.0mL,定容，30min后800nm顯色，同時(shí)做 空白。計(jì)算：P (mg/kg ) = (p *50*20 ) / (m*5*1000 ) *1000= (p *200) /m實(shí)驗(yàn)九：土壤全氮的消化(混合催化劑法)稱(chēng)取v 0.25mm風(fēng)干土 0.3* 0.4*g 于干燥的50mL消煮管中，加入 1.84g混 合催化劑，濕潤(rùn)樣品后加入濃硫酸5.00mL，

8、搖分散后低溫消煮。待溶液為藍(lán)色時(shí)繼續(xù)煮30min (其間搖動(dòng)34次)，取下冷卻定容，同時(shí)做空白。實(shí)驗(yàn)十：土壤有效氮的培養(yǎng)(康惠擴(kuò)散法)稱(chēng)取v 1mm風(fēng)干土 2.00g分散于已選好的擴(kuò)散皿外室，加0.2g磨細(xì)的FeSQ (盡量與土混勻)，加內(nèi)室2.00mL 2% H3B03，沿外緣磨堿性膠后轉(zhuǎn)動(dòng)使蓋子密合。輕 推蓋子使露一條縫，加飽和 A0SC4 2d，加1.07M NaQH 10.00mL,迅速密合蓋子， 并固定后放入40 C培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h，同時(shí)做空白。回收率實(shí)驗(yàn)：100 口 g/mL NH4+ N 10mL代替樣品實(shí)驗(yàn)一：土壤全氮的蒸餾及堿解氮的測(cè)定全氮的蒸餾：吸取待測(cè)液 20.00mL

9、, 10M NaQH 14.0mL, 2% H3B03 5.0mL,蒸餾至 5060mL，標(biāo)準(zhǔn)酸滴定。計(jì)算：N (g/kg) = (V1-V0) *c (1/2H2SQ4) *14.0*0.001*ts ) /m) *1000堿解氮的測(cè)定：將已吸收完全的樣品取出，小心揭下蓋子，墊高培養(yǎng)皿，用小玻 璃棒攪動(dòng)內(nèi)室，標(biāo)準(zhǔn)酸滴定。計(jì)算：回收率=(c* (V-V0) *14.0) /100*10*0.001 ) *100%堿解氮測(cè)定：N(mg/kg ) = (c* (V-V0) *14.0 ) /m ) *1000堿解氮含量：N (mg/kg ) =N/回收率實(shí)驗(yàn)十二：土壤速效鉀及 pH的測(cè)定速效鉀：稱(chēng)

10、取v 1mm風(fēng)干土 2.00g于干燥的塑料瓶中，加入 20.00mL pH=7.0 1MNH4OAC溶液，加塞，振蕩 30min后立即干過(guò)濾，濾液上機(jī)測(cè)定，同時(shí)做空白。標(biāo)準(zhǔn)曲線：0; 2; 4; 8; 16; 24; 32 計(jì)算：K (口 g/kg) =p * (20.00/2.00)PH:稱(chēng)取v 1mm風(fēng)干土 10.00g于50mL燒杯中，加 H2O 25.00mL,攪拌1min，靜 置30min，測(cè)定，同時(shí)預(yù)熱儀器。實(shí)驗(yàn)十三：植物樣品的灰化稱(chēng)取v 1mm風(fēng)干植物樣品0.45* 0.50*g于30mL干燥的瓷坩堝中，鋪平后預(yù) 灰化至無(wú)煙，放入已開(kāi)至300C左右的馬福爐中，500C 30C繪畫(huà)

11、2h,取出冷卻，2d水潤(rùn)濕樣品后沿潤(rùn)濕位置加入10.00mL 10%HC,充分?jǐn)嚢韬蠹訜嶂蠓校脽醿A瀉法過(guò)濾于100mL容量瓶中，另加10.00mL HCl充分溶解后過(guò)濾，并用水洗 干凈殘?jiān)蠖ㄈ?，同時(shí)做空白。實(shí)驗(yàn)十四：土壤有效硼的測(cè)定稱(chēng)取v 1mm風(fēng)干土 10.0g于250300mL三角瓶中，加水20.0mL,無(wú)損煮沸5min ,取下冷卻后2滴1M CaC2干過(guò)濾，吸取濾液1.00mL于100mL的瓷蒸發(fā)皿中，加 入4.00mL姜黃素，55 1C水浴蒸至無(wú)水后繼續(xù)蒸 5min，加入95%乙醇20.00mL 溶解(并過(guò)濾)后550nm比色，同時(shí)做空白。標(biāo)準(zhǔn)曲線：0; 0.05; 0.10; 0

12、.20; 0.40; 0.80實(shí)驗(yàn)十五：植物中鈣鎂鉀的測(cè)定鈣：吸取待測(cè)液10.00mL于50mL容量瓶中，加入 5% LaC2 1.00mL,用水定容，原子吸收法測(cè)定。標(biāo)準(zhǔn)曲線：0; 1.00 ; 2.00; 4.00; 8.00; 16.00鎂：吸取待測(cè)液1.00mL于50mL容量瓶中，加入 5% LaC2 1.00mL，用水定容，原 子吸收法測(cè)定。標(biāo)準(zhǔn)曲線：0; 0.05; 0.10 ; 0.20; 0.40; 0.60鉀：吸取待測(cè)液10.00mL于50mL容量瓶中，用水定容，火焰光度法測(cè)定。標(biāo)準(zhǔn)曲線：0; 2.0; 4.0; 8.0; 16.0 ; 32.0計(jì)算：M (%) =p *V*

13、ts*0.0001 /m實(shí)驗(yàn)十六：尿素中氮的測(cè)定稱(chēng)取待測(cè)樣品 0.40* 0.50*g于100mL消煮管中，濕潤(rùn)樣品后加入濃硫酸 5.00mL,搖勻后低溫消煮。待消煮管內(nèi)有“白煙”時(shí)繼續(xù)煮1520min (其間搖動(dòng)23次)，取下冷卻定容。吸取待測(cè)液10.00mL, 10M NaOH 5.0mL , 5% H3B0325.0mL,蒸餾至 100 110mL,標(biāo)準(zhǔn)酸(0.3846mol L-1)滴定。計(jì)算：N (g/kg) = (c* (V-V0) *14.*0.001*ts ) /m ) *1000實(shí)驗(yàn)十七：過(guò)磷酸鈣中有效磷的測(cè)定稱(chēng)取v 0.15mm樣品1.0*g于50mL燒杯中，加H2O 25mL，充分研磨后傾瀉法過(guò)濾于已有1 : 1 HNQ 5.00mL的250mL容量瓶中，再用H2O 25mL研磨殘?jiān)瑑A瀉法過(guò)濾，宮重復(fù)3次后將殘?jiān)耆D(zhuǎn)移到濾紙上，用H2O充分洗滌殘?jiān)了?00mL