Qubit標準操作規(guī)程

1、Qubit ? 3.0 熒光定量儀 操作與維護規(guī)程一、目的使 Qubit ? 3.0 熒光定量儀能夠正確和正常的使用，保證系統(tǒng)的正常運行的準確性和精 密度，以獲得準確可靠的檢驗結果。二、適用范圍可用于定量的DNA,RNA,micro RNA和蛋白質，使用高度敏感和準確的熒光技術量子位定 量分析三、工作原理Qubit ?熒光定量儀采用熒光染料與特異性的靶分子結合。 這些熒光染料只有與這些靶分子結 合時才會發(fā)射熒光信號，即使在濃度很低時。 Qubit ?3.0 熒光定量儀比傳統(tǒng)的紫外吸光法更 加準確。以往的紫光吸光法不具選擇性，測量260nm所有分子的吸光值一一包含 DNA RNA 蛋白質，游離核

2、苷酸或多余的鹽離子。此外， 紫外分光光度計的靈敏度不足，無法完成低濃 度DNA和RNA的精確定量。使用 Qubit ?熒光定量儀，將大大提升準確性。因為Qubit ?分析試劑盒里的熒光染料只與樣品中的特異分子結合一一DNA,RNA或蛋白，避免不準確測量帶來的重復工作四、職責實驗室負責該系統(tǒng)的日常維護保養(yǎng)，包括每周保養(yǎng)，以及需要時的保養(yǎng)工作。1. 保證儀器設備在計量有效期內使用，并配合完成計量相關工作。2. 負責儀器設備的正確使用、妥善保管和精心維護。3. 負責儀器設備的日常保養(yǎng)、定期校準。五、儀器特點1. 快速和高度精確的定量的 DNA，RNA 和蛋白質樣品少于 5 秒。2. 高水平的準確性只

3、有 1 20卩L的樣品，甚至用很稀的樣品3. 使用染料選擇性的雙鏈 Dna 、 RNA 或蛋白質樣品中的污染物的影響降至最低。4. 大型、 先進的彩色觸摸屏為簡單工作流導航的。5. 以圖形方式顯示達 20 的數(shù)據(jù)點6. 可以個性化儀器用戶界面將顯示只有常用的化驗六、使用要求1. 不要在陽光直射下操作儀器2. 樣品處理過程中需帶無粉橡膠手套3. 在室溫使用的儀器(22-28 oC)4. 測量之前已經(jīng)進行校準七、操作指南儀器外觀111 USB 電纜7.1儀器開啟和關閉1. 該儀器在平坦的地方，水平,干燥的表面2. 將提供的電源線的一端插入 Qubit? 3.0熒光計3. 電源線另一端附加適當?shù)牟孱^

4、適配器的，插在合適的電源上4. 儀器自動開啟，首先顯示閃屏，然后主屏幕5. 要關閉Qubit ? 3.0熒光計，直接拔下電源7.2儀器開機后，主屏幕自動顯示，可以在屏幕上選擇以下功能：1. 選擇一個定量測定：dsDNA, RNA, oligo (ssDNA), 蛋白質,或離子球2. 選擇熒光計模式3. 訪問以前保存的數(shù)據(jù)4. 系統(tǒng)設置(*)InBlrumetil settings7.3 屏幕設置(Instrumentsett ings )1. 睡眠模式2. 亮度設置3. 日期時間設置4. 恢復設置5. 語言設置Sflttings7.3.1設置睡眠模式：a系統(tǒng)默認為10分鐘進入睡眠模式，如要調整

5、該項，在屏幕上點擊Sleep mode ”b. 點擊文本框中得數(shù)字，然后更改，儀器設置范圍為160分鐘c. 設置好后點擊保存返回設置界面Sleep rnotle曲e indrunwil ic useli*Mnoi 小 urUEnableSleep Mode After7.3.2設置亮度a. 屏幕上點擊Brightness ”b. 移動滑塊按鈕向上或向下調整顯示器的亮度c. 設置好后點擊保存返回設置界面(*)Bright 噸 ssMjusi Ijhe briqhCnM olyqur ctbitaCancel7.3.3設置時間日期a. 屏幕上點擊Date/Time ”b. 選著日期時間格式然后進入

6、下一步c. 點擊相應的文本框進行設置d. 設置完成后點擊保存返回設置界面Dale / TimeChaise礎時訊色formatMM DD VYVi . DO MM YYVY MM DDChoose a Eim matU HCiiUr Dale / TimeChoo&e ” da博2di06ZS13Choose a timeOH54 Iothw7.3.4恢復設置：恢復出廠設置，刪除所有保存的數(shù)據(jù) 該選項請慎重選擇7.3.5語言設置a. 屏幕上點擊Language”b. 選擇相應的選項,用戶定義的儀器設置和定制的化驗,L*n簪卿Chaotfie 注ngub卑 you wantyour inslru

7、nrwnl:料 display(_lHMuni鉗c. 點擊保存返回設置界面7.4校準儀器工作原理是先使用標準濃度的試劑生成熒光值和濃度二維坐標軸，檢測時測出溶液的熒光值，然后根據(jù)熒光值來換算濃度，所以進行測驗時需要選擇新校準或使用以前保存的校準（如該功能第一次使用或更換檢測試劑盒就需重新校準）741點選需要檢測的項目，進入下一級目錄Choose an assay扌 dsDNA： Broad -ar?前的或新進行校準，這里選擇進行校準742點選試驗，如第一次選擇會直接提示進行校準，如以前進行過校準，則會提示使用以10佰； dsDMA- High sensilivilyL#il r4id 口鮎“阿

8、疊743出現(xiàn)下面界面，將試劑盒中用于校準的標準品1#放入樣品室，點擊Readsta ndard大約3秒，讀取元成進入到下一步，放入標準品 還需放入標準品3#） oisDNA Hih sensrtwfiyInsert 前mnd 萌d 22#,點擊Read standard ”（蛋白質校準744校準完成后可以不將標準品 2#取出直接檢測濃度，查看校準是否成功。如果校準成功 軟件顯示讀取標準的屏幕，顯示熒光與濃度圖。d5DNA： High sensitive,軟件在熒光與濃度圖：標準數(shù)據(jù)點被一條線連接。（圓圈表示正確的標準）如果校驗不成功 顯示“校準誤差”消息，需重新進行校準7.5樣品檢測7.5.1

9、將樣品與反應液混合（混合方案具體見試劑盒）孵化一段時間（DNA和RNA為2分鐘,蛋白質需要15分鐘）7.5.2在閱讀標準屏幕，點擊運行樣本dsDMA： High wnsilivrtyRFU Valuer函1246.23勻!和加 22545i.50fill Ifl IflD 20Q_GOfl AIK1 hHlCancelmmh7.5.3在樣本體積屏幕，選擇樣本體積和單位a. 觸摸+和-按鈕在方向盤上選擇樣本體積添加到試驗管（1 - 20山）。b. 從下拉菜單中，選擇的單位輸出樣本的濃度ngmL v7.5.4將樣品管插入到樣品室，關上蓋子，然后點擊讀取管。大約需要3秒Reading tube濃度7

10、.5.5在屏幕上就會顯示所需檢測的7.5.6多個樣品檢測：a. 相同體積和濃度單位：只需更換樣品室中樣品管，點擊讀取管b. 不同體積和濃度單位：重復上訴步驟更改體積和濃度單位7.5.7檢測濃度存在一定范圍，如超出檢測范圍會顯示“超出范圍7.5.7可以點擊屏幕上左右箭頭進入體積濃度設置界面和熒光與濃度圖1. 空心圓表示進行校準的標準品2. 大的灰色圓圈代表最新樣品3. 藍色圓圈代表在檢測范圍內4. 黃色圓圈代表在拓展范圍內5. 紅色圓圈代表在儀器檢測范圍外7.6熒光模式可以選擇熒光模式來作為mini熒光計使用（光源通道藍色 （470 nm） 或紅色（635 nm）761選擇相應的選項Dhao&e

11、 an 自軸y護0lonSubwe監(jiān) 一主界面點擊Fluorometer ”，進入下一級, Chuase excitatiOT7.6.2放入樣品，點擊讀取管6 ue 470nm|Insert asm ole7.6.3選擇藍光時，顯示的結果有藍光和紅光檢測數(shù)值，選擇紅光時，只顯示紅光的檢測數(shù) 值7.7數(shù)據(jù)管理Qubit? 3.0機子本身可以存儲1000樣本數(shù)據(jù)，對保存的數(shù)據(jù)，可以進行以下操作:a. 針對每個樣本查看詳細的數(shù)據(jù)b. 重命名數(shù)據(jù)文件c. 可以保存數(shù)據(jù)，導出到USB存儲器或電腦中d. 刪除數(shù)據(jù)文件7.7.1從濃度檢測界面、熒光與濃度圖界面、主屏幕點擊“Data”7.7.2出現(xiàn)數(shù)據(jù)屏幕，

12、點擊想查看的數(shù)據(jù)集7.7.3點擊想要查看的數(shù)據(jù)，就會出現(xiàn)以下詳細的數(shù)據(jù)列表ata detailsSample 1SampLe 101372014 9:40amOriqirifll Mnnpie ccncenlriilwiri 1.17rang/rrilnq/ifrildmpLe RF U valuer3砂活1Landard&fead1.n*dnrd 忌La5L loifidjni ne-ad：23/14amSample u&e*d (amavrit)DtLuUdr lattor13JExciiaitjonBlueEmisston channelGrwn7.7.4如需更改數(shù)據(jù)顯示名稱，在詳細數(shù)據(jù)界面點擊數(shù)據(jù)名（上圖紅色框），在彈出的界面輸入想要更改的即可7.7.5如需導出數(shù)據(jù)，將 USB存儲器插入 Qubit ? 3.0USB接口上，如果想導出的是數(shù)據(jù)集,則勾選該數(shù)據(jù)集；如需導出的是單個的數(shù)據(jù)，則點擊數(shù)據(jù)集進入再勾選需要導出的數(shù)據(jù)Eipoct datatr/Tinw3r iMvrirsdilNfi. Hiq 艮* 1打恥妙軒:巧的PtnfiMp為diilNA High.iOSH備尬1臥5 *1(RNA側Q印卩