腸道腺病毒檢測(cè)及臨床意義

1、整理ppt1 整理ppt2 防治原則 腸道腺病毒 診斷 l致病性與 l免疫性 臨床意義 生物學(xué)特征 定義及 血清型 主要 內(nèi)容 整理ppt3 整理ppt4 v 腸道病毒腸道病毒 ( (小小RNARNA病毒科病毒科) ) v 輪狀病毒輪狀病毒 v 腸道腺病毒腸道腺病毒 呼腸病毒科呼腸病毒科 v 杯狀病毒杯狀病毒 v 星狀病毒星狀病毒 整理ppt5 v2020世紀(jì)世紀(jì)5050年代初期，一位科學(xué)家對(duì)手術(shù)切除的人扁年代初期，一位科學(xué)家對(duì)手術(shù)切除的人扁 桃體增殖腺小塊進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)意外發(fā)現(xiàn)在培養(yǎng)的桃體增殖腺小塊進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)意外發(fā)現(xiàn)在培養(yǎng)的 腺樣組織內(nèi)潛伏著一種未知的病毒，這種病毒可引腺樣組織內(nèi)潛伏著一

2、種未知的病毒，這種病毒可引 起培養(yǎng)的單層細(xì)胞發(fā)生病變。由于這種病毒被首先起培養(yǎng)的單層細(xì)胞發(fā)生病變。由于這種病毒被首先 發(fā)現(xiàn)于腺樣組織中，發(fā)現(xiàn)于腺樣組織中，19561956年國際病毒命名委員會(huì)將年國際病毒命名委員會(huì)將 這類病毒命名為腺病毒，這類病毒命名為腺病毒，19621962年正式命名為腺病毒年正式命名為腺病毒 科科 整理ppt6 腺病毒血清型 目前，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)有100多種類型的腺病毒可以感染 人、哺乳動(dòng)物和禽類，其中能感染人類的腺病毒 （人腺病毒）就有50多型，把人腺病毒的41個(gè)血 清型分為A-F 6個(gè)組： A-E組：各型病毒均能在人的組織細(xì)胞 (如腎細(xì)胞) 常規(guī)培養(yǎng)中增殖，稱為普通腺病毒；

3、F組（40和41型）：是從糞便中發(fā)現(xiàn)，用常規(guī) 細(xì)胞培養(yǎng)不能增殖的腺病毒，僅在選擇性細(xì) 胞上生長，稱為腸道腺病毒。 整理ppt7 流行性 腺病毒胃腸炎廣泛分布于世界各地，在小兒，發(fā)病 情況僅次于輪狀病毒性腸炎。最小發(fā)病年齡為1月， 絕大多數(shù)發(fā)生于3歲以下的嬰幼兒。Ad-40主要感染 1歲左右嬰兒，Ad-41則感染稍大的幼兒，全年均可 發(fā)病，但腺病毒性胃腸炎一般呈散發(fā)性。 整理ppt8 v腸道腺病毒通過消化道傳播，主要原 因是因?yàn)闃渫粻罴?xì)胞缺乏腺病毒受體， 不能感染附近淋巴結(jié)。 流行性 整理ppt9 v腺病毒胃腸炎的潛伏期約10天，主要表現(xiàn)為腹瀉， 量少或多，呈水樣便或稀便，少數(shù)可排出粘液，病 程

4、4-8天，常伴嘔吐。部分患者有呼吸道癥狀，少數(shù) 患者發(fā)熱，病程多自限，排毒時(shí)間約1周。某些患者 失水較嚴(yán)重，個(gè)別重度失水者可死亡。 流行性 整理ppt10 v各型腺病毒所致腹瀉持續(xù)時(shí)間不等，以腸腺 病毒胃腸炎腹瀉時(shí)間最長，大多患者有嘔吐， 持續(xù)1-2天，少數(shù)有發(fā)熱。非腸型腺病毒腹瀉 患者發(fā)熱較多。約20腺病毒腸炎患者有呼 吸道癥狀。 流行性 整理ppt11 整理ppt12 整理ppt13 培養(yǎng)特性： 人類腺病毒無敏感動(dòng)物，也不能在雞胚中 生長。但能在來源于人的多種細(xì)胞培養(yǎng)中 增殖，引起明顯CPE：細(xì)胞腫脹變圓、集聚 成葡萄串狀，并可在感染的細(xì)胞核內(nèi)形成 嗜堿性包涵體。 生物學(xué)性狀生物學(xué)性狀 整

5、理ppt14 v腺病毒外膜無類脂質(zhì)包膜，故能耐乙醚和氯 仿等脂溶劑；并能耐受蛋白酶及膽汁的作用。 但不耐熱在室溫中可存活10d以上， 5630min滅活。 生物學(xué)性狀生物學(xué)性狀 整理ppt15 v突出小結(jié)和六鄰體都必須插入細(xì)胞表面的受體分子， 病毒才能被細(xì)胞攝入，被內(nèi)體包裹。 v在內(nèi)體的酸性環(huán)境中降解，進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)，將DNA釋放 到細(xì)胞核內(nèi)。 v腺病毒利用自身的DNA聚合酶進(jìn)行復(fù)制，先對(duì)一條親 代鏈進(jìn)行互補(bǔ)復(fù)制，取代第二條親代鏈，然后DNA聚 合酶再對(duì)第二條親代鏈進(jìn)行復(fù)制，因此，病毒 DNA 的兩條鏈都是連續(xù)的。 整理ppt16 整理ppt17 v因?yàn)橄俨《緩?fù)制緩慢，感染細(xì)胞容易受到宿 主防御系

6、統(tǒng)的攻擊，因此腺病毒有1/4的基因 組用來對(duì)付宿主的防御系統(tǒng)。 v通過釋放兩種E1B蛋白來抑制細(xì)胞的凋亡，使 受感染的細(xì)胞能支持到病毒完成復(fù)制。 致病性和免疫性致病性和免疫性 整理ppt18 v感染后期病毒復(fù)制組裝完成時(shí)，腺病毒產(chǎn)生 病毒死亡蛋白給細(xì)胞致命一擊徹底釋放病毒。 v腺病毒制造VARNA來免遭干擾素的破壞，通過 結(jié)合PKR，使之失活，使病毒蛋白質(zhì)合成。 整理ppt19 v阻止MHC-I類分子在病毒感染細(xì)胞上表達(dá) 以阻止CTL的攻擊。 v腺病毒合成RID蛋白結(jié)合病毒感染細(xì)胞的 死亡受體以逃避天然殺傷細(xì)胞的攻擊。 v病毒利用自身的聚合酶進(jìn)行基因組復(fù)制， 增加了抗原漂移的機(jī)會(huì)。 整理ppt

7、20 v腺病毒對(duì)腺病毒對(duì)呼吸道呼吸道、胃腸道、胃腸道、尿道尿道和和膀胱膀胱、 眼、眼、肝臟肝臟等均可感染，人腺病毒約等均可感染，人腺病毒約1/31/3 的已知血清型通常與人類疾病相關(guān)，但的已知血清型通常與人類疾病相關(guān)，但 一種血清型可引起不同的臨床疾患；相一種血清型可引起不同的臨床疾患；相 反，不同血清型也可引起同一種疾患。反，不同血清型也可引起同一種疾患。 整理ppt21 v呼吸道感染的典型癥狀是咳嗽、鼻塞和咽炎，同時(shí)伴呼吸道感染的典型癥狀是咳嗽、鼻塞和咽炎，同時(shí)伴 有發(fā)熱、寒戰(zhàn)、頭痛和肌肉有發(fā)熱、寒戰(zhàn)、頭痛和肌肉 痛等，包括以下痛等，包括以下4 4種不同種不同 的綜合征：的綜合征： v1

8、1急性發(fā)熱性咽喉炎由急性發(fā)熱性咽喉炎由C C組病毒引起，出現(xiàn)咳嗽，鼻組病毒引起，出現(xiàn)咳嗽，鼻 塞、發(fā)熱和咽喉部潰瘍等癥狀，這些表現(xiàn)難以與其他塞、發(fā)熱和咽喉部潰瘍等癥狀，這些表現(xiàn)難以與其他 病毒引起的輕型呼吸道感染鑒別病毒引起的輕型呼吸道感染鑒別 v2 2咽結(jié)膜熱多由咽結(jié)膜熱多由B B組腺病毒組腺病毒3 3和和7 7型所致，愈后尚好，型所致，愈后尚好， 一般無后遺癥。一般無后遺癥。 v3 3急性呼吸道疾病急性呼吸道疾病 多由腺病毒多由腺病毒4 4、7 7型引起，也可見型引起，也可見 于于3 3型型 v4 4、肺炎、肺炎 腺病毒肺炎約占兒童期肺炎的腺病毒肺炎約占兒童期肺炎的10%10%，多由腺病，

9、多由腺病 毒毒3 3、7 7型引起；在青年人腺病毒肺炎的病死率為型引起；在青年人腺病毒肺炎的病死率為8%8% 10%10% 整理ppt22 v腺病毒致輕型眼部感染是呼吸道感染和咽喉炎腺病毒致輕型眼部感染是呼吸道感染和咽喉炎 的并發(fā)癥。濾泡性結(jié)膜炎可由許多型腺病毒引起，的并發(fā)癥。濾泡性結(jié)膜炎可由許多型腺病毒引起， 類似于衣原體性結(jié)膜炎，而且為自限性。由腺病毒類似于衣原體性結(jié)膜炎，而且為自限性。由腺病毒 8 8、1919和和3737型引起的角結(jié)膜炎為重型感染，具高傳型引起的角結(jié)膜炎為重型感染，具高傳 染性，以急性結(jié)膜炎開始，擴(kuò)至耳前淋巴結(jié)，隨后染性，以急性結(jié)膜炎開始，擴(kuò)至耳前淋巴結(jié)，隨后 發(fā)生角膜

10、炎。發(fā)生角膜炎。 v胃腸炎胃腸炎 v許多腺病毒在腸道細(xì)胞中復(fù)制，隨糞便排出，許多腺病毒在腸道細(xì)胞中復(fù)制，隨糞便排出， 但大多血清型與胃腸道疾病無關(guān)。而但大多血清型與胃腸道疾病無關(guān)。而4040型和型和4141型腺型腺 病毒可引起嬰幼兒與年少（病毒可引起嬰幼兒與年少（4 4歲以下）兒童的胃腸歲以下）兒童的胃腸 炎，致腹痛、腹瀉。炎，致腹痛、腹瀉。C C組腺病毒能引起某些嬰幼兒組腺病毒能引起某些嬰幼兒 腸套疊。腸套疊。 整理ppt23 v腺病毒腺病毒1111、1212型能引起兒童急性出血性膀胱炎，尿中型能引起兒童急性出血性膀胱炎，尿中 出現(xiàn)病毒。出現(xiàn)病毒。3737型可引起女性宮頸炎和男性尿道炎，常型

11、可引起女性宮頸炎和男性尿道炎，常 由性傳播感染。在免疫功能低下者可引起偶發(fā)或嚴(yán)重由性傳播感染。在免疫功能低下者可引起偶發(fā)或嚴(yán)重 的病毒感染，尤其在器官移植病人中發(fā)生嚴(yán)重呼吸道的病毒感染，尤其在器官移植病人中發(fā)生嚴(yán)重呼吸道 感染和病毒性肝炎，多由感染和病毒性肝炎，多由1 1、5 5和和7 7型腺病毒引起。艾滋型腺病毒引起。艾滋 病患者可感染多種血清型腺病毒，并能出現(xiàn)抗原性介病患者可感染多種血清型腺病毒，并能出現(xiàn)抗原性介 于中間的雜合型毒株，而且常為致死性腺病毒感染。于中間的雜合型毒株，而且常為致死性腺病毒感染。 主要原因是腺病毒的主要原因是腺病毒的E1AE1A蛋白可反式激活蛋白可反式激活HIVH

12、IV的轉(zhuǎn)錄，的轉(zhuǎn)錄， 加速加速HIVHIV的復(fù)制。臨床發(fā)現(xiàn)的復(fù)制。臨床發(fā)現(xiàn)37%37%的艾滋病患者病毒性腹的艾滋病患者病毒性腹 瀉是由腺病毒所致。瀉是由腺病毒所致。 整理ppt24 免疫性免疫性 腺病毒感染后，產(chǎn)生特異性抗體，對(duì)同型病 毒的感染有保護(hù)作用，免疫力持久。 致病性和免疫性致病性和免疫性 整理ppt25 整理ppt26 v病原分離培養(yǎng)后, 應(yīng)用亞屬特異的免疫熒光 測(cè)定法、放射免疫測(cè)定、ELISA、DNA雜交等 進(jìn)行腺病毒亞屬的鑒定。再應(yīng)用型特異性血 清進(jìn)行中和試驗(yàn)。 v缺點(diǎn)：不僅費(fèi)時(shí)費(fèi)力, 結(jié)果也不夠理想 整理ppt27 病毒分離病毒分離： 標(biāo)本（患者咽喉、眼分泌物、糞便等） 敏感細(xì)

13、胞 CPE 分離株為抗原，用抗病毒診斷血清作CF試驗(yàn)， 確定是否為腺病毒；用已知腺病毒型特異性免疫血清 做NT試驗(yàn)可定型。 亦可用直接或間接免疫熒光方法，檢測(cè)臨床診斷 疑為腺病毒肺炎的嬰幼兒鼻咽部脫落細(xì)胞中的腺病毒 抗原。 微生物學(xué)檢查法微生物學(xué)檢查法 整理ppt28 采取患者早期和恢復(fù)期雙份血清做CF試驗(yàn)、HI 試驗(yàn)及NT試驗(yàn)?；謴?fù)期血清抗體滴度比早期 增長4倍以上有診斷意義。其中CF試驗(yàn)最為常 用。 微生物學(xué)檢查法微生物學(xué)檢查法 整理ppt29 ELISAELISA方法方法 檢測(cè)ADV抗原、抗體操作簡(jiǎn)單、快速、特異性強(qiáng)，有助于臨床 對(duì)疾病的早期明確診斷，結(jié)果判定用簡(jiǎn)單的分光光度計(jì)，客 觀準(zhǔn)

14、確，3 4h即可出結(jié)果，可大批檢測(cè)，陽性率遠(yuǎn)優(yōu)于 病毒分離，亦優(yōu)于血清學(xué)技術(shù)，適用于流行病學(xué)調(diào)查。IgM 產(chǎn)生早于IgG，有利于早期診斷，IgG產(chǎn)生稍晚，雖不能早期 診斷，但相當(dāng)一部分在7一14天內(nèi)檢測(cè)單份血IgG陽性再結(jié)合 臨床也可診斷。 整理ppt30 胸部胸部X X線及線及CTCT影像表現(xiàn)影像表現(xiàn) 肺內(nèi)表現(xiàn)以多肺葉受累的肺實(shí)變?yōu)橹饕卣?，其?團(tuán)簇狀影尤為突出，此類團(tuán)簇狀影有較明顯的特征 性，常密度較高、邊緣模糊、強(qiáng)化均勻。肺外表現(xiàn) 以胸膜增厚和少量胸腔積液為主，少數(shù)患者出現(xiàn)縱 隔氣腫或氣胸。小氣道改變多見。 整理ppt31 vAlland 和 Saitoh-Inagawa 在六鄰體 基

15、因的- 管狀物形成 P1區(qū)設(shè)計(jì)了一 對(duì)引物，應(yīng)用 PCR 結(jié)合 RFLP, 即將腺 病毒的特定序列用 PCR 擴(kuò)增后, 其產(chǎn) 物再用限制性內(nèi)切酶進(jìn)行酶切圖譜分析 v優(yōu)點(diǎn)：法分辨率高、重復(fù)性好、簡(jiǎn)單快 速 整理ppt32 v腺病毒抗原檢測(cè)試劑盒（膠體金法）陽性率 3.7% （12/322）平均年齡：8月齡，最大15 月齡，最小4月齡。北京萬泰 vPCR-熒光探針（EV71、腸道病毒通用引物、 柯薩奇病毒）陽性率12.5%（1/8） 湖南 圣 湘 整理ppt33 整理ppt34 v腺病毒感染主要在冬春季流行，通過呼吸道腺病毒感染主要在冬春季流行，通過呼吸道 和接觸傳播，其預(yù)防措施和預(yù)防其他呼吸道和

16、接觸傳播，其預(yù)防措施和預(yù)防其他呼吸道 傳染病相似，主要是勤洗手，勤消毒，避免傳染病相似，主要是勤洗手，勤消毒，避免 接觸患者及其呼吸道飛沫；平常多飲水，多接觸患者及其呼吸道飛沫；平常多飲水，多 吃蔬菜和水果，注意鍛煉身體；室內(nèi)多通風(fēng)，吃蔬菜和水果，注意鍛煉身體；室內(nèi)多通風(fēng)， 保持清潔；冬春流行季節(jié)盡量少去人員密集保持清潔；冬春流行季節(jié)盡量少去人員密集 的公共場(chǎng)所，外出時(shí)戴口罩，以防感染。的公共場(chǎng)所，外出時(shí)戴口罩，以防感染。 防防 治治 原原 則則 預(yù)防預(yù)防 整理ppt35 正在使用和試用的疫苗有甲醛滅活疫苗和 減毒活疫苗。但因腺病毒對(duì)新生地鼠有致癌作 用，人們對(duì)于疫苗的作用難免有疑慮。最近有 人研制腺病毒衣殼亞單位疫苗，可解決疫苗的 安全性問題。 目前尚無特效治療方法 防防 治治 原原 則則 疫苗 整理ppt36 v腺病毒腸炎病情不重，一般不治自愈。主要 是對(duì)癥治療及必要的支