提高移植物抗白血病效應(yīng)的研究進(jìn)展

1、DOC 格式論文，方便您的復(fù)制修改刪減提高移植物抗白血病效應(yīng)的研究進(jìn)展(作者：?jiǎn)挝唬亨]編：)【關(guān)鍵詞】 干細(xì)胞移植；移植物抗白血?。凰拗骺挂浦参锓磻?yīng)移植物抗白血病(graft versus leukemia，GVL效應(yīng)指對(duì)惡性 血液疾病進(jìn)行異基因干細(xì)胞移植(allo-HSCT)后所產(chǎn)生的一種重要 的免疫介導(dǎo)現(xiàn)象1。這種反應(yīng)能有效清除微小殘留病灶，減少腫瘤 的復(fù)發(fā)率，使患者得以持續(xù)緩解甚至完全治愈。allo-HSCT是治療惡 性血液系統(tǒng)疾病的有效手段，但移植后腫瘤復(fù)發(fā)和移植物抗宿主病(GVHD是病人存活率的主要障礙。人們發(fā)現(xiàn)allo-HSCT后發(fā)生GVHD 的病人腫瘤復(fù)發(fā)率低，而自體或同基因干細(xì)

2、胞移植可不發(fā)生GVHD但移植后腫瘤復(fù)發(fā)率高，長(zhǎng)期無(wú)病生存不到50%從而認(rèn)為allo-HSCT 中存在著GVL效應(yīng)2。GVL是指 allo-HSCT后供者T細(xì)胞通過(guò)與腫 瘤表面抗原發(fā)生免疫應(yīng)答而清除白血病細(xì)胞的效應(yīng)。GVHD中有GVL效應(yīng)，而GVL可不依賴于GVH3。如何提高移植后 GVL效應(yīng)，同 時(shí)避免GVHD當(dāng)今研究的熱點(diǎn)問題，現(xiàn)綜述如下。1用細(xì)胞因子特異性誘導(dǎo)GVL效應(yīng)細(xì)胞因子在免疫反應(yīng)的激活和調(diào)節(jié)中起關(guān)鍵作用，研究表明:37,某些細(xì)胞因子能抑制和殺傷腫瘤細(xì)胞，且對(duì)正常的造血干 細(xì)胞(HSC不但毫無(wú)影響，甚至還可以促進(jìn)其增殖，據(jù)此可研究出 誘導(dǎo)GVL效應(yīng)的方法。在GVL中應(yīng)用最早的細(xì)胞因子

3、是細(xì)胞白介素-2(IL-2 )，它能活化T細(xì)胞、NK細(xì)胞，促進(jìn)和增強(qiáng)其殺傷溶解白血病 細(xì)胞的能力，誘導(dǎo)腫瘤壞死因子(TNF、干擾素(IFN)、粒單系集落 刺激因子(M-CSF的釋放，并與這些細(xì)胞因子相互作用發(fā)揮GVL效應(yīng)。這可能是形成GVL效應(yīng)的基礎(chǔ)。Leshem等3用鼠AML模型探討在allo-HSCT受體內(nèi)GVL 效應(yīng)的誘導(dǎo)機(jī)制，研究重組白細(xì)胞介素-2 (rIL-2 )增強(qiáng)GVL效應(yīng)和 細(xì)胞毒性T淋巴前體(CTLp細(xì)胞增長(zhǎng)頻率的關(guān)系。將 AML鼠負(fù)荷 SJL/J (H-2s)并經(jīng)致死量照射后，植入骨髓細(xì)胞(BMC和脾細(xì)胞(SC) 的混合物(取自正常的同基因或異基因鼠)，為增強(qiáng)GVL效應(yīng)，移

4、植 當(dāng)天開始腹腔內(nèi)注射rIL-2 (1.2 xiO5IU/ml )，連續(xù)3天。從負(fù)荷 SJL/JAML鼠提取SC輸注給第二受體鼠，用次要組織相容性抗原(mHAgS不同的同基因/異基因BMC聯(lián)合SC解救，結(jié)果這些受鼠全 部死于白血?。欢胷IL-2體內(nèi)激活的BMC聯(lián)合SC解救的受鼠卻沒 有并發(fā)白血病。與體內(nèi)實(shí)驗(yàn)相一致，體外用 rIL-2 (6X 103IU/ml ) 培養(yǎng)SC4天，發(fā)現(xiàn)CTLp細(xì)胞出現(xiàn)頻率增長(zhǎng)了 520倍，且殺傷力增 強(qiáng)26倍。從而認(rèn)為rIL-2誘導(dǎo)GVL效應(yīng)可能主要通過(guò)CTLp活化， 也可能通過(guò)激活異基因的 NK細(xì)胞和非MHC艮制的殺傷細(xì)胞的途徑， 顯示了 rlL-2在誘導(dǎo)GV

5、L效應(yīng)中的重要作用。IL-12是一個(gè)多效性細(xì) 胞因子，能刺激NK細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)CTL活化及T細(xì)胞、NK細(xì)胞分泌 INF。其抗腫瘤活性依賴于CD+T細(xì)胞而不依賴NK細(xì)胞，能保留CD+T 細(xì)胞介導(dǎo)的GVL效應(yīng)，同時(shí)抑制GVHDLin等4用IL-12和IL-15 單獨(dú)或聯(lián)合作用于臍血（CB、成人外周血（APB的單個(gè)核細(xì)胞（MNC 和CD56淋巴細(xì)胞亞群，發(fā)現(xiàn)IL-15對(duì)CB和APB的MNC勺擴(kuò)增效應(yīng) 優(yōu)于IL-12，且IL-12聯(lián)合IL-15促進(jìn)3種細(xì)胞株的增殖效果強(qiáng)于兩 者單用這些發(fā)現(xiàn)為 CB移植的患者進(jìn)行細(xì)胞因子治療提供了理論依 據(jù)。Sun等5用IL-2、IL-12單獨(dú)或聯(lián)合作用于用粒系集落 刺

6、激因子（G-CSF動(dòng)員的外周血單個(gè)核細(xì)胞（PBMC的抗腫瘤活性， 發(fā)現(xiàn)動(dòng)員后的細(xì)胞毒活性在IL-2或IL-12作用前較低，用IL-2活化 2448h后，其細(xì)胞毒活性逐漸增加，經(jīng)72h后CD3和CD8+T細(xì)胞比 例增加；而且聯(lián)合應(yīng)用IL-2和IL-12培養(yǎng)，其抗腫瘤作用顯著增強(qiáng)， 因而認(rèn)為IL-2聯(lián)合IL-12體外培養(yǎng)可增強(qiáng)G-CSF動(dòng)員的PBM誘導(dǎo)的 GVL效應(yīng)。近來(lái)研究表明IL-11、人類重組角化細(xì)胞生長(zhǎng)因子（KGF :6及某些金屬蛋白酶抑制劑 KR-7785 :7抑制GVHD勺同時(shí)能有 效保留GVL效應(yīng)，另一方面INF-a、G-CSF等刺激因子不僅可激活免 疫效應(yīng)細(xì)胞，也直接影響白血病細(xì)胞

7、的生長(zhǎng)、 分化和白血病克隆干細(xì) 胞的增殖，它們將在誘導(dǎo)分離兩者中起重要作用。 細(xì)胞因子在GVL效 應(yīng)中的作用日益受人矚目，人們認(rèn)為多種細(xì)胞因子誘導(dǎo) GVL效應(yīng)的作 用優(yōu)于單一細(xì)胞因子，研究最佳的多細(xì)胞因子共同作用方案來(lái)誘導(dǎo) GVL效應(yīng)是白血病原體細(xì)胞免疫治療中的關(guān)鍵。2尋找特異性抗原分離GVL和 GVHD人們希望發(fā)現(xiàn)僅表達(dá)于白血病細(xì)胞表面的抗原。 利用這種抗 原刺激供者T細(xì)胞使之成為針對(duì)特定抗原的細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞（CT）通過(guò)特異性免疫應(yīng)答殺傷白血病細(xì)胞，發(fā)揮 GVL效應(yīng)，對(duì)宿 主的正常組織不產(chǎn)生損害，從而避免了 GVH啲發(fā)生。2.1腫瘤特異性抗原（TSA TSA特異性表達(dá)于腫瘤細(xì)胞表面， 如

8、p21、ras和bcr/abl，作為GVL靶抗原似乎很有可能。但針對(duì)這 些抗原的活化T細(xì)胞在allo-HSCT后是否能發(fā)揮GVL作用尚缺乏足夠 證據(jù)8。有些學(xué)者認(rèn)為9 TSA作為同質(zhì)反應(yīng)的靶抗原，可能是 腫瘤細(xì)胞生存非必需的，在腫瘤生長(zhǎng)、遷移過(guò)程中，會(huì)發(fā)生抗原丟失， 從而逃避機(jī)體免疫系統(tǒng)的識(shí)別，引起白血病復(fù)發(fā)。但有的學(xué)者認(rèn)為:10 bcr/abl融合蛋白b2a2和b3a3是GVL重要的靶抗原，它們 能在慢性粒細(xì)胞白血?。–ML病人進(jìn)行allo-HSCT后引發(fā)有效的GVL 效應(yīng)。因此TSA在分離GVL和 GVH中的作用有待進(jìn)一步研究。2.2腫瘤相關(guān)性抗原（TAA TAA可表達(dá)在正常組織器官，但在

9、 白血病細(xì)胞表面過(guò)表達(dá)，它和 TSA均非同種抗原，因此在不能進(jìn)行 allo-HSCT時(shí)，可作為靶抗原用于免疫治療11如PR3和WT-1均 在白血病細(xì)胞表面高表達(dá)，由它們誘導(dǎo)產(chǎn)生的CD8+CT可在體外抑制白血病細(xì)胞克隆，但不影響正常克隆細(xì)胞生長(zhǎng)12。但TAA用于免 疫治療存在一些問題有待克服，因?yàn)門AA對(duì)病人免疫系統(tǒng)來(lái)說(shuō)是新的 自身抗原，它們通常表達(dá)在非專職抗原提呈細(xì)胞表面，這些抗原通常被T細(xì)胞忽視，更不利的是，它能使對(duì) TAA反應(yīng)的T細(xì)胞耐受。所以 TAA作為分離GVL和GVHD勺靶抗原也存在未解決的問題。2.3 mHAgs實(shí)驗(yàn)研究13和臨床資料14均證明，即使主要 組織相容性復(fù)合體（MHC完

10、全配合，移植后仍然發(fā)生排斥反應(yīng)，但 其強(qiáng)度輕、速度慢，從而提示存在其它可能誘導(dǎo)排斥反應(yīng)的抗原，此 種抗原稱mHAgs它們表達(dá)于機(jī)體組織細(xì)胞表面，被降解成肽鏈片段 后，具同種異型抗原決定簇，可被 MHC分子所提呈15。既可引起 GVHD也可引起GVL限制性表達(dá)于HSC或白血病細(xì)胞表面的 mHags 是誘發(fā)GVL效應(yīng)理想的靶抗原16。因此應(yīng)用mHAg分離GVL和GVHD 具有重要意義。目前發(fā)現(xiàn)的有 HA-1、HA-2和UTY等。HA-1是具有單 個(gè)氨基酸多態(tài)性的復(fù)等位基因，其肽鏈為九肽結(jié)構(gòu)，由KIAA0223等位基因編碼。有兩種HA-1即HA-1H和HA-1R（相差1個(gè)氨基酸）17。 HA-1位點(diǎn)

11、組成除已知HILA-A2/HA-1HT細(xì)胞決 定簇，還有 HLA-B60/HA-1H決定簇。移植前選那些與受者 HLA-A2或HLA-B60相 同，HA-1不同的供者，針對(duì)HA-1特異性CTL輸注給移植后復(fù)發(fā)的白 血病患者，可根除白血病細(xì)胞13。但HA-1在GVH沖也起重要作 用。研究認(rèn)為15，HA-1像小鼠B6doml,是一種免疫優(yōu)勢(shì)抗原，在 樹突狀細(xì)胞（DQ表面高表達(dá)，可引發(fā)決定簇?cái)U(kuò)展即 T細(xì)胞對(duì)表達(dá)于 其它組織細(xì)胞表面的 mHAgS發(fā)生反應(yīng)，弓I起GVHD此外，HA-1特異 性的CTL起作用時(shí)分泌炎癥因子也可造成器官損傷，但這樣引起的 GVHD-般較輕。所以HA-1是理想的靶抗原。HA-

12、2是由位于7號(hào)染色 體短臂的MY01G(肌球蛋白相關(guān)基因)編碼，有兩種 HA-2即HA-2V(YIGEVLVSV HA-2M ( YIGEVLVSVM : 18 。HA-2 的識(shí)別也受HLA-A*0201限制。由于它也是僅表達(dá)于白血病細(xì)胞及 HSC表面的， 故針對(duì)它的特異CTL可發(fā)生GVL而不發(fā)生GVHDUTY是由Y染色體編 碼的肽鏈片段，由HLA-B8提呈，它高表達(dá)在HSC表面，而在其它組 織細(xì)胞低表達(dá)。男性HSC表面UTY呈陽(yáng)性表達(dá)，而女性的均呈陰性表 達(dá)。因此UTY可廣泛用于男性受者接受女性供者移植后的免疫治療:9。mHAgs也是腫瘤細(xì)胞表面蛋白，是維持腫瘤生存所必需的，在 腫瘤生長(zhǎng)和遷

13、移過(guò)程中不丟失，從而不能逃避機(jī)體免疫系統(tǒng)識(shí)別。 Allo-HSCT后免疫耐受形成，并不導(dǎo)致所有同種反應(yīng)T細(xì)胞克隆丟失， 宿主還保留針對(duì)一些mHAg啲潛在同種反應(yīng)，尤其針對(duì)那些組織限制 性的9。實(shí)驗(yàn)觀察發(fā)現(xiàn)復(fù)發(fā)后的白血病細(xì)胞對(duì)移植前供者的T細(xì)胞還是敏感的。這更提高了 mHAg在分離GVL和GVH呼的地位17。上述工作雖剛起步，但成績(jī)可喜。相信隨著GVH取GVL效應(yīng)發(fā)生機(jī)制研究的不斷深入，不遠(yuǎn)的將來(lái)一定會(huì)在allo-HSCT治療中 誘導(dǎo)GVL效應(yīng)和分離 GVL與GVHD方面取得重大突破，使臨床 allo-HSCT治療發(fā)揮更加重要的作用?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】1 Barnes DVyLoutit JF, Ne

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