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1、高中生物 課題2 多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增dna片段導(dǎo)學(xué)案 新人教版選修1高中生物 課題2 多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增dna片段導(dǎo)學(xué)案 新人教版選修1 編輯整理:尊敬的讀者朋友們:這里是精品文檔編輯中心,本文檔內(nèi)容是由我和我的同事精心編輯整理后發(fā)布的,發(fā)布之前我們對(duì)文中內(nèi)容進(jìn)行仔細(xì)校對(duì),但是難免會(huì)有疏漏的地方,但是任然希望(高中生物 課題2 多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增dna片段導(dǎo)學(xué)案 新人教版選修1)的內(nèi)容能夠給您的工作和學(xué)習(xí)帶來(lái)便利。同時(shí)也真誠(chéng)的希望收到您的建議和反饋,這將是我們進(jìn)步的源泉,前進(jìn)的動(dòng)力。本文可編輯可修改,如果覺(jué)得對(duì)您有幫助請(qǐng)收藏以便隨時(shí)查閱,最后祝您生活愉快 業(yè)績(jī)進(jìn)步,以下為高中生物 課題2 多聚
2、酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增dna片段導(dǎo)學(xué)案 新人教版選修1的全部?jī)?nèi)容。8課題2 多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增dna片段導(dǎo)學(xué)案 課題課題2多聚鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增dna片段課型新授課時(shí)1教師復(fù)備欄(學(xué)生筆記)【學(xué)習(xí)目標(biāo)】站得高-明確學(xué)習(xí)目標(biāo)(一)知識(shí)與技能:1、了解pcr技術(shù)的基本操作2、理解pcr的原理3、討論pcr的應(yīng)用(二)過(guò)程與方法:在多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增dna片段的實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,應(yīng)避免外源dna污染,嚴(yán)格控制溫度等反應(yīng)條件(三)情感、態(tài)度與價(jià)值觀:通過(guò)對(duì)pcr實(shí)驗(yàn)的操作及結(jié)果分析,培養(yǎng)學(xué)生嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué)態(tài)度和實(shí)事求是的科研精神 【學(xué)習(xí)重點(diǎn)和難點(diǎn)】重點(diǎn):pcr的原理和pcr的基本操作 難點(diǎn):pcr的原理【學(xué)法指導(dǎo)】啟發(fā)式教學(xué)
3、,拓展視野,感受科學(xué)技術(shù)的重要價(jià)值.?!局R(shí)鏈接】復(fù)習(xí)舊知,以舊帶新1、固定化技術(shù)中常用的載體有 、 、 、 和 等.2、dna析出時(shí),最適宜的鹽濃度是 。3、固定化技術(shù)包括 法、 法和 法。4、果膠酶的種類(lèi)包括 酶、 酶和 酶等.5、粗提取的dna,在 的條件下,用 檢驗(yàn),被當(dāng)成 .【學(xué)習(xí)內(nèi)容】一、 自主學(xué)習(xí):起步穩(wěn)夯實(shí)基礎(chǔ)促發(fā)展 學(xué)生閱讀教材p5863,完成下列學(xué)案(一)、基礎(chǔ)知識(shí)一、pcr原理:1、在用pcr擴(kuò)增dna時(shí),dna的復(fù)制過(guò)程與細(xì)胞內(nèi) 類(lèi)似.細(xì)胞內(nèi)參與dna復(fù)制的組成成分有 、 、4 種 、 酶、引物。它們的作用依次是 雙鏈、提供 、 的原料、 、使dna聚合酶能夠從引物 端
4、開(kāi)始連接 .2、dna的兩條鏈?zhǔn)?的,為了明確地表示 dna的方向,通常將dna的羥基端( )稱(chēng)為 端,而磷酸基團(tuán)的末端稱(chēng)為 端。dna聚合酶不能從 開(kāi)始合成dna,而能從 延伸dna鏈,因此,dna復(fù)制需要 。當(dāng)引物與dna母鏈通過(guò) 結(jié)合后,dna聚合酶就能從引物的開(kāi)始延伸,因此dna的合成方向總是從子鏈的向延伸。3、在dna的復(fù)制過(guò)程中,進(jìn)行dna復(fù)制的前提是 。這個(gè)過(guò)程可以通過(guò)控制 來(lái)實(shí)現(xiàn)。在80-100的溫度范圍內(nèi),dna的雙螺旋結(jié)構(gòu) 將 ,雙鏈 ,這個(gè)過(guò)程叫做 。當(dāng)溫度緩慢降低后,兩條彼此分離的dna鏈又會(huì)重新 成雙鏈。這叫做dna的 ,4、pcr利用了dna的 原理,通過(guò)控制 來(lái)控
5、制雙鏈的解聚與結(jié)合。pcr 反應(yīng)需要在一定的 中才能進(jìn)行,需提供: 、 分別與兩條模板鏈相結(jié)合的兩種 ,四種 ,耐熱的 酶,同時(shí)通過(guò)控制 使dna復(fù)制在 反復(fù)進(jìn)行。二、pcr的反應(yīng)過(guò)程: pcr一般要經(jīng)歷 多次循環(huán),每次循環(huán)可以分為 、 和 三步。在循環(huán)之前常要進(jìn)行一次 ,以便增大分子模板dna 的概率.從第二輪循環(huán)開(kāi)始,上一次循環(huán)的產(chǎn)物也作為 與反應(yīng),并且由 延伸而成的dna單鏈會(huì)與 結(jié)合,進(jìn)行dna的延伸,這樣,dna聚合酶只能特異地復(fù)制處于兩個(gè) 之間的dna序列,使這段固定長(zhǎng)度的序列呈指數(shù)擴(kuò)增. (二)實(shí)驗(yàn)操作:在pcr實(shí)驗(yàn)中通常要用到 ,它是一種薄壁塑料管,總?cè)莘e為 。具體操作時(shí),用
6、器,按照書(shū)中旁欄的配方在微量離心管中依次加入各組分,再參照書(shū)中表格設(shè)計(jì)好pcr儀的循環(huán)程序就可以了。(三)操作提示:1、為避免外源dna等因素的污染,pcr實(shí)驗(yàn)中使用的微量離心管、槍頭、緩沖液以及蒸餾水等在使用前必須進(jìn)行 。2、pcr所用的緩沖液和酶應(yīng)分裝成小份,并在20儲(chǔ)存。使用前,將所需試劑從冰箱拿出,放在冰塊上 。3、在微量離心管中添加反應(yīng)成分時(shí),每吸取一種試劑后,移液器上的槍頭必須 。二、合作探究:走得歡-探索中收獲,收獲中提升 【整理學(xué)案】:構(gòu)建網(wǎng)絡(luò),內(nèi)化知識(shí)多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增dna片段pcr原理dna的復(fù)制需要 、原料、 、引物dna的變性和復(fù)性受溫度影響pcr過(guò)程 延伸操作步驟配
7、制pcr反應(yīng)體系移入離心管放入pcr設(shè)置工作參數(shù)dna 測(cè)定含量稀釋調(diào)零測(cè)定并讀數(shù)計(jì)算【達(dá)標(biāo)測(cè)評(píng)】步步高-鞏固成果,對(duì)答如流1dna分子復(fù)制時(shí),解旋的兩條鏈中( )a僅一條作為復(fù)制模板 b兩條鏈作為模板并復(fù)制出兩個(gè)不同的dna分子c兩條鏈作為模板并復(fù)制出兩個(gè)相同的dna分子d兩條鏈作為模板,各自合成一條子鏈,然后兩條母鏈重新結(jié)合為原來(lái)的雙螺旋分子,兩條新鏈結(jié)合成一個(gè)全新的dna分子2。下列關(guān)于dna復(fù)制過(guò)程的正確順序是( )互補(bǔ)堿基對(duì)之間氫鍵斷裂互補(bǔ)堿基對(duì)之間形成氫鍵dna分子在解旋酶的作用下解旋以解旋后的母鏈為模板進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對(duì)子鏈與母鏈盤(pán)旋成雙螺旋狀結(jié)構(gòu)a b c d3.下列各項(xiàng)過(guò)程中,
8、遵循“堿基互補(bǔ)配對(duì)原則的有( )dna復(fù)制rna復(fù)制轉(zhuǎn)錄翻譯逆轉(zhuǎn)錄a b c d4.實(shí)驗(yàn)室內(nèi)模擬生物體dna的復(fù)制必需的一組條件是( )酶游離的脫氧核苷酸atpdna分子mrnatrna適宜的溫度適宜的酸堿度a b c d5.利用pcr技術(shù),把一個(gè)雙鏈dna分子當(dāng)作第一代,經(jīng)過(guò)3次循環(huán),在第四代dna分子中,有幾條第一代脫氧核苷酸的長(zhǎng)鏈?( )a 2 b 4 c 8 d 16,6。關(guān)于dna分子的敘述中,正確的是( )a .dna的兩條鏈?zhǔn)菢O性相同,同向平行 b.dna的兩條鏈?zhǔn)菢O性相同,反向平行c.dna的兩條鏈中極性不同,反向平行的 d。dna的兩條鏈?zhǔn)菢O性不同,同向平行7。假設(shè)pcr反應(yīng)
9、中,只有一個(gè)dna的片段作為模板,請(qǐng)計(jì)算在30次循環(huán)后,反應(yīng)物中大約有多少這樣的dna片段( )a 215 b 230 c 260 d 2318.dna的合成方向總是( )延伸。a從dna分子的左端向右端 b從dna分子的右端向左端c從子鏈的5,端向3,端 d從子鏈的3,端向5,端9。要使pcr反應(yīng)在體外的條件下順利地進(jìn)行,需要嚴(yán)格的控制( )a 氧氣的濃度 b酸堿度 c溫度 d 大氣的濕度10。dna分子經(jīng)pcr反應(yīng)循環(huán)一次后,新合成的那條子鏈的脫氧核苷酸的序列應(yīng)與( )a模板母鏈相同 b非模板母鏈相同 c兩條模板母鏈相同 d兩條模板母鏈都不相同【學(xué)后反思】答案: cdada cbccb課后
10、習(xí)題1pcr過(guò)程與細(xì)胞內(nèi)的dna復(fù)制過(guò)程相比,主要有兩點(diǎn)不同,它們是()pcr過(guò)程需要的引物是人工合成的單鏈dna或rnapcr過(guò)程不需要dna聚合酶pcr過(guò)程中dna的解旋不依靠解旋酶,而是通過(guò)對(duì)反應(yīng)溫度的控制來(lái)實(shí)現(xiàn)的pcr過(guò)程中,dna不需要解旋,直接以雙鏈dna為模板進(jìn)行復(fù)制abcd解析:選c。pcr過(guò)程與細(xì)胞內(nèi)的dna復(fù)制過(guò)程相比較,主要有兩點(diǎn)不同:(1)pcr過(guò)程需要的引物是人工合成的單鏈dna或rna,長(zhǎng)度通常為2030個(gè)核苷酸。(2)pcr過(guò)程中,dna解旋不依賴(lài)解旋酶,而是通過(guò)對(duì)反應(yīng)溫度的控制來(lái)實(shí)現(xiàn)的.2dna的復(fù)制需要引物,其主要原因是()a可加快dna的復(fù)制速度 b引物可與
11、dna母鏈堿基互補(bǔ)配對(duì)結(jié)合c引物的5端有助于dna聚合酶延伸dna鏈ddna聚合酶只能從3端延伸dna鏈解析:選d。引物的作用是結(jié)合在模板dna上提供dna延伸的起始位點(diǎn),而dna聚合酶的作用是從引物的3端開(kāi)始催化dna鏈的延伸。3pcr利用了dna的熱變性原理,pcr儀實(shí)際上也是一種能自動(dòng)調(diào)控溫度的儀器。下列對(duì)pcr過(guò)程中“溫度的控制”的說(shuō)法,錯(cuò)誤的是()apcr反應(yīng)需要高溫,是為了確保模板是單鏈b延伸的溫度必須大于復(fù)性溫度,而小于變性溫度c要用耐高溫的dna聚合酶 d需要耐高溫的解旋酶解析:選d.pcr是體外dna擴(kuò)增技術(shù),dna雙鏈的解開(kāi)不需要解旋酶,而是靠高溫使其變性解體。復(fù)性前,在耐
12、高溫的taq dna聚合酶的作用下根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則合成新的dna,因此延伸的溫度要大于復(fù)性溫度但小于變性溫度。4從第二次循環(huán)開(kāi)始,復(fù)制的dna片段呈_擴(kuò)增()a直線 b指數(shù) c對(duì)數(shù) d不變答案:b(緊扣教材,思考感悟)1一個(gè)dna片段做模板,30次循環(huán)后,反應(yīng)物中大約有多少個(gè)同樣的dna片段?(教材p63)答案:pcr反應(yīng)中的目的片段一般以2n的方式積累,其中n是反應(yīng)循環(huán)次數(shù)。一個(gè)dna片段在30次循環(huán)后的反應(yīng)物中大約有10億個(gè)這樣的片段,即2n2301073741824.2如何設(shè)計(jì)引物?(教材p63)答案:pcr引物是根據(jù)需要擴(kuò)增的目的dna的堿基序列來(lái)設(shè)計(jì)的.1pcr利用了dna的哪種
13、特性原理,來(lái)控制dna的解聚與結(jié)合()a特異性b穩(wěn)定性 c熱變性 d多樣性答案:c2(2011年聊城高二檢測(cè))在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)模擬生物體內(nèi)的dna復(fù)制,需要哪些條件()來(lái)源:xkb1。com酶游離的脫氧核苷酸atpdna分子引物trna適宜的溫度適宜的酸堿度a b c d解析:選d。在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)模擬dna復(fù)制時(shí),需要dna聚合酶催化合成dna子鏈;四種脫氧核苷酸為合成子鏈的原料;dna母鏈為dna復(fù)制的模板;還需要引物、較高的溫度、適宜的酸堿度等.3dna擴(kuò)增過(guò)程中,dna片段經(jīng)若干次擴(kuò)增,與其數(shù)目的理論值變化相符的圖是()解析:選c。pcr反應(yīng)中dna的擴(kuò)增數(shù)目和生物體內(nèi)的dna復(fù)制是類(lèi)似的,即1個(gè)
14、dna分子復(fù)制一次,產(chǎn)生2個(gè)dna分子,復(fù)制2次,產(chǎn)生4個(gè)dna分子,呈指數(shù)擴(kuò)增,開(kāi)始有一個(gè)dna分子為模板,經(jīng)過(guò)n次復(fù)制后得到的dna分子的數(shù)量為2n,與曲線c相符合.來(lái)源:xkb1。com4(2011年宿州高二檢測(cè))下列操作過(guò)程的敘述中錯(cuò)誤的是()apcr反應(yīng)中使用的微量離心管、槍頭、緩沖液以及蒸餾水等在使用前必須進(jìn)行高壓滅菌bpcr所用的緩沖液和酶應(yīng)分裝成小份,并在20 儲(chǔ)存cpcr所用的緩沖液和酶從冰箱拿出之后,迅速融化d在微量離心管中添加反應(yīng)成分時(shí),每吸取一種試劑后,移液器上的吸液槍頭都必須更換解析:選c。為了防止外源dna等因素的污染,pcr反應(yīng)中所用的微量離心管、槍頭、緩沖液及蒸
15、餾水等,在使用前要進(jìn)行高壓滅菌;還要將所用的緩沖液和酶分裝成小份;并且使用一次性吸液槍頭,則a、b、d項(xiàng)都正確.在使用前,將pcr所需試劑從冰箱內(nèi)拿出來(lái),放在冰塊上緩慢融化,則c項(xiàng)錯(cuò)誤。5標(biāo)準(zhǔn)的pcr過(guò)程一般分為變性、復(fù)性、延伸三大步,這三大步需要的溫度依次是()a92 、50 、72 b72 、50 、92 c50 、92 、72 d80 、50 、72 解析:選a。當(dāng)溫度上升到90 (9096 )以上時(shí),雙鏈dna解聚為單鏈,稱(chēng)之為變性;當(dāng)溫度下降到50 (4060 )左右時(shí),兩種引物通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)與兩條單鏈dna結(jié)合;當(dāng)溫度上升到72 (7075 )時(shí),溶液中的四種脫氧核苷酸(a、t、
16、c、g)在taq dna聚合酶的作用下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則合成新的dna鏈,稱(chēng)為延伸。6當(dāng)引物與dna母鏈通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)結(jié)合后,dna聚合酶就能開(kāi)始延伸dna子鏈,則延伸的方向是()來(lái)源:xkb1。coma從5端延伸dna子鏈bdna的合成方向總是從5端向3端延伸c子鏈延伸的方向是53或35ddna的合成方向總是從3端向5端延伸解析:選b。本題考查多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增dna片段的有關(guān)知識(shí),同時(shí)考查學(xué)生對(duì)pcr原理的理解。pcr擴(kuò)增的過(guò)程中子鏈延伸的方向是由dna聚合酶決定的,由于dna聚合酶只能從3端延伸dna鏈,而不能從頭開(kāi)始,因此dna的合成方向總是從5端向3端延伸。7如圖為dna變性和
17、復(fù)性示意圖,下列相關(guān)說(shuō)法正確的是()a向右的過(guò)程為加熱(80100 )變性的過(guò)程b向左的過(guò)程是dna雙鏈迅速致冷復(fù)性xkb1。comc變性與在生物體內(nèi)解旋過(guò)程的條件、實(shí)質(zhì)都相同d圖中dna片段共有4個(gè)游離的磷酸基、4個(gè)3端答案:a8在pcr的實(shí)驗(yàn)操作中,下列說(shuō)法正確的是()在微量離心管中添加各種試劑時(shí),只需要一個(gè)槍頭離心管的蓋子一定要蓋嚴(yán)用手指輕彈離心管壁離心的目的是使反應(yīng)液集中在離心管的底部a bc d解析:選c。在微量離心管中添加反應(yīng)成分時(shí),每吸取一種試劑后,移液器上的槍頭都必須更換,以確保實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性;蓋嚴(yán)離心管口的蓋子,防止實(shí)驗(yàn)中外源dna污染;用手指輕輕彈擊管的側(cè)壁,使反應(yīng)液混合均勻;離心目的是使反應(yīng)液集中在離心管的底部,提高反應(yīng)效果.9復(fù)性溫度是影響pcr特異性的較重要因素。變性后溫度快速冷卻至4060 ,可使引物和模板發(fā)生結(jié)合。pcr的結(jié)果可不考慮
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