疫病雞剖檢及病毒學(xué)檢查

1、新城疫病雞剖檢 及病毒學(xué)檢查,一、獸醫(yī)傳染病學(xué)實(shí)驗(yàn)室注意事項(xiàng) 二、獸醫(yī)傳染病的一般診斷程序 三、病雞剖檢及細(xì)菌學(xué)檢查,一、獸醫(yī)傳染病學(xué)實(shí)驗(yàn)室注意事項(xiàng),注意個(gè)人預(yù)防、避免病原傳播 穿著工作服，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后需立即消毒清洗。 實(shí)驗(yàn)操作期間，勿以手指或其他器物等接觸口唇、眼、鼻及面部。 實(shí)驗(yàn)完畢，應(yīng)洗手消毒后離去,一、獸醫(yī)傳染病學(xué)實(shí)驗(yàn)室注意事項(xiàng),危險(xiǎn)材料及其污染的器物處理 動(dòng)物尸體、內(nèi)臟、血液等廢棄病料，以及廢棄的病原培養(yǎng)物、生物制品等須深埋或經(jīng)過(guò)嚴(yán)格消毒處理（焚燒、煮沸、高壓滅菌等）后丟棄到公共垃圾處理場(chǎng)，嚴(yán)禁將未經(jīng)消毒的危險(xiǎn)性材料直接丟棄。 用過(guò)的棉球、紗布、吸水紙等污物須置于固定容器內(nèi)統(tǒng)一消毒處理

2、，不得任意拋棄。 桌面、地板或地面被污染時(shí)，應(yīng)用適當(dāng)消毒液清洗,二、獸醫(yī)傳染病的一般診斷程序,實(shí)驗(yàn)室診斷 病理組織學(xué)、病原學(xué)（涂片鏡檢、病原分離、PCR、動(dòng)物回歸）、血清學(xué)（HI、AGID、ELISA）等,臨床診斷 流行病學(xué)、臨床癥狀、病理解剖等,發(fā)生疫情,確 診,三、病雞剖檢及病毒學(xué)檢查,實(shí)驗(yàn)?zāi)康?1. 掌握動(dòng)物病毒病實(shí)驗(yàn)室診斷的一般程序。 2. 掌握病雞剖檢的一般方法。 3了解雞新城疫的病理變化和臨診要點(diǎn)。 4掌握新城疫病毒的分離鑒定,三、病雞剖檢及病毒學(xué)檢查,疑似新城疫病,流行病學(xué)調(diào)查,尸體剖檢 （取樣、病變的觀察,病原的分離,病原的鑒定,做出診斷,尸體剖檢,尸體剖檢,病雞剖檢基本原則

3、1、外 內(nèi) 2、觀察 取樣 剖檢 3、肝 脾 胃 腸 法氏囊 腎臟 肺 心 喉頭、氣管 腦,尸體剖檢,1. 全身黏膜和漿膜出血，淋巴系統(tǒng)腫脹、出血和壞死，以消化道和呼吸道為明顯。 2. 口腔有黏液，嗉囊內(nèi)積酸臭味液體和氣體； 3. 腺胃黏膜水腫，其乳頭或乳頭間有鮮明的出血點(diǎn)，或有潰瘍或壞死。肌胃角質(zhì)層下也可見(jiàn)出血點(diǎn),病毒分離,將脾臟剪碎，按照1:5的比例加入含三抗的PBS，用研磨器研磨成組織勻漿 將勻漿置于1.5ml離心管中，5000rpm離心10min。 離心后，取上清0.1ml接種雞胚 37度孵化雞胚72h（每隔12h照胚，挑出死胚和弱胚），棄掉24h之內(nèi)的死亡胚 收獲雞胚尿囊液之前，將雞

4、胚置于4度6h以上，促進(jìn)血管收縮 收獲尿囊液，測(cè)定尿囊液的HA效價(jià)， 并用新城疫的陽(yáng)性血清進(jìn)行HI實(shí)驗(yàn)，做出鑒定,雞胚培養(yǎng)法是用來(lái)培養(yǎng)某些對(duì)雞胚敏感的病原的一種培養(yǎng)方法，此方法可用以進(jìn)行多種病原的分離、培養(yǎng)，毒力的滴定，中和試驗(yàn)以及抗原和疫苗的制備等。 雞新城疫病毒適宜接種在尿囊腔和羊膜腔內(nèi)，生長(zhǎng)后，雞胚全身皮膚出現(xiàn)出血點(diǎn)，以腦后最顯著,常見(jiàn)接種方法： 1.尿囊腔接種 2.絨毛尿囊膜接種 3.卵黃囊接種 4.羊膜腔接種,尿囊腔接種步驟 標(biāo)本處理：病料研磨（5倍至10倍稀 釋），除菌處理 照胚： 活胚檢查： 胚動(dòng)、血管、絨毛尿囊 膜發(fā)育 確定接種部位：畫氣室、畫接種部 位（避開(kāi)大血管及頭部） 消

5、毒：酒精碘酒酒精 接種：0.1-0.2ml，氣室下 孵育：氣室向上放置，孵育的最適溫度為37，相對(duì)濕度為4070，孵育7296h,911日齡雞胚,雞胚孵育 氣室向上放置，孵育的最適溫度為37，相對(duì)濕度為4070，孵育7296h,接種后檢查 接種后24h內(nèi)死亡的雞胚，系由于接種時(shí)雞胚受損或其他原因而死亡，應(yīng)該棄去； 24h后，每天照蛋2次，如發(fā)現(xiàn)雞胚死亡立即放入冰箱，于一定時(shí)間內(nèi)（72h）不能致死的雞胚亦放入冰箱凍死，以便收縮血管。 死亡的雞胚置冰箱中12h即可取出收取材料并檢查雞胚病變,雞胚收獲 原則上接種什么部位，收獲什么部位。 尿囊腔內(nèi)接種者用無(wú)菌手術(shù)去氣室頂殼，打開(kāi)整個(gè)氣室區(qū)； 以無(wú)菌鑷子