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1、淘寶特賣網(wǎng)淘寶特賣頻道電子顯微鏡知識(shí)講座,顯微鏡的歷史,大約在400年前(1590年),由荷蘭科學(xué)家楊森和后來(lái)的博物學(xué)家列文虎克發(fā)明和完善的顯微鏡,向人們揭示了一個(gè)陌生的微觀世界,他們是開(kāi)辟人類顯微分析的始祖,因?yàn)樵缙诘娘@微鏡以玻璃鏡片做透鏡,使用可見(jiàn)光為光源,所以人們把它稱為光學(xué)顯微鏡。現(xiàn)在,最好的光學(xué)顯微鏡可以達(dá)到1500倍的放大倍數(shù),在光學(xué)顯微鏡的完善和發(fā)展過(guò)程中,人們發(fā)現(xiàn):不管如何完善光學(xué)顯微鏡的透鏡和結(jié)構(gòu),其放大倍數(shù)和分辨率總是被限定在1000多倍和幾百納米的水平,不可能再有所新的突破,后來(lái),人們終于發(fā)現(xiàn):是顯微鏡所使用的光源限制了光學(xué)顯微鏡的放大倍數(shù)和分辨率的進(jìn)一步發(fā)展。因?yàn)?,可?jiàn)
2、光的波長(zhǎng)在390納米到760納米之間,而顯微鏡的分辨率最多也只能是其所使用光源的半波長(zhǎng)的大小,所以光學(xué)顯微鏡的理論極限分辨本領(lǐng)也就在200納米左右,光的本質(zhì),光具有波粒兩像性,其中波長(zhǎng)是光的特性之一。隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展,人們對(duì)于光有了深入的認(rèn)識(shí)。人們知道了電磁波,紅外線和X射線等等和普通的可見(jiàn)光一樣都是光的一種,它們都具有光的一般性質(zhì),只不過(guò)它們的波長(zhǎng)有所不同,什么是分辨率,簡(jiǎn)單地說(shuō),分辨率就是能夠把兩個(gè)點(diǎn)分辨開(kāi)的最小距離。 人眼睛的分辨率大約為0.1個(gè)毫米。 所以,要想看清比0.1個(gè)毫米還小的東西,就要借助于放大鏡和顯微鏡。即利用顯微鏡把所要觀察的物體至少放大到0.1個(gè)毫米以上,我們才能看清
3、它,放大與空放大,定義:對(duì)于某一顯微鏡而言,在其可分辨能力之內(nèi)的圖像放大,叫做有效放大。此時(shí)的圖像放大不失圖像表面的細(xì)節(jié)。 而在顯微鏡分辨能力以外的圖像放大,叫做空放大,也叫做無(wú)效放大。空放大只是放大了圖像的輪廓,而不能放大和分辨圖像表面的細(xì)節(jié),聚焦和景深的概念,聚焦:簡(jiǎn)單地說(shuō)就是讓圖像最清楚。在理論上講,就是讓成像在透鏡的焦點(diǎn)上。 欠焦:就是成像還未達(dá)到焦點(diǎn)。 過(guò)焦:就是成像已超過(guò)了焦點(diǎn)。 景深:就是在焦點(diǎn)附近能看清圖像的余量。一般在低倍率下景深較大,在高倍率下景深變小,既然是光源限制了顯微鏡的放大倍數(shù)和分辨率的發(fā)展,人們自然會(huì)想到:要想提高顯微鏡的放大倍數(shù)和分辨率,就應(yīng)該更換波長(zhǎng)更短的光源
4、。隨著人們對(duì)電磁波的認(rèn)識(shí),人們了解到:在一定的電壓下電子束的波長(zhǎng)可以達(dá)到零點(diǎn)幾個(gè)納米,使用電子束做為光源,顯微鏡的分辨率就可能提高幾個(gè)數(shù)量級(jí),電子顯微鏡的產(chǎn)生,電磁透鏡,研究發(fā)現(xiàn):靜電磁場(chǎng)可以使電子的運(yùn)動(dòng)方向發(fā)生改變,對(duì)稱的靜電磁場(chǎng)可以像玻璃聚焦光線那樣把電子束匯聚成一點(diǎn),這使得用電子束聚焦成像成為可能,這樣就產(chǎn)生了電磁透鏡。由于電磁透鏡能把電子束象光一樣地聚焦成像,所以使用電子束做為光源的顯微鏡就應(yīng)運(yùn)而生了。這就是電子顯微鏡,實(shí)用的電子顯微鏡,經(jīng)過(guò)不斷的實(shí)驗(yàn)和摸索,在上個(gè)世紀(jì)三十年代,由德國(guó)科學(xué)家M克諾爾與E魯斯卡在柏林工學(xué)院制造出了世界上第一臺(tái)透射式電子顯微鏡。由于使用了電子束做為顯微鏡的
5、光源,電子顯微鏡的分辨率大大超過(guò)了光學(xué)顯微鏡,達(dá)到了零點(diǎn)幾個(gè)納米的水平,加速電壓與電子束波長(zhǎng)的關(guān)系,電子顯微鏡的電子束波長(zhǎng)視其所使用的加速電壓的大小而定,一般加速電壓在100KV的電子顯微鏡其電子束的波長(zhǎng)約為0.4納米,這樣電子顯微鏡的分辨率應(yīng)該可以達(dá)到兩個(gè)埃(0.2納米)的水平,這要比光學(xué)顯微鏡的分辨率高的多的多。 超高壓的電子顯微鏡其電子束的波長(zhǎng)更短,所以會(huì)有更高的分辨率,電子顯微鏡的分類,電子顯微鏡基本分為兩種類型: 一種是:透射電子顯微鏡, 另一種是:掃描電子顯微鏡。 透射電鏡是透射成像,圖像是二維的,靠欠焦形成一定的圖像反差。 掃描電鏡是反射成像,圖像是三維的,有很好的立體感,但分辨
6、率低于透射電鏡,目前指標(biāo)分辨率可以達(dá)到3個(gè)納米,其它型式的顯微鏡,掃描隧道顯微鏡:利用隧道電流效應(yīng) 原子力顯微鏡:利用原子力效應(yīng) 激光力顯微鏡:利用激光作用力 磁力顯微鏡:利用磁作用力 以上各類顯微鏡都屬于探針觸摸效應(yīng)方式的,而光學(xué)顯微鏡和電子顯微鏡則屬于光的視覺(jué)效應(yīng)方式,使用電子顯微鏡的一般要求,由于電子顯微鏡鏡體內(nèi)為真空系統(tǒng),所以要求被分析物質(zhì)應(yīng)為干燥的,不含有水分或揮發(fā)性溶劑的樣品。 對(duì)于透射電鏡還要求被分析樣品要做的很薄,最好在100納米以下,以有利于電子束的穿透成像。 當(dāng)加速電壓較高時(shí),電子束的穿透力會(huì)更強(qiáng),所以樣品可以做得厚一些,透射電鏡的制樣目的,制樣目的:就是要使樣品做的很薄,
7、以利于電子束的穿過(guò)。 制樣方法:可以是粉碎;切片;研磨;減??;分散,以及復(fù)型或染色等等。 制樣使用的設(shè)備有:超薄切片機(jī);真空鍍膜機(jī);離子減薄儀等等,樣品制備的具體要求和方法,對(duì)于粉末樣品一般要求粒度應(yīng)小于300納米,粒度較大時(shí),會(huì)只能看到顆粒的輪廓,不能分析顆粒表面上的細(xì)節(jié)。 纖維類樣品得直徑應(yīng)最好小于200納米。 不論是纖維,粉末或高分子納米球的樣品都要在適當(dāng)?shù)娜芤褐凶隽己玫姆稚?,然后滴在或撈到銅網(wǎng)上的支撐膜上。 對(duì)于特殊樣品需要做特殊的制備,列如:切片,染色,離子減薄或復(fù)型處理,銅網(wǎng)和承載樣品的支撐膜,透射電子顯微鏡使用的銅網(wǎng)一般直徑為2毫米,上面銃有許多微米大小的孔,在銅網(wǎng)上覆蓋了一層很
8、薄的火棉膠膜并在上面蒸鍍了碳層以增加其膜的強(qiáng)度,被分析樣品就承載在這種支撐膜上。 如果在連續(xù)的火棉膠膜上再制出一些通透的孔,我們把這種支撐膜叫作“微篩”。高分辨分析時(shí)一般使用微篩來(lái)承載樣品,什么是染色,對(duì)于反射電子能力差,圖像襯度小的樣品常用染色的方法來(lái)提高成像的質(zhì)量。染色的目的就是讓被分析樣品結(jié)合上一些重金屬,以增加其反射電子的能力,使樣品成像的襯度變大,最終獲得高質(zhì)量的電鏡照片。 染色常常是對(duì)于生物樣品或高分子樣品而言的,染色的方法有許多種,對(duì)于不同的樣品其染色方法可能完全不同,無(wú)機(jī)粉末樣品的制備要求,首先,樣品的粒度要足夠的小,例如在100納米以下。如果有團(tuán)聚較大的顆粒,要適當(dāng)?shù)淖鲅心ヌ?/p>
9、理。 一般將粉末樣品置于無(wú)水乙醇之中,使用超聲波將其充分分散,然后再滴到微篩膜上,自然涼干后就可用于電鏡分析了,電鏡照片的分析,對(duì)電鏡照片的分析,應(yīng)先從各種資料中盡可能地對(duì)被分析樣品有所了解,估計(jì)可能出現(xiàn)的結(jié)果,再與電鏡照片進(jìn)行比對(duì),做出正確的解釋。 對(duì)于金屬氧化物可能具有一些典型的構(gòu)成形狀,如球形,條形,支形或核形等等,可以根據(jù)這些形狀來(lái)判斷金屬氧化物的種類和生長(zhǎng)情況。 現(xiàn)代電鏡一般都帶有“能譜”附件,對(duì)于不好判斷的晶粒形狀,可以使用X光能譜對(duì)所分析的樣品做分區(qū)元素分析,然后再做出其正確的判斷,單晶,多晶與非晶的比較,使用電鏡的電子衍射功能可以判斷樣品的結(jié)晶狀態(tài): 單晶為排列完好的點(diǎn)陣。 多晶為一組序列直徑的同心環(huán)。 非晶為一對(duì)稱的球形,電鏡使用中的一些問(wèn)題,放大倍數(shù)不是越大越好。 要搞清你做電鏡分析的目的。 不是什么樣品都能達(dá)到分辨率的指標(biāo)。 要獲得高質(zhì)量的電鏡照片,樣品制備是一個(gè)重要的因素。 好的設(shè)備,加上適當(dāng)?shù)臉悠诽幚砗途牡牟僮鞑拍艿玫礁咚降碾婄R分析結(jié)果,結(jié)束語(yǔ),電子顯微鏡以其超高的分辨率而優(yōu)于光學(xué)顯微鏡,使其廣泛地應(yīng)用于材料,醫(yī)學(xué),化學(xué),生物等諸多的領(lǐng)
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