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文檔簡介
1、.實驗十二 消化實驗 家兔離體小腸平滑肌生理特性目的要求 1、學習離體腸段平滑肌的實驗方法。 2、了解腸段平滑肌的生理特性。基本原理哺乳動物消化管平滑肌與肌肉組織共有的特性,如興奮性、傳導性和收縮性等。但消化管平滑肌又有其特點,即興奮性較低,收縮緩慢,富有伸展性,具有緊張性、自動節(jié)律性,對化學、溫度和機械牽張刺激較敏感等。這些特性可維持消化管內(nèi)一定壓力,保持胃腸等一定的形態(tài)和位置,適合于消化管內(nèi)容物的理化變化,在體內(nèi)受中樞神經(jīng)系統(tǒng)和體液因素的調(diào)節(jié)。將離體組織器官置于摸擬體內(nèi)環(huán)境的溶液中,可在一定時間內(nèi)保持其功能。本實驗以臺式液作灌流液,在體外觀察及記錄哺乳動物離體腸段的一般生理特性。動物與器材
2、 兔、恒溫平滑肌槽、支架、燒杯、20ml注射器、張力傳感器、生物機能實驗系統(tǒng)、溫度計、臺式液、腎上腺素(1:10000)、乙酰膽堿(1:10000)、阿托品針劑(1支)。方法與步驟 1、裝好實驗裝置,平滑肌槽恒溫調(diào)至37。 2、制備離體兔腸段 用木槌猛擊兔后頭延髓部,致其昏迷后立即剖開腹腔,找到胃幽門與十二指腸交界處。在十二指腸起始端扎一線,取出十二指腸、空腸、放入冷臺式液內(nèi)。先用20ml注射器沖洗內(nèi)容物,沖洗干凈后剪成若干約1.5cm長的小腸段(每一實驗小組一段)在其兩端結(jié)扎,一端做一短線環(huán)固定在通氣的浴皿內(nèi),另一端扎線與張力傳感器相連。將腸段完全浸浴在調(diào)好溫度的平滑肌槽中,并調(diào)整好臺式液充
3、氣量(小氣泡接連不斷)。3、開啟生物機能實驗系統(tǒng),接通與張力傳感器相連的通道。固定管并調(diào)節(jié)扎線與張力傳感器,使腸段運動自如又能牽動傳感器(注意:扎線不可貼壁或過緊過松)。調(diào)節(jié)增益與掃描速度,使腸段的運動曲線清晰地顯示在顯示器上并記錄腸段活動曲線。4、實驗觀察 (1)記錄對照腸段運動曲線后,停止供氣1分鐘并記錄曲線變化,同時觀察腸段緊張度變化。當出現(xiàn)明顯變化后,立即恢復供氣。用新鮮37臺式液沖洗,待恢復正常(注意作好標記)。 (2)記錄對照腸段運動曲線后,加入25臺式液,并記錄曲線變化,同時觀察腸段緊張度變化。同法,當出現(xiàn)明顯變化后,立即用37臺式液沖洗,待恢復正常。 (3)同法加入45臺式液并
4、記錄曲線變化,同時觀察腸段緊張度變化。當出現(xiàn)明顯變化后,立即用新鮮37臺式液沖洗并待恢復。 由于以上流出液中未加入藥物,可以回收使用。以下加入藥物的流出也不可再用。(4)同法,加入2滴腎上腺素(1:10000),觀察并記錄曲線變化。 (5)同法加入12滴乙酰膽堿(1:10000),觀察并記錄曲線變化。 (6)加入3滴阿托品后立即加入于(5)同樣劑量的乙酰膽堿,記錄并觀察曲線變化。同(5)比較曲線有何不同。 注意:1 加藥前必須準備好更換用的37臺式液。上述藥物劑量只是參考,效果不明顯可補加,每次加藥出現(xiàn)效果后,必須立即更換浴槽內(nèi)的臺式液并沖洗3次,待腸肌恢復正常后在觀察下一項目。浴槽內(nèi)臺式液要
5、保持一定溫度。2游離及取出腸段時,動作要快,取兔腸及兔腸穿線時盡可能不用金屬及手指觸及。為保持離體腸段的活性,可先預冷充氧的營養(yǎng)液,游離腸段及穿線在預冷的營養(yǎng)液中進行。實驗中始終通氣。思考題 1、本實驗是否可用麻醉動物的腸段?為什么?麻醉狀態(tài)影響腸段細胞的反應性以及對藥物的敏感度 2、進行哺乳動物離體組織器官實驗時,需控制哪些條件? 溫度:本實驗控制恒定溫度37度濕度:要時刻記住用相應的潤濕液潤濕,本次試驗用哺乳動物的臺氏液PH:要與哺乳動物體液相似避免不必要的刺激:不要用手或者是金屬觸碰離子成分與濃度:要與相關(guān)的動物體液相似,本實驗是臺氏液3、 為什么加入各種藥物會引起離體腸段活動的變化?其
6、機理是什么?adr對其是抑制作用可見離體腸管活動減弱,描記曲線出現(xiàn)收縮頻率變慢,幅度減小以及基線下移ach是促進作用,可見離體腸管活動增強,描記曲線出現(xiàn)收縮頻率變快,幅度增加。出現(xiàn)上述現(xiàn)象的機理,與消化道平滑肌細胞產(chǎn)生動作電位的離子基礎是Ca2+的內(nèi)流有關(guān)。阿托品是ach的阻斷劑。所以兩者加入個觀察到曲線無明顯變化。阻斷乙酰膽堿與肌膜上的M受體結(jié)合。HCL離體腸管活動減弱,描記曲線出現(xiàn)收縮幅度降低,頻率變慢。H+升高能干擾肌肉的代謝和肌絲滑行的生化過程: H+能與Ca2+競爭鈣調(diào)蛋白的結(jié)合位點而使肌球蛋白ATP酶活性降低;使肌原纖維對Ca2+的敏感性和 Ca2+從肌質(zhì)網(wǎng)的釋放量減少。加了NAOH腸管活動增強。中和了H離子改變了細胞外液的PH值所以恢復正常4、 加入阿托品后再加入乙酰膽堿,腸段活動受到抑制,為什么?這兩種藥對腸道平滑肌的作用正好相反,乙酰膽堿能促進腸道平滑肌蠕動,阿托品是膽堿能神經(jīng)阻斷劑,能抑制腸道平滑肌蠕動。兩藥同時使用,阿托品阻斷了乙酰膽堿的作用,所以表現(xiàn)出腸道活動受到抑制。 5、根據(jù)實驗結(jié)果,說明平滑肌的生理特性消化管平滑肌又有其特點,即興奮性較低,收縮緩慢,富有伸展性,具有緊張性、自動節(jié)律性,對化學、溫度和機械牽張
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