《組培接種工培訓(xùn)教》PPT課件.ppt

1、組培接種工培訓(xùn)教程,科研中心組培車間,目錄,基本概念 規(guī)章制度 接種技術(shù) 安全生產(chǎn),基本概念,組織培養(yǎng)：根據(jù)植物細(xì)胞全能性，利用植物的一部分組織，在人工培養(yǎng)的條件下，使之不斷的快速分化繁殖，最終形成與母本植株相同性狀的大量種苗，簡稱組培。 培養(yǎng)基：為培養(yǎng)物提供營養(yǎng)物質(zhì)，并起到固定作用的介質(zhì)。,基本概念,污染：因受外界因素感染，培養(yǎng)基表面或內(nèi)部長出細(xì)菌或真菌的現(xiàn)象。 真菌：白色、黃色或黑色等毛狀霉菌，分布在培養(yǎng)基表面或瓶壁，接種后48天形成可見菌落，主要傳播途徑:空氣傳播。（一般操作不規(guī)范容易引起，如手經(jīng)過牛皮紙、經(jīng)過消毒好的瓶口上方、口罩沒戴好等等。） 細(xì)菌：白色、黃色或紅色絲狀、片狀菌落，表

2、面光滑濕潤，邊界清晰，分布在培養(yǎng)基表面、內(nèi)部，植株基部切口處。接種后35天形成。主要轉(zhuǎn)播途徑：接觸傳播。（一般是工具沒消毒好或工具碰到其它物體還在繼續(xù)使用，牛皮紙被切破碰到臺面等引起） 。,基本概念,有菌：已經(jīng)污染的材料或培養(yǎng)基（瓶內(nèi)任何部位一旦帶菌均視為污染）工作臺四壁、工作臺面、瓶子、酒精燈、培養(yǎng)瓶外壁、未消毒的接種工具、操作人員的體表、呼吸出的氣體、說話時濺出的唾液。 無菌：消毒后未污染培養(yǎng)瓶內(nèi)部，未污染的母體材料瓶內(nèi)部，消毒后的紙包內(nèi)部，消毒后的鑷子和刀片前端，工作臺內(nèi)部的空氣。 污染的形成：有菌和無菌的直接或間接接觸，無菌部位的風(fēng)向上方有有菌物體存在或經(jīng)過。 （容易污染的環(huán)節(jié)？）,基

3、本概念,無菌操作：在特定的無菌設(shè)備下，遵守嚴(yán)格的技術(shù)規(guī)范進(jìn)行的操作方式。 接種：在組培過程中，在無菌條件下，把芽叢從母瓶中取出，切分整理后，再接入新的培養(yǎng)基當(dāng)中。,規(guī)章制度,凈區(qū)工作人員工作守則 1.禁止在培養(yǎng)室、接種室內(nèi)講話、串崗。 2.禁止將臟物品（包括衣服）帶進(jìn)培養(yǎng)室、接種室。 3.患感冒時不準(zhǔn)入室操作。 4.室內(nèi)操作時動作要輕、緩，不允許打鬧和大聲說話。 5.進(jìn)更衣室前先脫鞋、換衣服后用肥皂洗手、過風(fēng)淋室、穿拖鞋、穿白大褂戴帽子（把所有頭發(fā)全戴進(jìn)）、戴口罩、進(jìn)出門必須隨手關(guān)門。 工作人員要勤洗澡、勤換衣服、勤剪指甲。 禁止在接種室內(nèi)聽MP3、接電話、發(fā)短信。,規(guī)章制度,工作臺使用操作守

4、則 1.使用超凈工作臺前，必須確認(rèn)有關(guān)插座、插頭、電源線和開關(guān)無明顯故障。 2.工作臺運(yùn)行過程中，如發(fā)現(xiàn)有異常聲音、氣味出現(xiàn)，應(yīng)立即切斷電源。 3.在下班時，必須超凈關(guān)閉工作臺的所有開關(guān)。 4.酒精燈、酒精紗布、裝有酒精的瓶子必須遠(yuǎn)離消毒器。 5.接種工具在消毒完成后要及時拿出，避免過熱燙傷。（一般消毒器溫度達(dá)到270度以上開始計時，消毒一分鐘以上為完成消毒）。 6.工作臺使用電源為4格指示燈。,規(guī)章制度,酒精燈使用操作守則 1.添加酒精時酒精燈必須是熄滅狀態(tài)。 2.酒精燈每次添加酒精時，最多可加至2/3容量處，切勿加滿。（酒精燈使用95%濃度的酒精） 3.酒精燈口有明顯缺口或裂縫時，不可繼續(xù)

5、使用（易爆）。 4.工作臺上的瓶子堆放要穩(wěn)固，雙手的移動要小心，避免砸碎或碰翻酒精燈。 5.三角瓶類（包括蘭苗瓶)禁止堆疊，以防翻倒。 6.酒精燈意外失火時，要迅速用的牛皮紙或浸有消毒藥水毛巾撲滅火焰。 7.熄滅酒精燈時必須是蓋滅，絕不可以吹滅。,規(guī)章制度,接種器械使用操作守則 1.在解剖刀柄上裝卸刀片時，必須首先經(jīng)過培訓(xùn)。 2.安裝刀片時，手指應(yīng)避開刀口方向，夾緊刀背一側(cè)往刀柄方推動。 3.拆卸刀片時，應(yīng)先確認(rèn)刀片已經(jīng)處于冷卻狀態(tài)。,操作技術(shù)小瓶無菌操作技術(shù)規(guī)范,1.準(zhǔn)備工作程序 操作人員換上拖鞋，通過工作人員通道，進(jìn)入準(zhǔn)備室。 在準(zhǔn)備室內(nèi)，先換去外套，再用肥皂洗手，通過風(fēng)淋室風(fēng)淋后，進(jìn)入更

6、衣室。 在更衣室內(nèi)，穿上工作服，戴好帽子、口罩。 用痱子粉擦拭雙手后戴上手套，進(jìn)入接種室，打開工作臺風(fēng)機(jī)，打開消毒器。 小玻璃瓶中倒入消毒酒精浸泡紗布。,操作技術(shù)小瓶無菌操作技術(shù)規(guī)范,2、酒精消毒工作臺及工具 .使用消毒酒精浸泡的紗布擦拭，程序為：工作臺頂上一面前方送風(fēng)正處一面右 側(cè)玻璃臺面右邊裝酒精的小瓶子并打開瓶塞/消毒器刀架、刀、鑷子酒精燈噴壺裝酒精的瓶子左側(cè)玻璃臺面左邊把工具擺在適當(dāng)?shù)奈恢谩＃ㄋ邢揪凭珵?5%的酒精),操作技術(shù)-小瓶無菌操作技術(shù)規(guī)范,3.用酒精燈的火焰消毒刀架、刀、鑷子（用外焰，第一次要燒徹底，刀片燒黑，刀尖發(fā)紅，鑷子尖發(fā)紅）。 4.將培養(yǎng)基和材料用消毒酒精浸泡的紗

7、布擦拭后擺放到工作臺面左側(cè)。,操作技術(shù)-小瓶無菌操作技術(shù)規(guī)范,5.用消毒過的鑷子從信封內(nèi)取出無菌紙（注意手勢），拿起材料瓶打開蓋子時，左手拿瓶蓋，右手拿瓶身，打開后瓶蓋不離手，并將瓶身放入左手心中、再從材料瓶中取出材料放在紙上切分，切分完成后，先把苗接入相應(yīng)的培養(yǎng)基中放好，接完后再用酒精紗布把刀子和鑷子擦干凈插入消毒器中消毒以備后用。,操作技術(shù)-小瓶無菌操作技術(shù)規(guī)范,6.收拾臺面：把牛皮紙上的廢材料倒入回收盆內(nèi)，把空的培養(yǎng)瓶、使用過的牛皮紙拿出工作臺，并用酒精紗布擦去紙上的殘留物，最后把臺面擦干凈。,操作技術(shù)-小瓶無菌操作技術(shù)規(guī)范,7.下一瓶材料轉(zhuǎn)接程序 用酒精紗布擦放適當(dāng)數(shù)量的培養(yǎng)基和材料把

8、先前消毒好的刀和鑷子放到紙上，火焰消毒或消毒器消毒下一套工具，火焰消毒時要燒至即將發(fā)紅即可，消毒器消毒時至少1分鐘，然后放置于刀架上冷卻待用567。,操作技術(shù)-小瓶無菌操作技術(shù)規(guī)范,8.材料接完后或下午下班前，要寫好標(biāo)簽貼在接好的瓶子上，標(biāo)簽的書寫包括四個內(nèi)容：品種名稱、接種日期、培養(yǎng)基編號、接種員編號；品種為原材料的品種，培養(yǎng)基編號為相應(yīng)編號，每種培養(yǎng)基都有編號；另外將接好的苗和未用完的原材料、培養(yǎng)基等分別放到指定的位置。 例如：在3月12日B2接非洲菊FP品種，同時接的繼代和生根，沒到下班 時間就下班了，B2要將接好的該品種貼上標(biāo)簽放到指定的位置；標(biāo)簽 的書寫分別為： FB 3.12 FB

9、 3.12 C1 B2 C2 B2,技術(shù)規(guī)范-小瓶無菌操作技術(shù)規(guī)范,9.注意事項 9.1 臺面上瓶數(shù)不可過多，打開瓶蓋的瓶子嚴(yán)禁前方有物體遮擋。 9.2 火焰消毒一定要用外焰，消毒器消毒時間一定要保證至少1分鐘的時間。 9.3 手離開工作臺后重新回到臺內(nèi)工作前一定要用酒精重新消毒。 9.4 中午下班后必須將刀和鑷子拿出消毒器放在刀架上，有紗布的酒精瓶要蓋好蓋子，下午下班時刀、鑷子和刀架重新用火焰消毒，最上面一張牛皮紙也要棄去不用。 9.5 裝無菌紙的大信封如有破損則不可使用，用完的無菌紙要用酒精紗布將廢材料擦干凈。 9.6在沒有特殊要求的情況下，材料每次只能開一瓶，如有特殊要求由組長另行通知。,操作技術(shù)-蘭花瓶無菌操作技術(shù)規(guī)范,1.準(zhǔn)備工作程序 -操作人員換上拖鞋，通過工作人員通道， 進(jìn)入準(zhǔn)備室。 -在準(zhǔn)備室內(nèi)先脫去外套，再用肥皂洗手，通過風(fēng)淋室風(fēng)淋后，進(jìn)入更衣室。 -在更衣室內(nèi)，穿上工作服，戴上帽子、口罩。 -用痱子粉擦拭雙手后戴上手套，進(jìn)入接種室，打開工作臺風(fēng)機(jī)，打開消毒器。 -小玻