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文檔簡介
1、專題一、傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用1.(2009浙江自選,17, 中)下面是有關(guān)食醋和泡菜制作的實驗。請回答:(1)食醋可用大米為原料經(jīng)三步發(fā)酵來制作:第一步: 大米經(jīng)蒸熟、冷卻后加入淀粉酶, 將原料中的淀粉分解成(填中間產(chǎn)物), 然后進一步分解成葡萄糖, 這一過程可用(填淀粉指示劑)來檢測, 因為該試劑遇淀粉呈藍色, 遇上述中間產(chǎn)物呈紅色。第二步: 用菌將葡萄糖轉(zhuǎn)化成乙醇, 這一發(fā)酵過程中, 玻璃發(fā)酵瓶不應(yīng)完全密閉的主要原因是。第三步: 用菌將乙醇轉(zhuǎn)化成乙酸, 這一過程氧氣。(2)泡菜發(fā)酵過程中, 會產(chǎn)生多種酸, 其中主要是, 還有少量的亞硝酸。對亞硝酸鹽的定量測定可以用法, 因為亞硝酸鹽與對氨基苯
2、磺酸的反應(yīng)產(chǎn)物能與n-1-萘基乙二胺偶聯(lián)成色化合物。進行樣品測定時, 還要取等量水進行同樣的測定, 目的是。答案:(1) 糊精碘液(ki-i2溶液)酵母發(fā)酵過程中會產(chǎn)生大量co2,使瓶內(nèi)壓力升高而可能引起爆裂醋化醋桿(醋桿)需要消耗(2)乳酸(或有機酸)(光電)比色紫紅作為對照解析:(1)大米經(jīng)蒸熟、冷卻后加入淀粉酶(淀粉酶必須冷卻后加入, 因為酶在高溫時會變性失活), 大米的主要成分是淀粉, 在淀粉酶催化作用下, 分解成糊精(主要含麥芽糖等), 這一過程可用碘液(或ki-i2溶液)來檢測。酵母菌將葡萄糖轉(zhuǎn)化成乙醇的過程中產(chǎn)生co2, 隨反應(yīng)的進行, 發(fā)酵瓶中co2逐漸增多,瓶內(nèi)壓力升高, 可
3、能引起破裂, 所以不要完全密閉。醋桿菌是好氧型細菌, 在將乙醇轉(zhuǎn)化成乙酸的過程中消耗氧氣。(2)泡菜發(fā)酵過程中離不開乳酸菌, 其產(chǎn)生的酸主要是乳酸, 還有少量的亞硝酸。亞硝酸鹽總量達到0. 30. 5 g 時就會引起人中毒, 必須對泡菜中亞硝酸鹽含量進行測定, 其測定可用比色法。2.(2010海南單科,25, 易)葡萄發(fā)酵可產(chǎn)生葡萄酒, 請利用相關(guān)的知識回答問題:(1)利用葡萄制作葡萄酒的過程中, 發(fā)揮作用的微生物是。(2)該微生物通過無氧呼吸可分解, 產(chǎn)生的終產(chǎn)物是和。(3)甲、乙、丙三位同學(xué)將葡萄榨成汁后分別裝入相應(yīng)的發(fā)酵瓶中, 在溫度等適宜的條件下進行發(fā)酵, 如圖所示。發(fā)酵過程中, 每隔
4、一段時間均需排氣一次。據(jù)圖分析, 甲和丙同學(xué)的操作有誤, 其中甲同學(xué)的錯誤是, 導(dǎo)致發(fā)酵中出現(xiàn)的主要異常現(xiàn)象是。丙同學(xué)的錯誤是,導(dǎo)致發(fā)酵中出現(xiàn)的主要異?,F(xiàn)象是。上述發(fā)酵過程結(jié)束后, 甲、乙、丙同學(xué)實際得到的發(fā)酵產(chǎn)品依次是、。(4)在上述制作葡萄酒的過程中, 假設(shè)乙同學(xué)的某一步驟操作錯誤導(dǎo)致發(fā)酵瓶瓶塞被沖開, 該操作錯誤是。答案:(1)酵母菌(2)葡萄糖乙醇co2(3)未夾住發(fā)酵瓶的充氣管發(fā)酵液從充氣管流出, 發(fā)酵液變酸瓶中發(fā)酵液過多, 淹沒了排氣管在瓶內(nèi)的管口排氣時發(fā)酵液從排氣管流出葡萄醋葡萄酒葡萄酒(4)未及時排氣解析:在制作果酒的時候, 常用酵母菌作菌種; 酵母菌酒精發(fā)酵進行的是無氧呼吸,
5、 所以甲同學(xué)未夾住發(fā)酵瓶的充氣管, 導(dǎo)致有氧氣進入, 酵母菌進行有氧呼吸, 產(chǎn)生較多的二氧化碳, 使發(fā)酵液從充氣管流出, 發(fā)酵液變酸; 而丙同學(xué)的錯誤是瓶中發(fā)酵液過多, 淹沒了排氣管在瓶內(nèi)的管口, 抑制發(fā)酵的進行, 一般來說, 發(fā)酵液不超過容器的2/3; 上述發(fā)酵過程結(jié)束后, 甲、乙、丙同學(xué)實際得到的發(fā)酵產(chǎn)品依次是葡萄醋、葡萄酒、葡萄酒。3.(2012海南單科, 30, 易)回答下列關(guān)于腐乳制作的問題:(1)腐乳是豆腐經(jīng)微生物發(fā)酵后制成的食品。多種微生物參與了該發(fā)酵過程, 其中起主要作用的微生物是, 其產(chǎn)生的蛋白酶可將豆腐中的蛋白質(zhì)水解為和; 其產(chǎn)生的能將豆腐中的脂肪水解為和。(2)發(fā)酵完成后
6、需加鹽腌制, 加鹽還可以抑制生長。(3)腐乳制作的后期可加入由酒和多種香辛料配制而成的鹵湯。鹵湯除具有一定的防腐作用外, 還能使腐乳具有獨特的。9答案:(15分)(1)毛霉肽氨基酸脂肪酶甘油脂肪酸(每空2分, 共12分)(2)微生物(2分)(3)風味(1分, 其他合理答案也給分)解析:本題考查腐乳制作過程的相關(guān)知識。(1)腐乳是以豆腐為原料, 在毛霉以及多種微生物參與下發(fā)酵而制成的食品, 富含易被人體吸收的多種營養(yǎng)物質(zhì), 如多肽、氨基酸等。腐乳制作過程中, 豆腐中的蛋白質(zhì)在蛋白酶的作用下被水解為多肽, 進而在肽酶的作用下被水解為各種氨基酸; 脂肪在脂肪酶的作用下被分解為甘油和脂肪酸。(2)在發(fā)
7、酵完成后的腌制過程中, 鹽能抑制微生物的生長, 防止豆腐塊腐敗變質(zhì)。(3)鹵湯除能防腐外, 還可使腐乳具有獨特的風味。4.(2011重慶理綜,30, 中)某興趣小組將豆腐塊滅菌, 接種微生物后培養(yǎng)2天, 加入適量食鹽, 經(jīng)密封放置10天后制得豆腐乳。(1)在保質(zhì)期內(nèi), 豆腐乳放置時間越長, 蛋白質(zhì)含量越低, 短肽和氨基酸含量越高。為探究其原因, 該小組取適量豆腐乳制成樣液, 等量加入各試管, 進行了以下實驗。處理編號處理方法顯色結(jié)果37放置0min加入等量雙縮脲試劑紫色37放置10min?37放置120min?100加熱5min后,37放置120min紫色實驗中, 加入雙縮脲試劑a后, 樣液的
8、顏色將。處理中,100加熱的目的是。如果處理與處理相比, 顯色較, 且處理與處理相比, 顯色較, 則表明豆腐乳中蛋白質(zhì)被微生物產(chǎn)生的分解。最終使短肽和氨基酸等含量增加, 因此保質(zhì)期內(nèi)豆腐乳放置越久風味越佳。(2)食用豆腐乳后, 其中的氨基酸可以在人體內(nèi)通過作用形成新的氨基酸, 還可以由氨基酸產(chǎn)生的不含氮部分合成。32答案:(1)不變使酶失活淺淺蛋白酶(肽酶)(2)氨基轉(zhuǎn)換糖類和脂肪解析:(1)雙縮脲試劑由a液(0.1 g/ml naoh溶液)和b液(0. 01 g/ml cuso4溶液)構(gòu)成。在蛋白質(zhì)溶液中只加入a液, 顏色沒有變化。由于微生物產(chǎn)生的蛋白酶(肽酶)可以將蛋白質(zhì)分解為短肽和氨基酸
9、, 所以, 放置時間越長, 豆腐乳樣液和雙縮脲試劑反應(yīng), 溶液顏色就越淺, 但是, 組中的豆腐乳樣液由于經(jīng)加熱處理, 蛋白酶失活,故組豆腐乳樣液加入等量雙縮脲試劑后, 顯色沒有變淺。(2)食用氨基酸含量豐富的豆腐乳后, 其中的氨基酸可以通過轉(zhuǎn)氨基作用形成新的氨基酸。氨基酸產(chǎn)生的不含氮部分還可以合成糖類和脂肪。5.(2015廣東理綜,29,16分)泡菜是我國的傳統(tǒng)食品之一,但制作過程中產(chǎn)生的亞硝酸鹽對人體健康有潛在危害。某興趣小組準備參加“科技創(chuàng)新大賽”,查閱資料得到下圖。(1)制作泡菜時,泡菜壇一般用水密封,目的是_。乳酸菌發(fā)酵第一階段的產(chǎn)物有。(2)據(jù)圖,與第3天相比,第8天后的泡菜更適于食
10、用,因為后者_;ph呈下降趨勢,原因是。(3)該小組得到一株“優(yōu)選”乳酸菌(亞硝酸鹽還原酶活力比普通乳酸菌高5倍),擬參照資料的實驗方案和食鹽濃度(4%10%),探究與普通乳酸菌相比用“優(yōu)選”乳酸菌制作泡菜過程中亞硝酸鹽含量的高低,并確定其最適條件。請你設(shè)計一個實驗結(jié)果記錄表,并推測實驗結(jié)論。答案:(16分)(1)創(chuàng)造無氧環(huán)境(1分)丙酮酸、h、atp(3分)(2)亞硝酸鹽含量已接近最低水平(1分)乳酸積累(2分)(3)結(jié)果記錄表(6分)亞硝酸鹽含量(單位:mg/kg)食鹽濃度(%)乳酸菌發(fā)酵時間(d)123456789104普通優(yōu)選7普通優(yōu)選10普通優(yōu)選注:其他合理答案酌情給分。推測實驗結(jié)論
11、:用“優(yōu)選”乳酸菌制作泡菜,亞硝酸鹽含量更低(1分)最適條件是亞硝酸鹽含量最低時的食鹽濃度和發(fā)酵時間(2分)解析:(1)由于乳酸菌是厭氧細菌,制作泡菜時,泡菜壇一般用水密封,目的是隔絕空氣,創(chuàng)造無氧環(huán)境。乳酸菌發(fā)酵第一階段的產(chǎn)物是丙酮酸、h和atp。(2)析圖可知,8天后的泡菜中亞硝酸鹽含量低,更適于食用。制作泡菜過程中,由于乳酸的積累,ph呈下降趨勢。(3)該實驗的目的是比較“優(yōu)選”乳酸菌和普通乳酸菌在制作泡菜過程中亞硝酸鹽含量的高低,并確定最適條件,故表格的設(shè)計要體現(xiàn)不同時間不同食鹽濃度下兩種乳酸菌的亞硝酸鹽含量的差異。實驗結(jié)論應(yīng)是優(yōu)選乳酸菌制作的泡菜中亞硝酸鹽含量更低,并確定最適于兩種乳
12、酸菌的食鹽濃度。6.(2013課標,39,15分)回答下列有關(guān)泡菜制作的問題:(1) 制作泡菜時, 所用鹽水需煮沸, 其目的是。為了縮短制作時間, 有人還會在冷卻后的鹽水中加入少量陳泡菜液, 加入陳泡菜液的作用是。(2) 泡菜制作過程中, 乳酸發(fā)酵的過程即為乳酸菌進行的過程。該過程發(fā)生在乳酸菌細胞的中。(3) 泡菜制作過程中影響亞硝酸鹽含量的因素有、和等。(4) 從開始制作到泡菜品質(zhì)最佳這段時間內(nèi), 泡菜液逐漸變酸。這段時間內(nèi)泡菜壇中乳酸菌和其他雜菌的消長規(guī)律是, 原因是。答案:(1) 殺滅雜菌增加乳酸菌數(shù)量(2) 無氧呼吸細胞質(zhì)(3) 溫度腌制時間食鹽用量(4) 乳酸菌數(shù)量增多, 雜菌數(shù)量減
13、少乳酸菌比雜菌更為耐酸解析:本題主要考查泡菜制作的原理和方法。(1) 泡菜制作時, 所用鹽水煮沸可殺滅雜菌; 由于陳泡菜液中含有較多的乳酸菌, 所以制作泡菜時加入少量陳泡菜液可增加發(fā)酵過程中乳酸菌的數(shù)量, 從而縮短制作時間。(2) 乳酸菌發(fā)酵屬于無氧呼吸, 乳酸菌進行無氧呼吸的場所是細胞質(zhì)。(3) 泡菜制作過程中, 溫度過高、食鹽用量過低、腌制時間過短容易造成細菌大量繁殖, 亞硝酸鹽含量增加, 故制作時要注意控制溫度、腌制時間、食鹽用量等條件。(4) 泡菜制作過程中, 由于乳酸菌發(fā)酵產(chǎn)生乳酸, 泡菜液逐漸變酸, 從而抑制了雜菌的繁殖, 雜菌數(shù)量減少。專題二、微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用一、基礎(chǔ)知識點1.
14、 微生物的培養(yǎng)和分離技術(shù)(1)微生物生長需要一般都含有(2)培養(yǎng)基的制作合格與否通過的培養(yǎng)基表面來驗證(3)是指使用強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物,包括芽孢和孢子。是指用較為溫和的理化方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對人體有害的微生物,不包括芽孢、孢子。滅菌的方法有、;用于接種用的金屬工具;用于能耐高溫的,需要保持干燥的玻璃器皿等;用于培養(yǎng)基等消毒的方法有,用于液體消毒;,用于不耐高溫的液體;化學(xué)藥劑或紫外線消毒,用于物體表面的消毒。(4)配制固體培養(yǎng)基的步驟:、(5)微生物接種的方法最常用的是和。是通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作。將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。在
15、數(shù)次劃線后培養(yǎng),可以分離到由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的子細胞群體,這就是純化的菌落。是將菌液進行一系列的,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面,進行培養(yǎng)。分為系列稀釋操作和涂布平板操作兩步。(6)平板冷凝后,為防止冷凝水滴到培養(yǎng)基上,所以培養(yǎng)時平板一定要。(7)接種操作每次劃線之前都要接種環(huán),是因為每次操作都要及時滅菌,以防污染雜菌。操作結(jié)束時,仍然需要灼燒接種環(huán)的原因是。2. 特定微生物的數(shù)量的測定(8)測定微生物數(shù)量的方法有、。3. 培養(yǎng)基對微生物的選擇作用(9)在微生物學(xué)中,將允許特定種類的微生物生長,同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基,稱做。例如:在培養(yǎng)基的配方
16、中,將尿素作為培養(yǎng)基中唯一的氮源,原則上只有能夠利用尿素的微生物才能夠生長。(10)選擇培養(yǎng)基配置的原理是。培養(yǎng)基中加入可以分離出酵母菌和霉菌;培養(yǎng)基中不加可以分離出固氮微生物二、真題訓(xùn)練1.(2011年新課標卷)有些細菌可分解原油,從而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同學(xué)欲從污染的土壤中篩選出高效降解原油的菌株?;卮饐栴}:在篩選過程中,應(yīng)將土壤樣品稀釋液接種于以 為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上,從功能上講,該培養(yǎng)基屬于 培養(yǎng)基。純化菌種時,為了得到單菌落,常采用的接種方法有兩種,即 和 。為了篩選出高效菌株,可比較單菌落周圍分解圈的大小,分解圈大說明該菌株的降解能力 。通常情況下,在微生物培養(yǎng)過程
17、中實驗室常用的滅菌方法有灼燒滅菌、 和 。無菌技術(shù)要求試驗操作應(yīng)在酒精燈 附近進行,以避免周圍環(huán)境中微生物的污染。2、(2012上海卷)回答下列關(guān)于微生物和酶的問題。高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)中有很大的實用性。研究者從熱泉中篩選了高效產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌,其篩選過程如圖15所示。(1)過程稱為_,過程是為了_。來源:中國教育出版網(wǎng)(2)號培養(yǎng)基稱為_(按功能分);該培養(yǎng)基中除了加入淀粉外,還需加入另一種重要的營養(yǎng)成分_。 a瓊脂 b葡萄糖 c硝酸銨 d碳酸氫鈉(3)一般對配制的培養(yǎng)基采用高壓滅菌,其中“高壓”是為了_。在高溫淀粉酶運用到工業(yè)生產(chǎn)前,需對該酶的最佳溫度范圍進
18、行測定。圖16中的曲線表示酶在各種溫度下酶活性相對最高酶活性的百分比。將酶在不同溫度下保溫足夠長的時間,再在酶活性最高的溫度下測其殘余酶活性,由此得到的數(shù)據(jù)為酶的熱穩(wěn)定性數(shù)據(jù),即圖16中的曲線。 (4)根據(jù)圖中的數(shù)據(jù),判斷該酶使用的最佳溫度范圍是_。a40一50 b50一60 c60一70 d70-80(5)據(jù)圖判斷下列敘述錯誤的是_。a該酶只能在最佳溫度范圍內(nèi)測出活性 b曲線35數(shù)據(jù)點是在80時測得的c曲線表明80是該酶活性最高的溫度d曲線表明該酶的熱穩(wěn)定性在70之后急劇下降來源:中教網(wǎng)3、(2013新課標卷ii)臨床試用抗生素前,有時需要做細菌耐藥實驗。實驗時,首先要從病人身上獲取少量樣本
19、,然后按照一定的實驗步驟操作,以確定某致病菌對不同抗生素的敏感性?;卮鹣铝袉栴}:(1)為了從樣本中獲取致病菌菌落,可用_法或_法將樣本借種于固體培養(yǎng)基表面,經(jīng)過選擇培養(yǎng)、鑒別等步驟獲得。(2)取該單菌落適當稀釋,用_法接種于固體培養(yǎng)基表面,在37培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h,使其均勻生長,布滿平板。(3)為了檢測該致病菌對于抗生素的敏感性,將分別含有a,b,c,d四種抗生素的濾紙片均勻置于該平板上的不同位置,培養(yǎng)一段時間后,含a的濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈,說明該致病菌對抗生素a_;含b的濾紙片周圍沒有出現(xiàn)透明圈,說明該致病菌對抗生素b_;含c的濾紙片周圍的透明圈比含a的小,說明_;含d的濾紙片周圍的透明圈也
20、比含a的小,且透明圈中出現(xiàn)了一個菌落,在排除雜菌污染的情況下,此菌落很可能是抗生素d的_。來源:zxxk.com(4)根據(jù)上述實驗結(jié)果,為達到抗菌目的,最好應(yīng)選擇抗生素_。4、 (2013四川卷)普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱,有人將地衣芽胞桿菌的-淀粉酶基因轉(zhuǎn)入酵母菌中,經(jīng)篩選得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌種(過程如圖甲所示)。來源:學(xué)#科#網(wǎng) 為達到篩選目的,平板內(nèi)的固體培養(yǎng)基應(yīng)以作為唯一碳源。、過程需要重復(fù)幾次,目的是 。某同學(xué)嘗試過程的操作,其中一個平板經(jīng)培養(yǎng)后的菌落分布如圖乙所示。該同學(xué)的接種方法是 ;推測該同學(xué)接種時可能的操作失誤是 。以淀粉為原料,用工程酵母菌和普通酵母菌在
21、相同的適宜條件下密閉發(fā)酵,接種 菌的發(fā)酵罐需要先排氣,其原因是 。5、(課標卷) 為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況,某研究小組測定了該河流水樣中的細菌含量,并進行了細菌的分離等工作?;卮鹣铝袉栴}:(1)該小組采用稀釋涂布平板法檢測水樣中的細菌含量。在涂布接種前,隨機取若干滅菌后的空平板先行培養(yǎng)了一段時間,這樣做的目的是 ;然后,將1ml水樣稀釋100倍,在3個平板上用涂布法分別接入0.1ml稀釋液;經(jīng)適當培養(yǎng)后,3個平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37。據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為 。(2)該小組采用平板劃線法分離水樣中的細菌。操作時,接種環(huán)通過 滅菌,在第二次及以后劃線時,總是從上一次的末端開始劃
22、線。這樣做的目的是 。(3)示意圖a和b中, 表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。 (4)該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻,一部分進行靜置培養(yǎng),另一部分進行振蕩培養(yǎng)。結(jié)果發(fā)現(xiàn):振蕩培養(yǎng)的細菌比靜置培養(yǎng)的細菌生長速度快。分析其原因是:振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液的 的含量,同時可以使菌體與培養(yǎng)液充分接觸,提高 的利用率。6、(課標卷)植物秸稈中的纖維素可被某些微生物分解?;卮鹣铝袉栴}:(1)分解秸稈中纖維素的微生物能分泌纖維素酶,該酶是由3種組分組成的復(fù)合酶,其中的葡萄糖苷酶可將 分解成 。(2)在含纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅(cr)時,cr可與纖維素形成 色復(fù)合物。用含有cr的該種
23、培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時,培養(yǎng)基上會出現(xiàn)以該菌的菌落為中心的 。 (3)為從富含纖維素的土壤中分離獲得纖維素分解菌的單菌落,某同學(xué)設(shè)計了甲、乙兩種培養(yǎng)基(成分見下表):酵母膏無機鹽淀粉纖維素粉瓊脂cr溶液水培養(yǎng)基甲+-+培養(yǎng)基乙+-+ 注:“+”表示有,“”表示無。據(jù)表判斷,培養(yǎng)基甲 (填“能”或“不能”)用于分離和鑒別纖維素分解菌,原因是 ;培養(yǎng)基乙 (填“能”或“不能”)用于分離和鑒別纖維素分解菌,原因是 ;答案一、基礎(chǔ)知識點1.(1)水碳源氮源無機鹽(2)是否有菌落生長(3)滅菌消毒灼燒滅菌干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌灼燒滅菌干熱滅菌高壓蒸汽滅菌煮沸消毒法巴氏消毒法(4)計算稱量溶化滅菌倒平板
24、(5)平板劃線法稀釋涂布平板法平板劃線法稀釋涂布平板法梯度稀釋(6)倒置。(7)灼燒防止雜菌污染環(huán)境。2.(8)顯微鏡直接計數(shù)統(tǒng)計菌落數(shù)目。3.(9)選擇培養(yǎng)基(10)增加或減去某種成分,使要選擇的微生物能生長,其它微生物不能生長青霉素氮源二、真題訓(xùn)練1.【答案】原油 選擇平板劃線法 稀釋涂布平板法強。干熱滅菌法 高壓蒸汽滅菌法 火焰2【答案】(1)稀釋 單個菌落的篩選(或篩選)(2)選擇培養(yǎng)基 c(3)殺死培養(yǎng)基中的細菌芽孢(4)c(5)a【解析】(1)由圖中顯示,在前后試管中細菌數(shù)目減少,可推知此過程為稀釋,過程后使用劃線法對細菌進行固體培養(yǎng)基培養(yǎng),可推知此過程為分離純化嗜熱菌。(2)由圖
25、示可知表示過程是嗜熱菌分離純化的過程,號培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基。在培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基中,碳源和氮源必不可少,所以除淀粉外還應(yīng)加入硝酸銨。(3)細菌芽孢是在極端環(huán)境中產(chǎn)生的,具有耐高溫等特點,只有用高溫高壓,才能殺死細菌芽孢,防止培養(yǎng)基污染。(4)在使用該酶時,應(yīng)保證活性較高、酶的熱穩(wěn)定性較好的溫度范圍。由圖中數(shù)據(jù)可知,6070符合要求。(5)酶活性受溫度影響,在不同的溫度下,都可以測定酶的活性,a錯誤;由曲線可知,該酶的最適溫度是80,曲線中的數(shù)據(jù)是將酶在不同溫度下保溫足夠長的時間,再在酶活性最高的溫度下測其殘余酶活性,對于b選項而言是將該酶在35下上時間保存,然后在80下測定該酶活性,b、c正確
26、。曲線顯示,酶的熱穩(wěn)定性從30開始不斷下降,在70后,急劇下降,d正確。來源:中國教育出版網(wǎng)4【答案】(1) 淀粉 篩選出真正高效利用淀粉的工程酵母菌菌種 (2)稀釋涂布法 涂布不均勻 (3)工程酵母 工程酵母菌利用淀粉的速度很快,發(fā)酵產(chǎn)生co2的速度也很快 5【答案】(1)檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格 3.8107(2)灼燒; 將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落(3)b 、溶解氧 營養(yǎng)物質(zhì)【解析】(1)為了確定培養(yǎng)基的滅菌是否合格,微生物學(xué)實驗一般會設(shè)置空白對照:隨機取若干滅菌后的空平板培養(yǎng)一段時間,觀察培養(yǎng)基上是否有菌落生成;利用平板菌落計數(shù)法的計算公式估算水樣中的活菌
27、數(shù): (2)接種時接種環(huán)需要灼燒滅菌;在第二次及以后劃線時,總是從上一次的末端開始劃線,這樣做的目的是:通過劃線次數(shù)的增加,使每次劃線時菌體的數(shù)目逐漸減少,以便得到菌落。(3)由題圖可知b圖為平板劃線法接種的結(jié)果(菌落相對均勻分布)。(4)震蕩培養(yǎng)可以增加液體培養(yǎng)基的氧氣含量,促進好氧型微生物的生長;另外震蕩培養(yǎng)還可以使菌體與培養(yǎng)液充分接觸,提高營養(yǎng)物質(zhì)的利用率。6、【答案】(1)纖維二糖 葡萄糖 (2)紅色 透明圈 (3)不能 液體培養(yǎng)基不能分離單菌落 不能 乙培養(yǎng)基中沒有纖維素,不會形成cr-纖維素紅色復(fù)合物,即使出現(xiàn)單菌落也不能確定其為纖維素分解菌【解析】(1)纖維素是一種由葡萄糖首尾相
28、連而成的高分子化合物,是含量最豐富的多糖類物質(zhì)。纖維素能被土壤中某些微生物分解利用,如下圖:(2)剛果紅與纖維素形成紅色復(fù)合物,當纖維素被纖維素酶分解后,紅色復(fù)合物無法形成,出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈,我們可以通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。(3)分離和鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基位固體培養(yǎng)基,且需以纖維素為唯一碳源。專題三、植物的組織培養(yǎng)技術(shù)1.(2014廣東卷)(16分)鐵皮石斛是我國名貴中藥,生物堿是其有效成分之一,應(yīng)用組織培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)鐵皮石斛擬原球莖(簡稱plbs,類似愈傷組織)生產(chǎn)生物堿的實驗流程如下:在固體培養(yǎng)基上,plbs的重量、生物堿含量隨增殖培養(yǎng)時間的變化如圖17所示
29、,請回答下列問題:選用新生營養(yǎng)芽為外植體的原因是 ,誘導(dǎo)外植體形成plbs的過程稱 。與黑暗條件下相比,plbs在光照條件下生長的優(yōu)勢體現(xiàn)在 , , 。脫落酸(aba)能提高生物堿含量,但會抑制plbs的生長。若采用液體培養(yǎng),推測添加適量的aba可提高生物堿產(chǎn)量。同學(xué)們擬開展探究實驗驗證該推測,在設(shè)計實驗方案是探討了以下問題:aba的濃度梯度設(shè)置和添加方式:設(shè)4個aba處理組,1個空白對照組,3次重復(fù)。因aba受熱易分解,故一定濃度的無菌aba母液應(yīng)在各組液體培養(yǎng)基 后按比例加入。實驗進程和取樣:實驗50天完成,每10天取樣,將樣品(plbs)稱重(g/瓶)后再測定生物堿含量。如初始(第0天)
30、數(shù)據(jù)已知,實驗過程中還需測定的樣品數(shù)為 。依所測定數(shù)據(jù)確定適宜的aba濃度和培養(yǎng)時間:當某3個樣品(重復(fù)樣)的 時,其對應(yīng)的aba濃度為適宜濃度,對應(yīng)的培養(yǎng)時間是適宜培養(yǎng)時間。【答案】(1)細胞分化程度低,容易誘導(dǎo)形成plbs(2分); 細胞的脫分化(2分) (2)生長起始快(2分), 快速生長時間較長(2分); plbs產(chǎn)量較高(2分);(3)滅菌、冷卻(2分); 75(2分); plbs重量和生物堿含量乘積的平均值最大(3分)【解析】(1)新生營養(yǎng)芽分裂能力強,全能性容易表達;根據(jù)題干可知,plbs類似愈傷組織,外植體形成愈傷組織的過程是脫分化。(2)據(jù)圖分析,光照下plbs的重量高于黑暗
31、條件下,原因可能是光照有利于細胞增殖、葉綠體的形成和進行光合作用制造有機物。(3)由于aba受熱易分解,所以各種液體培養(yǎng)基滅菌后,冷卻,再加入不同濃度的aba 根據(jù)題干可知,實驗50天完成,每10天取樣,需要取樣5次,4個aba處理組,1個空白對照組,3次重復(fù),因此每次取樣需要記錄15個樣品中的數(shù)據(jù),共需要測定樣品數(shù)75 適量的aba可提高生物堿產(chǎn)量,當樣品的平均值最大時,所對應(yīng)的aba濃度和時間為最適。2.(2014江蘇卷)(9分)為了獲得植物次生代謝產(chǎn)物,先用植物外植體獲得愈傷組織,然后在液體培養(yǎng)基中懸浮培養(yǎng)。請回答下列問題:(1)外植體經(jīng)誘導(dǎo)后形成愈傷組織的過程稱為 。(2)在愈傷組織懸
32、浮培養(yǎng)時,細胞干重、蔗糖濃度和ph的變化如右圖所示。細胞干重在12d后下降的原因有 ;培養(yǎng)液中蔗糖的作用是 、 。(3)多倍體愈傷組織細胞產(chǎn)生的次生代謝產(chǎn)物量常高于二倍體。二倍體愈傷組織細胞經(jīng) 處理,會產(chǎn)生染色體加倍的細胞。為檢測愈傷組織細胞染色體數(shù)目,壓片前常采用纖維素酶和 酶解離愈傷組織。若愈傷組織細胞(2n)經(jīng)誘導(dǎo)處理后,觀察到染色體數(shù)為8n的細胞,合理的解釋是 、 。(4)為了更好地獲得次生代謝產(chǎn)物,生產(chǎn)中采用植物細胞的固定化技術(shù),其原理與酵母細胞固定化類似。下列說法正確的有 (填序號)。選取旺盛生長的愈傷組織細胞包埋 必須在光照條件下培養(yǎng)培養(yǎng)過程中需通空氣 固定化后植物細胞生長會變慢
33、【答案】(9分)(1)脫分化 (2)蔗糖濃度下降,ph降低 提供能源 調(diào)節(jié)滲透壓(3)秋水仙素(低溫) 果膠 經(jīng)加倍到4n的細胞處于有絲分裂后期 經(jīng)加倍到8n的細胞處于有絲分裂中期 (4)【解析】本題考查的是植物組織培養(yǎng)、染色體變異及細胞固定化。(1)外植體在人工、無菌條件下,經(jīng)脫分化可形成愈傷組織。(2)由圖蔗糖濃度下降,可知外植體離體培養(yǎng)過程中需要消耗蔗糖,12天后蔗糖濃度變化不大;ph下降會影響酶的活性,愈傷組織細胞對物質(zhì)的合成小于分解,細胞干重下降。植物組織培養(yǎng)過程中,蔗糖既能維持一定的滲透壓,又能提供植物細胞生命活動必須的營養(yǎng)物質(zhì)(能量)。(3)一定濃度的秋水仙素或低溫都可抑制紡錘體
34、的形成,使子染色體不能移向兩極,從而使細胞中染色體數(shù)目加倍。植物細胞間的成分主要是纖維素和果膠,可通過纖維素酶、果膠酶破壞細胞間的物質(zhì),從而使愈傷組織細胞分離。在培養(yǎng)過程中,各個細胞所處時期不同,在用秋水仙素或低溫處理后,一定時間內(nèi)不同時期細胞分裂次數(shù)不同,從而會出現(xiàn)染色體為2n、4n、8n等的細胞,4n的細胞在有絲分裂后期著絲點分裂染色體數(shù)目加倍至8n;8n的細胞在有絲分裂中期能清晰看出8n條染色體。(4)為了更好地獲得次生代謝產(chǎn)物,應(yīng)選用生長旺盛的愈傷組織。愈傷組織不能進行光合作用,因此要通入無菌空氣確保其正常的生命活動。細胞的固定通常使用包埋法,由于包埋材料的影響,營養(yǎng)物質(zhì)和氧氣的擴散都
35、受到一定的限制,所以固定化細胞生長速度慢。3.(2013重慶卷)某興趣小組擬用組織培養(yǎng)繁殖一種名貴花卉,其技術(shù)路線為“取材消毒愈傷組織培養(yǎng)出芽生根移栽”。下列有關(guān)敘述,錯誤的是( )a消毒的原則是既殺死材料表面的微生物,又減少消毒劑對細胞的傷害b在愈傷組織培培養(yǎng)中加入細胞融合的誘導(dǎo)劑,可獲得染色體加倍的細胞c出芽是細胞再分化的結(jié)果,受基因選擇性表達的調(diào)控d生根時,培養(yǎng)基通常應(yīng)含 萘乙酸等生長素類調(diào)節(jié)劑【答案】b【解析】消毒劑的使用既要殺死表面微生物,有防止傷害組織細胞,影響組織培養(yǎng),a項正確;植物細胞融合是指經(jīng)纖維素酶和果膠酶處理后得到的原生質(zhì)體的誘導(dǎo)融合,帶有細胞壁的愈傷組織細胞不能誘導(dǎo)融合
36、形成染色體加倍的細胞,b 項錯誤;出芽和生根都是細胞再分化的結(jié)果,其實質(zhì)是基因的選擇性表達,c 項正確;萘乙酸為生長素類似物,可誘導(dǎo)愈傷組織生根,d 項正確。4.(2013四川卷)在誘導(dǎo)離體菊花莖段形成幼苗的過程中,下列生命活動不會同時發(fā)生的是:a細胞的增殖和分化 b光能的吸收與轉(zhuǎn)化catp的合成與分解 d基因的突變與重組【答案】:d【解析】:誘導(dǎo)莖分化形成幼苗為有絲分裂,故不可能發(fā)生基因重組。故d錯誤。5.(2013江蘇卷)某種極具觀賞價值的蘭科珍稀花卉很難獲得成熟種子。為盡快推廣種植,可應(yīng)用多種技術(shù)獲得大量優(yōu)質(zhì)苗,下列技術(shù)中不能選用的是( )a. 利用莖段扦插誘導(dǎo)生根技術(shù)快速育苗b. 采用
37、花粉粒組織培養(yǎng)獲得單倍體苗c. 采集幼芽嫁接到合適的其他種類植物體上d. 采用幼葉、莖尖等部位的組織進行組織培養(yǎng)【答案】:b【解析】:單倍體苗植株弱小且高度不育,不能稱之為優(yōu)質(zhì)苗。6(2013上海卷)在工業(yè)化大量培養(yǎng)植物試管苗的過程中,一般進行如下操作,則正確的操作順序是( )誘導(dǎo)形成芽 取合適外植體 誘導(dǎo)形成愈傷組織誘導(dǎo)形成未分化狀態(tài)的細胞 誘導(dǎo)形成根a b c d【答案】:b7(2012全國新課標卷)(15分)為了探究6-ba和iaa對某菊花品種莖尖外植體再生叢芽的影響,某研究小組在培養(yǎng)基中加入6-ba和iaa,配制成四種培養(yǎng)基(見下表),滅菌后分別接種數(shù)量相同、生長狀態(tài)一致、消毒后的莖尖
38、外植體,在適宜條件下培養(yǎng)一段時間后,統(tǒng)計再生叢芽外植體的比率(m),以及再生叢芽外植體上的叢芽平均數(shù)(n),結(jié)果如下表?;卮鹣铝袉栴}:()按照植物的需求量,培養(yǎng)基中無機鹽的元素可分為 和 兩類。上述培養(yǎng)基中,6-ba屬于 類生長調(diào)節(jié)劑。()在該實驗中,自變量是 ,因變量是 ,自變量的取值范圍是 。()從實驗結(jié)果可知,誘導(dǎo)叢芽總數(shù)最少的培養(yǎng)基是號培養(yǎng)基。()為了誘導(dǎo)該菊花試管苗生根,培養(yǎng)基中一般不加入(填“6-ba”或“iaa”)?!敬鸢浮浚ǎ┐罅吭匚⒘吭丶毎至阉?()iaa濃度叢芽外植體的比率及叢芽平均數(shù).mg/l () ()6-ba【解析】本題主要是對植物組培知識的考察,提問涉及必修一
39、和必修三的一些知識,再加上以實驗分析的形式考察中學(xué)生物實驗的基礎(chǔ)知識,綜合性強,并不局限于選修一,是為“選修可以考察必修”一說的集中體現(xiàn)。第()問第一空考察必需元素的分類(可分為大量元素微量元素),必修一的基礎(chǔ)知識,選修一教材上亦有原句。第()問第二空考察植物生長調(diào)節(jié)劑的知識。中學(xué)生物必修一提及植物體內(nèi)5大植物激素,分別為生長素類、細胞分裂素類、赤霉素類、乙烯類、脫落酸類,要求掌握植物生長調(diào)節(jié)劑的名稱;常見選修一的植物組織培養(yǎng)實驗中又重點分析了生長素類、細胞分裂素類,要求識記二者比例對植物脫分化的影響(生長素多有利于生根,細胞分裂素多有利于長芽);由表格易知iaa比例上升抑制長芽,為生長素(吲
40、哚乙酸),故6-ba為細胞分裂素。第(2)問考察中學(xué)生物實驗的基礎(chǔ)知識,自變量是iaa(6-ba濃度不變),取值范圍是到.;因變量是叢芽數(shù) (即再生叢芽外植體的比率和再生叢芽外植體上的叢芽平均數(shù))第(3)問直接從表格中可讀出。第(4)問參閱第()問第二空解析8.(2012廣東卷)培育草莓脫毒苗所采用的主要技術(shù)是( )a.組織培養(yǎng) b.細胞雜交 c.顯微注射 d.核移植【答案】【解析】草莓植株分生區(qū)的細胞含病毒的量比較少,可以利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)出脫毒幼苗。9(2012山東卷)(8分)辣椒素作為一種生物堿廣泛用于食品保健、醫(yī)藥工業(yè)等領(lǐng)域。辣椒素的獲得途徑如圖。(1)圖中和分別表示辣椒組織培養(yǎng)
41、中細胞的_和_過程。(2)圖中培養(yǎng)外植體的培養(yǎng)基中常用的凝固劑是_。培養(yǎng)基中的生長素和細胞分裂素用量的比值_(填“高”或“低”)時,有利于芽的分化。對培養(yǎng)基徹底滅菌時,應(yīng)采取的滅菌方法是_。(3)圖中外植體的消毒所需酒精的體積分數(shù)是_。用酶解法將愈傷組織分離成單細胞時,常用的酶是_和纖維素酶?!敬鸢浮浚?)脫分化(或去分化) 再分化 (2)瓊脂 低 高壓蒸汽滅菌(3)70% 果膠酶 【解析】本題以辣椒素的獲得途徑為情景,考查生物實驗的基本技能和操作,注重生物技術(shù)應(yīng)用于生產(chǎn)的理念??疾榈拿鎻V,但以識記的知識點應(yīng)用分析為主。10.(2011江蘇卷)下列有關(guān)植物組織培養(yǎng)的敘述,正確的是( )a.愈傷
42、組織是一團有特定結(jié)構(gòu)和功能的薄壁細胞b.二倍體植株的花粉經(jīng)脫分化與再分化后得到穩(wěn)定遺傳的植株c.用人工薄膜將胚狀體、愈傷組織等分別包裝可制成人工種子d.植物耐鹽突變體可通過添加適量nacl的培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選二獲得【答案】d 【解析】愈傷組織是一團無特定結(jié)構(gòu)和功能的薄壁細胞,a錯誤。二倍體植株的花粉經(jīng)脫分化與再分化后得到的是單倍體植株,b錯誤。用人工薄膜包裝愈傷組織得不到人工種子,c錯誤。11(2011上海卷)下列關(guān)于植物組織培養(yǎng)的表述,錯誤的是( )a外植體可以來自于植物的任何細胞b培養(yǎng)應(yīng)在無菌條件下進行c以花粉作為外植體可得到單倍體植株d不同階段的培養(yǎng)基中細胞分裂素和生長素的比例不同【答案】a
43、 【解析】不是任何植物細胞都可以作為外植體,比如植物精子或卵細胞,外植體必須是有生命活力的體細胞。12(2010浙江卷) 將無根的非洲菊幼苗轉(zhuǎn)入無植物激素的培養(yǎng)中,在適宜的溫度和光照等條件下培養(yǎng)一段時間后,應(yīng)出現(xiàn)的現(xiàn)象是【答案】a 【解析】不是任何植物細胞都可以作為外植體,比如植物精子或卵細胞,外植體必須是有生命活力的體細胞。13(2010全國新課標) (15分)(1)植物微型繁殖技術(shù)屬于植物組織培養(yǎng)的范疇。該技術(shù)可以保持品種的 ,繁殖種苗的速度 。離體的葉肉細胞在適宜的條件下培養(yǎng),最終能夠形成完整的植株,說明該葉肉細胞具有該植物的全部 。(2)把試管苗轉(zhuǎn)接到新的培養(yǎng)基上時,需要在超凈工作臺上
44、進行,其原因是避免 的污染。(3)微型繁殖過程中,適宜濃度的生長素單獨使用可誘導(dǎo)試管苗 ,而與 配比適宜時可促進芽的增殖。若要抑制試管苗的生長,促使愈傷組織產(chǎn)生和生長,需尊使用的生長調(diào)節(jié)劑是 (脫落酸、2,4-d)。(4)將某植物試管苗培養(yǎng)在含不同濃度蔗糖的培養(yǎng)基上一段時間后,單株鮮重和光合作用強度的變化如圖。據(jù)圖分析,隨著培養(yǎng)基中蔗糖濃度的增加,光合作用強度的變化趨勢是 ,單株鮮重的變化趨勢是 。據(jù)圖判斷,培養(yǎng)基中不含蔗糖時,試管苗光合作用產(chǎn)生的有機物的量 (能、不能)滿足自身最佳生長的需要。(5)據(jù)圖推測,若要在誘導(dǎo)試管苗生根的過程中提高其光合作用能力,應(yīng) (降低、增加)培養(yǎng)基中蔗糖濃度,
45、以便提高試管苗的自養(yǎng)能力。【答案】(1)遺傳性快遺傳信息 (2)微生物 (3)生根細胞分裂素2,4d(4)逐漸減小先增加后下降不能 (5)降低【解析】(1)葉肉細胞具有該植物的全部遺傳信息,因此可經(jīng)組織培養(yǎng)成為完整個體。(2)在組織培養(yǎng)過程及將試管苗轉(zhuǎn)接到新培養(yǎng)基上時,要無菌操作,防止微生物污染 。(3)在微型繁殖中,不同階段要使用不同的激素。生長素可誘導(dǎo)生根,與細胞分裂素混合使用,在一定濃度配比下可促進生芽。2,4d可促進愈傷組織生長。(4)從題圖看出,隨蔗糖濃度增大,光合作用強度在下降,而單株鮮重是先增后降,培養(yǎng)基中不含蔗糖時,試管苗制造的有機物不能滿足自身需要。(5)要提高試管苗光合作用
46、能力,應(yīng)適量降低蔗糖濃度。14(2010安徽卷)(9分)草莓生產(chǎn)上傳統(tǒng)的繁殖方式易將所感染的病毒傳播給后代,導(dǎo)致產(chǎn)量降低。品質(zhì)變差。運用微型繁殖技術(shù)可以培育出無病毒幼苗。草莓微型繁殖的基本過程如下:外植體愈傷組織芽、根植株 請回答:(1)微型繁殖培育無病毒草莓苗時,一般選取_作為外植體,其依據(jù)是_ _。(2)在過程中,常用的ms培養(yǎng)基主要成分包括大量元素、微量元素和_,在配制好的培養(yǎng)基中,常常需要添加_,有利于外植體啟動細胞分裂形成愈傷組織。接種后25d,若發(fā)現(xiàn)外植體邊緣局部污染,原因可能是_。(3)在過程中,愈傷組織在誘導(dǎo)生根的培養(yǎng)基中未形成根,但分化出了芽,其原因可能是_?!敬鸢浮?1)莖
47、尖(或根尖) 莖尖(或根尖)病毒極少,甚至無病毒(2)有機物 植物激素 外植體消毒不徹底(3)培養(yǎng)基中生長素類物質(zhì)用量與細胞分裂素類物質(zhì)用量的比值偏低【解析】植物微型繁殖時常采用莖尖或根尖作為外植體,原因是莖尖或根尖病毒極少,因此切取一定大小的莖尖或根尖進行組織培養(yǎng),再生的植株就可能不帶病毒。ms培養(yǎng)基的成分主要包括水、無機鹽、有機小分子物質(zhì)以及植物激素等,植物激素的比例能夠影響芽的分化和根的分化,如細胞分裂素的比例大于生長素的比例,則有利于芽的分化,反之則有利于根的分化。接種前培養(yǎng)基一定要進行高溫滅菌,接種時一定要在無菌條件下進行操作,以免引起雜菌污染。15、(2012年江蘇)某研究組對秈稻開展了組織培養(yǎng)及相關(guān)研究,請回答下列問題:(1)2,4d常用于秈稻愈傷組織的誘導(dǎo),對形態(tài)的發(fā)生有一定的抑制作用。為促進愈傷組織再分化,在配制分化培養(yǎng)基時需_(填“升高”“保持”或“降低”)2,4d的濃度。(2)當秈稻愈傷組織在只含有細胞分裂素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)時,出現(xiàn)具有分生能力的綠色芽點,但不能繼續(xù)出芽,通常在培養(yǎng)基中添加_,以促進幼苗形成。(3)研究中用顯微鏡可以
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