中西醫(yī)結(jié)合臨床醫(yī)學(xué)專業(yè)畢業(yè)論文 [精品論文] 中藥重樓聯(lián)合奧沙利鉑抗血管生成的實(shí)驗(yàn)研究

中西醫(yī)結(jié)合臨床醫(yī)學(xué)專業(yè)畢業(yè)論文精品論文中藥重樓聯(lián)合奧沙利鉑抗血管生成的實(shí)驗(yàn)研究關(guān)鍵詞中藥重樓奧沙利鉑抗血管生成協(xié)同增效作用惡性腫瘤化療藥物摘要血管生成（ANGIOGENESIS）是指從已經(jīng)存在的血管之上以萌芽的方式形成新的毛細(xì)血管。FOLKMAN先生在1971年首次提出腫瘤的生長(zhǎng)依賴于新生血管的生成的假說(shuō)，這一假說(shuō)基于作者觀察到在缺乏血管的部位很少出現(xiàn)惡性腫瘤。新生的血管可以為腫瘤的生長(zhǎng)提供氧和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，并且導(dǎo)致腫瘤的快速轉(zhuǎn)移，而通過(guò)抑制腫瘤組織中新生血管的形成能夠抑制腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移。某些化療藥物，在小劑量、高頻率的給藥方式下可以選擇性地抑制腫瘤組織內(nèi)新生血管內(nèi)皮細(xì)胞的生長(zhǎng)，使腫瘤細(xì)胞因血供不足而生長(zhǎng)受阻，這種特殊的給藥模式，化療藥物的作用靶位已不是腫瘤細(xì)胞，而是新生的血管內(nèi)皮細(xì)胞，這就是小劑量化療或抗血管生成化療。目前，抗血管生成藥物價(jià)格昂貴，中國(guó)的經(jīng)濟(jì)條件難以負(fù)擔(dān)，而中藥是我國(guó)的寶庫(kù)，尋找具有抗血管生成作用的物美價(jià)廉的中藥，顯得尤其重要。中醫(yī)藥治療惡性腫瘤有著豐富的經(jīng)驗(yàn)，近年來(lái)，隨著抗血管生成治療的研究的深入，發(fā)現(xiàn)很多傳統(tǒng)中藥及其化學(xué)成分也具有較好的抑制腫瘤新生血管的作用，并且價(jià)格低廉，毒副作用較小，逐漸成為國(guó)內(nèi)抗腫瘤研究的熱點(diǎn)。體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)中已經(jīng)證實(shí)，中藥重樓（RHIZOMAPARIDIS）及其化學(xué)成分具有顯著的抗腫瘤作用，需要深入研究重樓及其與化療藥物聯(lián)合在腫瘤的抗血管生成中的作用。目的探討中藥重樓醇提物、奧沙利鉑以及兩者聯(lián)合在體外、體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中可能具有的抗血管生成的作用。方法采用MTT法檢測(cè)中藥重樓醇提物、奧沙利鉑以及兩者聯(lián)合應(yīng)用對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞HUVEC和人腸癌細(xì)胞LOVO增殖的抑制作用；采用TRANSWELL模型，觀察藥物對(duì)HUVEC的遷移的作用；采用三維新生血管模型，觀察藥物對(duì)小管形成的形態(tài)的影響；采用ANNEXIN熒光染色、細(xì)胞周期檢測(cè)試劑盒和流式細(xì)胞儀（FCM）檢測(cè)藥物作用對(duì)細(xì)胞的凋亡和周期的影響；觀察藥物對(duì)于雞胚絨毛尿囊膜模型中新生血管的影響。結(jié)果中藥重樓醇提物在75G/ML240G/ML之間對(duì)HUVEC細(xì)胞的抑制作用呈劑量依賴性（IC503683G/ML），對(duì)LOVO的細(xì)胞毒作用也呈劑量依賴性（IC5026754G/ML），重樓醇提物對(duì)HUVEC細(xì)胞的IC50值明顯低于其對(duì)LOVO細(xì)胞的IC50值，重樓醇提物對(duì)HUVEC細(xì)胞和LOVO細(xì)胞的作用顯示出明顯的差異細(xì)胞毒性；奧沙利鉑在05G/ML16G/ML之間對(duì)HUVEC細(xì)胞的抑制作用呈劑量依賴性（IC50352G/ML），對(duì)LOVO的細(xì)胞毒作用也呈劑量依賴性（IC50820G/ML），奧沙利鉑對(duì)HUVEC細(xì)胞的IC50值明顯低于其對(duì)LOVO細(xì)胞的IC50值，奧沙利鉑對(duì)HUVEC細(xì)胞和LOVO細(xì)胞的作用顯示出明顯的差異細(xì)胞毒性；兩者聯(lián)合應(yīng)用具有協(xié)同或者次加的作用；中藥重樓醇提物在75G/ML60G/ML時(shí)對(duì)HUVEC的遷移有一定的抑制作用，能夠明顯減少HUVEC遷移的數(shù)目，75G/ML、15G/ML、30G/ML、60G/ML的重樓醇提物的抑制率分別為1480、2573、3557、7012，奧沙利鉑在054G/ML時(shí)對(duì)HUVEC的遷移也有一定的抑制作用，能夠明顯減少HUVEC遷移的數(shù)目，05G/ML、1G/ML、2G/ML、4G/ML的奧沙利鉑的抑制率分別為1745、3123、4545、5904，兩者聯(lián)合應(yīng)用具有協(xié)同或者次加作用；中藥重樓醇提物和奧沙利鉑能夠破壞臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞形成的管腔狀結(jié)構(gòu)，兩者聯(lián)合應(yīng)用可能具有協(xié)同增效作用；HUVEC經(jīng)中藥重樓醇提物、奧沙利鉑作用48H后，能夠明顯誘導(dǎo)HUVEC細(xì)胞凋亡，兩藥聯(lián)合應(yīng)用誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞凋亡作用更加明顯，兩者可能存在協(xié)同增效作用；中藥重樓醇提物、奧沙利鉑作用HUVEC24H后，可能使內(nèi)皮細(xì)胞周期主要阻滯在G0G1期，兩藥聯(lián)合應(yīng)用G0G1期峰值增高，提示兩者可能有協(xié)同增效作用；中藥重樓醇提物、奧沙利鉑對(duì)雞胚絨毛尿囊膜新生血管有一定的抑制作用，能夠明顯減少新生血管的數(shù)目，兩藥聯(lián)合應(yīng)用可觀察到次加作用效果。結(jié)論中藥重樓和奧沙利鉑在體外、體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中可能具有一定抗血管生成的作用，兩者聯(lián)合應(yīng)用可能具有協(xié)同增效作用。正文內(nèi)容血管生成（ANGIOGENESIS）是指從已經(jīng)存在的血管之上以萌芽的方式形成新的毛細(xì)血管。FOLKMAN先生在1971年首次提出腫瘤的生長(zhǎng)依賴于新生血管的生成的假說(shuō)，這一假說(shuō)基于作者觀察到在缺乏血管的部位很少出現(xiàn)惡性腫瘤。新生的血管可以為腫瘤的生長(zhǎng)提供氧和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，并且導(dǎo)致腫瘤的快速轉(zhuǎn)移，而通過(guò)抑制腫瘤組織中新生血管的形成能夠抑制腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移。某些化療藥物，在小劑量、高頻率的給藥方式下可以選擇性地抑制腫瘤組織內(nèi)新生血管內(nèi)皮細(xì)胞的生長(zhǎng)，使腫瘤細(xì)胞因血供不足而生長(zhǎng)受阻，這種特殊的給藥模式，化療藥物的作用靶位已不是腫瘤細(xì)胞，而是新生的血管內(nèi)皮細(xì)胞，這就是小劑量化療或抗血管生成化療。目前，抗血管生成藥物價(jià)格昂貴，中國(guó)的經(jīng)濟(jì)條件難以負(fù)擔(dān)，而中藥是我國(guó)的寶庫(kù)，尋找具有抗血管生成作用的物美價(jià)廉的中藥，顯得尤其重要。中醫(yī)藥治療惡性腫瘤有著豐富的經(jīng)驗(yàn)，近年來(lái)，隨著抗血管生成治療的研究的深入，發(fā)現(xiàn)很多傳統(tǒng)中藥及其化學(xué)成分也具有較好的抑制腫瘤新生血管的作用，并且價(jià)格低廉，毒副作用較小，逐漸成為國(guó)內(nèi)抗腫瘤研究的熱點(diǎn)。體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)中已經(jīng)證實(shí)，中藥重樓（RHIZOMAPARIDIS）及其化學(xué)成分具有顯著的抗腫瘤作用，需要深入研究重樓及其與化療藥物聯(lián)合在腫瘤的抗血管生成中的作用。目的探討中藥重樓醇提物、奧沙利鉑以及兩者聯(lián)合在體外、體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中可能具有的抗血管生成的作用。方法采用MTT法檢測(cè)中藥重樓醇提物、奧沙利鉑以及兩者聯(lián)合應(yīng)用對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞HUVEC和人腸癌細(xì)胞LOVO增殖的抑制作用；采用TRANSWELL模型，觀察藥物對(duì)HUVEC的遷移的作用；采用三維新生血管模型，觀察藥物對(duì)小管形成的形態(tài)的影響；采用ANNEXIN熒光染色、細(xì)胞周期檢測(cè)試劑盒和流式細(xì)胞儀（FCM）檢測(cè)藥物作用對(duì)細(xì)胞的凋亡和周期的影響；觀察藥物對(duì)于雞胚絨毛尿囊膜模型中新生血管的影響。結(jié)果中藥重樓醇提物在75G/ML240G/ML之間對(duì)HUVEC細(xì)胞的抑制作用呈劑量依賴性（IC503683G/ML），對(duì)LOVO的細(xì)胞毒作用也呈劑量依賴性（IC5026754G/ML），重樓醇提物對(duì)HUVEC細(xì)胞的IC50值明顯低于其對(duì)LOVO細(xì)胞的IC50值，重樓醇提物對(duì)HUVEC細(xì)胞和LOVO細(xì)胞的作用顯示出明顯的差異細(xì)胞毒性；奧沙利鉑在05G/ML16G/ML之間對(duì)HUVEC細(xì)胞的抑制作用呈劑量依賴性（IC50352G/ML），對(duì)LOVO的細(xì)胞毒作用也呈劑量依賴性（IC50820G/ML），奧沙利鉑對(duì)HUVEC細(xì)胞的IC50值明顯低于其對(duì)LOVO細(xì)胞的IC50值，奧沙利鉑對(duì)HUVEC細(xì)胞和LOVO細(xì)胞的作用顯示出明顯的差異細(xì)胞毒性；兩者聯(lián)合應(yīng)用具有協(xié)同或者次加的作用；中藥重樓醇提物在75G/ML60G/ML時(shí)對(duì)HUVEC的遷移有一定的抑制作用，能夠明顯減少HUVEC遷移的數(shù)目，75G/ML、15G/ML、30G/ML、60G/ML的重樓醇提物的抑制率分別為1480、2573、3557、7012，奧沙利鉑在054G/ML時(shí)對(duì)HUVEC的遷移也有一定的抑制作用，能夠明顯減少HUVEC遷移的數(shù)目，05G/ML、1G/ML、2G/ML、4G/ML的奧沙利鉑的抑制率分別為1745、3123、4545、5904，兩者聯(lián)合應(yīng)用具有協(xié)同或者次加作用；中藥重樓醇提物和奧沙利鉑能夠破壞臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞形成的管腔狀結(jié)構(gòu)，兩者聯(lián)合應(yīng)用可能具有協(xié)同增效作用；HUVEC經(jīng)中藥重樓醇提物、奧沙利鉑作用48H后，能夠明顯誘導(dǎo)HUVEC細(xì)胞凋亡，兩藥聯(lián)合應(yīng)用誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞凋亡作用更加明顯，兩者可能存在協(xié)同增效作用；中藥重樓醇提物、奧沙利鉑作用HUVEC24H后，可能使內(nèi)皮細(xì)胞周期主要阻滯在G0G1期，兩藥聯(lián)合應(yīng)用G0G1期峰值增高，提示兩者可能有協(xié)同增效作用；中藥重樓醇提物、奧沙利鉑對(duì)雞胚絨毛尿囊膜新生血管有一定的抑制作用，能夠明顯減少新生血管的數(shù)目，兩藥聯(lián)合應(yīng)用可觀察到次加作用效果。結(jié)論中藥重樓和奧沙利鉑在體外、體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中可能具有一定抗血管生成的作用，兩者聯(lián)合應(yīng)用可能具有協(xié)同增效作用。血管生成（ANGIOGENESIS）是指從已經(jīng)存在的血管之上以萌芽的方式形成新的毛細(xì)血管。FOLKMAN先生在1971年首次提出腫瘤的生長(zhǎng)依賴于新生血管的生成的假說(shuō)，這一假說(shuō)基于作者觀察到在缺乏血管的部位很少出現(xiàn)惡性腫瘤。新生的血管可以為腫瘤的生長(zhǎng)提供氧和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，并且導(dǎo)致腫瘤的快速轉(zhuǎn)移，而通過(guò)抑制腫瘤組織中新生血管的形成能夠抑制腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移。某些化療藥物，在小劑量、高頻率的給藥方式下可以選擇性地抑制腫瘤組織內(nèi)新生血管內(nèi)皮細(xì)胞的生長(zhǎng)，使腫瘤細(xì)胞因血供不足而生長(zhǎng)受阻，這種特殊的給藥模式，化療藥物的作用靶位已不是腫瘤細(xì)胞，而是新生的血管內(nèi)皮細(xì)胞，這就是小劑量化療或抗血管生成化療。目前，抗血管生成藥物價(jià)格昂貴，中國(guó)的經(jīng)濟(jì)條件難以負(fù)擔(dān)，而中藥是我國(guó)的寶庫(kù)，尋找具有抗血管生成作用的物美價(jià)廉的中藥，顯得尤其重要。中醫(yī)藥治療惡性腫瘤有著豐富的經(jīng)驗(yàn)，近年來(lái)，隨著抗血管生成治療的研究的深入，發(fā)現(xiàn)很多傳統(tǒng)中藥及其化學(xué)成分也具有較好的抑制腫瘤新生血管的作用，并且價(jià)格低廉，毒副作用較小，逐漸成為國(guó)內(nèi)抗腫瘤研究的熱點(diǎn)。體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)中已經(jīng)證實(shí)，中藥重樓（RHIZOMAPARIDIS）及其化學(xué)成分具有顯著的抗腫瘤作用，需要深入研究重樓及其與化療藥物聯(lián)合在腫瘤的抗血管生成中的作用。目的探討中藥重樓醇提物、奧沙利鉑以及兩者聯(lián)合在體外、體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中可能具有的抗血管生成的作用。方法采用MTT法檢測(cè)中藥重樓醇提物、奧沙利鉑以及兩者聯(lián)合應(yīng)用對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞HUVEC和人腸癌細(xì)胞LOVO增殖的抑制作用；采用TRANSWELL模型，觀察藥物對(duì)HUVEC的遷移的作用；采用三維新生血管模型，觀察藥物對(duì)小管形成的形態(tài)的影響；采用ANNEXIN熒光染色、細(xì)胞周期檢測(cè)試劑盒和流式細(xì)胞儀（FCM）檢測(cè)藥物作用對(duì)細(xì)胞的凋亡和周期的影響；觀察藥物對(duì)于雞胚絨毛尿囊膜模型中新生血管的影響。結(jié)果中藥重樓醇提物在75G/ML240G/ML之間對(duì)HUVEC細(xì)胞的抑制作用呈劑量依賴性（IC503683G/ML），對(duì)LOVO的細(xì)胞毒作用也呈劑量依賴性（IC5026754G/ML），重樓醇提物對(duì)HUVEC細(xì)胞的IC50值明顯低于其對(duì)LOVO細(xì)胞的IC50值，重樓醇提物對(duì)HUVEC細(xì)胞和LOVO細(xì)胞的作用顯示出明顯的差異細(xì)胞毒性；奧沙利鉑在05G/ML16G/ML之間對(duì)HUVEC細(xì)胞的抑制作用呈劑量依賴性（IC50352G/ML），對(duì)LOVO的細(xì)胞毒作用也呈劑量依賴性（IC50820G/ML），奧沙利鉑對(duì)HUVEC細(xì)胞的IC50值明顯低于其對(duì)LOVO細(xì)胞的IC50值，奧沙利鉑對(duì)HUVEC細(xì)胞和LOVO細(xì)胞的作用顯示出明顯的差異細(xì)胞毒性；兩者聯(lián)合應(yīng)用具有協(xié)同或者次加的作用；中藥重樓醇提物在75G/ML60G/ML時(shí)對(duì)HUVEC的遷移有一定的抑制作用，能夠明顯減少HUVEC遷移的數(shù)目，75G/ML、15G/ML、30G/ML、60G/ML的重樓醇提物的抑制率分別為1480、2573、3557、7012，奧沙利鉑在054G/ML時(shí)對(duì)HUVEC的遷移也有一定的抑制作用，能夠明顯減少HUVEC遷移的數(shù)目，05G/ML、1G/ML、2G/ML、4G/ML的奧沙利鉑的抑制率分別為1745、3123、4545、5904，兩者聯(lián)合應(yīng)用具有協(xié)同或者次加作用；中藥重樓醇提物和奧沙利鉑能夠破壞臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞形成的管腔狀結(jié)構(gòu)，兩者聯(lián)合應(yīng)用可能具有協(xié)同增效作用；HUVEC經(jīng)中藥重樓醇提物、奧沙利鉑作用48H后，能夠明顯誘導(dǎo)HUVEC細(xì)胞凋亡，兩藥聯(lián)合應(yīng)用誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞凋亡作用更加明顯，兩者可能存在協(xié)同增效作用；中藥重樓醇提物、奧沙利鉑作用HUVEC24H后，可能使內(nèi)皮細(xì)胞周期主要阻滯在G0G1期，兩藥聯(lián)合應(yīng)用G0G1期峰值增高，提示兩者可能有協(xié)同增效作用；中藥重樓醇提物、奧沙利鉑對(duì)雞胚絨毛尿囊膜新生血管有一定的抑制作用，能夠明顯減少新生血管的數(shù)目，兩藥聯(lián)合應(yīng)用可觀察到次加作用效果。結(jié)論中藥重樓和奧沙利鉑在體外、體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中可能具有一定抗血管生成的作用，兩者聯(lián)合應(yīng)用可能具有協(xié)同增效作用。血管生成（ANGIOGENESIS）是指從已經(jīng)存在的血管之上以萌芽的方式形成新的毛細(xì)血管。FOLKMAN先生在1971年首次提出腫瘤的生長(zhǎng)依賴于新生血管的生成的假說(shuō)，這一假說(shuō)基于作者觀察到在缺乏血管的部位很少出現(xiàn)惡性腫瘤。新生的血管可以為腫瘤的生長(zhǎng)提供氧和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，并且導(dǎo)致腫瘤的快速轉(zhuǎn)移，而通過(guò)抑制腫瘤組織中新生血管的形成能夠抑制腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移。某些化療藥物，在小劑量、高頻率的給藥方式下可以選擇性地抑制腫瘤組織內(nèi)新生血管內(nèi)皮細(xì)胞的生長(zhǎng)，使腫瘤細(xì)胞因血供不足而生長(zhǎng)受阻，這種特殊的給藥模式，化療藥物的作用靶位已不是腫瘤細(xì)胞，而是新生的血管內(nèi)皮細(xì)胞，這就是小劑量化療或抗血管生成化療。目前，抗血管生成藥物價(jià)格昂貴，中國(guó)的經(jīng)濟(jì)條件難以負(fù)擔(dān)，而中藥是我國(guó)的寶庫(kù)，尋找具有抗血管生成作用的物美價(jià)廉的中藥，顯得尤其重要。中醫(yī)藥治療惡性腫瘤有著豐富的經(jīng)驗(yàn)，近年來(lái)，隨著抗血管生成治療的研究的深入，發(fā)現(xiàn)很多傳統(tǒng)中藥及其化學(xué)成分也具有較好的抑制腫瘤新生血管的作用，并且價(jià)格低廉，毒副作用較小，逐漸成為國(guó)內(nèi)抗腫瘤研究的熱點(diǎn)。體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)中已經(jīng)證實(shí)，中藥重樓（RHIZOMAPARIDIS）及其化學(xué)成分具有顯著的抗腫瘤作用，需要深入研究重樓及其與化療藥物聯(lián)合在腫瘤的抗血管生成中的作用。目的探討中藥重樓醇提物、奧沙利鉑以及兩者聯(lián)合在體外、體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中可能具有的抗血管生成的作用。方法采用MTT法檢測(cè)中藥重樓醇提物、奧沙利鉑以及兩者聯(lián)合應(yīng)用對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞HUVEC和人腸癌細(xì)胞LOVO增殖的抑制作用；采用TRANSWELL模型，觀察藥物對(duì)HUVEC的遷移的作用；采用三維新生血管模型，觀察藥物對(duì)小管形成的形態(tài)的影響；采用ANNEXIN熒光染色、細(xì)胞周期檢測(cè)試劑盒和流式細(xì)胞儀（FCM）檢測(cè)藥物作用對(duì)細(xì)胞的凋亡和周期的影響；觀察藥物對(duì)于雞胚絨毛尿囊膜模型中新生血管的影響。結(jié)果中藥重樓醇提物在75G/ML240G/ML之間對(duì)HUVEC細(xì)胞的抑制作用呈劑量依賴性（IC503683G/ML），對(duì)LOVO的細(xì)胞毒作用也呈劑量依賴性（IC5026754G/ML），重樓醇提物對(duì)HUVEC細(xì)胞的IC50值明顯低于其對(duì)LOVO細(xì)胞的IC50值，重樓醇提物對(duì)HUVEC細(xì)胞和LOVO細(xì)胞的作用顯示出明顯的差異細(xì)胞毒性；奧沙利鉑在05G/ML16G/ML之間對(duì)HUVEC細(xì)胞的抑制作用呈劑量依賴性（IC50352G/ML），對(duì)LOVO的細(xì)胞毒作用也呈劑量依賴性（IC50820G/ML），奧沙利鉑對(duì)HUVEC細(xì)胞的IC50值明顯低于其對(duì)LOVO細(xì)胞的IC50值，奧沙利鉑對(duì)HUVEC細(xì)胞和LOVO細(xì)胞的作用顯示出明顯的差異細(xì)胞毒性；兩者聯(lián)合應(yīng)用具有協(xié)同或者次加的作用；中藥重樓醇提物在75G/ML60G/ML時(shí)對(duì)HUVEC的遷移有一定的抑制作用，能夠明顯減少HUVEC遷移的數(shù)目，75G/ML、15G/ML、30G/ML、60G/ML的重樓醇提物的抑制率分別為1480、2573、3557、7012，奧沙利鉑在054G/ML時(shí)對(duì)HUVEC的遷移也有一定的抑制作用，能夠明顯減少HUVEC遷移的數(shù)目，05G/ML、1G/ML、2G/ML、4G/ML的奧沙利鉑的抑制率分別為1745、3123、4545、5904，兩者聯(lián)合應(yīng)用具有協(xié)同或者次加作用；中藥重樓醇提物和奧沙利鉑能夠破壞臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞形成的管腔狀結(jié)構(gòu)，兩者聯(lián)合應(yīng)用可能具有協(xié)同增效作用；HUVEC經(jīng)中藥重樓醇提物、奧沙利鉑作用48H后，能夠明顯誘導(dǎo)HUVEC細(xì)胞凋亡，兩藥聯(lián)合應(yīng)用誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞凋亡作用更加明顯，兩者可能存在協(xié)同增效作用；中藥重樓醇提物、奧沙利鉑作用HUVEC24H后，可能使內(nèi)皮細(xì)胞周期主要阻滯在G0G1期，兩藥聯(lián)合應(yīng)用G0G1期峰值增高，提示兩者可能有協(xié)同增效作用；中藥重樓醇提物、奧沙利鉑對(duì)雞胚絨毛尿囊膜新生血管有一定的抑制作用，能夠明顯減少新生血管的數(shù)目，兩藥聯(lián)合應(yīng)用可觀察到次加作用效果。結(jié)論中藥重樓和奧沙利鉑在體外、體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中可能具有一定抗血管生成的作用，兩者聯(lián)合應(yīng)用可能具有協(xié)同增效作用。血管生成（ANGIOGENESIS）是指從已經(jīng)存在的血管之上以萌芽的方式形成新的毛細(xì)血管。FOLKMAN先生在1971年首次提出腫瘤的生長(zhǎng)依賴于新生血管的生成的假說(shuō)，這一假說(shuō)基于作者觀察到在缺乏血管的部位很少出現(xiàn)惡性腫瘤。新生的血管可以為腫瘤的生長(zhǎng)提供氧和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，并且導(dǎo)致腫瘤的快速轉(zhuǎn)移，而通過(guò)抑制腫瘤組織中新生血管的形成能夠抑制腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移。某些化療藥物，在小劑量、高頻率的給藥方式下可以選擇性地抑制腫瘤組織內(nèi)新生血管內(nèi)皮細(xì)胞的生長(zhǎng)，使腫瘤細(xì)胞因血供不足而生長(zhǎng)受阻，這種特殊的給藥模式，化療藥物的作用靶位已不是腫瘤細(xì)胞，而是新生的血管內(nèi)皮細(xì)胞，這就是小劑量化療或抗血管生成化療。目前，抗血管生成藥物價(jià)格昂貴，中國(guó)的經(jīng)濟(jì)條件難以負(fù)擔(dān)，而中藥是我國(guó)的寶庫(kù)，尋找具有抗血管生成作用的物美價(jià)廉的中藥，顯得尤其重要。中醫(yī)藥治療惡性腫瘤有著豐富的經(jīng)驗(yàn)，近年來(lái)，隨著抗血管生成治療的研究的深入，發(fā)現(xiàn)很多傳統(tǒng)中藥及其化學(xué)成分也具有較好的抑制腫瘤新生血管的作用，并且價(jià)格低廉，毒副作用較小，逐漸成為國(guó)內(nèi)抗腫瘤研究的熱點(diǎn)。體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)中已經(jīng)證實(shí)，中藥重樓（RHIZOMAPARIDIS）及其化學(xué)成分具有顯著的抗腫瘤作用，需要深入研究重樓及其與化療藥物聯(lián)合在腫瘤的抗血管生成中的作用。目的探討中藥重樓醇提物、奧沙利鉑以及兩者聯(lián)合在體外、體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中可能具有的抗血管生成的作用。方法采用MTT法檢測(cè)中藥重樓醇提物、奧沙利鉑以及兩者聯(lián)合應(yīng)用對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞HUVEC和人腸癌細(xì)胞LOVO增殖的抑制作用；采用TRANSWELL模型，觀察藥物對(duì)HUVEC的遷移的作用；采用三維新生血管模型，觀察藥物對(duì)小管形成的形態(tài)的影響；采用ANNEXIN熒光染色、細(xì)胞周期檢測(cè)試劑盒和流式細(xì)胞儀（FCM）檢測(cè)藥物作用對(duì)細(xì)胞的凋亡和周期的影響；觀察藥物對(duì)于雞胚絨毛尿囊膜模型中新生血管的影響。結(jié)果中藥重樓醇提物在75G/ML240G/ML之間對(duì)HUVEC細(xì)胞的抑制作用呈劑量依賴性（IC503683G/ML），對(duì)LOVO的細(xì)胞毒作用也呈劑量依賴性（IC5026754G/ML），重樓醇提物對(duì)HUVEC細(xì)胞的IC50值明顯低于其對(duì)LOVO細(xì)胞的IC50值，重樓醇提物對(duì)HUVEC細(xì)胞和LOVO細(xì)胞的作用顯示出明顯的差異細(xì)胞毒性；奧沙利鉑在05G/ML16G/ML之間對(duì)HUVEC細(xì)胞的抑制作用呈劑量依賴性（IC50352G/ML），對(duì)LOVO的細(xì)胞毒作用也呈劑量依賴性（IC50820G/ML），奧沙利鉑對(duì)HUVEC細(xì)胞的IC50值明顯低于其對(duì)LOVO細(xì)胞的IC50值，奧沙利鉑對(duì)HUVEC細(xì)胞和LOVO細(xì)胞的作用顯示出明顯的差異細(xì)胞毒性；兩者聯(lián)合應(yīng)用具有協(xié)同或者次加的作用；中藥重樓醇提物在75G/ML60G/ML時(shí)對(duì)HUVEC的遷移有一定的抑制作用，能夠明顯減少HUVEC遷移的數(shù)目，75G/ML、15G/ML、30G/ML、60G/ML的重樓醇提物的抑制率分別為1480、2573、3557、7012，奧沙利鉑在054G/ML時(shí)對(duì)HUVEC的遷移也有一定的抑制作用，能夠明顯減少HUVEC遷移的數(shù)目，05G/ML、1G/ML、2G/ML、4G/ML的奧沙利鉑的抑制率分別為1745、3123、4545、5904，兩者聯(lián)合應(yīng)用具有協(xié)同或者次加作用；中藥重樓醇提物和奧沙利鉑能夠破壞臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞形成的管腔狀結(jié)構(gòu)，兩者聯(lián)合應(yīng)用可能具有協(xié)同增效作用；HUVEC經(jīng)中藥重樓醇提物、奧沙利鉑作用48H后，能夠明顯誘導(dǎo)HUVEC細(xì)胞凋亡，兩藥聯(lián)合應(yīng)用誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞凋亡作用更加明顯，兩者可能存在協(xié)同增效作用；中藥重樓醇提物、奧沙利鉑作用HUVEC24H后，可能使內(nèi)皮細(xì)胞周期主要阻滯在G0G1期，兩藥聯(lián)合應(yīng)用G0G1期峰值增高，提示兩者可能有協(xié)同增效作用；中藥重樓醇提物、奧沙利鉑對(duì)雞胚絨毛尿囊膜新生血管有一定的抑制作用，能夠明顯減少新生血管的數(shù)目，兩藥聯(lián)合應(yīng)用可觀察到次加作用效果。結(jié)論中藥重樓和奧沙利鉑在體外、體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中可能具有一定抗血管生成的作用，兩者聯(lián)合應(yīng)用可能具有協(xié)同增效作用。血管生成（ANGIOGENESIS）是指從已經(jīng)存在的血管之上以萌芽的方式形成新的毛細(xì)血管。FOLKMAN先生在1971年首次提出腫瘤的生長(zhǎng)依賴于新生血管的生成的假說(shuō)，這一假說(shuō)基于作者觀察到在缺乏血管的部位很少出現(xiàn)惡性腫瘤。新生的血管可以為腫瘤的生長(zhǎng)提供氧和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，并且導(dǎo)致腫瘤的快速轉(zhuǎn)移，而通過(guò)抑制腫瘤組織中新生血管的形成能夠抑制腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移。某些化療藥物，在小劑量、高頻率的給藥方式下可以選擇性地抑制腫瘤組織內(nèi)新生血管內(nèi)皮細(xì)胞的生長(zhǎng)，使腫瘤細(xì)胞因血供不足而生長(zhǎng)受阻，這種特殊的給藥模式，化療藥物的作用靶位已不是腫瘤細(xì)胞，而是新生的血管內(nèi)皮細(xì)胞，這就是小劑量化療或抗血管生成化療。目前，抗血管生成藥物價(jià)格昂貴，中國(guó)的經(jīng)濟(jì)條件難以負(fù)擔(dān)，而中藥是我國(guó)的寶庫(kù)，尋找具有抗血管生成作用的物美價(jià)廉的中藥，顯得尤其重要。中醫(yī)藥治療惡性腫瘤有著豐富的經(jīng)驗(yàn)，近年來(lái)，隨著抗血管生成治療的研究的深入，發(fā)現(xiàn)很多傳統(tǒng)中藥及其化學(xué)成分也具有較好的抑制腫瘤新生血管的作用，并且價(jià)格低廉，毒副作用較小，逐漸成為國(guó)內(nèi)抗腫瘤研究的熱點(diǎn)。體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)中已經(jīng)證實(shí)，中藥重樓（RHIZOMAPARIDIS）及其化學(xué)成分具有顯著的抗腫瘤作用，需要深入研究重樓及其與化療藥物聯(lián)合在腫瘤的抗血管生成中的作用。目的探討中藥重樓醇提物、奧沙利鉑以及兩者聯(lián)合在體外、體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中可能具有的抗血管生成的作用。方法采用MTT法檢測(cè)中藥重樓醇提物、奧沙利鉑以及兩者聯(lián)合應(yīng)用對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞HUVEC和人腸癌細(xì)胞LOVO增殖的抑制作用；采用TRANSWELL模型，觀察藥物對(duì)HUVEC的遷移的作用；采用三維新生血管模型，觀察藥物對(duì)小管形成的形態(tài)的影響；采用ANNEXIN熒光染色、細(xì)胞周期檢測(cè)試劑盒和流式細(xì)胞儀（FCM）檢測(cè)藥物作用對(duì)細(xì)胞的凋亡和周期的影響；觀察藥物對(duì)于雞胚絨毛尿囊膜模型中新生血管的影響。結(jié)果中藥重樓醇提物在75G/ML240G/ML之間對(duì)HUVEC細(xì)胞的抑制作用呈劑量依賴性（IC503683G/ML），對(duì)LOVO的細(xì)胞毒作用也呈劑量依賴性（IC5026754G/ML），重樓醇提物對(duì)HUVEC細(xì)胞的IC50值明顯低于其對(duì)LOVO細(xì)胞的IC50值，重樓醇提物對(duì)HUVEC細(xì)胞和LOVO細(xì)胞的作用顯示出明顯的差異細(xì)胞毒性；奧沙利鉑在05G/ML16G/ML之間對(duì)HUVEC細(xì)胞的抑制作用呈劑量依賴性（IC50352G/ML），對(duì)LOVO的細(xì)胞毒作用也呈劑量依賴性（IC50820G/ML），奧沙利鉑對(duì)HUVEC細(xì)胞的IC50值明顯低于其對(duì)LOVO細(xì)胞的IC50值，奧沙利鉑對(duì)HUVEC細(xì)胞和LOVO細(xì)胞的作用顯示出明顯的差異細(xì)胞毒性；兩者聯(lián)合應(yīng)用具有協(xié)同或者次加的作用；中藥重樓醇提物在75G/ML60G/ML時(shí)對(duì)HUVEC的遷移有一定的抑制作用，能夠明顯減少HUVEC遷移的數(shù)目，75G/ML、15G/ML、30G/ML、60G/ML的重樓醇提物的抑制率分別為1480、2573、3557、7012，奧沙利鉑在054G/ML時(shí)對(duì)HUVEC的遷移也有一定的抑制作用，能夠明顯減少HUVEC遷移的數(shù)目，05G/ML、1G/ML、2G/ML、4G/ML的奧沙利鉑的抑制率分別為1745、3123、4545、5904，兩者聯(lián)合應(yīng)用具有協(xié)同或者次加作用；中藥重樓醇提物和奧沙利鉑能夠破壞臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞形成的管腔狀結(jié)構(gòu)，兩者聯(lián)合應(yīng)用可能具有協(xié)同增效作用；HUVEC經(jīng)中藥重樓醇提物、奧沙利鉑作用48H后，能夠明顯誘導(dǎo)HUVEC細(xì)胞凋亡，兩藥聯(lián)合應(yīng)用誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞凋亡作用更加明顯，兩者可能存在協(xié)同增效作用；中藥重樓醇提物、奧沙利鉑作用HUVEC24H后，可能使內(nèi)皮細(xì)胞周期主要阻滯在G0G1期，兩藥聯(lián)合應(yīng)用G0G1期峰值增高，提示兩者可能有協(xié)同增效作用；中藥重樓醇提物、奧沙利鉑對(duì)雞胚絨毛尿囊膜新生血管有一定的抑制作用，能夠明顯減少新生血管的數(shù)目，兩藥聯(lián)合應(yīng)用可觀察到次加作用效果。結(jié)論中藥重樓和奧沙利鉑在體外、體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中可能具有一定抗血管生成的作用，兩者聯(lián)合應(yīng)用可能具有協(xié)同增效作用。血管生成（ANGIOGENESIS）是指從已經(jīng)存在的血管之上以萌芽的方式形成新的毛細(xì)血管。FOLKMAN先生在1971年首次提出腫瘤的生長(zhǎng)依賴于新生血管的生成的假說(shuō)，這一假說(shuō)基于作者觀察到在缺乏血管的部位很少出現(xiàn)惡性腫瘤。新生的血管可以為腫瘤的生長(zhǎng)提供氧和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，并且導(dǎo)致腫瘤的快速轉(zhuǎn)移，而通過(guò)抑制腫瘤組織中新生血管的形成能夠抑制腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移。某些化療藥物，在小劑量、高頻率的給藥方式下可以選擇性地抑制腫瘤組織內(nèi)新生血管內(nèi)皮細(xì)胞的生長(zhǎng)，使腫瘤細(xì)胞因血供不足而生長(zhǎng)受阻，這種特殊的給藥模式，化療藥物的作用靶位已不是腫瘤細(xì)胞，而是新生的血管內(nèi)皮細(xì)胞，這就是小劑量化療或抗血管生成化療。目前，抗血管生成藥物價(jià)格昂貴，中國(guó)的經(jīng)濟(jì)條件難以負(fù)擔(dān)，而中藥是我國(guó)的寶庫(kù)，尋找具有抗血管生成作用的物美價(jià)廉的中藥，顯得尤其重要。中醫(yī)藥治療惡性腫瘤有著豐富的經(jīng)驗(yàn)，近年來(lái)，隨著抗血管生成治療的研究的深入，發(fā)現(xiàn)很多傳統(tǒng)中藥及其化學(xué)成分也具有較好的抑制腫瘤新生血管的作用，并且價(jià)格低廉，毒副作用較小，逐漸成為國(guó)內(nèi)抗腫瘤研究的熱點(diǎn)。體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)中已經(jīng)證實(shí)，中藥重樓（RHIZOMAPARIDIS）及其化學(xué)成分具有顯著的抗腫瘤作用，需要深入研究重樓及其與化療藥物聯(lián)合在腫瘤的抗血管生成中的作用。目的探討中藥重樓醇提物、奧沙利鉑以及兩者聯(lián)合在體外、體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中可能具有的抗血管生成的作用。方法采用MTT法檢測(cè)中藥重樓醇提物、奧沙利鉑以及兩者聯(lián)合應(yīng)用對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞HUVEC和人腸癌細(xì)胞LOVO增殖的抑制作用；采用TRANSWELL模型，觀察藥物對(duì)HUVEC的遷移的作用；采用三維新生血管模型，觀察藥物對(duì)小管形成的形態(tài)的影響；采用ANNEXIN熒光染色、細(xì)胞周期檢測(cè)試劑盒和流式細(xì)胞儀（FCM）檢測(cè)藥物作用對(duì)細(xì)胞的凋亡和周期的影響；觀察藥物對(duì)于雞胚絨毛尿囊膜模型中新生血管的影響。結(jié)果中藥重樓醇提物在75G/ML240G/ML之間對(duì)HUVEC細(xì)胞的抑制作用呈劑量依賴性（IC503683G/ML），對(duì)LOVO的細(xì)胞毒作用也呈劑量依賴性（IC5026754G/ML），重樓醇提物對(duì)HUVEC細(xì)胞的IC50值明顯低于其對(duì)LOVO細(xì)胞的IC50值，重樓醇提物對(duì)HUVEC細(xì)胞和LOVO細(xì)胞的作用顯示出明顯的差異細(xì)胞毒性；奧沙利鉑在05G/ML16G/ML之間對(duì)HUVEC細(xì)胞的抑制作用呈劑量依賴性（IC50352G/ML），對(duì)LOVO的細(xì)胞毒作用也呈劑量依賴性（IC50820G/ML），奧沙利鉑對(duì)HUVEC細(xì)胞的IC50值明顯低于其對(duì)LOVO細(xì)胞的IC50值，奧沙利鉑對(duì)HUVEC細(xì)胞和LOVO細(xì)胞的作用顯示出明顯的差異細(xì)胞毒性；兩者聯(lián)合應(yīng)用具有協(xié)同或者次加的作用；中藥重樓醇提物在75G/ML60G/ML時(shí)對(duì)HUVEC的遷移有一定的抑制作用，能夠明顯減少HUVEC遷移的數(shù)目，75G/ML、15G/ML、30G/ML、60G/ML的重樓醇提物的抑制率分別為1480、2573、3557、7012，奧沙利鉑在054G/ML時(shí)對(duì)HUVEC的遷移也有一定的抑制作用，能夠明顯減少HUVEC遷移的數(shù)目，05G/ML、1G/ML、2G/ML、4G/ML的奧沙利鉑的抑制率分別為1745、3123、4545、5904，兩者聯(lián)合應(yīng)用具有協(xié)同或者次加作用；中藥重樓醇提物和奧沙利鉑能夠破壞臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞形成的管腔狀結(jié)構(gòu)，兩者聯(lián)合應(yīng)用可能具有協(xié)同增效作用；HUVEC經(jīng)中藥重樓醇提物、奧沙利鉑作用48H后，能夠明顯誘導(dǎo)HUVEC細(xì)胞凋亡，兩藥聯(lián)合應(yīng)用誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞凋亡作用更加明顯，兩者可能存在協(xié)同增效作用；中藥重樓醇提物、奧沙利鉑作用HUVEC24H后，可能使內(nèi)皮細(xì)胞周期主要阻滯在G0G1期，兩藥聯(lián)合應(yīng)用G0G1期峰值增高，提示兩者可能有協(xié)同增效作用；中藥重樓醇提物、奧沙利鉑對(duì)雞胚絨毛尿囊膜新生血管有一定的抑制作用，能夠明顯減少新生血管的數(shù)目，兩藥聯(lián)合應(yīng)用可觀察到次加作用效果。結(jié)論中藥重樓和奧沙利鉑在體外、體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中可能具有一定抗血管生成的作用，兩者聯(lián)合應(yīng)用可能具有協(xié)同增效作用。血管生成（ANGIOGENESIS）是指從已經(jīng)存在的血管之上以萌芽的方式形成新的毛細(xì)血管。FOLKMAN先生在1971年首次提出腫瘤的生長(zhǎng)依賴于新生血管的生成的假說(shuō)，這一假說(shuō)基于作者觀察到在缺乏血管的部位很少出現(xiàn)惡性腫瘤。新生的血管可以為腫瘤的生長(zhǎng)提供氧和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，并且導(dǎo)致腫瘤的快速轉(zhuǎn)移，而通過(guò)抑制腫瘤組織中新生血管的形成能夠抑制腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移。某些化療藥物，在小劑量、高頻率的給藥方式下可以選擇性地抑制腫瘤組織內(nèi)新生血管內(nèi)皮細(xì)胞的生長(zhǎng)，使腫瘤細(xì)胞因血供不足而生長(zhǎng)受阻，這種特殊的給藥模式，化療藥物的作用靶位已不是腫瘤細(xì)胞，而是新生的血管內(nèi)皮細(xì)胞，這就是小劑量化療或抗血管生成化療。目前，抗血管生成藥物價(jià)格昂貴，中國(guó)的經(jīng)濟(jì)條件難以負(fù)擔(dān)，而中藥是我國(guó)的寶庫(kù)，尋找具有抗血管生成作用的物美價(jià)廉的中藥，顯得尤其重要。中醫(yī)藥治療惡性腫瘤有著豐富的經(jīng)驗(yàn)，近年來(lái)，隨著抗血管生成治療的研究的深入，發(fā)現(xiàn)很多傳統(tǒng)中藥及其化學(xué)成分也具有較好的抑制腫瘤新生血管的作用，并且價(jià)格低廉，毒副作用較小，逐漸成為國(guó)內(nèi)抗腫瘤研究的熱點(diǎn)。體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)中已經(jīng)證實(shí)，中藥重樓（RHIZOMAPARIDIS）及其化學(xué)成分具有顯著的抗腫瘤作用，需要深入研究重樓及其與化療藥物聯(lián)合在腫瘤的抗血管生成中的作用。目的探討中藥重樓醇提物、奧沙利鉑以及兩者聯(lián)合在體外、體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中可能具有的抗血管生成的作用。方法采用MTT法檢測(cè)中藥重樓醇提物、奧沙利鉑以及兩者聯(lián)合應(yīng)用對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞HUVEC和人腸癌細(xì)胞LOVO增殖的抑制作用；采用TRANSWELL模型，觀察藥物對(duì)HUVEC的遷移的作用；采用三維新生血管模型，觀察藥物對(duì)小管形成的形態(tài)的影響；采用ANNEXIN熒光染色、細(xì)胞周期檢測(cè)試劑盒和流式細(xì)胞儀（FCM）檢測(cè)藥物作用對(duì)細(xì)胞的凋亡和周期的影響；觀察藥物對(duì)于雞胚絨毛尿囊膜模型中新生血管的影響。結(jié)果中藥重樓醇提物在75G/ML240G/ML之間對(duì)HUVEC細(xì)胞的抑制作用呈劑量依賴性（IC503683G/ML），對(duì)LOVO的細(xì)胞毒作用也呈劑量依賴性（IC5026754G/ML），重樓醇提物對(duì)HUVEC細(xì)胞的IC50值明顯低于其對(duì)LOVO細(xì)胞的IC50值，重樓醇提物對(duì)HUVEC細(xì)胞和LOVO細(xì)胞的作用顯示出明顯的差異細(xì)胞毒性；奧沙利鉑在05G/ML16G/ML之間對(duì)HUVEC細(xì)胞的抑制作用呈劑量依賴性（IC50352G/ML），對(duì)LOVO的細(xì)胞毒作用也呈劑量依賴性（IC50820G/ML），奧沙利鉑對(duì)HUVEC細(xì)胞的IC50值明顯低于其對(duì)LOVO細(xì)胞的IC50值，奧沙利鉑對(duì)HUVEC細(xì)胞和LOVO細(xì)胞的作用顯示出明顯的差異細(xì)胞毒性；兩者聯(lián)合應(yīng)用具有協(xié)同或者次加的作用；中藥重樓醇提物在75G/ML60G/ML時(shí)對(duì)HUVEC的遷移有一定的抑制作用，能夠明顯減少HUVEC遷移的數(shù)目，75G/ML、15G/ML、30G/ML、60G/ML的重樓醇提物的抑制率分別為1480、2573、3557、7012，奧沙利鉑在054G/ML時(shí)對(duì)HUVEC的遷移也有一定的抑制作用，能夠明顯減少HUVEC遷移的數(shù)目，05G/ML、1G/ML、2G/ML、4G/ML的奧沙利鉑的抑制率分別為1745、3123、4545、5904，兩者聯(lián)合應(yīng)用具有協(xié)同或者次加作用；中藥重樓醇提物和奧沙利鉑能夠破壞臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞形成的管腔狀結(jié)構(gòu)，兩者聯(lián)合應(yīng)用可能具有協(xié)同增效作用；HUVEC經(jīng)中藥重樓醇提物、奧沙利鉑作用48H后，能夠明顯誘導(dǎo)HUVEC細(xì)胞凋亡，兩藥聯(lián)合應(yīng)用誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞凋亡作用更加明顯，兩者可能存在協(xié)同增效作用；中藥重樓醇提物、奧沙利鉑作用HUVEC24H后，可能使內(nèi)皮細(xì)胞周期主要阻滯在G0G1期，兩藥聯(lián)合應(yīng)用G0G1期峰值增高，提示兩者可能有協(xié)同增效作用；中藥重樓醇提物、奧沙利鉑對(duì)雞胚絨毛尿囊膜新生血管有一定的抑制作用，能夠明顯減少新生血管的數(shù)目，兩藥聯(lián)合應(yīng)用可觀察到次加作用效果。結(jié)論中藥重樓和奧沙利鉑在體外、體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中可能具有一定抗血管生成的作用，兩者聯(lián)合應(yīng)用可能具有協(xié)同增效作用。血管生成（ANGIOGENESIS）是指從已經(jīng)存在的血管之上以萌芽的方式形成新的毛細(xì)血管。FOLKMAN先生在1971年首次提出腫瘤的生長(zhǎng)依賴于新生血管的生成的假說(shuō)，這一假說(shuō)基于作者觀察到在缺乏血管的部位很少出現(xiàn)惡性腫瘤。新生的血管可以為腫瘤的生長(zhǎng)提供氧和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，并且導(dǎo)致腫瘤的快速轉(zhuǎn)移，而通過(guò)抑制腫瘤組織中新生血管的形成能夠抑制腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移。某些化療藥物，在小劑量、高頻率的給藥方式下可以選擇性地抑制腫瘤組織內(nèi)新生血管內(nèi)皮細(xì)胞的生長(zhǎng)，使腫瘤細(xì)胞因血供不足而生長(zhǎng)受阻，這種特殊的給藥模式，化療藥物的作用靶位已不是腫瘤細(xì)胞，而是新生的血管內(nèi)皮細(xì)胞，這就是小劑量化療或抗血管生成化療。目前，抗血管生成藥物價(jià)格昂貴，中國(guó)的經(jīng)濟(jì)條件難以負(fù)擔(dān)，而中藥是我國(guó)的寶庫(kù)，尋找具有抗血管生成作用的物美價(jià)廉的中藥，顯得尤其重要。中醫(yī)藥治療惡性腫瘤有著豐富的經(jīng)驗(yàn)，近年來(lái)，隨著抗血管生成治療的研究的深入，發(fā)現(xiàn)很多傳統(tǒng)中藥及其化學(xué)成分也具有較好的抑制腫瘤新生血管的作用，并且價(jià)格低廉，毒副作用較小，逐漸成為國(guó)內(nèi)抗腫瘤研究的熱點(diǎn)。體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)中已經(jīng)證實(shí)，中藥重樓（RHIZOMAPARIDIS）及其化學(xué)成分具有顯著的抗腫瘤作用，需要深入研究重樓及其與化療藥物聯(lián)合在腫瘤的抗血管生成中的作用。目的探討中藥重樓醇提物、奧沙利鉑以及兩者聯(lián)合在體外、體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中可能具有的抗血管生成的作用。方法采用MTT法檢測(cè)中藥重樓醇提物、奧沙利鉑以及兩者聯(lián)合應(yīng)用對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞HUVEC和人腸癌細(xì)胞LOVO增殖的抑制作用；采用TRANSWELL模型，觀察藥物對(duì)HUVEC的遷移的作用；采用三維新生血管模型，觀察藥物對(duì)小管形成的形態(tài)的影響；采用ANNEXIN熒光染色、細(xì)胞周期檢測(cè)試劑盒和流式細(xì)胞儀（FCM）檢測(cè)藥物作用對(duì)細(xì)胞的凋亡和周期的影響；觀察藥物對(duì)于雞胚絨毛尿囊膜模型中新生血管的影響。結(jié)果中藥重樓醇提物在75G/ML240G/ML之間對(duì)HUVEC細(xì)胞的抑制作用呈劑量依賴性（IC503683G/ML），對(duì)LOVO的細(xì)胞毒作用也呈劑量依賴性（IC5026754G/ML），重樓醇提物對(duì)HUVEC細(xì)胞的IC50值明顯低于其對(duì)LOVO細(xì)胞的IC50值，重樓醇提物對(duì)HUVEC細(xì)胞和LOVO細(xì)胞的作用顯示出明顯的差異細(xì)胞毒性；奧沙利鉑在05G/ML16G/ML之間對(duì)HUVEC細(xì)胞的抑制作用呈劑量依賴性（IC50352G/ML），對(duì)LOVO的細(xì)胞毒作用也呈劑量依賴性（IC50820G/ML），奧沙利鉑對(duì)HUVEC細(xì)胞的IC50值明顯低于其對(duì)LOVO細(xì)胞的IC50值，奧沙利鉑對(duì)HUVEC細(xì)胞和LOVO細(xì)胞的作用顯示出明顯的差異細(xì)胞毒性；兩者聯(lián)合應(yīng)用具有協(xié)同或者次加的作用；中藥重樓醇提物在75G/ML60G/ML時(shí)對(duì)HUVEC的遷移有一定的抑制作用，能夠明顯減少HUVEC遷移的數(shù)目，75G/ML、15G/ML、30G/ML、60G/ML的重樓醇提物的抑制率分別為1480、2573、3557、7012，奧沙利鉑在054G/ML時(shí)對(duì)HUVEC的遷移也有一定的抑制作用，能夠明顯減少HUVEC遷移的數(shù)目，05G/ML、1G/ML、2G/ML、4G/ML的奧沙利鉑的抑制率分別為1745、3123、4545、5904，兩者聯(lián)合應(yīng)用具有協(xié)同或者次加作用；中藥重樓醇提物和奧沙利鉑能夠破壞臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞形成的管腔狀結(jié)構(gòu)，兩者聯(lián)合應(yīng)用可能具有協(xié)同增效作用；HUVEC經(jīng)中藥重樓醇提物、奧沙利鉑作用48H后，能夠明顯誘導(dǎo)HUVEC細(xì)胞凋亡，兩藥聯(lián)合應(yīng)用誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞凋亡作用更加明顯，兩者可能存在協(xié)同增效作用；中藥重樓醇提物、奧沙利鉑作用HUVEC24H后，可能使內(nèi)皮細(xì)胞周期主要阻滯在G0G1期，兩藥聯(lián)合應(yīng)用G0G1期峰值增高，提示兩者可能有協(xié)同增效作用；中藥重樓醇提物、奧沙利鉑對(duì)雞胚絨毛尿囊膜新生血管有一定的抑制作用，能夠明顯減少新生血管的數(shù)目，兩藥聯(lián)合應(yīng)用可觀察到次加作用效果。結(jié)論中藥重樓和奧沙利鉑在體外、體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中可能具有一定抗血管生成的作用，兩者聯(lián)合應(yīng)用可能具有協(xié)同增效作用。血管生成（ANGIOGENESIS）是指從已經(jīng)存在的血管之上以萌芽的方式形成新的毛細(xì)血管。FOLKMAN先生在1971年首次提出腫瘤的生長(zhǎng)依賴于新生血管的生成的假說(shuō)，這一假說(shuō)基于作者觀察到在缺乏血管的部位很少出現(xiàn)惡性腫瘤。新生的血管可以為腫瘤的生長(zhǎng)提供氧和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，并且導(dǎo)致腫瘤的快速轉(zhuǎn)移，而通過(guò)抑制腫瘤組織中新生血管的形成能夠抑制腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移。某些化療藥物，在小劑量、高頻率的給藥方式下可以選擇性地抑制腫瘤組織內(nèi)新生血管內(nèi)皮細(xì)胞的生長(zhǎng)，使腫瘤細(xì)胞因血供不足而生長(zhǎng)受阻，這種特殊的給藥模式，化療藥物的作用靶位已不是腫瘤細(xì)胞，而是新生的血管內(nèi)皮細(xì)胞，這就是小劑量化療或抗血管生成化療。目前，抗血管生成藥物價(jià)格昂貴，中國(guó)的經(jīng)濟(jì)條件難以負(fù)擔(dān)，而中藥是我國(guó)的寶庫(kù)，尋找具有抗血管生成作用的物美價(jià)廉的中藥，顯得尤其重要。中醫(yī)藥治療惡性腫瘤有著豐富的經(jīng)驗(yàn)，近年來(lái)，隨著抗血管生成治療的研究的深入，發(fā)現(xiàn)很多傳統(tǒng)中藥及其化學(xué)成分也具有較好的抑制腫瘤新生血管的作用，并且價(jià)格低廉，毒副作用較小，逐漸成為國(guó)內(nèi)抗腫瘤研究的熱點(diǎn)。體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)中已經(jīng)證實(shí)，中藥重樓（RHIZOMAPARIDIS）及其化學(xué)成分具有顯著的抗腫瘤作用，需要深入研究重樓及其與化療藥物聯(lián)合在腫瘤的抗血管生成中的作用。目的探討中藥重樓醇提物、奧沙利鉑以及兩者聯(lián)合在體外、體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中可能具有的抗血管生成的作用。方法采用MTT法檢測(cè)中藥重樓醇提物、奧沙利鉑以及兩者聯(lián)合應(yīng)用對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞HUVEC和人腸癌細(xì)胞LOVO增殖的抑制作用；采用TRANSWELL模型，觀察藥物對(duì)HUVEC的遷移的作用；采用三維新生血管模型，觀察藥物對(duì)小管形成的形態(tài)的影響；采用ANNEXIN熒光染色、細(xì)胞周期檢測(cè)試劑盒和流式細(xì)胞儀（FCM）檢測(cè)藥物作用對(duì)細(xì)胞的凋亡和周期的影響；觀察藥物對(duì)于雞胚絨毛尿囊膜模型中新生血管的影響。結(jié)果中藥重樓醇提物在75G/ML240G/ML之間對(duì)HUVEC細(xì)胞的抑制作用呈劑量依賴性（IC503683G/ML），對(duì)LOVO的細(xì)胞毒作用也呈劑量依賴性（IC5026754G/ML），重樓醇提物對(duì)HUVEC細(xì)胞的IC50值明顯低于其對(duì)LOVO細(xì)胞的IC50值，重樓醇提物對(duì)HUVEC細(xì)胞和LOVO細(xì)胞的作用顯示出明顯的差異細(xì)胞毒性；奧沙利鉑在05G/ML16G/ML之間對(duì)HUVEC細(xì)胞的抑制作用呈劑量依賴性（IC50352G/ML），對(duì)LOVO的細(xì)胞毒作用也呈劑量依賴性（IC50820G/ML），奧沙利鉑對(duì)HUVEC細(xì)胞的IC50值明顯低于其對(duì)LOVO細(xì)胞的IC50值，奧沙利鉑對(duì)HUVEC細(xì)胞和LOVO細(xì)胞的作用顯示出明顯的差異細(xì)胞毒性；兩者聯(lián)合應(yīng)用具有協(xié)同或者次加的作用；中藥重樓醇提物在75G/ML60G/ML時(shí)對(duì)HUVEC的遷移有一定的抑制作用，能夠明顯減少HUVEC遷移的數(shù)目，75G/ML、15G/ML、30G/ML、60G/ML的重樓醇提物的抑制率分別為1480、2573、3557、7012，奧沙利鉑在054G/ML時(shí)對(duì)HUVEC的遷移也有一定的抑制作用，能夠明顯減少HUVEC遷移的數(shù)目，05G/ML、1G/ML、2G/ML、4G/ML的奧沙利鉑的抑制率分別為1745、3123、4545、5904，兩者聯(lián)合應(yīng)用具有協(xié)同或者次加作用；中藥重樓醇提物和奧沙利鉑能夠破壞臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞形成的管腔狀結(jié)構(gòu)，兩者聯(lián)合應(yīng)用可能具有協(xié)同增效作用；HUVEC經(jīng)中藥重樓醇提物、奧沙利鉑作用48H后，能夠明顯誘導(dǎo)HUVEC細(xì)胞凋亡，兩藥聯(lián)合應(yīng)用誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞凋亡作用更加明顯，兩者可能存在協(xié)同增效作用；中藥重樓醇提物、奧沙利鉑作用HUVEC24H后，可能使內(nèi)皮細(xì)胞周期主要阻滯在G0G1期，兩藥聯(lián)合應(yīng)用G0G1期峰值增高，提示兩者可能有協(xié)同增效作用；中藥重樓醇提物、奧沙利鉑對(duì)雞胚絨毛尿囊膜新生血管有一定的抑制作用，能夠明顯減少新生血管的數(shù)目，兩藥聯(lián)合應(yīng)用可觀察到次加作用效果。結(jié)論中藥重樓和奧沙利鉑在體外、體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中可能具有一定抗血管生成的作用，兩者聯(lián)合應(yīng)用可能具有協(xié)同增效作用。血管生成（ANGIOGENESIS）是指從已經(jīng)存在的血管之上以萌芽的方式形成新的毛細(xì)血管。FOLKMAN先生在1971年首次提出腫瘤的生長(zhǎng)依賴于新生血管的生成的假說(shuō)，這一假說(shuō)基于作者觀察到在缺乏血管的部位很少出現(xiàn)惡性腫瘤。新生的血管可以為腫瘤的生長(zhǎng)提供氧和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，并且導(dǎo)致腫瘤的快速轉(zhuǎn)移，而通過(guò)抑制腫瘤組織中新生血管的形成能夠抑制腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移。某些化療藥物，在小劑量、高頻率的給藥方式下可以選擇性地抑制腫瘤組織內(nèi)新生血管內(nèi)皮細(xì)胞的生長(zhǎng)，使腫瘤細(xì)胞因血供不足而生長(zhǎng)受阻，這種特殊的給藥模