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1,腸桿菌科,2,3,腸道感染細(xì)菌,通過(guò)糞口途徑進(jìn)行傳播的細(xì)菌主要包括腸桿菌科細(xì)菌(最重要)弧菌屬細(xì)菌幽門螺桿菌和彎曲菌屬等,4,腸桿菌科,是一大群生物學(xué)性狀相似的革蘭氏陰性短小桿菌,有的為致病菌,多為腸道內(nèi)正常菌群,可引起醫(yī)院感染。條件致病菌臨床可查到四十種以上。,包括埃希菌屬志賀菌屬沙門菌屬變形桿菌屬克雷伯菌屬摩根菌屬枸櫞酸菌屬腸桿菌屬沙雷菌屬等,8,腸桿菌科共同特點(diǎn),形態(tài)結(jié)構(gòu) G小桿菌,鈍圓桿菌,無(wú)芽孢,多數(shù)有鞭毛及菌毛,少數(shù)有莢膜。培養(yǎng)特性 需氧或兼性厭氧營(yíng)養(yǎng)要求不高,普通培養(yǎng)基可生長(zhǎng),菌落相似,形成灰白色中等大小S型菌落。腸道選擇培養(yǎng)基:,SS培養(yǎng)基(沙門志賀培養(yǎng)基)乳糖、中性紅指示劑、膽鹽、煌綠等抑制劑,10,生化反應(yīng)活躍,常用于鑒別腸道桿菌 乳糖發(fā)酵試驗(yàn) 重要試驗(yàn) 初步鑒別腸道致病菌和腸道非致病菌腸道致病菌多數(shù)不發(fā)酵乳糖(志賀菌,沙門菌等)腸道非致病菌多數(shù)發(fā)酵乳糖抵抗力不強(qiáng),60 30min 即可滅活易出現(xiàn)各種變異抗原結(jié)構(gòu)復(fù)雜菌體(O)抗原鞭毛(H)抗原表面(K、Vi)抗原,11,溶原性轉(zhuǎn)換,生化反應(yīng)性變異,通過(guò),耐藥性變異,毒力性變異,轉(zhuǎn)導(dǎo),接合,易出現(xiàn)各種變異,通過(guò),引起,12,抗原構(gòu)造復(fù)雜,鞭毛抗原(H)IgG,菌體抗原(O)IgM,K或Vi抗原,13,第一節(jié) 埃希菌屬,大腸桿菌: E.coli (臨床上最常見,最重要),埃希菌屬:Escherichia(6個(gè)種),重要正常菌群,代謝產(chǎn)物具有營(yíng)養(yǎng)作用 機(jī)會(huì)致病菌,腸道外感染。 致病性(少量血清型),胃腸炎。 糞便污染的衛(wèi)生學(xué)檢測(cè)指標(biāo)。,生物學(xué)性狀,形態(tài)染色 符合腸桿菌特點(diǎn),多數(shù)周身鞭毛,有菌毛,無(wú)芽孢。培養(yǎng)特性 符合腸桿菌特點(diǎn) S-S桃紅色:乳糖發(fā)酵菌落生化反應(yīng) IMViC(+-)抗原O 抗原( O1-O173)H 抗原(H1-H56)K 抗原(K1-K100)血清型表示法:O:K:H,16,致病性,致病物質(zhì) 除內(nèi)毒素、莢膜腸桿菌科共有的毒力因子外,大腸埃希菌具有獨(dú)特的毒力因子有:黏附素具有高度特異性 吸附、定植、致病,外毒素(由ETEC產(chǎn)生的腸毒素)(1)不耐熱腸毒素(LT),分LT-I和LT-兩型 蛋白質(zhì)對(duì)熱不穩(wěn)定,與霍亂腸毒素相似 A亞單位(1個(gè))毒素活性成分機(jī)制 B亞單位(5個(gè))與腸上皮細(xì)胞受體(GM1神經(jīng) 節(jié)苷脂)結(jié)合B單位與受體結(jié)合導(dǎo)致A進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)激活腺苷酸環(huán)化酶,ATP cAMP,小腸液過(guò)度分泌,腸腔積液、腹瀉,18,(2)耐熱腸毒素(ST),分STa、STb兩型 為低分子多肽,對(duì)熱穩(wěn)定 機(jī)制為激活細(xì)胞鳥苷酸環(huán)化酶,使cGMP導(dǎo)致腹瀉 LT和ST同時(shí)存在,致病性要強(qiáng),19,所致疾?。耗c道外感染(內(nèi)源性感染)化膿性感染定位轉(zhuǎn)移腹膜炎、闌尾炎、創(chuàng)傷感染、手術(shù)刀口感染、肺炎、敗血癥等泌尿道感染病原菌來(lái)自病人腸道(上行性)占泌尿道感染首位、女性多見(尿道炎、膀胱炎、腎盂腎炎等)-尿路致病性大腸埃希菌,20,腸道感染胃腸炎(腹瀉),(外源性感染) 腸產(chǎn)毒性大腸埃希菌(ETEC): 嬰幼兒、旅游者腹瀉,與霍亂功能相似腸侵襲性大腸埃希菌(EIEC): 成人腹瀉,與菌痢相似腸致病性大腸埃希菌(EPEC): 嬰兒腹瀉(水樣腹瀉)腸出血性大腸埃希菌( EHEC,O157): 出血性結(jié)腸炎, 溶血性尿毒綜合征(HUS)腸集聚性大腸埃希菌 (EAEC): 嬰兒腹瀉(持續(xù)性),引起胃腸炎的大腸埃希菌,22,微生物學(xué)檢查法,臨床標(biāo)本的檢查(1)標(biāo)本 腸外感染:采取中段尿、血液、膿液、腦脊液等。胃腸炎:主要取糞便。,23,(2) 分離培養(yǎng)與鑒定腸道外感染標(biāo)本涂片、染色分離培養(yǎng)初步鑒定(IMViC:+-) 最后鑒定(一系列生化反應(yīng))尿路感染時(shí)每ml尿含菌10萬(wàn),有診斷價(jià)值腸道內(nèi)感染分離培養(yǎng)+生化反應(yīng)+血清分型+毒素測(cè)定+核酸檢測(cè)等,24,衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)檢查 大腸菌群系指在37度24小時(shí)內(nèi)發(fā)酵乳糖產(chǎn) 酸產(chǎn)氣的腸道桿菌,包括埃希菌屬,枸櫞酸桿 菌屬,克雷伯菌屬及腸桿菌屬等 衛(wèi)生學(xué)標(biāo)準(zhǔn):每100ml飲水中不得檢出大腸菌群,每1000ml水中大腸桿菌3個(gè)。,25,防治原則,人工合成的疫苗可預(yù)防ETEC等感染。 耐藥性普遍,抗生素治療應(yīng)在藥敏試驗(yàn)的指導(dǎo)下進(jìn)行,特別是細(xì)菌性腦膜炎。 尿道插管和膀胱鏡檢查等嚴(yán)格無(wú)菌操作,對(duì)腹瀉病人進(jìn)行隔離治療,減少醫(yī)院感染 充分烹飪?nèi)忸?,牛奶等食品,可減少ETEC和EHEC感染的危險(xiǎn)。,26,第二節(jié) 志賀菌(痢疾桿菌),27,生物學(xué)性狀,形態(tài)染色符合腸桿菌特征,有菌毛,無(wú)鞭毛,無(wú)動(dòng)力是本菌與其它腸道致病菌主要區(qū)別點(diǎn)培養(yǎng)特性腸道鑒別培養(yǎng)基上的無(wú)色透明、乳糖不發(fā)酵菌落生化反應(yīng)葡萄糖(+)、乳糖(-)(宋內(nèi)志賀菌遲緩發(fā)酵乳糖)、H2S-、尿素(-)、動(dòng)力(-)抗原分類根據(jù)O抗原分4群,40余型A群痢疾志賀菌(10)B群福氏志賀菌(13)C群鮑氏志賀菌(18)D群宋氏志賀菌(1)抵抗力 比其它腸桿菌弱,尤其對(duì)酸敏感,28,29,致病性與免疫性,致病物質(zhì)侵襲力 菌毛:黏附腸黏膜上皮細(xì)胞 型分泌系統(tǒng)穿透上皮細(xì)胞并擴(kuò)散、傳播內(nèi)毒素強(qiáng)烈內(nèi)毒素,作用于局部并可吸附入血引起全 身癥狀外毒素A群(、型)產(chǎn)生志賀毒素(Sts)有3種生 物活性(1)腸毒素:類似ETEC毒素、霍亂腸毒素作用水樣瀉(2)細(xì)胞毒性:對(duì)人肝細(xì)胞、腸黏膜細(xì)胞有毒性,引起變性壞死(3)神經(jīng)毒性:損傷動(dòng)物神經(jīng)系統(tǒng)(麻痹、死亡),31,所致疾病細(xì)菌性痢疾傳染源:病人、帶菌者傳播途徑:經(jīng)口致病機(jī)制臨床類型急性菌痢中毒性菌痢慢性菌痢免疫力 不牢固,易再感染,32,微生物學(xué)檢查與防治,(一)標(biāo)本 取糞便膿血或黏液部分,避免與尿混合;在使用抗生素前采樣;標(biāo)本應(yīng)新鮮;若不能及時(shí)送檢,宜將標(biāo)本保存于30甘油緩沖鹽水或?qū)iT送檢的培養(yǎng)基內(nèi)。中毒性痢疾者可取肛拭。(二)分離培養(yǎng)與鑒定(三)毒力試驗(yàn)(Sereny 試驗(yàn))(四)快速診斷法 免疫染色法;免疫熒光菌球法;協(xié)同凝集試驗(yàn);膠乳凝集試驗(yàn);分子生物學(xué)方法,33,防治原則,非特異性預(yù)防:水、食物和牛奶的衛(wèi)生學(xué)監(jiān)測(cè),垃圾處理和滅蠅;隔離病人和消毒排泄物;發(fā)現(xiàn)亞臨床病例和帶菌者;抗生素治療感染個(gè)體。此菌很易出現(xiàn)多重耐藥菌株。免疫防御現(xiàn)致力于活疫苗的研究。主要分為3類,即減毒突變株、用不同載體菌構(gòu)建的雜交株以及營(yíng)養(yǎng)缺陷減毒株。例如鏈霉素依賴株(streptomycin dependent strain, Sd),34,第三節(jié) 沙門菌屬,是腸桿菌科中最復(fù)雜的菌屬,有2000種以上血清型 (腸道沙門菌腸道亞種)對(duì)人類有致病性腸熱癥傷寒沙門菌,甲型副傷寒沙門菌、肖氏沙門菌、希氏沙門菌食物中毒鼠傷寒沙門菌、豬霍亂沙門菌、腸炎沙門菌敗血癥豬霍亂沙門菌最常見,35,生物學(xué)性狀,形態(tài)染色符合腸桿菌特點(diǎn),多為周毛菌,有菌毛,一般無(wú)莢膜,均無(wú)芽孢。,傷寒桿菌的周身鞭毛,36,培養(yǎng)特性EMB、SS上呈無(wú)色透明乳糖不發(fā)酵菌落,麥康凱培養(yǎng)基上的傷寒桿菌菌落,37,生化反應(yīng)乳糖(-),葡萄糖(+)/+,多數(shù)H2S+,動(dòng)力+,尿素(-)抗原結(jié)構(gòu)O抗原特異性低、穩(wěn)定、分群(組)H抗原I相特異性高,II相特異性低,不穩(wěn)定(分型)Vi抗原(毒力抗原)不穩(wěn)定,可阻止“O”凝集反應(yīng)抵抗力 不強(qiáng) 65 1530min,38,致病性與免疫性,致病物質(zhì)侵襲力菌毛吸附型分泌系統(tǒng)穿入細(xì)胞,擴(kuò)散Vi抗原微莢膜(抗吞噬)內(nèi)毒素外毒素個(gè)別(鼠傷寒沙門菌)產(chǎn)生,與ETEC腸毒素相似,所致疾?。?菌毛,穿入淋巴液,胸導(dǎo)管,第二次菌血癥,遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)腸壁壞死、潰瘍,高熱、肝脾腫大、玫瑰疹、白細(xì)胞等全身中毒癥狀,腸熱癥,傷寒沙門菌等經(jīng)口,吸附小腸黏膜細(xì)胞上,在腸壁、腸系膜淋巴組織中繁殖(致敏),血流(第一次菌血癥),腸出血、腸穿孔,發(fā)熱,不適,全身疼痛等前驅(qū)癥狀,40,臨床過(guò)程潛伏期2W發(fā)病初期:第1W(第一次菌血癥)、發(fā)熱,不適,全身疼痛等前驅(qū)癥狀,此期血液(80%)、骨髓(90%(+)有大量細(xì)菌發(fā)病極期:第2-4W,全身癥狀持續(xù)加重,出現(xiàn)高熱、肝脾腫大、皮疹、白細(xì)胞等全身中毒癥狀。此期血、骨髓中仍有菌,但糞便(60%)、尿(20%)、皮疹液中可查到細(xì)菌,由于型變態(tài)反應(yīng)并發(fā)癥發(fā)生,血液抗體達(dá)到陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)肥達(dá)反應(yīng)恢復(fù)期:第四周末,體溫下降,癥狀消失,恢復(fù)期帶菌1年(糞便仍陽(yáng)性),血液抗體仍高,腸熱癥,胃腸炎(食物中毒) 潛伏期短,6-24h,起病急,病程短2-4天,發(fā)熱、惡心、嘔吐、腹痛、腹瀉敗血癥 經(jīng)口感染,經(jīng)腸道入血,癥狀嚴(yán)重,有高熱,寒戰(zhàn),厭食和貧血等。敗血癥癥狀明顯而腸道癥狀不明顯帶菌者 健康帶菌者,恢復(fù)期帶菌者免疫性 腸熱癥,病后免疫牢固,特異性細(xì)胞免疫是主 要防御機(jī)制,特異性體液免疫起輔助殺菌作用。 胃腸炎的恢復(fù)與腸道局部生成sIgA有關(guān)。,42,微生物學(xué)檢查,分離培養(yǎng)與鑒定標(biāo)本采取腸熱癥:第1W,血;第2W起,糞便;第3W起,尿液;第1-3W,骨髓液。食物中毒:糞便、嘔吐物、可疑食物敗血癥:血液帶菌者:糞便/十二指腸引流液(膽道)分離鑒定:增菌(血、骨髓)SS生化反應(yīng)血清鑒定,43,血清學(xué)診斷肥達(dá)試驗(yàn)(Widal test),定義 用已知傷寒沙門菌菌體O抗原和H鞭毛抗原、副傷寒的甲型副傷寒沙門菌、肖氏沙門菌和希氏沙門菌H鞭毛抗原的診斷菌液與受檢血清做試管或微孔板定量凝集試驗(yàn),測(cè)定受檢血清中有無(wú)相應(yīng)抗體及其效價(jià)的試驗(yàn)。方法:試管凝集法(定量)傷寒沙門菌O1:80,H1:160,副傷寒沙門菌H1:80才有意義動(dòng)態(tài)觀察:雙份血清抗體四倍升高有診斷意義,44,O抗體(IgM), H抗體(IgG)O 、H抗體均升高,患傷寒的可能性大O 、H抗體不升高,患傷寒的可能性小只有H升高,則可能是預(yù)防接種過(guò)或非特異性回憶反應(yīng),只有O升高而H不高,則可能是感染早期或其他沙門菌的交叉反應(yīng)。,臨床意義,45,防治原則,做好水源和食品的衛(wèi)生管理,防止被沙門菌感染的人和動(dòng)物的糞便污染。感染動(dòng)物的肉類、蛋等制品要徹底烹飪。 發(fā)現(xiàn)、確診和治療帶菌者。帶菌期間不能從事飲食行業(yè)的工作。 目前國(guó)際上公認(rèn)的新一代疫苗是傷寒Vi莢膜多糖疫苗,我國(guó)也以正式批準(zhǔn)使用。 腸熱癥的治療目前使用的有效藥物主要是環(huán)丙氟哌酸(Ciprogloxacin)。,46,第四節(jié) 其他菌屬,一、克雷伯菌屬 二、變形桿菌屬三、腸桿菌屬四、沙雷菌屬五、枸櫞酸桿菌屬六、摩根菌屬,47,克雷伯菌屬(5個(gè)種)肺炎克氏菌(3個(gè)亞種)的肺炎亞種,俗稱肺炎桿菌,與人類感染有關(guān)G-球桿菌,無(wú)動(dòng)力,有較厚的莢膜,多有菌毛普通平板呈M型菌落(易拉成絲)存在正常人體,目前為除大腸埃希菌以外最重要的條件致病菌。,變形桿菌G-桿菌,有多形性,
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