HIV初篩實驗室相關工作制度

HIV初篩實驗室工作制度1、本實驗操作人員必須經(jīng)省艾滋病初檢技術培訓學習合格后方可持證上崗。2、嚴格遵守樣本的采集、保存制度;樣品的運送處理制度;遵守實驗室操作、檢驗結(jié)果的報告處理和保密、實驗室污染物廢棄物以及工作人員防護消毒隔離制度。3、積極參加上級實驗室的業(yè)務培訓和技術考核。4、必須參加省臨檢中心的室間質(zhì)量評價工作。5、未盡事宜按科室實驗室按科室工作制度和相關管理條例執(zhí)行。HIV抗體檢測程序及其流程1、血液標本驗收合格后,用初篩試劑進行檢測,如呈陰性反應,則作HIV抗體陰性報告;2、初篩檢測結(jié)果呈陽性反應的標本,須進行重復檢測。復檢時用兩種不同的初篩檢測試劑復測;3、如兩種試劑復檢結(jié)果均呈陰性反應,則作HIV抗體陰性報告;如均呈陽性反應,或有一份陽性,該標本需送上級實驗室加以進一步證實。送檢時應將重新采集的該受檢者血液標本和原有血液標本一并送檢。4、檢測結(jié)果的判定和處理對HIV抗體陽性者應做好咨詢、保密和報告工作。對HIV抗體陰性者,如近期有高危行為如性亂史、吸毒史、受血史,或有急性流感樣癥狀等情況,為排除窗口期的可能,建議每3個月復查一次,連續(xù)2次。對HIV抗體可疑的對象要做好咨詢和隨訪工作。5、反饋與報告程序(一初篩檢測中發(fā)現(xiàn)HIV抗體陽性反應的標本,應盡快(城區(qū)一般要求在48小時內(nèi),農(nóng)村要求在96小時內(nèi)將血樣連同原始實驗資料(包括廠家批號、試劑種類、有效期,如ELISA實驗應附上陰性、陽性對照值,Cut off值及樣品OD值和送檢化驗單送衛(wèi)生行政部門指定的初篩中心實驗室,再轉(zhuǎn)送確認實驗室,或直接送至HIV抗體確認實驗室。送檢化驗單必須由初篩實驗室一名直接實驗操作人員和一名中級技術職稱以上的負責人員簽名。初篩實驗室不得向受檢者宣布初檢陽性反應結(jié)果;(二做好標本收集與檢測登記工作,每月5日按統(tǒng)一表格向衛(wèi)生行政部門指定的HIV抗體初篩中心實驗室報告檢測情況,如無HIV抗體中心實驗室,則直接向省級HIV抗體確認中心報告。HIV檢測安全制度(一實驗室工作人員要熟悉生物安全操作知識和消毒技術;(二不得在實驗室內(nèi)喝飲料、吸煙、吃食物和化妝打扮等;不得在實驗室內(nèi)會客;(三實驗室用品(包括工作服不得用于其他用途;不可將私人和無關的物品帶入實驗室;(四工作時,要戴手套、穿工作衣和隔離衣,操作時手套破損應立即丟棄、洗手并戴上新手套;(五不要用戴著手套的手觸摸暴露的皮膚、口唇、眼睛、耳朵和頭發(fā)等;(六盡量避免使用尖銳物品和器具;宜用不易破碎材料制品;禁止用口吸任何物質(zhì);(七工作結(jié)束后,要對工作臺面消毒,如用消毒液清洗后要干燥20分鐘以上;操作時有標本、檢測試劑外濺時應及時消毒;平時要保持環(huán)境整潔;(八工作完畢,脫去手套后洗手,再脫去工作衣,用肥皂和流動水洗手;(九遇有意外事故,應立即處理并分別以口頭和書面報告上級部門。如工作人員皮膚被刺傷,可以用流動水局部清洗或用刺激性較輕的含氯消毒劑浸泡皮膚創(chuàng)口;樣品或檢測試劑濺入眼內(nèi)立即用生理鹽水沖洗,濺入嘴內(nèi),先吐出殘留的液體后,用水反復漱口;(十遇有高危的意外事故發(fā)生,除進行局部處理外,同時應立即采取預防措施,包括對其隨訪、HIV檢測、休息并暫時離開原崗位3個月,按醫(yī)囑服用抗HIV藥物進行預防。HIV實驗室物品消毒處理制度(一血液標本置于合適容器內(nèi),加蓋蓋緊后運送,切勿污染盛器外部。如果盛器被污染,要用消毒液消毒。也可將血樣置于有蓋的塑料管內(nèi),外面套上塑料袋,封口,連同送檢單一并運送,有血液外溢時,立即用消毒液消毒;(二各種試劑和化學品均應貼有標簽,放置于合適的位置,實驗臺上不放置不必要的物品。任何測試用的樣品和試劑不宜置于桌面或架子的邊沿,以防滑落打破,污染環(huán)境。一旦污染,先在污染區(qū)外周圍倒入消毒液,逐漸向中心消毒處理。(三實驗室所有垃圾,包括用過的一次性手套和工作衣,置于專門污物袋內(nèi),經(jīng)焚燒或有效消毒劑處理后丟棄,污染的非一次性工作衣應先消毒后再洗滌;(四所有用過的實驗用品,尤其是血樣管和血液標本先在實驗室內(nèi)消毒,再移出清洗,待消毒后再用;(五所有尖銳物品應置于不宜刺破的容器內(nèi),消毒后用合適的方法處理;(六常用的消毒劑和消毒方法與病毒性肝炎消毒方法相同。HIV實驗室工作人員健康監(jiān)護制度(一實驗室工作人員從事工作前必須進行HIV抗體和乙肝、丙肝等肝炎病毒標記物的檢測;(二每半年進行一次HIV抗體的復檢,并保留血樣一年以上;(三遇有意外事故,接觸者應在接觸當時、接觸后6周、3個月、6個月及12個月各采血檢查一次;(四患有皮膚疾患,尤其有皮膚潰爛、破損情況要及時診治。HIV 實驗室操作技術要求 一、樣本的采集 （一）血液是最常見的樣品，包括血清、血漿和全血，有時用唾液或尿液作測試樣本。樣品采集應按試劑盒說明書要求采集。 （二）采血時一定要注意安全，采血用一次性注射器，謹慎操作，防止發(fā)生刺傷皮膚和造成外界污染。血樣如即時用，可存于普 通冰箱，如要長期保存，則置于一 200C 及以下。如用濾紙采樣，則手指或耳垂局部消毒嚴格按常規(guī)進行，在刺破皮膚后，迅速 把濾紙沾上，切勿讓血液滴落在其他物體表面造成污染。采血后要待血樣干燥后再包裝送檢。如要置于低溫，將濾紙放進塑料袋， 可以長時間保存。濾紙上的血量，一般直徑為 63 毫米的圓點濾紙血樣相當于 10 微升全血或 5 微升的血清。 二、樣本的運送 樣品從一個實驗室轉(zhuǎn)送到另外一個實驗室，必須是血清或血漿，除特殊需要外，一般不能用全血，且須置于帶有蓋帽的試管內(nèi)， 防止樣品流出，試管上應有明顯的標記，標明種類、姓名、地區(qū)、時間或原有的編號。將試管放入專門帶蓋的容器內(nèi)，容器的材 料要易于消毒處理，在所放試管周圍上下均墊有軟性物質(zhì)，以免碰碎，容器外標有 HIV 檢測專用字樣。如果路程較遠或者氣候炎 熱時，盛有樣本的容器應置于 40C 以下運送。送樣同時需附送驗單。如有特殊情況，對個別樣品進行復測，可以用特快專遞形式 投寄，但盛樣品的試管，必須包扎好，保證不會破碎、溢漏。如果為濾紙標本，置于塑料袋后再放入特快專遞投寄。 三、樣本的處理 （一）對從其他實驗室送來的樣品，注意檢查并注明其送檢單與標本記錄的符合、樣品管破損、溢漏情況。如有溢漏應立即將尚 留存的血樣移出，并對管壁和盛器消毒。要檢查并記錄樣品的質(zhì)量有無嚴重溶血、細菌污染、血脂過多以及黃疸等情況。如經(jīng)過 某些臨床治療可導致樣品自發(fā)熒光的，不能供熒光方法測試用。 （二）對實驗室自己采集的樣品，最好將血液先自然存放 1-2 時后，再用 3000rpm 離心 15 分鐘，吸出上清液備用，如在幾天內(nèi) 檢測可放在 28冰箱中，如要貯存，則置于-20的低溫冰箱內(nèi)。 四、樣本的加量和稀釋 嚴格按照每種試劑說明書規(guī)定加樣量和稀釋度操作，不能擅自更改，要做到準確地取樣、加樣和稀釋。加樣器刻度必須標化，包 括移液器、刻度吸管和機械吸液管，尤其移液器一定要高質(zhì)量的，要隨時測定其容量精確度。加樣要小心，不要使吸頭碰著了酶 標板（或細胞板）孔上的包被抗原或抗體層。一般均應先加入樣品稀釋液后再加入樣品。為保證加樣的準確，加入稀釋液、酶抗 體、底物等均應以多孔道加樣器為主，使用時要注意防止吸頭間的交叉污染。 五、血清制品的檢驗 目前市售的各類診斷試劑主要適合于人血清或血漿樣品，而血制品如免疫球蛋白、凝血因子 VIII 和 IX 等均為濃縮制品，檢測方 法與直接采集人血測定有別，要按照國家有關要求進行檢驗。 六、樣本測試時的其他條件 要嚴格按照各廠家試劑盒說明書操作，包括試劑加量、洗滌次數(shù)、保溫（溫育）反應時間、顯色時間、讀數(shù)時間、陰、陽性對照 狀態(tài)、儀器設備穩(wěn)定性等。如 ELISA 法（俗稱酶標法），必須用儀器測定，不能目測。測試時，必須按規(guī)定波長測試。要隨時掌 握儀器的正確性。 醫(yī)務人員職業(yè)暴露處理流程 1、血液、體液等濺灑于皮膚、黏膜表面應立即先用肥皂，再用清水、自來水或生