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HIV初篩實(shí)驗(yàn)室工作制度1、本實(shí)驗(yàn)操作人員必須經(jīng)省艾滋病初檢技術(shù)培訓(xùn)學(xué)習(xí)合格后方可持證上崗。2、嚴(yán)格遵守樣本的采集、保存制度;樣品的運(yùn)送處理制度;遵守實(shí)驗(yàn)室操作、檢驗(yàn)結(jié)果的報(bào)告處理和保密、實(shí)驗(yàn)室污染物廢棄物以及工作人員防護(hù)消毒隔離制度。3、積極參加上級(jí)實(shí)驗(yàn)室的業(yè)務(wù)培訓(xùn)和技術(shù)考核。4、必須參加省臨檢中心的室間質(zhì)量評(píng)價(jià)工作。5、未盡事宜按科室實(shí)驗(yàn)室按科室工作制度和相關(guān)管理?xiàng)l例執(zhí)行。HIV抗體檢測(cè)程序及其流程1、血液標(biāo)本驗(yàn)收合格后,用初篩試劑進(jìn)行檢測(cè),如呈陰性反應(yīng),則作HIV抗體陰性報(bào)告;2、初篩檢測(cè)結(jié)果呈陽性反應(yīng)的標(biāo)本,須進(jìn)行重復(fù)檢測(cè)。復(fù)檢時(shí)用兩種不同的初篩檢測(cè)試劑復(fù)測(cè);3、如兩種試劑復(fù)檢結(jié)果均呈陰性反應(yīng),則作HIV抗體陰性報(bào)告;如均呈陽性反應(yīng),或有一份陽性,該標(biāo)本需送上級(jí)實(shí)驗(yàn)室加以進(jìn)一步證實(shí)。送檢時(shí)應(yīng)將重新采集的該受檢者血液標(biāo)本和原有血液標(biāo)本一并送檢。4、檢測(cè)結(jié)果的判定和處理對(duì)HIV抗體陽性者應(yīng)做好咨詢、保密和報(bào)告工作。對(duì)HIV抗體陰性者,如近期有高危行為如性亂史、吸毒史、受血史,或有急性流感樣癥狀等情況,為排除窗口期的可能,建議每3個(gè)月復(fù)查一次,連續(xù)2次。對(duì)HIV抗體可疑的對(duì)象要做好咨詢和隨訪工作。5、反饋與報(bào)告程序(一初篩檢測(cè)中發(fā)現(xiàn)HIV抗體陽性反應(yīng)的標(biāo)本,應(yīng)盡快(城區(qū)一般要求在48小時(shí)內(nèi),農(nóng)村要求在96小時(shí)內(nèi)將血樣連同原始實(shí)驗(yàn)資料(包括廠家批號(hào)、試劑種類、有效期,如ELISA實(shí)驗(yàn)應(yīng)附上陰性、陽性對(duì)照值,Cut off值及樣品OD值和送檢化驗(yàn)單送衛(wèi)生行政部門指定的初篩中心實(shí)驗(yàn)室,再轉(zhuǎn)送確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室,或直接送至HIV抗體確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室。送檢化驗(yàn)單必須由初篩實(shí)驗(yàn)室一名直接實(shí)驗(yàn)操作人員和一名中級(jí)技術(shù)職稱以上的負(fù)責(zé)人員簽名。初篩實(shí)驗(yàn)室不得向受檢者宣布初檢陽性反應(yīng)結(jié)果;(二做好標(biāo)本收集與檢測(cè)登記工作,每月5日按統(tǒng)一表格向衛(wèi)生行政部門指定的HIV抗體初篩中心實(shí)驗(yàn)室報(bào)告檢測(cè)情況,如無HIV抗體中心實(shí)驗(yàn)室,則直接向省級(jí)HIV抗體確認(rèn)中心報(bào)告。HIV檢測(cè)安全制度(一實(shí)驗(yàn)室工作人員要熟悉生物安全操作知識(shí)和消毒技術(shù);(二不得在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)喝飲料、吸煙、吃食物和化妝打扮等;不得在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)會(huì)客;(三實(shí)驗(yàn)室用品(包括工作服不得用于其他用途;不可將私人和無關(guān)的物品帶入實(shí)驗(yàn)室;(四工作時(shí),要戴手套、穿工作衣和隔離衣,操作時(shí)手套破損應(yīng)立即丟棄、洗手并戴上新手套;(五不要用戴著手套的手觸摸暴露的皮膚、口唇、眼睛、耳朵和頭發(fā)等;(六盡量避免使用尖銳物品和器具;宜用不易破碎材料制品;禁止用口吸任何物質(zhì);(七工作結(jié)束后,要對(duì)工作臺(tái)面消毒,如用消毒液清洗后要干燥20分鐘以上;操作時(shí)有標(biāo)本、檢測(cè)試劑外濺時(shí)應(yīng)及時(shí)消毒;平時(shí)要保持環(huán)境整潔;(八工作完畢,脫去手套后洗手,再脫去工作衣,用肥皂和流動(dòng)水洗手;(九遇有意外事故,應(yīng)立即處理并分別以口頭和書面報(bào)告上級(jí)部門。如工作人員皮膚被刺傷,可以用流動(dòng)水局部清洗或用刺激性較輕的含氯消毒劑浸泡皮膚創(chuàng)口;樣品或檢測(cè)試劑濺入眼內(nèi)立即用生理鹽水沖洗,濺入嘴內(nèi),先吐出殘留的液體后,用水反復(fù)漱口;(十遇有高危的意外事故發(fā)生,除進(jìn)行局部處理外,同時(shí)應(yīng)立即采取預(yù)防措施,包括對(duì)其隨訪、HIV檢測(cè)、休息并暫時(shí)離開原崗位3個(gè)月,按醫(yī)囑服用抗HIV藥物進(jìn)行預(yù)防。HIV實(shí)驗(yàn)室物品消毒處理制度(一血液標(biāo)本置于合適容器內(nèi),加蓋蓋緊后運(yùn)送,切勿污染盛器外部。如果盛器被污染,要用消毒液消毒。也可將血樣置于有蓋的塑料管內(nèi),外面套上塑料袋,封口,連同送檢單一并運(yùn)送,有血液外溢時(shí),立即用消毒液消毒;(二各種試劑和化學(xué)品均應(yīng)貼有標(biāo)簽,放置于合適的位置,實(shí)驗(yàn)臺(tái)上不放置不必要的物品。任何測(cè)試用的樣品和試劑不宜置于桌面或架子的邊沿,以防滑落打破,污染環(huán)境。一旦污染,先在污染區(qū)外周圍倒入消毒液,逐漸向中心消毒處理。(三實(shí)驗(yàn)室所有垃圾,包括用過的一次性手套和工作衣,置于專門污物袋內(nèi),經(jīng)焚燒或有效消毒劑處理后丟棄,污染的非一次性工作衣應(yīng)先消毒后再洗滌;(四所有用過的實(shí)驗(yàn)用品,尤其是血樣管和血液標(biāo)本先在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)消毒,再移出清洗,待消毒后再用;(五所有尖銳物品應(yīng)置于不宜刺破的容器內(nèi),消毒后用合適的方法處理;(六常用的消毒劑和消毒方法與病毒性肝炎消毒方法相同。HIV實(shí)驗(yàn)室工作人員健康監(jiān)護(hù)制度(一實(shí)驗(yàn)室工作人員從事工作前必須進(jìn)行HIV抗體和乙肝、丙肝等肝炎病毒標(biāo)記物的檢測(cè);(二每半年進(jìn)行一次HIV抗體的復(fù)檢,并保留血樣一年以上;(三遇有意外事故,接觸者應(yīng)在接觸當(dāng)時(shí)、接觸后6周、3個(gè)月、6個(gè)月及12個(gè)月各采血檢查一次;(四患有皮膚疾患,尤其有皮膚潰爛、破損情況要及時(shí)診治。HIV 實(shí)驗(yàn)室操作技術(shù)要求 一、樣本的采集 (一)血液是最常見的樣品,包括血清、血漿和全血,有時(shí)用唾液或尿液作測(cè)試樣本。樣品采集應(yīng)按試劑盒說明書要求采集。 (二)采血時(shí)一定要注意安全,采血用一次性注射器,謹(jǐn)慎操作,防止發(fā)生刺傷皮膚和造成外界污染。血樣如即時(shí)用,可存于普 通冰箱,如要長(zhǎng)期保存,則置于一 200C 及以下。如用濾紙采樣,則手指或耳垂局部消毒嚴(yán)格按常規(guī)進(jìn)行,在刺破皮膚后,迅速 把濾紙沾上,切勿讓血液滴落在其他物體表面造成污染。采血后要待血樣干燥后再包裝送檢。如要置于低溫,將濾紙放進(jìn)塑料袋, 可以長(zhǎng)時(shí)間保存。濾紙上的血量,一般直徑為 63 毫米的圓點(diǎn)濾紙血樣相當(dāng)于 10 微升全血或 5 微升的血清。 二、樣本的運(yùn)送 樣品從一個(gè)實(shí)驗(yàn)室轉(zhuǎn)送到另外一個(gè)實(shí)驗(yàn)室,必須是血清或血漿,除特殊需要外,一般不能用全血,且須置于帶有蓋帽的試管內(nèi), 防止樣品流出,試管上應(yīng)有明顯的標(biāo)記,標(biāo)明種類、姓名、地區(qū)、時(shí)間或原有的編號(hào)。將試管放入專門帶蓋的容器內(nèi),容器的材 料要易于消毒處理,在所放試管周圍上下均墊有軟性物質(zhì),以免碰碎,容器外標(biāo)有 HIV 檢測(cè)專用字樣。如果路程較遠(yuǎn)或者氣候炎 熱時(shí),盛有樣本的容器應(yīng)置于 40C 以下運(yùn)送。送樣同時(shí)需附送驗(yàn)單。如有特殊情況,對(duì)個(gè)別樣品進(jìn)行復(fù)測(cè),可以用特快專遞形式 投寄,但盛樣品的試管,必須包扎好,保證不會(huì)破碎、溢漏。如果為濾紙標(biāo)本,置于塑料袋后再放入特快專遞投寄。 三、樣本的處理 (一)對(duì)從其他實(shí)驗(yàn)室送來的樣品,注意檢查并注明其送檢單與標(biāo)本記錄的符合、樣品管破損、溢漏情況。如有溢漏應(yīng)立即將尚 留存的血樣移出,并對(duì)管壁和盛器消毒。要檢查并記錄樣品的質(zhì)量有無嚴(yán)重溶血、細(xì)菌污染、血脂過多以及黃疸等情況。如經(jīng)過 某些臨床治療可導(dǎo)致樣品自發(fā)熒光的,不能供熒光方法測(cè)試用。 (二)對(duì)實(shí)驗(yàn)室自己采集的樣品,最好將血液先自然存放 1-2 時(shí)后,再用 3000rpm 離心 15 分鐘,吸出上清液備用,如在幾天內(nèi) 檢測(cè)可放在 28冰箱中,如要貯存,則置于-20的低溫冰箱內(nèi)。 四、樣本的加量和稀釋 嚴(yán)格按照每種試劑說明書規(guī)定加樣量和稀釋度操作,不能擅自更改,要做到準(zhǔn)確地取樣、加樣和稀釋。加樣器刻度必須標(biāo)化,包 括移液器、刻度吸管和機(jī)械吸液管,尤其移液器一定要高質(zhì)量的,要隨時(shí)測(cè)定其容量精確度。加樣要小心,不要使吸頭碰著了酶 標(biāo)板(或細(xì)胞板)孔上的包被抗原或抗體層。一般均應(yīng)先加入樣品稀釋液后再加入樣品。為保證加樣的準(zhǔn)確,加入稀釋液、酶抗 體、底物等均應(yīng)以多孔道加樣器為主,使用時(shí)要注意防止吸頭間的交叉污染。 五、血清制品的檢驗(yàn) 目前市售的各類診斷試劑主要適合于人血清或血漿樣品,而血制品如免疫球蛋白、凝血因子 VIII 和 IX 等均為濃縮制品,檢測(cè)方 法與直接采集人血測(cè)定有別,要按照國(guó)家有關(guān)要求進(jìn)行檢驗(yàn)。 六、樣本測(cè)試時(shí)的其他條件 要嚴(yán)格按照各廠家試劑盒說明書操作,包括試劑加量、洗滌次數(shù)、保溫(溫育)反應(yīng)時(shí)間、顯色時(shí)間、讀數(shù)時(shí)間、陰、陽性對(duì)照 狀態(tài)、儀器設(shè)備穩(wěn)定性等。如 ELISA 法(俗稱酶標(biāo)法),必須用儀器測(cè)定,不能目測(cè)。測(cè)試時(shí),必須按規(guī)定波長(zhǎng)測(cè)試。要隨時(shí)掌 握儀器的正確性。 醫(yī)務(wù)人員職業(yè)暴露處理流程 1、血液、體液等濺灑于皮膚、黏膜表面應(yīng)立即先用肥皂,再用清水、自來水或生
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