化學(xué)發(fā)光檢測

第一章 化學(xué)發(fā)光技術(shù)一、 免疫學(xué)檢測發(fā)展階段免疫學(xué)檢測主要是利用抗原和抗體的特異性反應(yīng)進行檢測的一種手段，由于其可以利用同位素、酶、化學(xué)發(fā)光物質(zhì)等對檢測信號進行放大和顯示，因此常被用于檢測蛋白質(zhì)、激素等微量物質(zhì)。我國免疫學(xué)的檢測基本歷經(jīng)了以下幾個過程，如圖1.1所示?；瘜W(xué)發(fā)光免疫檢測（CLIA）酶聯(lián)免疫檢測（ELISA）放射免疫檢測（RIA）20世紀 60年代 70年代 90年代 時間圖1.1免疫學(xué)檢測發(fā)展階段盡管免疫診斷在臨床診斷中占據(jù)著非常重要的地位，但是從我國臨床免疫診斷現(xiàn)狀來看，無論是臨床應(yīng)用方面，還是產(chǎn)業(yè)化角度，都處于相對比較落后的狀態(tài)，亟待改進。下表.就此做一比較：表1.1 中國免疫診斷現(xiàn)狀中國國際（歐美為主）放射免疫法（）興起于20世紀70年代，現(xiàn)仍普遍使用于縣級以上醫(yī)院；產(chǎn)品處于衰退期；廠商試劑與儀器共同開發(fā)，試劑基本系列化。興起于20世紀60年代，現(xiàn)已基本退出臨床應(yīng)用；產(chǎn)品生命周期已終結(jié)；廠商試劑和儀器共同開發(fā)，試劑基本系列化。酶聯(lián)免疫法（）興起于20世紀80年代，現(xiàn)普遍使用于各級臨床機構(gòu)，為我國臨床免疫診斷的基本方法；產(chǎn)品處于成熟期；廠商試劑與儀器共同開發(fā)，試劑尚未系列化。興起于20世紀70年代，現(xiàn)仍在臨床應(yīng)用；產(chǎn)品處于衰退期；廠商試劑與儀器共同開發(fā)，試劑基本系列化。化學(xué)發(fā)光免疫法（）導(dǎo)入于20世紀90年代，現(xiàn)個別較大醫(yī)院開展個別項目；產(chǎn)品處于導(dǎo)入期或成長期；無廠商開發(fā)生產(chǎn)，完全依賴進口。興起于20世紀80年代，現(xiàn)已被臨床普遍使用，成為臨床免疫診斷的支柱方法；產(chǎn)品處于成熟期；廠商試劑與儀器共同開發(fā)，儀器自動化程度高，試劑系列化狀態(tài)好。 由以上分析不難看出，化學(xué)發(fā)光免疫檢測是大勢所趨；而取代進口，發(fā)展我國的化學(xué)發(fā)光檢測事業(yè)，正是臨床檢驗界著手發(fā)展的方向。由此，我公司自1998年立項至今，致利于化學(xué)發(fā)光檢測方案設(shè)計，自行開發(fā)了具有國內(nèi)領(lǐng)先水平的化學(xué)發(fā)光底物，與國外知名檢測儀器生產(chǎn)商聯(lián)合開發(fā)了化學(xué)發(fā)光全自動、半自動檢測儀，并自行設(shè)計開發(fā)了化學(xué)發(fā)光管理軟件，而今形成了儀器、試劑、軟件全面配套，為我國的臨床檢驗界提供了一套完善的解決方案。二、 化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)【概述】本世紀70年代中期Arakawe首次報道用發(fā)光信號進行酶免疫分析，利用發(fā)光的化學(xué)反應(yīng)分析超微量物質(zhì)，特別是用于臨床免疫分析中檢驗超微量活性物質(zhì)。目前，這一技術(shù)已從實驗室的稀有技術(shù)過渡到臨床醫(yī)學(xué)的常規(guī)檢測手段?；瘜W(xué)發(fā)光免疫分析（Chemiluminescence Immunoassay，CLIA）是將化學(xué)發(fā)光或生物發(fā)光體系與免疫反應(yīng)相結(jié)合，用于檢測微量抗原或抗體的一種新型標記免疫測定技術(shù)。其檢測原理與放射免疫（RIA）和酶免疫（EIA）相似，不同這處是以發(fā)光物質(zhì)代替放射性核素或酶作為標記物，并藉助其自身的發(fā)光強度直接進行測定。化學(xué)發(fā)光免疫分析既具有放射免疫的高靈敏度，又具有酶聯(lián)免疫的操作簡便、快速的特點，易于標準化操作。且測試中不使用有害的試劑，試劑保持期長，應(yīng)用于生物學(xué)、醫(yī)學(xué)研究和臨床實驗診斷工作，成為非放射性免疫分析法中最有前途的方法之一?！驹怼吭诨瘜W(xué)發(fā)光免疫分析中包含兩個部分，即免疫反應(yīng)系統(tǒng)和化學(xué)發(fā)光系統(tǒng)。免疫反應(yīng)系統(tǒng)，其基本原理同酶聯(lián)免疫技術(shù)（ELISA），常采用雙抗體夾心法、競爭法、間接法等反應(yīng)模式，如圖1.2，1.3，1.4所示。如圖1.2雙抗體夾心法反應(yīng)原理示意圖化學(xué)發(fā)光系統(tǒng)的原理在于免疫反應(yīng)中的酶作用于發(fā)光底物。發(fā)光底物在酶的作用下，底物發(fā)生化學(xué)反應(yīng)并釋放出大量的能量，產(chǎn)生激發(fā)態(tài)的中間體。這種激發(fā)態(tài)中間體，當其回到穩(wěn)定的基態(tài)時，可同時發(fā)射出光子。利用發(fā)光信號測量儀器即可測量光量子產(chǎn)額，該光量子產(chǎn)額與樣品中的待測物質(zhì)的量成正比。由此可以建立標準曲線并計算樣品中待測物質(zhì)的含量。具體說來，我們采用的是辣根過氧化物酶（HRP）催化魯米諾（Luminol）底物發(fā)光系統(tǒng)，如圖1.5所示。我們的核心技術(shù)之一在于自行研制開發(fā)的發(fā)光底物系統(tǒng)，該系統(tǒng)與國外同類產(chǎn)品的比較表明，不僅主要性能指標達到了國外產(chǎn)品水平，并且由于自行生產(chǎn)，因此大大降低了發(fā)光底物的成本。在該底物系統(tǒng)中，我們采用特殊的復(fù)合型增強劑，發(fā)光快，強度高，發(fā)光平臺期長，可達3060分鐘，因此完全可以滿足臨床檢測的需要。其發(fā)光平臺期測定結(jié)果如圖1.6所示（1）與放免（RIA）產(chǎn)品比較 與放射免疫試劑（RIA）比較，化學(xué)發(fā)光避免了放射性核素的污染以及對操作人員的傷害，大大縮短了反應(yīng)時間，同時兼具高靈敏度的優(yōu)勢。 （2）與酶免（ELISA）產(chǎn)品比較 靈敏度與可測范圍遠遠高于酶免產(chǎn)品，兼具ELISA法簡便的操作方法與較短的反應(yīng)時間。 （3）與進口全自動發(fā)光比較試劑成本遠遠低于進口全自動發(fā)光試劑，為開放體系，也可適用其他發(fā)光檢測儀器檢測?！緫?yīng)用】發(fā)光免疫分析作為一種非放射性免疫標記技術(shù)，除了具有靈敏、特異、標記物穩(wěn)定等特點外，其檢測程序亦簡便、快速，只需微量標本，近年來臨床上已應(yīng)用于檢測各種激素、腫瘤標志物、藥物及其他微量生物活性物質(zhì)，亦可用于細菌和病毒感染的快速診斷。三、 技術(shù)優(yōu)勢【技術(shù)路線的確定】為適應(yīng)中國臨床檢驗的實際需要，我公司確定了以下的技術(shù)路線，如下表1.7所示：【技術(shù)鑒定】（1） 化學(xué)發(fā)光試劑的現(xiàn)狀 已通過河北省科委鑒定： 國外進口發(fā)光劑對比結(jié)果：符合率為98%，部分技術(shù)指標超過進口發(fā)光劑。 甲胎蛋白（AFP）化學(xué)發(fā)光定量檢測試劑盒：已通過中國藥品生物制品檢定所檢定，各項指標優(yōu)異。 癌抗原125（CA125）化學(xué)發(fā)光定量檢測試劑盒：已通過中國藥品生物制品檢定所檢定，各項指標優(yōu)異。 催乳素（PRL）化學(xué)發(fā)光定量檢測試劑盒：已通過中國藥品生物制品檢定所檢定，各項指標優(yōu)異。（2） 化學(xué)發(fā)光儀及軟件 化學(xué)發(fā)光分析管理軟件已開發(fā)完成，可實現(xiàn)程序測量、快速測量、單板多項、兩點定標、自動打印化驗單、工作量統(tǒng)計等功能。 表1.7技術(shù)路線思路確定技術(shù)路線思路標準微孔板為反應(yīng)載體操作簡便、易于標準化標記辣根過氧化物酶應(yīng)用廣泛、標記技術(shù)穩(wěn)定魯米諾底物系統(tǒng)針對辣根過氧化物酶，發(fā)光強度大，擴展性強全自動、半自動發(fā)光儀適合不同層次用戶的需要中文操作軟件方便國內(nèi)臨床免疫學(xué)檢測實驗室四、 產(chǎn)品介紹【系列試劑盒】現(xiàn)有試劑盒共有5個系列，20余種產(chǎn)品。（1） 腫瘤標志物系列：甲胎蛋白（AFP）、癌胚抗原（CEA）、血清鐵蛋白（SF）、2微球蛋白（2-MG）、人絨毛膜促性腺激素（HCG）、前列腺特異性抗原（PSA）、游離前列腺特異性抗原（f-PSA）、癌抗原125（CA125）、癌抗原15-3（CA15-3）、癌抗原19-9（CA19-9）（2） 甲狀腺功能系列：甲狀腺素（T4）、游離甲狀腺素（FT4）、三碘甲腺原氨酸（T3）、游離三碘甲腺原氨酸（FT3）、促甲狀腺素（TSH）（3） 生殖內(nèi)分泌激素系列：催乳素（PRL）、黃體生成素（LH）、卵泡刺激激素（FSH）、孕酮（P）、睪酮（T）、雌二醇（E2）（4） 糖尿病系列：胰島素、血清C肽（5） 其他檢測系列：皮質(zhì)醇、總lgE、生長激素（GH）【試劑盒評價標準】從臨床應(yīng)用角度考核檢驗試劑的可靠性，是以其能否區(qū)分健康與疾病的能力作為依據(jù)的。目前還很難找到100%可靠的試驗，任何試驗都會出現(xiàn)假陰性或假陽性。以下指標為評價一個試劑盒的常用指標，不同的試劑盒將根據(jù)不同的標準進行評價。（1） 準確性準確性是指測定所得值與真值的一致性。（2） 精密性精密度是指對同一份樣品重復(fù)測定，每次測定結(jié)果和均值的接近程度。（3） 靈敏度靈敏度是指某種試驗檢出極低免疫物質(zhì)的能力。（4） 特異性特異性是指以無病者試驗，其陰性的百分率。（5） 穩(wěn)定性是指試劑盒在有效期內(nèi)保持穩(wěn)定的程度?！驹噭┖胁僮髯⒁馐马棥浚?） 發(fā)光反應(yīng)最適溫度在2528，為保證試驗測定的準確性，應(yīng)嚴格控制實驗室溫度在1825。（2） 發(fā)光反應(yīng)靈敏度很高，因此需要嚴格按照說明書要求，控制每步反應(yīng)時間，操作應(yīng)緊湊。（3） 處理試劑和樣品時需戴一次性手套，操作后應(yīng)徹底洗手。（4） 所有標本應(yīng)視為潛在的傳染性物質(zhì)，廢棄處理時，請按照當?shù)卣陀嘘P(guān)國家規(guī)定進行。（5） 操作前仔細閱讀使用說明書，不同批號的試劑不得混用。（6） 包被條打開后，應(yīng)將剩余包被條用密封保存，以免受潮。（7） 加樣頭不可混用，以免交叉感染。（8） 為避免邊緣效應(yīng)，建議溫育過程中將微孔板用封膜覆蓋。（9） 洗滌要徹底，洗液應(yīng)注滿每孔，避免產(chǎn)生氣泡。每次洗滌均應(yīng)甩干孔內(nèi)液體。但不可用水過猛，最后應(yīng)將孔內(nèi)液體拍干。（10） 建議各實驗室根據(jù)自己實際條件建立臨界值范圍。本試劑盒僅作其他診斷方法的輔助手段之一，供醫(yī)生參考。（11） 試劑請在有效期內(nèi)使用。第二章 腫瘤標志物檢測一、腫瘤標志物簡介近年來，腫瘤已成為危害人類生命健康的常見病、多發(fā)病。腫瘤根據(jù)來源可分為瘤和癌，按照性質(zhì)可分為良性和惡性。腫瘤的發(fā)生直接影響機體的代謝，如改變糖的代謝途徑，改變蛋白質(zhì)與核酸的合成，改變代謝過程中關(guān)鍵酶的活性，以及引起激素代謝異常等。以蛋白質(zhì)為例，腫瘤組織中的蛋白質(zhì)含量要比正常組織高。作為可用于腫瘤標志檢測蛋白質(zhì)來講，屬于腫瘤組織自身增值中合成的標志蛋白質(zhì)或酶均見增高，而屬于腫瘤細胞分化標志的蛋白質(zhì)或酶，其合成往往成減低趨勢。并且通過研究發(fā)現(xiàn)，在哺乳類動物胚胎期所具有蛋白質(zhì)，隨著年齡增長其結(jié)構(gòu)有所改變，當人體出生后或隨著年齡變化，某些基因被關(guān)閉，不再表達或很少表達該基因的活性，當癌變時，某些細胞退化成為分化較差的、近似于胚胎細胞時，使得某些基因失活，某些基因被激活，重新合成一些胚胎蛋白，如甲胎蛋白、癌胚抗原等，這一現(xiàn)象稱為返祖現(xiàn)象。這即為腫瘤標志物的檢測建立了科學(xué)基礎(chǔ)。所謂腫瘤標志物（tumormarker,TM），是指由腫瘤組織產(chǎn)生的存在于腫瘤組織本身，或分泌至血液或其他體液，或因腫瘤組織刺激，由宿主細胞產(chǎn)生而含量明顯高于正常參考值的一類物質(zhì)。腫瘤標志物的檢測，對于腫瘤的早期發(fā)現(xiàn)，病情的發(fā)展、治療后的評價、監(jiān)測復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移等方面都具有一定的應(yīng)用價值，可以為患者爭取治療時間，延長患者生命。因而近年來，世界許多醫(yī)學(xué)科學(xué)工作者致力于對腫瘤細胞生長各環(huán)節(jié)、代謝與調(diào)控的基本規(guī)律和變化研究，尋求新的特異性或相對特異性的腫瘤標志物。二、瘤標志物的分類腫瘤胚胎性抗原標志物該類蛋白質(zhì)即前文所提到的因返祖現(xiàn)象的出現(xiàn)，而產(chǎn)生的腫瘤標志物。雖然該類標志物與腫瘤組織不一定具有特定的相關(guān)性，但與腫瘤的發(fā)生存在著內(nèi)在的聯(lián)系。例：甲胎蛋白（alpha-fetoprotein, AFP）癌胚抗原（carcinoembryonic antigen, CEA）糖類抗原標志物該類物質(zhì)是腫瘤細胞表面的抗原物質(zhì)，或腫瘤細胞所分泌的物質(zhì)。這類標志物的出現(xiàn)為臨床腫瘤的診斷帶來方便，但其命名無規(guī)律可言。有些是腫瘤細胞株編號，有些是抗體物質(zhì)的編號。該類標志物又可分為兩類1糖類高分子粘蛋白抗原例：癌抗原CA125癌抗原CA15-32血型類抗原例：癌抗原CA19-9癌抗原CA50酶類標志物酶及同工酶是最早出現(xiàn)和使用的腫瘤標志物之一。腫瘤狀態(tài)時，機體的酶活力就會發(fā)生較大變化，這主要是因為腫瘤細胞或組織本身誘導(dǎo)其他細胞和組織產(chǎn)生異常含量的酶；腫瘤細胞的代謝旺盛，細胞通透性增加，使得腫瘤細胞內(nèi)的酶進入血液，或因腫瘤使得某些器官功能不良，導(dǎo)致各種酶的滅活和排泄障礙。例：前列腺特異性抗原（prostate specific antigen, PSA）神經(jīng)原特異性烯醇化酶（neuron-specificenolase, NSE）激素類標志物當具有分泌激素功能的細胞癌變時，就會使分泌的激素量發(fā)生異常。這種現(xiàn)象被稱為正位激素異常。而正常情況下不能生成激素的那些細胞，轉(zhuǎn)化為腫瘤細胞后所產(chǎn)生的激素，或者是那些能產(chǎn)生出激素的細胞癌變后，分泌出的是其他激素細胞所產(chǎn)生的激素，這種現(xiàn)象被稱為異位激素異常。衡量異位激素異常的條件是：有非內(nèi)分泌腺細胞合成的激素；某種內(nèi)分泌細胞卻分泌其他分泌腺細胞的激素；腫瘤患者同時伴有分泌異常綜合征；這類腫瘤細胞在體外培養(yǎng)時也能產(chǎn)生激素；腫瘤切除或經(jīng)治療腫瘤消退時，此種激素含量下降，內(nèi)分泌綜合征的癥狀改善。例：人絨毛膜促性腺激素（human chorionic gonagotropin,HCG）人胎盤催乳素（PRL）其它蛋白質(zhì)類標志物另外還有一些早期發(fā)現(xiàn)的蛋白類腫瘤標志物，特異性稍差，但檢測方法相對比較容易，因而常作為常規(guī)檢測項目，用以腫瘤普查。例：2-微球蛋白（2-microglobulin,2-MG）血清鐵蛋白（Serum Ferritin,SF）三、肝癌及甲胎蛋白（AFP）原發(fā)性肝癌是指由肝細胞或肝內(nèi)膽管細胞癌變所形成的惡性腫瘤，是我國常見的惡性腫瘤。近年來國內(nèi)外原發(fā)性肝癌的發(fā)病率，均有不斷增高的趨勢。從世界范圍來看，各地區(qū)發(fā)病有較大差別，歐美國家發(fā)病率較低（1.93.4人/10萬人），亞非國家發(fā)病率較高（4.698.2人/10萬人）。根據(jù)我國一些地區(qū)的普查，我國的發(fā)病率為14.553人/10萬人,可見我國亦屬原發(fā)性肝癌的高發(fā)區(qū)。男性肝癌的死亡率僅次于胃癌和食管癌，占各種惡性腫瘤的第三位，女性則僅次于胃癌、宮頸癌和食管癌，為第四位。肝癌的發(fā)病率呈一定的地區(qū)分布，沿海高于內(nèi)地，東南和東北高于西北、華北和西南部，沿海島嶼和江河?？谟指哂谘睾Ｆ渌貐^(qū)。肝癌多見于男性，男女發(fā)病之比為25:1，年齡大多為4049歲。越是肝癌高發(fā)區(qū)，這種性別差異就越明顯，發(fā)病年齡也越早。原發(fā)性肝癌起病隱匿，早期癥狀不明顯，一旦出現(xiàn)臨床病狀和體征，診斷多屬晚期，難以治療。因此臨床上迫切需要一種能夠早期診斷原發(fā)性肝癌的檢查方法。1956年Bergstrand和Czar在人胎兒血清中發(fā)現(xiàn)一種胚胎專一性甲種球蛋白，以后證實為甲胎蛋白（AFP）；1963年蘇聯(lián)GlAbelev首先在移植肝癌細胞的小鼠血清中發(fā)現(xiàn)了甲胎蛋白，并發(fā)現(xiàn)甲胎蛋白主要由胎肝合成；1964年Tatarinov證明肝癌病人血清中也存在AFP；其后Uriel 等進一步證實AFP在原發(fā)性肝癌診斷中的價值。1970年后，通過廣泛的臨床應(yīng)用，證實AFP是診斷肝癌的可靠指標之一，從而使肝癌的診斷獲得重大突破。大量研究結(jié)果表明，原發(fā)性肝癌者血清AFP含量90%以上超過500ng/ml,最高可達每毫升數(shù)毫克，一般正常人血清AFP含量都在20ng/ml以下。世界各國已先后將AFP檢查作為早期診斷原發(fā)性肝癌的有效方法用于臨床。我國在十一屆國際肝瘤會議上報告了49430人AFP普查工作，初步肯定了AFP普查對原發(fā)性肝癌具有早期診斷意義。通過普查在臨床上發(fā)現(xiàn)了許多無癥狀、無體征的“小肝癌”，對早期治療、提高患者的生存率起到了十分重要的作用。AFP測定的臨床意義：1 原發(fā)性肝癌的診斷檢測血清AFP含量是診斷原發(fā)性肝癌的重要手段之一。由于方法學(xué)的不斷改進，使原發(fā)性肝癌的陽性檢出率達到了90%以上。正常成人血清AFP含量各家報告不一致?？赡芘c測定方法、標準品等不同有關(guān)。中國肝癌研究協(xié)會報導(dǎo)正常人血清AFP20ng/ml。而原發(fā)性肝癌患者血清AFP多數(shù)在500ng/ml左右。目前國內(nèi)多采用1977年全國肝癌防治協(xié)作會議擬定的單項AFP診斷肝癌的標準：定量500ng/ml,持續(xù)一個月以上，并能排除妊娠，活動性肝病，生殖腺胚胎性腫瘤等。通過觀察血清AFP的動態(tài)變化可了解患者病情進展狀態(tài)，因為血清AFP升高常在患者癥狀和體征出現(xiàn)數(shù)月之久之前，故AFP檢測對原發(fā)性肝癌具有早期診斷價值。Kwata等檢測一例肝癌患者血清AFP僅31ng/ml,一年后即達10000ng/ml。Purres報導(dǎo)一例血清AFP為300ng/ml的患者，經(jīng)尸檢證實其肝癌結(jié)節(jié)的直徑僅0.5 cm。上海19711976年普查196萬人，發(fā)現(xiàn)300例肝癌，其中134例為無明顯肝癌癥狀和體征的早期病人。普查發(fā)現(xiàn)的臨床前期病人，經(jīng)手術(shù)證實81.6%為5cm的小肝癌。以上的結(jié)果提示：AFP檢測用于普查可早期發(fā)現(xiàn)原發(fā)性肝癌。此外檢測AFP還可作為治療效果的評價指標。2 急慢性肝炎和肝硬化的鑒別診斷急慢性肝炎、肝硬化患者血清中可檢出AFP一般僅為50200ng/ml，少數(shù)病人可暫時升高到400ng/ml以上。但急性肝炎患者隨著病情好轉(zhuǎn)，常在短時間內(nèi)下降至正常水平，此即AFP“一過性升高”。慢性肝病和肝硬化可呈下降或持續(xù)低水平，肝癌則呈逐漸上升趨勢。由于肝硬性患者有轉(zhuǎn)化為肝癌的可能，故在AFP原來正常的肝硬化病人中，出現(xiàn)AFP持續(xù)升高應(yīng)考慮癌變的可能。據(jù)文獻報告，我國某些地區(qū)肝硬化病例中肝癌發(fā)生率可高達到32.1%。在臨床工作中，應(yīng)進行多項動態(tài)測定才能與肝癌進行鑒別。3 先天性胎兒畸形診斷胎兒AFP可有少量通過胎盤屏障進行母體，因此孕婦血清AFP可升高，一般在500ng/ml以下，產(chǎn)后20天內(nèi)降至正常人水平。在無腦兒脊柱裂畸形妊娠時，孕婦血清AFP異常升高，高者可達800ng/ml以上。近年來，羊水中AFP檢測的意義又引起人們的注意，如胎兒為無腦兒、開放性脊柱裂時，羊水中甲胎蛋白含量可顯著增加。因此，羊水中甲胎蛋白的測定已成為開放性神經(jīng)管畸形的特異診斷方法。惡性畸胎瘤的診斷一些胚胎性腫瘤如睪丸和卵巢的惡性畸胎瘤細胞也可合成AFP，所以惡性畸胎瘤患者血清中可出現(xiàn)較高含量的AFP，所以惡性畸胎瘤患者血清中可出現(xiàn)較高含量的AFP，臨床上應(yīng)注意根據(jù)患者的癥狀、體征等進行鑒別。四、前列腺癌及其腫瘤標志物前列腺癌的發(fā)病率在全球范圍內(nèi)呈上升趨勢。據(jù)美國統(tǒng)計約占男性癌腫的36%，以及男性癌腫相關(guān)死亡率的13%。在歐美國家前列腺癌是發(fā)病率最高的惡性腫瘤，死亡率僅次于肺癌位于男性腫瘤的第二位。在我國，隨著人口的老齡化、膳食結(jié)構(gòu)的改變和診斷技術(shù)的提高，前列腺癌的發(fā)病率和死亡率也在迅速增長。1992年，美國白人前列腺癌的發(fā)病率為 404.5/10萬男性人口，黑人可達477.2/10萬男性人口。我國前列腺發(fā)病率約為3.4/10萬男性人口，遠低于西方國家，但國人良性前列腺增生（BPH）手術(shù)發(fā)現(xiàn)的偶發(fā)癌和尸檢前列腺標本的潛伏癌約為歐美一半左右。由此推斷中國人前列腺癌從組織學(xué)發(fā)展到臨床要比歐美人需要更長的時間，而前列腺癌的早期診斷是決定能否進行根治性治療的關(guān)鍵。根據(jù)Stamey前列腺癌臨床分期標準，可將前列腺癌分為4期。A期：直腸指檢不能觸及前列腺癌結(jié)節(jié)；B 期：可觸及節(jié)結(jié)但局限在前列腺內(nèi)；C期：腫瘤侵犯周圍組織；D期：前列腺癌有遠處轉(zhuǎn)移。其中，A、B期為臨床早期，而前列腺癌根治術(shù)也只限于A、B期的腫瘤。前列腺癌為老年性疾病，50歲以前很少發(fā)生。前列腺癌患者的表現(xiàn)變化多端。其自然發(fā)展規(guī)律無法預(yù)測。多數(shù)前列腺癌發(fā)生在腺體周邊，遠離尿道，故早期患者很少出現(xiàn)癥狀。其診斷主要通過直腸指檢（DRE）、血清PSA檢測或直腸B超（TRUS）針刺活檢確定診斷。自1979年Wang等首先從前列腺組織內(nèi)分離和提純出前列腺特異性抗原（prostatic specific antigen，PSA）以來，PSA在臨床上得到了廣泛的研究和應(yīng)用。PSA是由人前列腺上皮細胞合成并分泌至精漿中的一種糖蛋白，分子量為3300034000道爾頓。許多體外試驗表明，PSA具有糜蛋白酶樣活性，其本質(zhì)是一種絲氨酸蛋白酶，能使精液的凝塊水解，功能與男性性生育力有關(guān)。PSA主要存在于前列腺組織中，女性體內(nèi)不存在，當發(fā)生前列腺癌時，PSA會大量釋放進入血液，因此測定血PSA對前列腺癌的診斷有重要價值。當血清PSA10ng/ml時，應(yīng)高度懷疑前列腺癌；而PSA410ng/ml時，則為灰色區(qū)。PSA測定可使前列腺癌的診斷提前4年，在用PSA進行篩選的人群中，通過活檢發(fā)現(xiàn)癌的機會，PSA 4ng/ml者為1/50；410ng/ml者為1/5；10ng/ml者為1/3。近年來采用以檢測血清PSA為基礎(chǔ)，結(jié)合DRE、直腸B超（TRUS）、針刺活檢來診斷前列腺癌，其檢出率比未用PSA前提高了70%，對局限在前列腺內(nèi)的早期前列腺癌提高了一倍。因此建議50歲以上的男性，有條件時應(yīng)每年作一次直腸指檢（DRE）及血清PSA檢查。但是值得注意的是，血清PSA濃度可受多種因素的影響，特別是PSA的升高和前列腺的創(chuàng)傷有關(guān)。常規(guī)的直腸指檢、前列腺按摩、前列腺活檢、膀胱鏡操作、留置導(dǎo)尿都可以使PSA明顯升高，故血清PSA測定應(yīng)在前列腺操作前或操作后至少一周才抽血，前列腺活檢后則需等待更長的時間。PSA對前列腺癌組織有特異性，但對前列腺癌并無特異性，各種良性前列腺病變?nèi)鏐PH也可表現(xiàn)為PSA增高。為了將前列腺癌和前列腺良性病變區(qū)別開來，近年來在此基礎(chǔ)上產(chǎn)生了以下指標，特別是當血清PSA為410ng/ml時，對前列腺癌的診斷有較大幫助。血清游離PSA（f-PSA）與總PSA的比值（fPSA/tPSA） 1995年McCrmack發(fā)現(xiàn)正常fPSA僅占tPSA的10%20%，若fPSA/tPSA25%，前列腺癌的可能性極?。?0%當fPSA/tPSA10%時，則前列腺癌的可能性極大（80%），必須作前列腺活檢以確診。前列腺特異性抗原速率（PSA velocity,PSAV）回顧性研究表明，連續(xù)觀察血清PSA濃度的變化，前列腺癌組織PSA速率顯著高于良性前列腺增生組和正常人組，正常值上限為每年 0.75ng/ml。這樣，即使在兩次檢測中PSA的濃度均在正常范圍，但根據(jù)PSA的速率變化，可進一步檢查發(fā)現(xiàn)早期前列腺癌。大量的篩選資料證明，如果PSA速率超過每年0.75ng/ml，則可發(fā)現(xiàn)47%的患者患前列腺癌。五、卵巢癌及癌抗原CA125據(jù)統(tǒng)計，每年都約有20，000名婦女被診斷為新的卵巢癌病人。每年死于卵巢癌的婦女超過12，000人。卵巢癌是僅次于宮頸癌、宮體癌的第三位婦科腫瘤，居女性惡性腫瘤的第六位，但其死亡率卻明顯高于宮頸癌和宮體癌，是惡性程度最高的婦科癌癥，且由于大多數(shù)卵巢癌均發(fā)現(xiàn)于晚期，故其五年生存率僅為20%30%。世界上卵巢癌發(fā)病率最高的是瑞典（21/10萬）。上海1988年統(tǒng)計，卵巢惡性腫瘤發(fā)病率為5.37/10萬。卵巢癌的高發(fā)年齡在4070歲。卵巢癌的組織病理類型復(fù)雜，一般而言，卵巢實性腫瘤多屬惡性，而囊性腫瘤多屬良性。1981年，Bast等從人卵巢漿液囊胞腺癌抗原可被單克隆抗體OC125識別，因而被稱為CA125，是一種卵巢癌相關(guān)抗原。為一種糖蛋白，MW大于200000。CA125是研究最多的卵巢癌標記物，在早期篩查、診斷、治療及預(yù)后的應(yīng)用研究均有報道。在早期篩查方面，雖然血清CA125在、期卵巢癌的敏感性只有60%左右，仍被認為是一項經(jīng)濟、方便的早期檢查手段。有研究表明，還未被診斷為卵巢癌者血清中即可檢測到CA125升高，比臨床診斷提前至少1年的時間。在一項用挪威的血清庫進行的更大規(guī)模的研究中，發(fā)現(xiàn)CA125升高早在臨床檢查前18個月即可出現(xiàn)。更早的CA125變化可出現(xiàn)在臨床確診前5年，那時即有25%的病人高于30U/ml，同年齡段的對照組只有7%的升高。這表明通過檢測血清CA125，上皮性卵巢癌能被提前相當一段時間發(fā)現(xiàn)。CA125在早期篩查方面的敏感性低于陰道超聲檢查（TVU），連續(xù)檢測CA125或與陰道超聲（TVU）聯(lián)合應(yīng)用可提高診斷的特異性和敏感性。在一個5500人的健康女性人群中，175人被查到CA125升高，連同另外175個健康對照隨訪者，每三個月做一次CA125，每半年做一次陰道超聲和盆腔檢查。用這種方式查到6個病人，其中4人是早期。在連續(xù)檢測中，CA125的初始濃度和上升斜率應(yīng)考慮在內(nèi)，以鑒別腫瘤是良性生長還是惡性生長。在一次8688份血清樣品的回顧性研究中，發(fā)現(xiàn)用這種方式來計算卵巢癌的危險性，其敏感性83%，特異性99.1%，陽性預(yù)見率16%，認為這種方式是篩查早期卵巢癌的較好技術(shù)。CA125用于卵巢癌篩查假陽性主要出現(xiàn)在妊娠、月經(jīng)期及婦科炎癥等情況。在妊娠頭3個月和月經(jīng)期CA125假陽性分別可達57%和16%。也有認為CA125與月經(jīng)周期無關(guān)，但子宮內(nèi)膜炎患者CA125升高。CA125的升高與臨床分期及病理類型相關(guān)，漿液性卵巢上皮癌CA125陽性率89%，粘液性癌16%，卵巢內(nèi)胚竇瘤CA125不升高。、期卵巢癌CA125的陽性率在60%左右，、期患者陽性率在85%以上，甚至接近100%。卵巢癌經(jīng)過手術(shù)治療或綜合治療后，因腫瘤負荷的減少，腫瘤標志物的水平亦有明顯變化。通過連續(xù)檢測腫瘤標志物的變化，可對治療效果進行評價。CA125在評價療效方面很有價值。Crombach等報道CA125水平的變化與治療后病情變化的符合率達89%。Hilila報道治療后病情進展者中88%升高，在病情好轉(zhuǎn)者中87%降低，總符合率88%。CA125治療后的下降幅度和下降后的穩(wěn)定期長短是評價治療效果的良好指標。對治療后隨訪的患者，CA125是較佳的復(fù)查指標，其變化比客觀證據(jù)早16個月，但二次手術(shù)探查中CA125的陽性率僅有35%40%，復(fù)發(fā)灶直徑大于2cm者陽性率較高。但有臨床表現(xiàn)的復(fù)發(fā)患者CA125的陽性率可達90%以上。連續(xù)動態(tài)測定可以提高在復(fù)發(fā)診斷方面的陽性率，發(fā)現(xiàn)CA125升高應(yīng)考慮復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移，CA125升高的斜度和幅度可預(yù)示局部復(fù)發(fā)或是遠處轉(zhuǎn)移。在無癥狀的絕經(jīng)后婦女中CA125水平升高也是一個重要的危險因素。Jeyarajah等隨訪了從22000名絕經(jīng)后婦女中篩選出的血清CA125高于30U/ml的女性771人，另外隨機選擇了同等數(shù)量的血清CA125低于30U/ml女性一起隨訪1614+897天，結(jié)果共有84人死亡，其中CA125升高組占62人，而CA125正常者僅22人，血清CA125升高者死亡危險性顯著高于正常者。六、乳腺癌及癌抗原CA15-3乳腺癌的發(fā)病率居常見癌癥的第三位，是婦女中最常見的惡性腫瘤，在我國位于婦女惡性腫瘤的第二位。乳腺癌的發(fā)病率在世界各個國家和地區(qū)判別很大，北美、北歐最高，亞洲、非洲最低，南歐及拉丁美洲居中。我國的津、京、滬及沿海城市為高發(fā)地區(qū)，上海最高。乳腺癌好發(fā)于女性，發(fā)病率是男性的100倍。30歲后，發(fā)病逐年增多，7075歲達高峰。乳腺癌常在確診時已經(jīng)有轉(zhuǎn)移或在治療后發(fā)生轉(zhuǎn)移，而腫瘤細胞的轉(zhuǎn)移是引起患者死亡的主要原因之一。因此乳腺癌從發(fā)病開始就是一種全身性疾病，在體內(nèi)可能隱藏著一些微小轉(zhuǎn)移灶。手術(shù)、放化療及內(nèi)分泌治療有助于控制乳腺癌的發(fā)展。早期檢測乳腺癌轉(zhuǎn)移和治療后的復(fù)發(fā)對控制乳腺癌的發(fā)展，改善患者的生存質(zhì)量，養(yǎng)活轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)和死亡率有重要的意義。1984年，Hikens等人及Kufe等人分別用人乳脂球膜上分離的糖蛋白MAM-16和肝轉(zhuǎn)移的乳腺癌細胞免疫小鼠，制成針對相應(yīng)抗原的單克隆抗體：115-D8和DF-3。這兩株抗體所識別的抗原是上皮細胞上的一種粘蛋白MUC-1的唾液酸糖抗原，該抗原被命名為CA15-3。這兩株抗體分別與CA15-3抗原上的兩個主要決定簇相結(jié)合。CA15-3分子結(jié)構(gòu)還不清楚。該種糖蛋白含有脫輔基蛋白一個跨膜區(qū)，一個胞內(nèi)區(qū)和由20個氨基酸縱向排列的胞外區(qū)。CA15-3分子量約為400KD這種粘液性糖蛋白（MUC-1）位于乳腺細胞和肺上皮細胞上，也大量表達于乳腺癌，卵巢癌，胰腺癌，胃癌和肝癌上，是一種腫瘤相關(guān)抗原。CA15-3的血清半衰期不到兩周。乳腺良性腫瘤患者術(shù)前、術(shù)后CA15-3水平均正常；乳腺癌患者術(shù)前CA15-3水平期處于正常水平，、期升高，并以期升高最為明顯。、期乳腺癌根治術(shù)后CA15-3水平降至正常，而姑息性切除術(shù)后仍高于正常。術(shù)前乳腺癌患者CA15-3水平較低與較好的預(yù)后呈正相關(guān)。血清CA15-3在治療后持續(xù)較高或又出現(xiàn)持續(xù)性升高，提示體內(nèi)殘留有腫瘤或乳腺腫瘤發(fā)生轉(zhuǎn)移或復(fù)發(fā)。血清CA15-3水平持續(xù)性升高較臨床診斷乳腺癌復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移灶要早幾個月。因此一些臨床腫瘤專家認為，在乳腺癌術(shù)后最初四年中應(yīng)該每三個月復(fù)查一次血清CA15-3水平，而五年以上的患者應(yīng)每六個月復(fù)查一次。在正常人群及乳腺良性腫瘤患者中，CA15-3有一定比例的陽性檢出率，在少數(shù)良性疾患中，如慢性肝炎，結(jié)核，自身免疫疾病中也會有所升高。七、消化道腫瘤及癌抗原CA19-9消化道腫瘤，尤其是胃癌在中國占各種惡性腫瘤發(fā)病率及死亡率的第一位，且未見明顯下降趨勢。據(jù)調(diào)查，雖然城市人口胃癌死亡率稍有下降，但在農(nóng)村中則有所升高。統(tǒng)計結(jié)果表明在中國胃癌的死亡率由1973-1974年的19.8萬增至1990-1992年的21.8/10萬。男性的胃癌發(fā)病率高于女性，男女發(fā)病率之比為2-3：1。發(fā)病的高峰年齡為40-59歲，且有年輕化的趨勢。結(jié)腸癌，胰腺癌發(fā)病率也有所升高。結(jié)腸癌的發(fā)病率，以上海市為例，在這期間以每年10%的速度增加。在20年間增加2.25倍。1979年Koprowski用結(jié)腸癌細胞系SW1116免疫小鼠，與骨髓瘤雜交制備出被命名為116NS19-9的單克隆抗體。該株抗體能識別腫瘤細胞膜上如糖脂和粘蛋白成分中所表達的唾液酸化的Lewis血型抗原（Sialosy-fucosyl-lactotetraose）的表位。這種血型抗原是一種異質(zhì)性的高分子量粘糖蛋白，分子量范圍從200-1000Kd。在胚胎上皮組織中有較高表達，但在正常人中表達量很低，該株抗體所識別的腫瘤相關(guān)抗原被命名為CA19-9。CA19-9在消化道腺癌病人血清中濃度可明顯升高，因而又稱作胃腸癌抗原。CA19-9是一種與胃腸道惡性腫瘤有關(guān)的腫瘤相關(guān)抗原。在胰腺癌，膽管細胞癌，肝細胞癌，胃癌，結(jié)腸癌以及食管癌，甚至在非胃腸道惡性腫瘤患者，血清CA19-9循環(huán)抗原含量都有不同程度的升高。隨著治療和病情的不同轉(zhuǎn)歸，血清中CA19-9含量會有所變化，因而能較好的反映患者的病變狀態(tài)。血清CA19-9的測定是一種高特異性，高預(yù)見性和無害的測定方法，可用于胃腸道惡性腫瘤的早期診斷，及時監(jiān)測病情的進展、復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移，有助于臨床腫瘤醫(yī)師研究和確定對胃腸道惡性腫瘤患者的治療方案。八、人絨毛膜促性腺激素（HCG）檢測及癌癥診斷人絨毛膜促性腺激素（HCG）是由胎盤的滋養(yǎng)層細胞分泌的一種糖蛋白激素，由100個氨基酸和一些單糖組成，分子量約為30000，有和兩個亞單位，主要具有刺激黃體發(fā)育的功能，從而維持妊娠的繼續(xù)。HCG的檢測除了可診斷正常妊娠外，還可對異位妊娠、絨毛膜癌、滋養(yǎng)層腫瘤等進行診斷，并可用于正確指導(dǎo)人工流產(chǎn)。1正常妊娠檢測一般孕婦在停經(jīng)后30-60天才知道受孕，而且妊娠癥狀在頭一月往往不是很明顯。胚胎極易受到X線、放療、手術(shù)麻醉以及藥物的損傷，另外煙酒及不良飲食也會影響的發(fā)育，為減少由于胚治的損傷，而導(dǎo)致嬰兒先天缺陷和避免不必要的人工流產(chǎn)，盡早使醫(yī)生和孕婦掌握受孕與否就顯得非常必要，對落實優(yōu)生優(yōu)育尤為重要。2 測異位妊娠和正常指導(dǎo)人工流產(chǎn)HCG在受精卵植入子宮后24至48小時就可以出現(xiàn)在血、尿及體液中，可以被檢測出來。不同個體及時期HCG含量有極大變化。但總的變化趨勢大致相同，一般都在第8-10周達到最高峰，平均上升速度為2.10.4增加一倍，然后逐漸降低，到18周時降至同第4周水平相近時即維持無較大的波動。但是異位妊娠、先兆流產(chǎn)的HCG水平或增長速度低于正常妊娠時的情況。當受精卵在子宮外植入后，胚胎的發(fā)育可受到嚴重的限制，所以HCG的水平與同期正常妊娠相比就顯得很低。往往人工流產(chǎn)數(shù)天，HCG就會消失。如果HCG繼續(xù)存在，就說明仍有絨毛組織殘存，需進一步清宮。3 檢測亞臨床自然流產(chǎn)自然流產(chǎn)多為孕卵和發(fā)育異常，機體孕激素分泌不足，與著床不同步或脫膜發(fā)育不良。HCG水平也大大低于正常妊娠，一般在流產(chǎn)前HCG的水平在20mlU/ml左右，所以自然流產(chǎn)的診斷就需采用高靈敏度的試劑。滋養(yǎng)層細胞腫瘤的診斷滋養(yǎng)層細胞腫瘤系由絨毛膜的滋養(yǎng)層細胞和合體滋養(yǎng)細胞過度增生而來，根據(jù)滋養(yǎng)層細胞增生的程度，有無絨毛，侵蝕能力及其它生物學(xué)特性，分為良性葡萄胎、惡性葡萄胎，HCG水平持續(xù)升高，可提示這類疾病的存在。 CG與腫瘤近年來的研究調(diào)查提示，HCG不僅是滋養(yǎng)層細胞腫瘤標志，而且還可為許多其它腫瘤的重要標志。如胃癌、胰腺癌、肝癌、多發(fā)性骨髓癌、卵巢癌、乳癌等。九、腫瘤普查腫瘤發(fā)生常常無明顯癥狀，因而無法早期治療，常常因此延誤了最佳治療時機目前一些地區(qū)已將甲胎蛋白（AFP）癌胚抗原（CEA）、2-微球蛋白（2-MG）、血清鐵蛋白（SF）作為體檢的檢查項目，用以腫瘤普查，從而提高了癌癥的早期診斷率。以上腫瘤標志物多屬于非組織特異性腫瘤相關(guān)標志物，但是聯(lián)合檢測可彌補非特異性的不足，提高腫瘤的檢出率。以下就這幾種腫瘤標志物進行分別介紹。甲胎蛋白（AFP）：見前文所述。癌胚抗原（CEA）是1965年Gold和Freedman首先從胎兒及結(jié)腸癌組織中發(fā)現(xiàn)的，CEA是一種分子量為22000道爾頓的多糖蛋白復(fù)合物，45%為蛋白質(zhì)。一般情況下，CEA是由胎兒胃腸道上皮組織、胰和肝的細胞所合成，通常在妊娠前6個月內(nèi)CEA含量增高，出生后血清含量降至很低。CEA屬于非器官特異性腫瘤相關(guān)抗原，分泌CEA的腫瘤大多位于空腔臟器，如胃腸道、呼吸道、泌尿道等。正常情況下，CEA經(jīng)胃腸道代謝，而腫瘤狀態(tài)時的CEA則進入血液和淋巴循環(huán)，引起血清CEA異常增高，使上述各種腫瘤患者的血清CEA均增高。如肺癌、乳腺癌、膀胱癌和卵巢癌患者血清CEA量會明顯升高，大多顯示為腫瘤浸潤，其中約有70%為轉(zhuǎn)移性癌。一般來說，手術(shù)切除后6周，CEA水平恢復(fù)正常，否則提示有殘存腫瘤，若CEA濃度持續(xù)不斷增高，或其數(shù)值超過正常56倍者均提示預(yù)后不良。連續(xù)隨訪定量檢測血清CEA含量，對腫瘤病情判斷更具有意義。2-微球蛋白（2-MG）由Berggard和Besrn于1996年從腎臟患者尿中分離出的一種蛋白質(zhì)，由于它的分子量僅為1.2KU,電泳是顯于2-MG區(qū)帶，故被命名為2-微球蛋白。2-微球蛋白是人體有核細胞產(chǎn)生的一種由100個氨基酸殘基組成的單鏈多肽地分子蛋白。2-微球蛋白是惡性腫瘤的輔助標志物，也是一些腫瘤細胞上的腫瘤相關(guān)抗原。2-微球蛋白是人類白細胞抗原（HLA）的輕鏈部分，鏈內(nèi)含有一對二硫鍵，2-MG與HLA-A、B、C抗原的重鏈非共價的相結(jié)合而存在于細胞膜上。一般認為除成熟紅細胞和胎盤滋養(yǎng)層細胞外，其它細胞均含有2-MG。它可從有核細胞中脫落進入血循環(huán)，使血液中的2-MG升高。血清2-MG不但可以在腎功能衰竭、多種血液系統(tǒng)疾病及炎癥時升高，而且在多種疾病中均可增高，故應(yīng)排除由于某些炎癥性疾病或腎小球濾過功能減低所致的血清2-MG增高。腫瘤患者2-MG含量異常增高，在淋巴系統(tǒng)中如慢性淋巴細胞白血病、淋巴細胞肉瘤、多發(fā)性骨髓瘤等尤為明顯，在肺癌、乳腺癌、胃腸道癌及子宮頸癌等也可見增高。由于在腫瘤早期，血清2-MG可明顯高于正常值，故有助于鑒別良、惡性腫瘤。腦脊液中的2-MG的檢測對膜白血病的診斷有特別的意義。鐵蛋白（ferritin）是Laufberger于1937年從馬脾中發(fā)現(xiàn)的一種儲鐵蛋白質(zhì)，分子量約450KD，每個鐵蛋白分子由24個亞基組成，亞基分L（light, liver, basic）和H（heavy, heart, acidic）2種，儲鐵組織（如肝、脾）中的鐵蛋白主要由L亞基組成，等電點較高；而心臟、胎盤中的鐵蛋白含H亞基較多，等電點較低。1965年Richter的報道引起了人們對腫瘤細胞鐵蛋白的極大興趣，與肝、脾鐵蛋白不同，腫瘤細胞的鐵蛋白含H亞基較多，習(xí)慣上稱之為酸性鐵蛋白（acidic isoferrtins）。免疫學(xué)研究確立了鐵蛋白為一種腫瘤相關(guān)蛋白質(zhì)，多數(shù)腫瘤病人血清中鐵蛋白濃度升高，而組織鐵儲量并未發(fā)生相應(yīng)的增加，血清鐵蛋白濃度升高通常說明病人預(yù)后不良。在荷有移植性人腫瘤的裸鼠血清中可檢測到人鐵蛋白的存在，而腫瘤摘除后人鐵蛋白從血清中迅速消失，這說明腫瘤細胞可分泌胞外鐵蛋白，腫瘤病人血清中鐵蛋白水平的升高可能是腫瘤組織泄漏所致。十、腫瘤標志物檢測圖譜腫瘤標志物的檢測可依照表2.1進行選擇表2.1腫瘤標志物的選擇癌腫部分腫瘤標志物選擇順序肝AFP SF CEA 結(jié)直腸CEA CA19-9 CA50胰腺CA19-9 CEA CA50胃MGAg CA724 CEA CA19-9食道SCC肺CA50 CEA CA19-9 SCC SYFRA211 NSE乳房CA15-3 CA125 CEA卵巢CA125 AFP -HCG CEA子宮SCC SF -HCG前列腺fPSA PSA PAP甲狀腺HTG CEA CA19-9血液病SF -HCG項目名稱主診陽性順序CA50廣譜胰、肝、卵巢、腸、胃、肺CA125卵巢卵巢、胰、肺、乳、腸CA15-3乳房乳房CA19-9消化道胰、膽、胃、腸MGAg/CA724胃胃、腸、肺、乳SCC/SYFRA211鱗癌肺、食道、上鄂、宮頸、皮膚 注：以上表格摘自中國檢驗醫(yī)學(xué)用品2001年第一期，僅供參考。第三章 甲狀腺激素檢測人體生理功能的調(diào)節(jié)系統(tǒng)包括神經(jīng)系統(tǒng)和內(nèi)分泌系統(tǒng)，神經(jīng)系統(tǒng)通過神經(jīng)纖維傳導(dǎo)信息實現(xiàn)調(diào)節(jié)功能，內(nèi)分泌通過血液和組織液運輸激素，作用于某些靶細胞而達到調(diào)節(jié)功能，二者關(guān)系密切。所有的內(nèi)分泌腺都直接或間接受神經(jīng)系統(tǒng)的影響，激素也可以影響神經(jīng)功能，如甲狀激素能明顯影響腦的發(fā)育和正常功能。甲狀腺是一個內(nèi)分泌腺體，它分泌具有生物活性的甲狀腺激素。甲狀腺激素對機體的代謝、生長發(fā)育、神經(jīng)系統(tǒng)、心血管及消化系統(tǒng)等具有重要作用；甲腺激素分泌量增加或減少均可導(dǎo)致甲狀腺功能失調(diào)，內(nèi)分泌代謝紊亂。因此，正確檢測甲狀腺相關(guān)激素，對于診斷治療甲狀腺疾病具有重要意義。一、甲狀腺基本知識甲狀腺分泌有生理活性的甲狀腺素（T4）和三碘甲腺原氨酸（T3）及無生理活性的反T3等。血漿中T4來自甲狀腺，而80-90%的T3和反T3是T4在外周組織經(jīng)脫碘作用，脫去一個碘原子而生成的。血液中的T3和T4，以結(jié)合和游離兩種形式存在。絕大部分的甲狀腺激素（T4 99.97%,T3 99.7%）可逆性的結(jié)合于血漿蛋白上；游離的甲狀腺激素在血中含量甚微，與蛋白結(jié)合的激素和微量游離激素處于動態(tài)平衡中，然而正是這些微量的游離激素才能進入靶組織細胞，與細胞中受體結(jié)合，發(fā)揮其生物學(xué)作用，它還在垂體部分反饋地調(diào)節(jié)促甲狀腺激素（TSH）的分泌。結(jié)合型的甲狀腺激素是沒有生物學(xué)作用的，它對穩(wěn)定血中游離激素含量起著貯存與緩沖作用。與甲狀腺功能密切相關(guān)的另一激素為垂體所分泌的TSH。TSH是由垂體前葉嗜堿細胞所分泌，它是一種糖蛋白，分子量為25000-28000，糖類分子占總分子量的15%，包括巖藻糖、甘露糖、半乳糖、氨基葡萄糖和氨基半乳糖等。TSH的分子是由兩條肽鏈組成，一條是鏈，由89個氨基酸組成；另一條是鏈，由112個氨基酸組成，兩條肽鏈靠非共價鍵結(jié)合在一起。激素的生物學(xué)活性由肽鏈決定。兩個亞基必須結(jié)合才具生物活性，分開則無活性。TSH分泌受神經(jīng)和體液的調(diào)節(jié)，包括：下丘腦促甲狀腺素釋放素（TRH）的促進與靶腺激素（T3、T4）反饋抑制的影響，二者互相拮抗，構(gòu)成下丘腦腺垂體甲狀腺軸；神經(jīng)系統(tǒng)對TSH分泌控制，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的控制下，生長介素可降低TSH分泌，多巴胺可抑TSH釋放，雌激素可升高TSH基礎(chǔ)分泌，糖皮質(zhì)激素可通過抑制TSH的釋放，使垂體分泌TSH減少；TSH分泌受機體反應(yīng)調(diào)節(jié)；TSH分泌有晝夜節(jié)律性變化，高峰于午夜23：00-24：00，上午11：00時最低；冷刺激TSH分泌增加，再促進T3、T4分泌以適應(yīng)冷環(huán)境。（一）甲狀腺功能的調(diào)節(jié)生理情況下，甲狀腺功能有兩種調(diào)節(jié)方式。即下丘腦垂體甲狀腺之間的反饋性調(diào)節(jié)和甲狀腺的自身調(diào)節(jié)。第一種調(diào)節(jié)是最主要的調(diào)節(jié)方式（見圖3.1）下丘腦 TRH垂體TSH甲狀腺T3、T4圖3.1 下丘腦垂體甲狀腺軸的調(diào)節(jié)腦的神經(jīng)分泌細胞產(chǎn)生促甲狀腺激素釋放激素（TRH）。TRH到達垂體前葉，促進合成和釋放TSH。TSH在血液中濃度小于10IU/ml。TSH有興奮甲狀腺的功能：能使甲狀腺激素的合成增加；促進甲狀腺激素分泌；使甲狀腺上皮細胞增生肥大。血液中甲狀腺激素濃度，對下丘腦和垂體功能也具有負反饋調(diào)節(jié)作用。血液中甲狀腺激素尤其是T4濃度升高，可反饋性抑制TSH分泌，反之，甲狀腺激素濃度降低時，則TSH分泌增強，從而興奮甲狀腺，使之分泌更多的甲狀腺激素。3血中TSH和甲狀腺激素水平可以反饋性的影響TRH的釋放。TSH增加，可以使TRH分泌減少。當血液中游離甲狀腺激素，主要是游離T3（fT3）的濃度升高，可刺激TRH合成增加，并貯存于下丘腦，待FT3、FT4降低時，可興奮TRH的釋放，從而增加TSH的分泌，以提高血中甲狀腺激素的濃度。因此，機體通過這一調(diào)節(jié)系統(tǒng)，以滿足周圍組織對甲狀腺激素的需要；并使血中甲狀腺激素濃度保持在正常范圍之內(nèi)。（二）甲狀腺激素的生理作用1代謝的影響產(chǎn)熱效應(yīng)：甲狀腺激素能使細胞內(nèi)氧化速度提高，耗氧量增加，產(chǎn)熱增加，使人體能量代謝維持在一定水平，調(diào)節(jié)體溫恒定。糖、脂肪、蛋白質(zhì)代謝糖代謝：生理劑量甲狀腺激素能促進腸道對葡萄和半乳糖的吸收，促進肝糖原的合成。超生理劑量能促進肝糖原分解。脂肪代謝：甲狀腺激素具有刺激脂肪合成和促進脂肪分解的雙重功能，但總的作用是減少脂肪儲存，降低血脂濃度。故甲亢時血膽固醇低于正常，機能低下時則高于正常。蛋白質(zhì)代謝：甲狀腺激素能促進蛋白質(zhì)及各種酶的生成，T3或T4分泌不足時，蛋白質(zhì)合成減少，但細胞間的粘蛋白增多，引起浮腫，稱為粘液性水腫。T3或T4分泌