第17章 免疫球蛋白檢測

臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)技術(shù),第十七章免疫球蛋白檢測,馮珍如,目錄,第一節(jié)免疫球蛋白的生物學(xué)功能第二節(jié)IgG、IgM、IgA測定方法及臨床意義第三節(jié)血液IgE和IgD測定方法及臨床意義第四節(jié)冷球蛋白測定方法及臨床意義,第一節(jié)免疫球蛋白生物學(xué)功能,重點(diǎn)提示,免疫球蛋白異質(zhì)性的表現(xiàn)類型免疫球蛋白V區(qū)和C區(qū)功能特點(diǎn)五類免疫球蛋白的不同功能特點(diǎn),一、免疫球蛋白的異質(zhì)性,免疫球蛋白的類型免疫球蛋白的多樣性免疫球蛋白的血清型,二、免疫球蛋白的功能,免疫球蛋白的V區(qū)作用免疫球蛋白的C區(qū)作用五類免疫球蛋白不同的生物學(xué)功能,第二節(jié)IgG、IgM、IgA測定方法及臨床意義,重點(diǎn)提示,不同標(biāo)本類型的IgG、IgM、IgA檢測方法血液IgG、IgM、IgA檢測方法的比較不同標(biāo)本類型的IgG、IgM、IgA檢測意義IgG亞型檢測的臨床意義選擇性蛋白尿指數(shù)白蛋白商值IgG生成指數(shù),一、血液IgG、IgM、IgA測定方法及臨床意義,測定方法,單向免疫擴(kuò)散試驗(yàn)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）放射免疫試驗(yàn)（RIA）免疫固定電泳免疫比濁法：免疫透射比濁法、免疫散射比濁法,測定方法,血液IgG、IgM、IgA檢測方法的比較,臨床意義,年齡的差異：年齡不同其血液中的免疫球蛋白的含量有一定變化。新生兒可由母體獲得通過胎盤轉(zhuǎn)移來的IgG，故血液中含量較高，接近成人水平。嬰幼兒體液免疫功能尚不成熟，免疫球蛋白含量低于成人。血液免疫球蛋白隨年齡、性別、血型、種族及測定方法不同而有所差別。,臨床意義,多克隆高免疫球蛋白血癥：肝臟疾病如慢性活動性肝炎、原發(fā)性膽汁性肝硬化、隱匿性肝硬化等患者血清中三類免疫球蛋白均可升高。慢性細(xì)菌感染如肺結(jié)核、麻風(fēng)、慢性支氣管炎等血中IgG可升高。宮內(nèi)感染時(shí)臍血或出生后的新生兒血清中IgM含量可增高。自身免疫病時(shí)免疫球蛋白均可升高，如系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者以IgG、IgA升高較多見，類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者以IgM升高為主。,臨床意義,單克隆免疫球蛋白升高：主要是指患者血清中某一類免疫球蛋白含量顯著增多，大多在30g/L以上。這種異常增多的免疫球蛋白理化性質(zhì)十分一致，稱為單克隆蛋白（monoclonalprotein，MP）即M蛋白。此類異常增多的免疫球蛋白多無免疫活性，故又稱副蛋白（paraprotein）。由M蛋白所致的疾病稱為免疫增殖性疾病，如：多發(fā)性骨髓瘤、巨球蛋白血癥、惡性淋巴瘤、重鏈病、輕鏈病等。,臨床意義,低免疫球蛋白血癥：先天性低免疫球蛋白血癥：體液免疫缺陷病聯(lián)合免疫缺陷病獲得性低免疫球蛋白血癥：患者血清中IgG常小于5g/L，引起的原因較多。大量蛋白丟失：如燒傷、剝脫性皮炎、腎病綜合征等淋巴系統(tǒng)腫瘤：如白血病、霍奇金淋巴瘤等感染性疾?。喝绨滩￠L期使用免疫抑制劑,二、血液IgG亞類測定方法及臨床意義,測定方法,單向免疫擴(kuò)散試驗(yàn)：最早用于IgG亞類測定，但靈敏度低，檢測時(shí)間長等缺陷，臨床已不用。ELISA：因抗原特異性較差，檢測時(shí)間長，臨床應(yīng)用較少。免疫散射比濁法：以檢測速度快，靈敏度高，準(zhǔn)確性好，自動化程度高等為優(yōu)點(diǎn)，在臨床廣泛應(yīng)用。,臨床意義,年齡：IgG亞類在不同年齡、種族以及不同測定方法的情況下，檢測結(jié)果都存在差異。IgG亞類的含量隨年齡的不同而變化。在兒童時(shí)期，男性IgG亞類缺陷比女性常見，其比例為3:1；成年男女的比例為4:2。兒童中IgG2缺陷最常見，成年人IgG1和IgG3缺陷最常見。,臨床意義,IgG亞類缺陷：臨床上可表現(xiàn)為反復(fù)呼吸道感染、腹瀉、中耳炎、鼻竇炎、支氣管擴(kuò)張以及哮喘等。有些患者IgG亞類異常，但總IgG正常甚至還偏高，因此認(rèn)為IgG亞類測定比總IgG測定更有價(jià)值。IgA缺乏癥常伴有IgG2缺陷某些病毒感染時(shí)IgG1、IgG2、IgG3顯著下降腎病綜合征出現(xiàn)低IgG血癥時(shí)，IgG亞類并非呈比例降低，以IgG1下降為主，而IgG3代償性增高。糖尿病患者以IgG1下降為主IgG亞類異常增高可見于型超敏反應(yīng)，如變應(yīng)原可刺激機(jī)體使IgG4含量增加。,臨床意義,IgG4相關(guān)性疾?。菏且唤M以血清IgG4水平升高、受累組織IgG4陽性漿細(xì)胞浸潤及纖維化為特征的疾病。該病可累及全身多個組織器官，受累器官因纖維化、慢性炎癥等出現(xiàn)增生腫大，從而導(dǎo)致相應(yīng)壓迫阻塞癥狀或功能障礙，其中胰腺、淚腺和涎腺的受累最為常見。,三、尿液免疫球蛋白測定方法及臨床意義,測定方法,單向免疫擴(kuò)散試驗(yàn)：臨床已基本不用。ELISA：臨床應(yīng)用較少。免疫散射比濁法：臨床廣泛應(yīng)用。,測定方法,選擇性蛋白尿指數(shù)（selectiveproteinuriaindex，SPI）：同時(shí)測定尿液和血液中的轉(zhuǎn)鐵蛋白（transferrin，TF）及IgG的含量，以此來判斷尿液Ig測定的臨床意義。SPI計(jì)算公式：SPI=(尿IgG/血清IgG)/（尿TF/血清TF）。,臨床意義,當(dāng)SPI0.1時(shí)，表明腎臟高選擇性排泌分子量較小的蛋白質(zhì)：微小病變型腎病。當(dāng)SPI0.2時(shí)，表明腎臟是非選擇性排泌分子量較大的蛋白質(zhì)：膜性腎病、膜增殖性腎炎、腎病綜合征。,臨床意義,尿中IgG升高：原發(fā)性腎小球腎炎、慢性腎炎尿內(nèi)IgA：原發(fā)性腎小球腎病和慢性腎炎腎?。汉孔罡呗阅I炎高血壓型及普通型：輕度增高隱匿性腎炎及急性腎炎：含量很少尿內(nèi)IgM：慢性腎炎尿游離輕鏈：輕鏈病、多發(fā)性骨髓瘤等,四、腦脊液免疫球蛋白測定方法及臨床意義,測定方法,免疫散射比濁法：正常人腦脊液（CSF）免疫球蛋白含量低，故臨床應(yīng)用靈敏度高的免疫散射比濁法來測定CSF中免疫球蛋白。白蛋白商值：同時(shí)測定CSF和血液中的白蛋白（Alb）,計(jì)算白蛋白商值（Albquotient，QAlb）的大小來反映血腦屏障受損程度。QAlb計(jì)算公式：QAlb=(AlbCSF/AlbS)1000,測定方法,IgG生成指數(shù)（IgGindex）：通過計(jì)算IgG生成指數(shù)來反應(yīng)CSF鞘內(nèi)免疫球蛋白合成。其計(jì)算公式為：IgG生成指數(shù)=(IgGCSF/AlbS)/(IgGS/AlbCSF),臨床意義,血液中免疫球蛋白通過血腦屏障的難易程度與免疫球蛋白分子量大小直接相關(guān)。IgG較易通過血腦屏障，而IgA略難，IgM更難。所以IgG、IgA、IgM在CSF中的含量依次遞減。當(dāng)腦組織或腦膜出現(xiàn)病變時(shí)，導(dǎo)致血腦屏障發(fā)生破壞，通透性增加，或自身病變組織產(chǎn)生的病理性產(chǎn)物進(jìn)入CSF，使CSF成分發(fā)生改變。,臨床意義,QAlb不僅可以檢測血腦屏障損傷的程度，還可以提示神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)生疾病的類型。QAlb9：提示血腦屏障無明顯受損。QAlb915：急慢性病毒感染、多發(fā)性硬化、神經(jīng)梅毒、帶狀皰疹性神經(jīng)節(jié)炎、腦萎縮等神經(jīng)系統(tǒng)疾病。QAlb1533：急性神經(jīng)疏螺旋體病、條件致病性腦膜炎、吉蘭-巴雷綜合征等。QAlb33100：化膿性腦膜炎、單純皰疹性腦炎、結(jié)核性腦膜炎等嚴(yán)重細(xì)菌感染性疾病。QAlb100為完全破裂。,臨床意義,當(dāng)IgG生成指數(shù)升高時(shí)，表明CSF中的IgG主要由中樞神經(jīng)系統(tǒng)鞘內(nèi)合成。IgG生成指數(shù)升高多見于多發(fā)性硬化癥。CSF中IgG增高：腦血栓、蛛網(wǎng)膜下腔出血、系統(tǒng)性紅斑狼瘡腦病、神經(jīng)梅毒、重癥肌無力等。CSF中IgG、IgA均增高：化膿性腦膜炎及結(jié)核性腦膜炎。CSF中IgA和IgM升高：神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤。CSF中IgG和IgM明顯升高：精神分裂癥。,第三節(jié)血液IgE和IgD測定方法及臨床意義,重點(diǎn)提示,血液IgE檢測方法血液IgE檢測的臨床意義血液IgE水平的影響因素,一、血液IgE測定方法及臨床意義,測定方法,ELISA熒光酶免疫試驗(yàn)（FEIA）化學(xué)發(fā)光免疫試驗(yàn)（CLIA）三種方法在臨床均常用。相比ELISA，F(xiàn)EIA和CLIA因檢測速度快，自動化程度高等優(yōu)點(diǎn)在臨床應(yīng)用更為廣泛。,臨床意義,型超敏反應(yīng)：血清IgE升高。嬰兒：高水平的IgE預(yù)測未來有超敏反應(yīng)的可能寄生蟲?。篒gE水平明顯升高。某些非超敏反應(yīng)：IgE水平升高還可見于其它一些非超敏反應(yīng)，如感染性疾病、IgE型骨髓瘤、高IgE綜合征、嗜酸性粒細(xì)胞增多癥、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎等。其它：原發(fā)性無丙種球蛋白血癥、腫瘤及化療藥物應(yīng)用后IgE可下降。,臨床意義,影響IgE水平的因素：年齡：新生兒IgE水平非常低，隨著年齡的增長，IgE的水平隨之增高，學(xué)齡前兒童IgE可接近成人水平，青春期水平最高，30歲后逐漸下降，老年人IgE水平處于較低的水平，這可能與老年人Th細(xì)胞功能低下，Ts細(xì)胞功能相對較高有關(guān)。性別：男性高于女性，其機(jī)制尚不清楚。種族：混血人種的IgE比白人高34倍，黑人水平更高，黃種人水平也較高。這可能受遺傳的影響。,二、血液IgD測定方法及臨床應(yīng)用,因IgD生物學(xué)功能尚不清楚，血液IgD定量檢測臨床基本不做。血液IgD的定性檢測有免疫固定電泳等，見第二十四章。血液中IgD升高主要見于IgD型骨髓瘤等免疫增值性疾病。,第四節(jié)冷球蛋白測定及臨床意義,重點(diǎn)提示,冷球蛋白的特點(diǎn)冷球蛋白檢測流程保溫的重要性冷球蛋白分型的意義,測定方法,冷球蛋白的測定方法有兩種：定性測定：血細(xì)胞比容管法定量測定：分光光度法在冷球蛋白的測定中樣本采集及處理的保溫過程是保證檢測結(jié)果準(zhǔn)確的關(guān)鍵。,臨床意義,冷球蛋白可分為型、型、型，各型具有不同的臨床意義。型：為單克隆冷球蛋白，由IgM、IgG、IgA或本-周蛋白組成，大約25%的冷球蛋白屬于此類型。臨床上多見于多發(fā)性骨髓瘤、巨球蛋白血癥、淋巴瘤、慢性淋巴細(xì)胞白血病等疾病。,臨床意義,冷球蛋白可分為型、型、型，各型具有不同的臨床意義。型：為單克隆混合冷球蛋白，由單克隆免疫球蛋白和自身IgG組成，分為IgM-IgG、IgG-IgG、IgA-IgG，大約25%的冷球蛋白屬于此類型。臨床上見于類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、血管炎、干燥綜合征等疾病。,臨床意義,冷球蛋白可分為型、型、型，各型具有不同的臨床意義。型：為多克隆混合冷球蛋白，由兩類或兩類以上的多克隆免疫球蛋白組成，即抗原和抗體都是多克隆的，大約50%的冷球蛋白屬于此類型。臨床上見于傳染性單核細(xì)胞增多癥、急性病毒性肝炎、鏈球菌感染后腎小球腎炎、原發(fā)性膽汁性肝硬化、感染性心內(nèi)膜炎等疾病。,本章小結(jié),免疫球蛋白具有明顯的異質(zhì)性，不僅可分為五類和兩型，而且包含多種亞類；免疫球蛋白血清型有同種型、同種異型和獨(dú)特型；免疫球蛋白功能與其結(jié)構(gòu)密切相關(guān)；五類免疫球蛋白具有各自不同的生物學(xué)功能。,本章小結(jié),IgG亞類測定對研究免疫缺陷病、超敏反應(yīng)和IgG4相關(guān)性疾病有重要價(jià)值。免疫球蛋白定量測定在臨床上常用免疫散射比濁法來測定。,本章小結(jié),通過選擇