白細胞分類計數(shù)操作程序.doc

南通市第一人民醫(yī)院醫(yī)學檢驗科標準操作程序文件編號：NTYY-XYXM-SOP-001版本序號：A修訂序號：0編寫：陸永輝審核：陶國華批準：曹興建制定日期：2018-05-01修訂日期：執(zhí)行日期：2018-06-01白細胞分類計數(shù)標準操作程序1. 目的 規(guī)范白細胞分類計數(shù)操作程序，保證檢驗結果準確可靠。2. 標本種類 人體靜脈血或末梢血。3適用范圍 操作區(qū)白細胞分類計數(shù)。4.原理 把血液推制成薄膜涂片，用瑞氏-姬姆薩染液染色，根據(jù)各類白細胞形態(tài)特征予以分類計數(shù)，得出相對比值（百分率），同時觀察細胞形態(tài)的變化。5.試劑與器材 5.1試劑：瑞氏-姬姆薩染色液A、B 液5.2器材：玻片、推片、吸耳球、吸水紙、顯微鏡、香柏油、擦鏡液。 6.操作步驟6.1 采血后在玻片端1cm處加1滴血，持推片以30-450角勻速平穩(wěn)推至另一端，制成厚薄適宜的血膜,血膜應呈舌狀，頭、體、尾清晰可分。6.2 推好的血膜在空氣中晃動，促使快干，天氣寒冷或潮濕時，應于37溫箱中保溫促干，以免細胞變形。6.3 染色：平置玻片于染色架上，滴加瑞氏-姬姆薩染色液A 液數(shù)滴，使其迅速蓋滿血膜，約1分鐘后滴加等量瑞氏-姬姆薩染色液B 液，與A液混合用吸耳球吹勻，5-10分鐘后用水沖去染液，待干（或用吸水紙吸干）。6.4 選擇體尾交界處染色良好的區(qū)域在油鏡下計數(shù)100個白細胞，按其形態(tài)特征分類計數(shù)。7.參考區(qū)間 中性粒細胞桿狀核（成人，6歲-）： 0.01-0.05，分葉核0.50-0.70 中性粒細胞（新生兒、嬰兒,0-6歲）：0.30-0.40 嗜酸性粒細胞：0.005-0.05 嗜堿性粒細胞：0-0.01 淋巴細胞：（成人，6歲-）：0.20-0.40；新生兒、嬰兒（0-6歲）：0.40-0.60 單核細胞：0.03-0.088.注意事項8.1 避免重復計數(shù),應在血涂片體尾交界處由邊緣向中央依次上下呈城墻式曲線移動，禁止在計數(shù)池或涂片下用高倍鏡作白細胞分類。8.2 白細胞明顯減少的血片,檢查多張血片。8.3 見有核紅細胞以分類100個白細胞過程所見數(shù)量報告：N個/100個WBC。8.4 注意觀察紅細胞、血小板的形態(tài)染色和分布情況，有無寄生蟲和異常所見，破碎細胞和不能識別細胞作適當描述（一般2%）。8.5 pH、染液濃度、染色時間、溫度影響染色效果。9.臨床意義9.1增多9.1.1 中性粒細胞增多：見于急性化膿性感染、粒細胞性白血病、急性出血、溶血、手術后、尿毒癥、酸中毒、急性鉛中毒等。9.1.2 嗜酸性粒細胞增多：見于變態(tài)反應、寄生蟲病、某些皮膚病、某些血液病、手術后、燒傷等。9.1.3.嗜堿性粒細胞增多：見于慢性粒細胞白血病、佝僂病、癌轉移、鉛、鉍中毒等。9.1.4 淋巴細胞增多：見于百日咳、傳染性單核細胞增多癥、慢性淋巴細胞白血病、麻疹、結核、傳染性肝炎等。9.1.5 單核細胞增多：見于結核、傷寒、亞急性傳染性心內(nèi)膜炎、瘧疾、黑熱病、單核細胞白血病、急性傳染病恢復期等。9.2 減少9.2.1中性粒細胞減少：見于傷寒、副傷寒、瘧疾、流感、再障、粒細胞缺乏等。9.2.2嗜酸性粒細胞減少：見于傷寒、副傷寒以及應用腎上腺皮質(zhì)激素后。9.2.3淋巴細胞減少：多見于傳染病急性期、放射病、細胞免疫缺陷等。10.血液分析儀法 操作見LH750血細胞分析儀標準操作程序。11. 參考文獻11.1 中華人民共和國國家衛(wèi)生和計劃生育委員會醫(yī)政醫(yī)管局. 全國臨床檢驗操作規(guī)程（第4版）.北京: 人民衛(wèi)生出版社, 2015.11.2 江蘇省衛(wèi)生廳. 醫(yī)院檢驗科建設管理規(guī)范（第2版）.南京: 東南大學出版社, 2013.11.3 劉成玉, 羅春麗. 臨床檢驗基礎（第5版）M .人民衛(wèi)生出版社, 2012.附： 異常白細胞形態(tài)的變化1.中性粒細胞： a 核象變化：核左移、核右移。b 毒性變化：細胞大小不均、中毒顆粒、空泡變性、Dohle體、核棘突。c 退行性變化：核固縮、核碎裂、核溶解。2.淋巴細胞：異型淋巴細胞分