環(huán)境毒理學(xué)復(fù)習(xí)重點(diǎn)

1、一室模型：當(dāng)毒物進(jìn)入機(jī)體后立即均勻的分布到所有的組織器官，并迅速達(dá)到平衡時(shí)，可將機(jī)體視為一室模型。 二室模型：二室模型將機(jī)體分為中央室和周邊室，體內(nèi)不能迅速分布而達(dá)到平衡的毒物，如苯、對(duì)溴磷等，迅速在中心室分布，然后經(jīng)較長(zhǎng)時(shí)間才在周邊室達(dá)到平衡。2、污染物的生物地球化學(xué)循環(huán)：就是生物的合成作用和礦化作用所引起的污染物周而復(fù)始的循環(huán)運(yùn)動(dòng)過(guò)程（循環(huán)過(guò)程中伴隨著污染物的遷移、轉(zhuǎn)化、分散、富集和污染物的形態(tài)、化學(xué)組分的變化）3、 半數(shù)效應(yīng)劑量 ED50：XB引起機(jī)體某項(xiàng)生物效應(yīng)發(fā)生50%改變所需的劑量。 半數(shù)致死劑量或濃度（LD50或LC50）能引起一群個(gè)體50%死亡的最低劑量或濃度4、 酶的抑制與誘導(dǎo)：5、毒物（toxicant）：在一定條件下，以較小劑量給予機(jī)體時(shí)，能與生物體相互作用，引起生物體功能或器質(zhì)性損傷的化學(xué)物質(zhì)；或劑量雖微，但積累到一定的量，就能干擾或破壞機(jī)體的正常生理功能，引起暫時(shí)或持久性的病理變化，甚至危及生命的化合物。6、劑量-效應(yīng)關(guān)系：是指不同劑量外源化學(xué)物與其在個(gè)體或群體中所引起的量效應(yīng)大小之間的相關(guān)關(guān)系。 劑量-反應(yīng)關(guān)系：是指不同劑量的外源化學(xué)物與其引起的效應(yīng)發(fā)生率之間的關(guān)系。7、半數(shù)耐受限量(TLm) TLm)，也叫半數(shù)存活濃度，是指在一定時(shí)間內(nèi)一群水生生物中50%個(gè)體能夠耐受的某種環(huán)境污染物在水中的濃度，單位為mg/L。8、最大無(wú)作用劑量（maximal no-effectlevel）：又稱(chēng)未觀察到作用劑量（no observed effect level,NOEL）指化學(xué)物在一定時(shí)間內(nèi)，按一定方式與機(jī)體接觸，按一定的檢測(cè)方法或觀察指標(biāo)，不能觀察到任何損害作用的最高劑量。最小有作用劑量（minimal effectlevel）：指XB按一定方式與機(jī)體接觸，在一定時(shí)間內(nèi)，按一定的檢測(cè)方法或觀察指標(biāo)，觀察到機(jī)體開(kāi)始出現(xiàn)某種異常變化的最低劑量。若能使機(jī)體開(kāi)始出現(xiàn)毒性反應(yīng)的最低劑量，又稱(chēng)中毒閾劑量。9、 受體學(xué)說(shuō)：存在于細(xì)胞膜上或細(xì)胞內(nèi)對(duì)特定生物活性物質(zhì)具有識(shí)別能力并可選擇性地與其結(jié)合的蛋白質(zhì)，與外來(lái)化合物結(jié)合，進(jìn)而引發(fā)一系列識(shí)別、換能和放大過(guò)程，最后導(dǎo)致生物學(xué)效應(yīng)。自由基學(xué)說(shuō)：進(jìn)入生物體內(nèi)的污染物，可以在生物轉(zhuǎn)化過(guò)程中形成各種自由基中間體，導(dǎo)致脂質(zhì)過(guò)氧化等反應(yīng)，從而造成細(xì)胞損傷和死亡。10、癌是指組織或細(xì)胞相對(duì)自主生長(zhǎng)形成腫塊并危害機(jī)體的新生物?；瘜W(xué)致癌作用：化學(xué)物質(zhì)引起腫瘤的過(guò)程。 致畸作用：胚胎在發(fā)育過(guò)程中，由于受到某種因素的影響，使胚胎細(xì)胞分化和器官的形成不能正常進(jìn)行，而造成器官組織上的缺陷，并出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)的形態(tài)結(jié)構(gòu)異常。 致突變作用(mutagenesis)引起生物遺傳物質(zhì)發(fā)生基因結(jié)構(gòu)改變的作用,突變的發(fā)生及其過(guò)程叫誘變作用。11、即發(fā)作用：毒物一經(jīng)接觸后，短期內(nèi)引起的毒作用。如一氧化碳、氰化物的急性中毒。 遲發(fā)作用（delay effect）：經(jīng)長(zhǎng)期接觸或間隔一段時(shí)間后，才呈現(xiàn)的毒作用。 變態(tài)反應(yīng)（allergic reaction）：致敏作用所致,化合物作為一種半抗原與內(nèi)源性蛋白質(zhì)結(jié)合形成抗原,從而激發(fā)抗體,繼而再次接觸時(shí)將產(chǎn)生抗原-抗體反應(yīng).可存在閾劑量。 特異性反應(yīng)：一般是指遺傳所決定的特異體質(zhì)對(duì)某種化學(xué)物的異常反應(yīng)，又稱(chēng)特發(fā)性反應(yīng)。12、 危險(xiǎn)性（risk）：也稱(chēng)危險(xiǎn)度，是指某種物質(zhì)在具體的接觸條件下，能引起機(jī)體發(fā)生中毒可能性的定量估計(jì)。13、生物性遷移：污染物通過(guò)生物體的吸附、吸收、代謝、死亡等過(guò)程而發(fā)生的遷移。14、人體每日容許攝入量ADI（acceptable daily intake,）：人類(lèi)終生每日攝入該外來(lái)化合物對(duì)人體不致引起任何損害作用的劑量。最高允許濃度（MAC）:某一環(huán)境污染物可在環(huán)境中存在而不致對(duì)人體造成任何損害作用的濃度15、 污染物的遷移和轉(zhuǎn)化（污染物的環(huán)境行為）：污染物進(jìn)入環(huán)境后由于自身物理化學(xué)性質(zhì)的決定和環(huán)境因素的影響，在空間位置或形態(tài)特征等方面發(fā)生一系列復(fù)雜的變化，又叫污染物的環(huán)境行為（environmentalbehavior）或環(huán)境轉(zhuǎn)歸（environmental fate）16、 協(xié)同作用：兩種或兩種以上環(huán)境化學(xué)物同時(shí)作用于機(jī)體所產(chǎn)生的生物學(xué)作用的強(qiáng)度遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)各化學(xué)物單獨(dú)作用強(qiáng)度的總和。拮抗作用：兩種環(huán)境化學(xué)物同時(shí)作用于機(jī)體時(shí)，其中一種化學(xué)物可干擾另一種化學(xué)物的生物學(xué)作用；或兩種化學(xué)物相互干擾，使混合物的毒作用強(qiáng)度低于各自單獨(dú)作用的強(qiáng)度之和。獨(dú)立作用：兩種或兩種以上的環(huán)境化合物作用于機(jī)體，各自的作用方式、途徑、受體和部位不同，彼此無(wú)影響，僅表現(xiàn)為各自的毒作用?；衔锏穆?lián)合作用：凡兩種或兩種以上化合物同時(shí)或短期內(nèi)先后作用于機(jī)體所產(chǎn)生的綜合毒作用。（相加作用、協(xié)同作用、拮抗作用、獨(dú)立作用）17、 安全：是指某種化學(xué)物在規(guī)定的使用方式和用量條件下，對(duì)機(jī)體不產(chǎn)生任何損害(包括急性毒性、慢性毒性以及致癌、致畸等遠(yuǎn)期或潛在危害)安全性評(píng)價(jià)：是指通過(guò)規(guī)定的毒理學(xué)試驗(yàn)程序和方法以及對(duì)人群效應(yīng)的觀察，評(píng)價(jià)某種化學(xué)物的毒性及其潛在危害，進(jìn)而提出在通常的暴露條件下該物質(zhì)對(duì)人體健康是否安全以及其安全接觸限量。實(shí)際安全劑量：與可接受的危險(xiǎn)度相對(duì)應(yīng)的暴露劑量稱(chēng)為實(shí)際安全劑量。18、生物半減期：T1/2指一種毒物在體內(nèi)含量或濃度減少一半所需時(shí)間。T1/2=0.693/K可表示毒物由機(jī)體的消除速度和機(jī)體對(duì)毒物的消除能力。一般指血漿半減期。19、毒作用帶：是一種根據(jù)毒性和毒性作用特點(diǎn)綜合評(píng)價(jià)外源化學(xué)物危險(xiǎn)性的指標(biāo)。常用的有急性毒作用帶和慢性毒作用帶。20、靶位點(diǎn)：污染物在生物體內(nèi)達(dá)到某一濃度并足以引發(fā)一系列有害生物效應(yīng)的部位。一個(gè)或多個(gè)2、生物濃縮的研究意義、方法、測(cè)量，具有什么特性的污染物容易被生物濃縮。生物濃縮（bioconcentration）：生物體從環(huán)境中蓄積某種污染物，出現(xiàn)生物體中濃度高于環(huán)境中濃度的現(xiàn)象，又叫生物富集；生物濃縮程度用生物濃縮系數(shù)（KBCF）表示；研究污染物遷移規(guī)律與危害作用：用于闡述生物濃縮、生物積累和生物放大，一般多用來(lái)表示某種物質(zhì)在水中的濃度同在水生生物體內(nèi)的濃度之間的關(guān)系。平衡濃縮系數(shù)：生物通過(guò)吸收、吸附、吞食、排出等過(guò)程，經(jīng)歷一段時(shí)間后達(dá)到平衡狀態(tài)時(shí)的濃縮系數(shù)求生物濃縮系數(shù)的方法lgKbcf=0.54211Kow+0.124生物富集因子與什么因素相關(guān)？物質(zhì)本身性質(zhì)：化學(xué)性質(zhì)、物理狀態(tài)生物：生長(zhǎng)、發(fā)育、大小、年齡等 環(huán)境：溫度、pH、光照、季節(jié)哪類(lèi)污染物易生物濃縮？不易分解 脂溶性較強(qiáng) 與蛋白質(zhì)或酶有較強(qiáng)親和力3、 化合物的聯(lián)合毒作用類(lèi)型的判斷方法。相加作用：多種化合物同時(shí)作用于機(jī)體所產(chǎn)生的生物學(xué)作用的強(qiáng)度是各自單獨(dú)作用的總和協(xié)同作用：兩種或兩種以上環(huán)境化學(xué)物同時(shí)作用于機(jī)體所產(chǎn)生的生物學(xué)作用的強(qiáng)度遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)各化學(xué)物單獨(dú)作用強(qiáng)度的總和拮抗作用：兩種環(huán)境化學(xué)物同時(shí)作用于機(jī)體時(shí)，其中一種化學(xué)物可干擾另一種化學(xué)物的生物學(xué)作用；或兩種化學(xué)物相互干擾，使混合物的毒作用強(qiáng)度低于各自單獨(dú)作用的強(qiáng)度之和獨(dú)立作用：兩種或兩種以上的環(huán)境化合物作用于機(jī)體，各自的作用方式、途徑、受體和部位不同，彼此無(wú)影響，僅表現(xiàn)為各自的毒作用評(píng)定：對(duì)化合物聯(lián)合作用類(lèi)型的評(píng)定一般采用急性毒性試驗(yàn)的方法系數(shù)法：先求出各化合物各自的LD50值，從各化合物的聯(lián)合作用是相加作用的假設(shè)出發(fā)，計(jì)算出混合物的預(yù)期LD50值，再通過(guò)實(shí)驗(yàn)求出實(shí)測(cè)混合物的LD50值。聯(lián)合作用系數(shù)(K)混合物的預(yù)期LD50混合物實(shí)測(cè)LD50。等效應(yīng)線(xiàn)圖法： 只能評(píng)定兩個(gè)化合物的聯(lián)合作用。在試驗(yàn)條件和接觸途徑相同情況下分別求出受試的兩種化合物的LD50及其95%可信限。將甲化合物L(fēng)D50值及95%可信限的上、下限值點(diǎn)在縱坐標(biāo)上，將乙化合物L(fēng)D50值及95%可信限的上、下限值點(diǎn)在橫坐標(biāo)上，再將兩個(gè)化合物的LD50、95%可信限的上、下限劑量點(diǎn)相應(yīng)連接，形成三條直線(xiàn)(LD50線(xiàn)、95%可信限上限線(xiàn)和下限線(xiàn))(如圖)。此即為等效應(yīng)線(xiàn)。然后在相同條件下取甲、乙化合物的等毒性劑量(如各取0.5LD50劑量)制成混合物，染毒，求出LD50，以混合物L(fēng)D50中甲、乙各自的實(shí)際劑量分別標(biāo)注圖上在此兩劑量點(diǎn)各作垂線(xiàn)，以相交點(diǎn)位置判斷聯(lián)合作用類(lèi)型。4、蓄積毒性的實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果判定方法。實(shí)驗(yàn)方法：（1）、蓄積系數(shù)法原理：某種化學(xué)物按一定時(shí)間間隔分次染毒，如果受試物在體內(nèi)全部蓄積，在理論上某毒效應(yīng)相當(dāng)一次染毒劑量所產(chǎn)生的毒效應(yīng)。如果化合物的蓄積性越小，則多次染毒產(chǎn)生毒效應(yīng)的劑量與次染毒產(chǎn)生相同毒效應(yīng)所需劑量之間的比值就越大，由此比值來(lái)判斷化合物蓄積性的大小。方法： 固定劑量法對(duì)受試動(dòng)物以1/5-1/20LD50的固定劑量，每天染毒，當(dāng)染毒劑量累計(jì)達(dá)5個(gè)LD50（1）以上時(shí)，若受試動(dòng)物死亡數(shù)未超過(guò)半數(shù)，此時(shí)蓄積系數(shù)已大于5；若染毒過(guò)程中動(dòng)物相繼死亡，記下受試動(dòng)物出現(xiàn)50%死亡時(shí)累計(jì)的染毒總劑量，計(jì)算K染毒方式：一般小動(dòng)物以灌胃和腹腔注射方式動(dòng)物分組：一般20只，一組對(duì)照，一組劑量組實(shí)驗(yàn)天數(shù)：最短25天，最長(zhǎng)100天、劑量定期遞增染毒法取一組受試動(dòng)物，每天染毒一次，4天為期，每期中每日給予受試化合物的劑量相同。開(kāi)始時(shí)可按0.1LD50給予實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，以后每期給予劑量按等比級(jí)數(shù)遞增1.5倍遞增，至半數(shù)動(dòng)物死亡，總劑量即為L(zhǎng)D50(n)，計(jì)算蓄積系數(shù)。如果到20天，死亡動(dòng)物仍不是半數(shù)，可停止試驗(yàn)，此時(shí)總劑量達(dá)5.3LD50，K值5.3，可認(rèn)為蓄積作用不明顯。其他與固定劑量法基本相同（2）20天蓄積實(shí)驗(yàn)法設(shè)(溶劑對(duì)照)、1/2、1/5、1/10和1/20LD50五個(gè)劑量組，每組雌雄動(dòng)物各10，每天染毒，持續(xù)20天，觀察停止染毒后7天內(nèi)動(dòng)物死亡情況。各劑量組均無(wú)死亡，即為蓄積性不明顯； 如僅高劑量(1/2LD50)組有死亡，其他組均無(wú)死亡，則為弱蓄積性；如低劑量組無(wú)死亡，其他各組間死亡數(shù)有劑量反應(yīng)關(guān)系時(shí)，則為中等蓄積性；如低劑量組有死亡，且有劑量反應(yīng)關(guān)系，則為強(qiáng)蓄積性。（3）、生物半減期法利用毒物代謝動(dòng)力學(xué)原理XB在生物體內(nèi)蓄積的速度與數(shù)量與吸收、消除有關(guān)，蓄積量不能無(wú)限制增加，有一定極限研究表明在等間距接觸條件下，XB在體內(nèi)經(jīng)六個(gè)生物半減期，即可達(dá)到蓄積極限5、化合物毒作用分子機(jī)理。污染物的毒作用機(jī)理是指污染物與生物靶分子相互作用而產(chǎn)生有害生物效應(yīng)的生物化學(xué)和生物物理學(xué)過(guò)程。毒作用的分子機(jī)理有靶位點(diǎn)學(xué)說(shuō)、受體學(xué)說(shuō)、共價(jià)結(jié)合學(xué)說(shuō)、自由基學(xué)說(shuō)。、污染物在生物體內(nèi)達(dá)到某一濃度并足以引發(fā)一系列有害生物效應(yīng)的部位叫靶位點(diǎn)。靶位點(diǎn)學(xué)說(shuō)認(rèn)為污染物常能選擇性地作用于某種細(xì)胞或某一位點(diǎn)，或作用于多種細(xì)胞或多個(gè)位點(diǎn)。靶位點(diǎn)的位置：污染物及其代謝產(chǎn)物與生物體接觸部位或生物轉(zhuǎn)運(yùn)，或生物轉(zhuǎn)化過(guò)程所發(fā)生的部位。影響因素有污染物理化性質(zhì)、靶位點(diǎn)的生理學(xué)功能。、受體學(xué)說(shuō)：存在于細(xì)胞膜上或細(xì)胞內(nèi)對(duì)特定生物活性物質(zhì)具有識(shí)別能力并可選擇性地與其結(jié)合的蛋白質(zhì)（受體），與外來(lái)化合物結(jié)合，進(jìn)而引發(fā)一系列識(shí)別、換能和放大過(guò)程，最后導(dǎo)致生物學(xué)效應(yīng)。根據(jù)作用原理主要有四種受體 I. 配體門(mén)控離子通道型受體(如ca離子通道受體）II. G蛋白偶聯(lián)受體III. 具有酪氨酸激活酶活性的受體IV. 細(xì)胞內(nèi)受體、共價(jià)結(jié)合學(xué)說(shuō)：是指污染物或其代謝產(chǎn)物在生物體內(nèi),可以與生物大分子(RNA、DNA、酶等）發(fā)生共價(jià)結(jié)合，從而改變生物大分子的結(jié)構(gòu)與功能，引起一系列的有害生物效應(yīng)。、自由基學(xué)說(shuō)：進(jìn)入生物體內(nèi)的污染物，可以在生物轉(zhuǎn)化過(guò)程中形成各種自由基中間體，導(dǎo)致脂質(zhì)過(guò)氧化等反應(yīng)，從而造成細(xì)胞損傷和死亡。危害：對(duì)不飽和脂肪酸（PUFA）的攻擊:可啟動(dòng)與增強(qiáng)細(xì)胞膜脂質(zhì)過(guò)氧化鏈?zhǔn)椒磻?yīng)對(duì)蛋白質(zhì)的作用：缺氧，導(dǎo)致蛋白質(zhì)分子內(nèi)或分子間交聯(lián)形成高聚蛋白質(zhì)；斷解；或直接攻擊氨基酸 核酸：DNA主鏈的斷裂、單股DNA鏈的斷裂、交聯(lián)堿基降解、氫鍵的斷裂等6、主要致突變?cè)囼?yàn)機(jī)理及其主要方法：Ames實(shí)驗(yàn)、微核試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)、姊妹染色單體實(shí)驗(yàn)、果蠅實(shí)驗(yàn)、DNA修復(fù)合成實(shí)驗(yàn)。（一個(gè)）鼠傷寒沙門(mén)氏菌/哺乳動(dòng)物微粒體酶試驗(yàn)法（Ames實(shí)驗(yàn)）實(shí)驗(yàn)原理：利用鼠傷寒沙門(mén)氏菌的突變型菌株（自然回復(fù)率低失去對(duì)紫外損傷的恢復(fù)能力細(xì)胞壁脂多糖性質(zhì)變化，喪失屏障作用）表現(xiàn)為需組氨酸營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株，其在具致突變的XB作用下，有的還需肝微粒體酶（使前致突變物活化，轉(zhuǎn)化為致突變作用的親電子性終致突變物，增加靈敏性）的活化，可使突變型鼠傷寒沙門(mén)氏菌恢復(fù)為野生型。（能在不含組氨酸的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)）方法：1. 大鼠先用多氯聯(lián)苯或巴比妥類(lèi)進(jìn)行酶誘導(dǎo)數(shù)日，取出肝臟，勻漿，12000g離心，取上清液，加入輔助因子（NADP、G-6-P），制成S-9混合物；2. 將突變菌株、受試物、S-9混合物混勻，在特定的缺乏組氨酸的培養(yǎng)基上培養(yǎng)3. 若受試物平皿上生長(zhǎng)的菌落數(shù)大于對(duì)照平皿自發(fā)回復(fù)突變菌落數(shù)二倍以上，且呈劑量-效應(yīng)關(guān)系，判斷受試物可能具突變作用果蠅伴性隱性致死試驗(yàn)原理：致突變物可在雄性X染色體上誘導(dǎo)隱性致死突變。將處理的雄蠅與未處理的雌蠅交配，其基因可通過(guò)攜帶此隱性致死突變的子一代雌蠅傳給子二代雄蠅，并引起死亡。方法：雄蠅饑餓4h后染毒，喂飼24-72h后，雄蠅20只按1雄3雌比例與處女蠅交配，經(jīng)2周，子1代長(zhǎng)成。每管各取子1代按1：3雄雌比例交配，培養(yǎng)子2代。觀察每管中已有20個(gè)以上果蠅的結(jié)果結(jié)果：o 不見(jiàn)圓、紅眼雄蠅為陽(yáng)性o 見(jiàn)2只圓紅眼為陰性o 僅1只圓紅眼或F2不足20只者為可疑特點(diǎn)：較靈敏、簡(jiǎn)單、可靠；一些不易在Ames試驗(yàn)方法測(cè)出致突變性XB可用此法測(cè)出；對(duì)芳香胺類(lèi)和多環(huán)芳烴不敏感。、微核試驗(yàn) 原理：正常細(xì)胞在有絲分裂中期，染色體均排列在赤道板附近，分裂后期分成兩份，分別向兩極移動(dòng)，在終期分別形成兩個(gè)細(xì)胞的核。如在分裂細(xì)胞染色體受到某種損傷，在中期就會(huì)觀察到染色體斷裂，在分裂后期，斷片落后于向兩極移動(dòng)的染色體而滯留在赤道板附近，形成微核。（表現(xiàn)是在間期細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中出現(xiàn)一個(gè)或幾個(gè)圓形或杏形結(jié)構(gòu)，直徑為細(xì)胞直徑的1/5-1/20。）材料：嚙齒類(lèi)動(dòng)物骨髓多染性細(xì)胞：常用PCE（小鼠骨髓多染紅細(xì)胞）人類(lèi)外周血淋巴細(xì)胞蠶豆動(dòng)物：18-22g的小鼠或150-200g 的大鼠劑量分組：每組至少雌雄各5只；劑量根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)或1/5-1/20LD50內(nèi)選擇3-4個(gè)劑量，并設(shè)陽(yáng)性與陰性對(duì)照；通常一次投入采樣時(shí)間：至少三次，第一次不早與處理后12h；最后一次不晚于處理后72h；應(yīng)在敏感期采樣。制片：處死后，剪取一根肋骨，剪掉股骨頭，露出髓腔，用小牛血清將骨髓細(xì)胞洗入離心管，離心1000r/分鐘，5分鐘；留少量血清懸浮液涂片，甲醇固定5分鐘；隔天染色；熒光顯微鏡下觀察，一個(gè)骨髓細(xì)胞出現(xiàn)多于一個(gè)的微核，仍算一個(gè)。、姐妹染色單體交換試驗(yàn)SCE原理：5-溴脫氧尿嘧啶（Brdu）是胸腺嘧啶核苷（T）的類(lèi)似物，在DNA復(fù)制過(guò)程中，Brdu能替代胸腺嘧啶核苷的位置，摻入新復(fù)制的核苷酸鏈中，當(dāng)細(xì)胞在含有Brdu的培養(yǎng)液中經(jīng)過(guò)兩個(gè)細(xì)胞周期后，兩條姐妹染色單體的DNA雙鏈在化學(xué)組成上就有差別。 采用熒光染料加姬姆薩（PFG）染色，一條單鏈有Brdu染色深，兩條有Brdu染色淺。方法：實(shí)驗(yàn)生物材料：體外試驗(yàn)可用外周淋巴細(xì)胞或哺乳動(dòng)物細(xì)胞，最常用CHO；體內(nèi)試驗(yàn)常用小鼠結(jié)果判定：染色觀察，SCE增加頻率需要有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。、DNA修復(fù)合成實(shí)驗(yàn)原理：細(xì)胞對(duì)DNA損傷具有修復(fù)能力。當(dāng)細(xì)胞與化合物接觸后，能誘導(dǎo)DNA修復(fù)合成，即可推斷該化合物具有損傷DNA的潛力。方法：實(shí)驗(yàn)生物材料：選接觸抑制敏感、不增殖或增殖速度極慢的細(xì)胞（淋巴細(xì)胞、外周血細(xì)胞、游離肝細(xì)胞等）抑制正常S期DNA復(fù)制方法有：加入化學(xué)抑制劑（羥基脲）；使細(xì)胞處于接觸抑制；剝奪部分營(yíng)養(yǎng)物等 設(shè)陽(yáng)性對(duì)照：二甲基亞硝胺試驗(yàn)：在含有放射性標(biāo)記的DNA前體（3H-胸苷）的培養(yǎng)液中受試物處理細(xì)胞結(jié)果評(píng)定：呈劑量效應(yīng)關(guān)系；與陰性對(duì)照呈顯著性差異。7、進(jìn)行安全性評(píng)價(jià)工作前的準(zhǔn)備工作。資料收集 受試化學(xué)品的準(zhǔn)備 試驗(yàn)動(dòng)物的準(zhǔn)備資料收集1、掌握該物質(zhì)的基本資料和相關(guān)數(shù)據(jù)：化學(xué)結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)（包括化學(xué)結(jié)構(gòu)、純度、沸點(diǎn)、蒸汽壓、溶解度、pH、穩(wěn)定性等） 、定量測(cè)定方法2、了解生產(chǎn)過(guò)程中所用的原料或中間體3、了解該化學(xué)物可能的用途、使用范圍、使用方法和使用劑量4、人體暴露的途徑和可能的攝入量受試化學(xué)品的準(zhǔn)備樣品要求：受試物必須是符合既定的生產(chǎn)工藝和配方的規(guī)格化產(chǎn)品，其純度應(yīng)與實(shí)際應(yīng)用的相同，在需要檢測(cè)高純度受試物及其可能存在的雜質(zhì)的毒性或進(jìn)行特殊試驗(yàn)時(shí)可選用純品，或以純品及雜質(zhì)分別進(jìn)行毒性檢測(cè)。試驗(yàn)動(dòng)物的準(zhǔn)備動(dòng)物：對(duì)受試物的代謝近可能與人類(lèi)相似，最先考慮哺乳動(dòng)物與雜食動(dòng)物大鼠；純系動(dòng)物或內(nèi)部雜交動(dòng)物和第一代雜種動(dòng)物。8、食品安全性毒理學(xué)評(píng)價(jià)程序中評(píng)價(jià)試驗(yàn)的選擇原則。 我國(guó)創(chuàng)制的新化學(xué)物質(zhì)，一般要求進(jìn)行四個(gè)階段實(shí)驗(yàn)，特別是其中化學(xué)結(jié)構(gòu)提示有慢性毒性和（或）致癌可能，或產(chǎn)量大、使用面廣、攝入機(jī)會(huì)多，必須進(jìn)行全部四階段的實(shí)驗(yàn)。 凡屬與已知物質(zhì)的化學(xué)結(jié)構(gòu)基本相同的衍生物，則根據(jù)一、二、三階段實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，由專(zhuān)家決定是否需第四階段實(shí)驗(yàn)。 如多數(shù)國(guó)家已