腎陽虛機(jī)理研究進(jìn)展.doc

精品文檔腎陽虛機(jī)理研究進(jìn)展葉東東 康永1.山西省中醫(yī)藥研究院碩士研究生2013級（太原030012 ）；2.山西省中醫(yī)藥研究院（太原030012）摘要：目前對腎陽虛機(jī)理沒有統(tǒng)一的認(rèn)識，神經(jīng)-內(nèi)分泌-免疫調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)組學(xué)，代謝組學(xué)，轉(zhuǎn)錄組學(xué)，基因組學(xué)，蛋白質(zhì)組學(xué)等學(xué)說眾說不一。本文從不同角度對腎陽虛的機(jī)理進(jìn)行全面系統(tǒng)的闡釋。Abstract: Currently, the scientific community have no unified understand on declination of kidney yang, the theory of neuro-endocrine-immunoregulatory network, Metabonomics, Transcriptomics, Genomics, Proteome, ect have different points, In this paper, we are from different angles to conduct declination of kidney yang.關(guān)鍵詞：腎陽虛；神經(jīng)內(nèi)分泌免疫調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)；系統(tǒng)生物學(xué)Keywords：declinationofkidneyyang；neuro-endocrine-immunoregulatory network；systems biology腎陽虛，即腎臟陽氣虛衰，是腎臟陽氣衰竭表現(xiàn)的征候。臨床表現(xiàn)癥狀多見腰膝酸軟，四肢不溫，面色朓白，腹中冷痛，小便清長，舌淡苔薄白，脈沉遲。中醫(yī)認(rèn)為陽虛多因年老腎虧，久病傷腎，以及房勞過度等因素引起的?，F(xiàn)在對腎陽虛的本質(zhì)還沒有統(tǒng)一的認(rèn)識，通過神經(jīng)-內(nèi)分泌-免疫調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)組學(xué)，代謝組學(xué)，轉(zhuǎn)錄組學(xué)，基因組學(xué)，蛋白質(zhì)組學(xué)等學(xué)說多年的研究，從人體系統(tǒng)到基因分子水平，取得了不同層次研究成果。1.腎陽虛與神經(jīng)內(nèi)分泌免疫調(diào)節(jié)組學(xué)1.1腎陽虛與神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)下丘腦垂體靶腺軸(腎上腺軸、甲狀腺軸、性腺軸)的功能障礙和功能低下是腎陽虛證的物質(zhì)基礎(chǔ)。甲狀腺激素與腎上腺素在體溫調(diào)節(jié)方面起協(xié)同作用。甲狀腺激素與性腺激素在生長發(fā)育方面起到協(xié)同作用，陽虛患者常多伴有性腺功能低下。從1959年,鄺安堃等用糖皮質(zhì)激素造成了腎陽虛小鼠模型開始，到沈自尹等發(fā)現(xiàn)不同病種的腎陽虛證病人有靶器官損傷，鐘歷勇等研究了補(bǔ)腎中藥能對下丘腦垂體靶腺軸起到保護(hù)作用。還有很多的藥理實(shí)驗(yàn)，臨床實(shí)驗(yàn)都可以證明腎陽虛證與神經(jīng)內(nèi)分泌功能紊亂有關(guān)。1.1.1下丘腦-垂體-腎上腺軸腎陽虛患者整體表現(xiàn)出代謝低下的趨勢。腎上腺素可促進(jìn)糖原和脂肪分解，增加組織耗氧量及產(chǎn)熱量，如果腎上腺素水平低下就不能很好的促進(jìn)糖原和脂肪分解，影響機(jī)體產(chǎn)熱。馬娜，羅來成，朱東海把90只SD雄性大鼠分為正常組，模型組，右歸丸組，每組30只。用氫化可的松注射液對模型組和右歸丸組SD雄性大鼠肌注29天，進(jìn)行腎陽虛造模。造模成功后，模型組和右歸丸組分別用生理鹽水和右歸丸水煎液灌胃22天。在灌胃的第一周，第二周，第三周，每次從每組中取10只大鼠，抽取血清，用放射免疫法測定垂體-腎上腺軸激素的含量并取垂體和腎上腺稱取重量。結(jié)果發(fā)現(xiàn)模型組大鼠垂體-腎上腺軸激素水平不斷下降，且垂體和靶腺下降程度一致。右歸丸組大鼠垂體-腎上腺軸的激素水平、腎上腺重量較模型組有明顯提高（1）。徐文聃，王欣等將60只SD大鼠隨機(jī)分為正常組，模型組，腎氣丸組，附桂混懸液組，六味地黃丸組5組，每組12只。用氫化可的松造模20天，藥物干預(yù)組在造模的同時給予藥物干預(yù)。每5天記錄一次大鼠體征，最后通過腹腔靜脈采血，分離血清和摘取下丘腦制備漿液，用ELISA法分別測定大鼠促腎上腺皮質(zhì)激素、皮質(zhì)醇和促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素受體1、促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素。結(jié)果發(fā)現(xiàn)模型組血清中ACTH、CORT和下丘腦中CRH、CRHR1的含量明顯降低，腎氣丸組有明顯升高，附桂混懸液組次之，六味地黃丸組無效（2）。1.1.2下丘腦-垂體-甲狀腺軸 甲狀腺激素在寒冷，緊張時分泌，有促進(jìn)新陳代謝和發(fā)育，提高神經(jīng)系統(tǒng)的興奮性，使心律加快，增加產(chǎn)熱。 王秀鳳，張磊等將60只SPF級雄性SD大鼠隨機(jī)分成正常組和陽虛模型組，模型組用氫化可的松造模29天。分別在第15，23，30天，每組每次取10只大鼠取血，用放射免疫分析法檢測TSH、T3、T4 和ACTH、CORT的含量。結(jié)果發(fā)現(xiàn)下丘腦-垂體-腎上腺軸與甲狀腺軸之間的失衡是腎陽虛的一個病因（3）。 林清志用溫補(bǔ)脾腎、益氣活血方藥配合優(yōu)甲樂治療甲減有效率高達(dá)100%。郭海玲將86例甲減患者分成2組，發(fā)現(xiàn)多用真武湯加味組有效率為95.5%，比單純用優(yōu)甲樂組的有效率高。徐文華等用溫腎方配合優(yōu)甲樂治療甲減有效率達(dá)95%。張敏等用參桂甲減飲配合優(yōu)甲樂治療老年甲減總有效率達(dá)93.75%。徐玨用還少膠囊配合優(yōu)甲樂治療甲減有效率為93.3%（4）。1.1.3下丘腦-垂體-性腺軸性激素具有促進(jìn)細(xì)胞的增殖與分化，生殖器官的發(fā)育成熟的功能，影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)，調(diào)節(jié)機(jī)體對環(huán)境的適應(yīng)以及通過三大營養(yǎng)物質(zhì)代謝為生命活動供給能量。張宗保摘除60只Wister大鼠雙側(cè)睪丸，制造去勢模型。第3天將60只大鼠隨機(jī)分成正常對照組，去勢模型組，陽性對照組，鹿茸益腎膠囊高、中、低對照組，共6組。觀察去勢大鼠陰莖勃起時間，對大鼠附性器官、垂體、腎上腺進(jìn)行稱重和測定血清中性激素的含量。結(jié)果發(fā)現(xiàn)鹿茸益腎膠囊能縮短去勢組大鼠陰莖勃起潛伏時間，提高附性器官、垂體、腎上腺重量，限制升高血清中的睪丸酮和皮質(zhì)醇（5）。 毛愿舒，王加維收集62例腎陽虛排卵障礙型不孕患者作為觀察病例，把62名患者隨機(jī)分成中藥人工周期聯(lián)合克羅米芬治療組和克羅米芬對照組。結(jié)果發(fā)現(xiàn)治療組的中醫(yī)癥狀、卵泡生長情況、性激素激素水平、妊娠率都得到了很好的改善，且比對照組療效更加好（6）。1.2腎陽虛與免疫系統(tǒng)胸腺超微結(jié)構(gòu)的損傷是導(dǎo)致腎陽虛小鼠下丘腦一垂體一胸腺功能低下的重要原因。腎陽虛證患者表現(xiàn)為從細(xì)胞免疫到體液免疫及補(bǔ)體整體水平的下降。在免疫組織方面,主要表現(xiàn)為胸腺，脾臟縮小、重量減輕、脾細(xì)胞懸液內(nèi)溶菌酶含量減少。顏亭祥，李震對房事不節(jié)陽虛型小鼠胸腺和脾臟稱重,發(fā)兩個免疫器官重量都減小。對模型小鼠胸腺的形態(tài)學(xué)進(jìn)行光學(xué)顯微鏡和電子顯微鏡觀察，發(fā)現(xiàn)胸腺體積縮小，胸腺皮質(zhì)變薄,且細(xì)胞數(shù)量明顯減少。右歸丸治療組胸腺重量和細(xì)胞數(shù)量得到明顯提高（7）。2. 腎陽虛與蛋白質(zhì)組學(xué) 蛋白組學(xué)是從整體角度分析機(jī)體全部蛋白質(zhì)的組成成分、表達(dá)水平與修飾狀態(tài)，了解蛋白質(zhì)之間的相互作用與聯(lián)系，揭示蛋白質(zhì)的功能與細(xì)胞生命活動的規(guī)律的一門學(xué)科?？梢匝芯磕I陽虛患者與正常人的蛋白質(zhì)的差異，發(fā)現(xiàn)腎陽虛的本質(zhì)機(jī)理。譚從娥，黃祥云等對4名腎陽虛患者用右歸丸進(jìn)行治療，分別采取4名患者治療前后外周血液，從血清中分離提取蛋白質(zhì)，采用核素標(biāo)記蛋白組學(xué)技術(shù)篩選出治療前后4組均存在差異且表達(dá)一致的蛋白質(zhì)有6個。最后得出補(bǔ)體C3 ，原肌球蛋白治療含量下調(diào)，脯氨酸尿蛋白，半胱氨酸抑制酶，載脂蛋白C，載脂蛋白E治療后含量上調(diào)與腎陽虛有直接密切關(guān)系（8）。3. 腎陽虛與基因組學(xué) 基因組學(xué)研究的方法學(xué)內(nèi)容與中醫(yī)學(xué)的基本思想比較接近，通過基因組學(xué)研究，建立腎陽虛證的基因變異及基因表達(dá)差異譜和功能基因調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，并從基因組學(xué)的角度探討腎陽虛的機(jī)理。 黃禹峰，李煒宏利用基因芯片技術(shù)研究少年，中年，老年不同人群的腎陽虛基因表達(dá)圖譜，發(fā)現(xiàn)腎陽虛組與正常組確實(shí)存在基因差異，影響能量合成與代謝。且腎陽虛基因差異影響兒童造血功能，中年人細(xì)胞增殖功能，老年人生殖功能（9）。魏敏，趙曉山等對亞健康腎陽虛患者和正常人的基因做比較，通過基因芯片技術(shù)獲得基因圖譜，發(fā)現(xiàn)75條存在差異，其中22條上調(diào)，53條下調(diào)（10）。 姚實(shí)林，張祖志等通過測定30例腎陽虛患者外周血白細(xì)胞 DNA的全基因組，發(fā)現(xiàn)陽虛質(zhì)者基因組存在一些特異的拷貝數(shù)變異，這些 CNVs 可能導(dǎo)致陽虛質(zhì)表型（11）。 曾躍琴，李煒弘等利用結(jié)合重亞硫酸鹽測序法發(fā)現(xiàn)受試血漿中有5種基因啟動子區(qū)甲基化狀態(tài)與是否患有腎陽虛證相關(guān)（12）。4. 腎陽虛與轉(zhuǎn)錄組學(xué) 轉(zhuǎn)錄組學(xué)是在mRNA水平研究基因表達(dá)譜，表達(dá)譜可以提供腎陽虛患者的基因表達(dá)信息，并據(jù)此推斷相應(yīng)未知基因的功能，揭示腎陽虛調(diào)節(jié)基因的作用機(jī)制。 于宏波，嚴(yán)石林分別抽取3例典型陽瘓腎陽虛證患者和健康志愿者10ml靜脈血，分離出白細(xì)胞，用,Trizol法提取總RNA。采用基因芯片技術(shù)篩選出1396個差異基因。其中最為突出的發(fā)現(xiàn)是10條蛋白絲氨酸/蘇氨酸磷酸酶復(fù)合物相關(guān)基因與腎陽虛有密切關(guān)系（13）。5. 腎陽虛與代謝組學(xué) 代謝組學(xué)是系統(tǒng)研究代謝產(chǎn)物的變化規(guī)律并揭示機(jī)體生命活動代謝本質(zhì)的科學(xué)，通過對腎陽虛患者與正常人的代謝產(chǎn)物的差異研究，可以發(fā)現(xiàn)腎陽虛的本質(zhì)機(jī)理。 吳思，柴逸峰用PTU藥物成功制造脾腎陽虛型甲減大鼠模型，把24只潔凈級 Wistar 雄性大鼠隨機(jī)分成正常組，模型組，四逆湯組。正常組給予生理鹽水，模型組和四逆湯組給予PTU各15天。最好四逆湯組造模成功后用四逆湯治療4周。通過大鼠眼眶取血，獲得血清。用超高效液相-四級桿飛行時間質(zhì)譜法篩選出 13個潛在的血清生物標(biāo)志物。最后用代謝通路智能分析發(fā)現(xiàn)鞘脂代謝、脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)、磷脂代謝和苯丙氨酸代謝與甲減脾腎陽虛證關(guān)系密切(14)。 中醫(yī)的癥候是指疾病過程中一定階段的病位、病因、病性、病勢及機(jī)體抗病能力的強(qiáng)弱等本質(zhì)有機(jī)聯(lián)系的反應(yīng)狀態(tài)，表現(xiàn)為臨床可被觀察到的癥狀。所以一個學(xué)說從一個層次角度研究腎陽虛機(jī)理是很全面把握的。近年來興起的系統(tǒng)生物學(xué)要實(shí)現(xiàn)從基因到細(xì)胞、到組織、到個體的各個層次的整合，認(rèn)為腎陽虛證的物質(zhì)基礎(chǔ)不是單一的系統(tǒng)或組織，而是人體多個系統(tǒng)和組織共同作用的結(jié)果，很符合中醫(yī)的整體觀。中醫(yī)通過望、聞、問、切，四診合參觀察人體變化和代謝產(chǎn)物，收集人體體征。代謝組學(xué)作為系統(tǒng)生物學(xué)的重要部分，完全符合中醫(yī)診斷的思路，和中藥多成分，多靶點(diǎn)的特性，為我們研究中醫(yī)證型指明了前進(jìn)的道路。參考文獻(xiàn)：1.馬娜，羅來成等.右歸丸對腎陽虛大鼠垂體-腎上腺軸動態(tài)影響的實(shí)驗(yàn)研究J.中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2014，32（6）：1324-1325.2.徐文聃，王欣等.從下丘腦-垂體-腎上腺皮質(zhì)軸探討附子肉桂在腎氣丸中補(bǔ)腎陽的作用J.浙江中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報，2014，38（7）：831-841.3. 王秀鳳，張磊等.基于支持向量機(jī)的腎陽虛大鼠甲狀腺與腎上腺功能的動態(tài)分析J.時珍國醫(yī)國藥，2014，25（8）：2023-2025.4.高潔，王旭.中醫(yī)補(bǔ)陽法在治療甲減中應(yīng)用J.遼寧中醫(yī)大學(xué)學(xué)報，2014，16（3）：111-112.5.張宗保.鹿茸益腎膠囊治療腎陽虛證陽痿的藥效學(xué)研究J.中國執(zhí)業(yè)藥師，2014，11（6）：20-23.6. 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