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文檔簡介
第2課時分離特定的微生物并測定其數(shù)量 第一章無菌操作技術(shù)實(shí)踐 學(xué)習(xí)導(dǎo)航1 認(rèn)識各種微生物形成的菌落特征 2 學(xué)會利用涂布平板法分離 培養(yǎng)微生物 并能測定其數(shù)量 3 掌握利用選擇培養(yǎng)基分離特定微生物的方法 重難點(diǎn)擊簡述分離 培養(yǎng)微生物的方法及數(shù)量測定 一 微生物分離和培養(yǎng)的基本理論 二 以尿素為唯一氮源的土壤微生物的分離 培養(yǎng)與數(shù)量測定 內(nèi)容索引 當(dāng)堂檢測 三 分離土壤中能分解纖維素的微生物 一 微生物分離和培養(yǎng)的基本理論 1 純培養(yǎng)物培養(yǎng)在實(shí)驗(yàn)室中利用培養(yǎng)基可以篩選和分離某種微生物 然后在 的條件下 在培養(yǎng)基上培養(yǎng)該微生物形成單個菌落 即由一個微生物 如某種細(xì)菌 形成的單個菌落 即為純培養(yǎng)物 可用于科學(xué)研究 2 分離特定的微生物 1 平板分離法 概念 能將微生物分離和固定在固體培養(yǎng)基表面或里面 每個孤立的活微生物體經(jīng)過生長 繁殖均可形成 分離 培養(yǎng)微生物最常用的培養(yǎng)基是培養(yǎng)基 基礎(chǔ)梳理 選擇 高度稀釋 固體 單個菌落 單個 單個菌落 瓊脂固體 類型 平板分離法有多種 如平板法 平板法等 a 涂布平板法分離細(xì)菌 將待分離的樣品進(jìn)行10倍系列 取一定稀釋度的樣品0 1ml倒入預(yù)先制備好的培養(yǎng)基平板中 用無菌 將樣品均勻 恒溫培養(yǎng)一段時間 以獲得單個菌落的方法 b 混合平板法分離細(xì)菌 將待分離的樣品進(jìn)行10倍系列稀釋 取一定稀釋度的樣品0 1ml與的培養(yǎng)基 將混合液倒入無菌培養(yǎng)皿中制成平板 培養(yǎng)一段時間 以獲得單個菌落的方法 涂布 混合 稀釋 玻璃涂布器 涂布 熔化冷卻至50 左右 混合均勻 2 選擇培養(yǎng)分離 概念 科學(xué)家針對某種微生物的 設(shè)計(jì)一個特定的環(huán)境 使之這種微生物的生長 而其他微生物的生長 這種通過進(jìn)行微生物純培養(yǎng)分離的技術(shù)稱為選擇培養(yǎng)分離 依據(jù)原理 不同的微生物有不同的或?qū)τ胁煌拿舾行?特別適合 抑制 選擇培養(yǎng) 特性 營養(yǎng)需求 某種化學(xué)物質(zhì) 舉例a 要分離耐高溫菌 可在條件下進(jìn)行培養(yǎng) b 要分離對某種抗生素具有抗性的菌種 可在加有 如鏈霉素或青霉素 的平板上進(jìn)行分離 c 在培養(yǎng)基中加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10 的酚 可以抑制的生長 d 運(yùn)用將作為唯一碳源和能源的培養(yǎng)基 可以有效地分離能分解纖維素的細(xì)菌 e 運(yùn)用培養(yǎng)基 培養(yǎng)基完全不含氮元素 可選擇能固氮的細(xì)菌 f 運(yùn)用只含尿素而不含其他氮元素的培養(yǎng)基 可以選擇 的微生物 能合成脲酶的微生物可以分解尿素 高溫 該抗生素 細(xì)菌和霉菌 纖維素 無氮 能分解尿素以獲取氮 3 觀察各種微生物形成的菌落 1 菌落 指微生物在適宜的表面或內(nèi)部生長 繁殖到一定程度 形成 有一定的子細(xì)胞生長群體 2 菌落特征 微生物在培養(yǎng)基上生長形成的一般都具有穩(wěn)定的特征 如菌落的大小 形狀 邊緣特征 隆起程度 顏色等 這些可以作為對微生物進(jìn)行 的重要依據(jù) 單個 固體培養(yǎng)基 肉眼可見的 形態(tài)結(jié)構(gòu) 不同 特定 菌落 分類 鑒定 問題探究 1 如何從眾多微生物中分離某種微生物 所利用的原理是什么 答案 答案根據(jù)微生物所需營養(yǎng)物質(zhì) 氧氣 ph不同利用選擇培養(yǎng)基選擇 2 結(jié)合教材完善下圖中兩種分離和純化微生物的平板分離法并思考 涂布 涂布均勻 混合 表面 表面和 內(nèi)部 培養(yǎng)基 1 涂布平板法的實(shí)質(zhì)是什么 答案在稀釋度足夠高的菌液里 聚集在一起的微生物將被分散成單個細(xì)胞 從而能在培養(yǎng)基表面形成單個菌落 答案 2 試比較兩種分離和純化方法 涂布 先制作平板后加入菌液 平板表面 菌液與培養(yǎng)基混合 共同倒平板 平板表面和內(nèi)部 3 選擇培養(yǎng)分離所利用的培養(yǎng)基是什么培養(yǎng)基 它利用的原理是什么 答案選擇培養(yǎng)分離所利用的培養(yǎng)基是選擇培養(yǎng)基 它利用的原理是不同的微生物有不同的營養(yǎng)需求或?qū)δ撤N化學(xué)物質(zhì)有不同的敏感性 4 通常以菌落的哪些表觀特征來對微生物進(jìn)行分類 鑒定等 答案菌落的大小 形狀 邊緣特征 隆起程度 顏色等 答案 1 菌落的特征 菌落形態(tài)包括菌落的大小 形狀 邊緣 光澤 質(zhì)地 顏色和透明程度等 每一種細(xì)菌在一定條件下形成固定的菌落特征 這些特征對菌種識別 鑒定有一定意義 2 選擇培養(yǎng)基篩選微生物的方法 在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì) 改變培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分 改變微生物的培養(yǎng)條件 3 平板劃線法和涂布平板法的比較 拓展應(yīng)用 1 下列有關(guān)涂布平板法 敘述錯誤的是a 首先將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋b 然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面c 在適宜條件下培養(yǎng)d 結(jié)果都可在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落 答案 解析 解析涂布平板法是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋 然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面 進(jìn)行培養(yǎng) 用不同稀釋度的菌液接種 只有在稀釋度足夠高的菌液里 聚集在一起的微生物被分散成單個細(xì)胞 才能夠在培養(yǎng)基表面形成單個菌落 而不是所有培養(yǎng)基上均可出現(xiàn)單個菌落 1 移液時需要注意哪些問題 答案移液管也需經(jīng)過滅菌 操作時 試管口和移液管應(yīng)在離火焰1 2cm處 吸管頭不要接觸任何其他物體 2 如何處理涂布器 答案將涂布器浸在盛有70 酒精的燒杯中 取出時 讓多余的酒精在燒杯中滴盡 然后將沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃 答案 2 從自然菌樣中篩選較理想生產(chǎn)菌種的一般步驟是 采集菌樣 富集培養(yǎng) 純種分離 性能測定 1 不同微生物的生存環(huán)境不同 獲得理想微生物的第一步是從適合的環(huán)境采集菌樣 然后再按一定的方法分離 純化 培養(yǎng)嗜鹽菌的菌樣應(yīng)從 填 高鹽 或 低鹽 環(huán)境采集 培養(yǎng)厭氧菌的菌樣應(yīng)從 填 有氧 或 無氧 環(huán)境采集 解析在長期自然選擇的作用下 生物與其生活環(huán)境相適應(yīng) 培養(yǎng)嗜鹽菌的菌樣應(yīng)從高鹽環(huán)境中采集 培養(yǎng)厭氧菌應(yīng)從無氧環(huán)境中采集 答案 解析 高鹽 無氧 2 富集培養(yǎng)指創(chuàng)設(shè)僅適應(yīng)于該條件的微生物旺盛生長的特定的環(huán)境條件 使待分離微生物在群落中的數(shù)量大大增加 從而達(dá)到從自然界中分離到所需的特定微生物目的的微生物培養(yǎng)方法 對嗜鹽菌富集培養(yǎng)的培養(yǎng)基應(yīng)是培養(yǎng)基 對含耐高溫淀粉酶的微生物富集培養(yǎng)應(yīng)選擇 的培養(yǎng)基 并在條件下培養(yǎng) 解析對嗜鹽菌富集培養(yǎng)的培養(yǎng)基應(yīng)是加鹽培養(yǎng)基 對含耐高溫淀粉酶的微生物富集培養(yǎng)應(yīng)選擇以淀粉為唯一碳源的培養(yǎng)基且在高溫條件下培養(yǎng) 答案 解析 加鹽 以淀粉 為唯一碳源 高溫 3 實(shí)驗(yàn)室最常用的滅菌方法是利用高溫處理達(dá)到殺菌的效果 高溫滅菌的原理是高溫使微生物的蛋白質(zhì)和核酸等物質(zhì)發(fā)生 滅菌法是微生物研究和教學(xué)中應(yīng)用最廣 效果最好的濕熱滅菌法 解析高溫能使蛋白質(zhì)和核酸發(fā)生不可逆轉(zhuǎn)的變性 高壓蒸汽滅菌法是應(yīng)用最廣 效果最好的濕熱滅菌法 答案 解析 變性 高壓蒸汽 4 如圖是采用純化微生物培養(yǎng)的兩種接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖解 請分析接種的具體方法 獲得圖a效果的接種方法是 獲得圖b效果的接種方法是 解析從培養(yǎng)基中菌落分布看 獲得圖a用的是涂布平板法 獲得圖b用的是平板劃線法 答案 解析 涂布平板法 平板劃線法 二 以尿素為唯一氮源的土壤微生物的分離 培養(yǎng)與數(shù)量測定 基礎(chǔ)梳理 1 原理 采用唯一氮源為的選擇培養(yǎng)基來培養(yǎng) 分離出能在此培養(yǎng)基中生長 繁殖的微生物 2 實(shí)驗(yàn)流程采集土壤 制備懸液 制備系列稀釋液 選擇培養(yǎng) 采用選擇培養(yǎng)基培養(yǎng) 接種 涂布平板 培養(yǎng)與觀察 計(jì)數(shù)菌落 選取菌落數(shù)為的一組為樣本進(jìn)行統(tǒng)計(jì) 尿素 30 300 3 顯微鏡直接計(jì)數(shù)法 1 原理 此法利用血球計(jì)數(shù)板 在顯微鏡下計(jì)算的樣品中微生物數(shù)量 但不能區(qū)分細(xì)菌的 血球計(jì)數(shù)板是一塊特制的載玻片 上面有一個特定的容積為mm3的計(jì)數(shù)室 計(jì)數(shù)室的規(guī)格有兩種 分別是25 16個小方格或16 25個小方格 但兩種規(guī)格的計(jì)數(shù)室都是由個小格組成的 具體如右圖 一定容積 死活 1 1 0 1 400 2 操作 將清潔干燥的血球計(jì)數(shù)板蓋上蓋玻片 用無菌的毛細(xì)滴管吸取搖勻的土壤微生物培養(yǎng)液 在滴一小滴 讓培養(yǎng)液沿著縫隙通過毛細(xì)滲透作用自動進(jìn)入計(jì)數(shù)室 加樣后靜置min 然后將血球計(jì)數(shù)板置于顯微鏡載物臺上 先用 找到計(jì)數(shù)室所在位置 再換成進(jìn)行觀察和計(jì)數(shù) 3 計(jì)數(shù) 若規(guī)格為16 25型的血球計(jì)數(shù)板 則在計(jì)數(shù)室內(nèi)選個中方格 如圖中加黑點(diǎn)的左上 右上 左下 右下四個角 中的菌體進(jìn)行計(jì)數(shù) 蓋玻片的邊緣 5 低倍鏡 高倍鏡 4 若使用規(guī)格為25 16型的血球計(jì)數(shù)板 則在計(jì)數(shù)室內(nèi)選個中方格 四個角和中央的方格 中的菌體進(jìn)行計(jì)數(shù) 對位于格線上的菌體 一般只統(tǒng)計(jì)格線上的 求出每個所含細(xì)菌的平均數(shù) 再按下面公式求出樣品中所含的細(xì)菌數(shù) 計(jì)算公式如下 每ml原液所含細(xì)菌數(shù) 400 104 4 使用完畢后 將血球計(jì)數(shù)板用水反復(fù)沖洗干凈 切勿用硬物洗刷 洗完后自然即可 5 上方和右邊 小格 每毫升 每小格平均細(xì)菌數(shù) 稀釋倍數(shù) 晾干 問題探究 1 篩選分解尿素的細(xì)菌的選擇培養(yǎng)基下面是篩選分解尿素的細(xì)菌使用的培養(yǎng)基的配方 請分析 1 在培養(yǎng)基的配方中 為微生物的生長提供碳源和氮源的分別是什么物質(zhì) 答案碳源是葡萄糖 氮源是尿素 2 分離分解尿素的細(xì)菌的選擇培養(yǎng)基是如何進(jìn)行選擇的 答案該選擇培養(yǎng)基的配方中 尿素是培養(yǎng)基中的唯一氮源 因此 只有能夠利用尿素的微生物才能夠生長 3 為什么只有能分解尿素的微生物才能在該培養(yǎng)基上生長 答案分解尿素的微生物能合成脲酶 而脲酶可將尿素分解成氨 從而為微生物生長提供氮源 答案 2 下面是土壤中尿素分解菌的分離與計(jì)數(shù)的實(shí)驗(yàn)流程示意圖 請結(jié)合教材提供的資料分析回答下列問題 1 試寫出分離土壤中分解尿素的細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)流程 答案 答案土壤取樣 樣品稀釋 取樣涂布 微生物培養(yǎng) 觀察并記錄結(jié)果 細(xì)菌計(jì)數(shù) 2 統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目甲 乙兩位同學(xué)用涂布平板法測定同一土壤樣品中的細(xì)菌數(shù) 在對應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中 得到以下兩種統(tǒng)計(jì)結(jié)果 甲同學(xué)在該濃度下涂布了一個平板 統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)為230 該同學(xué)的統(tǒng)計(jì)結(jié)果是否真實(shí)可靠 為什么 答案不真實(shí) 為增加實(shí)驗(yàn)的說服力與準(zhǔn)確性 應(yīng)設(shè)置重復(fù)實(shí)驗(yàn) 在同一稀釋度下涂布3個平板 統(tǒng)計(jì)結(jié)果后計(jì)算平均值 答案 乙同學(xué)在該濃度下涂布了3個平板 統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別為21 212 256 該同學(xué)將21舍去 然后取平均值 該同學(xué)對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的處理是否合理 為什么 答案不合理 微生物計(jì)數(shù)時 如果實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)重復(fù)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果不一致的情況 應(yīng)分析實(shí)驗(yàn)過程中可能的影響因素 找出差異的原因 而不能簡單地舍棄后進(jìn)行計(jì)數(shù) 答案 某同學(xué)在三種稀釋度下吸取0 1ml的菌液涂布平板 統(tǒng)計(jì)菌落數(shù) 得到以下的數(shù)據(jù) 試計(jì)算1g樣品的活菌數(shù) 答案105的稀釋度下取0 1ml涂布的三個平板上的菌落數(shù)在30 300之間 計(jì)算其平均值為 212 234 287 3 244 進(jìn)一步可以換算出1g樣品中活菌數(shù)為 244 0 1 105 2 44 108 答案 為什么統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)比活菌的實(shí)際數(shù)目低 答案當(dāng)兩個或多個細(xì)菌連在一起時 平板上觀察到的只是一個菌落 答案 分離尿素分解菌操作中的注意事項(xiàng) 1 在實(shí)驗(yàn)操作中 每個步驟都要注意無菌操作 以防培養(yǎng)基被污染 影響實(shí)驗(yàn)效果 2 樣品稀釋液的最佳濃度為獲得每個平板上有30 300個菌落 這個稀釋度細(xì)菌一般為104 105 106倍稀釋液 放線菌一般為103 104 105倍稀釋液 真菌一般為102 103 104倍稀釋液 3 為排除非測試因素 培養(yǎng)基 的干擾 實(shí)驗(yàn)需設(shè)置牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基進(jìn)行空白對照 4 每一稀釋倍數(shù)的菌液都至少要涂布3個平板 作為重復(fù)實(shí)驗(yàn) 求其平均值 若其中有菌落數(shù)與其他平板懸殊過大的 需要對該平板重新制作 拓展應(yīng)用 3 下列有關(guān)微生物篩選的敘述中 不正確的是a 用全營養(yǎng)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基篩選大腸桿菌b 用高nacl的培養(yǎng)基篩選抗鹽突變菌株c 含酚紅的尿素培養(yǎng)基篩選鑒別出分解尿素的菌株d 利用高溫條件篩選耐熱的taq細(xì)菌 答案 解析 解析全營養(yǎng)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基常用于大腸桿菌的培養(yǎng) 該培養(yǎng)基對微生物無選擇作用 a項(xiàng)錯誤 抗鹽突變菌株具有耐高鹽的能力 因此可以利用高nacl的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行選擇培養(yǎng) b項(xiàng)正確 分解尿素的菌株會分解尿素形成氨 使培養(yǎng)基ph升高 因此可以利用含酚紅的尿素培養(yǎng)基篩選鑒別出分解尿素的菌株 c項(xiàng)正確 利用高溫條件可以篩選耐熱的taq細(xì)菌 d項(xiàng)正確 解析若對大腸桿菌進(jìn)行計(jì)數(shù) 則需要用涂布平板法接種樣品 4 自然界中的微生物往往是混雜生長的 人們在研究微生物時一般要將它們分離提純 然后進(jìn)行數(shù)量的測定 下面是對大腸桿菌進(jìn)行數(shù)量測定的實(shí)驗(yàn) 請回答下列有關(guān)問題 1 實(shí)驗(yàn)步驟 制備稀釋倍數(shù)為102 103 104 105 106的系列稀釋液 為了得到更加準(zhǔn)確的結(jié)果 應(yīng)選用法接種樣品 適宜溫度下培養(yǎng) 答案 解析 涂布平板 2 結(jié)果分析 測定大腸桿菌數(shù)目時 在對應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中 得到以下幾種統(tǒng)計(jì)結(jié)果 與事實(shí)更加接近的是 a 一個平板 統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是230b 兩個平板 統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是220和260 取平均值240c 三個平板 統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是400 212和256 取平均值289d 四個平板 統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是210 260 240和250 取平均值240 答案 解析 解析應(yīng)選取多個菌落數(shù)相差不大的平板進(jìn)行計(jì)數(shù) 取其平均值 一同學(xué)在稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基上測得平板上菌落數(shù)的平均值為212 那么每毫升樣品中的菌落數(shù)約是 涂布平板時所用的稀釋液體積為0 2ml 用這種方法測定菌體密度時 實(shí)際活菌數(shù)量要比測得的數(shù)量 填 多 或 少 因?yàn)?答案 解析 解析212 0 2 106 1 06 109 個 1 06 109個 多 當(dāng)兩個或多個細(xì)菌連在一起時 平板上觀察到的只是一個 菌落 解析因?yàn)橐粋€菌落可能由兩個或多個細(xì)菌連在一起生長而成 所以實(shí)際活菌數(shù)量要比測得的數(shù)量多 1 如果某同學(xué)的稀釋倍數(shù)僅為104 則測定的數(shù)值要比題中測定的數(shù)值高還是低 為什么 答案低 因?yàn)橄♂尡稊?shù)太低 則大部分菌落是由多個細(xì)菌繁殖而成 所以測定的菌落的數(shù)值要偏低 2 第 2 問第 小題c項(xiàng)中菌落數(shù)為400的平板不符合要求 試分析該平板中菌落數(shù)目多于其他平板的可能的原因 答案a 培養(yǎng)基被污染 一些菌落是由雜菌繁殖而成的 b 接種過程中由于操作不當(dāng)感染了雜菌 c 取菌液時沒有搖晃 導(dǎo)致所取菌液中細(xì)菌個體濃度偏大等 答案 用涂布平板法計(jì)數(shù)微生物的注意事項(xiàng) 1 涂布平板操作要求 按照平行重復(fù)的原則 每一稀釋度的菌液涂布3個或3個以上的平板 2 計(jì)數(shù)的時機(jī) 當(dāng)各平板上菌落數(shù)目穩(wěn)定時進(jìn)行計(jì)數(shù) 3 選擇可用于計(jì)數(shù)的平板 選擇菌落數(shù)在30 300之間的平板 相同稀釋度的平板均符合該特點(diǎn) 進(jìn)行計(jì)數(shù) 然后取平均值 三 分離土壤中能分解纖維素的微生物 基礎(chǔ)梳理 1 原理 1 土壤中能分解纖維素的微生物 都能分泌 將纖維素分解成小分子糖類物質(zhì)以滿足自身生命活動的需要 2 培養(yǎng)基 以為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基 2 纖維素分解菌的鑒定 剛果紅染色法 即通過是否產(chǎn)生來說明菌落是由能分解纖維素的細(xì)菌形成的 其原理是 纖維素分解菌 剛果紅纖維素 紅色消失 出現(xiàn) 纖維素酶 纖維素 透明圈 紅色復(fù)合物 透明圈 1 鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基 1 鑒別纖維素分解菌時需在培養(yǎng)基中添加什么物質(zhì) 答案剛果紅染色劑 2 鑒別培養(yǎng)基和選擇培養(yǎng)基在目的和物理性質(zhì)方面的區(qū)別是什么 答案 鑒別培養(yǎng)基是在培養(yǎng)基中加入某些特定的作用底物和指示劑 觀察微生物生長過程中分解底物所釋放的不同產(chǎn)物 通過指示劑的反應(yīng)不同來鑒別微生物 選擇培養(yǎng)基是在培養(yǎng)基中加入某些物質(zhì) 以促進(jìn)目的菌的生長繁殖 同時抑制其他雜菌的生長繁殖 選擇培養(yǎng)的培養(yǎng)基中沒有加入瓊脂 所以屬于液體培養(yǎng)基 而鑒別培養(yǎng)基一般為固體培養(yǎng)基 問題探究 答案 2 透明圈的形成 1 對分離的纖維素分解菌作進(jìn)一步的鑒定的原因是什么 答案產(chǎn)生透明圈的菌落可能是能產(chǎn)生纖維素酶的微生物 也可能是能降解剛果紅的菌種 所以需要進(jìn)一步鑒定 2 簡要概述篩選纖維素分解菌時透明圈是如何形成的 答案纖維素分解菌分解纖維素產(chǎn)生的纖維二糖和葡萄糖 不能與剛果紅形成紅色復(fù)合物 而出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈 3 向含有分解尿素的細(xì)菌的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑 會出現(xiàn)類似的圈嗎 答案分解尿素的細(xì)菌能夠?qū)⒛蛩胤纸獬砂?加入酚紅指示劑后會變紅 也會形成以尿素分解菌為中心的紅色的圈 答案 5 分析下表培養(yǎng)基的配方 請回答下面的問題 纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基 將物質(zhì)溶解后 用蒸餾水定容到1000ml 1 此培養(yǎng)基配方中為微生物提供碳源的主要是 氮源是 2 此配方為培養(yǎng)基 根據(jù)物理狀態(tài) 配方 3 此培養(yǎng)基選擇出的微生物主要是 拓展應(yīng)用 答案 解析 纖維素粉 nano3 酵母膏 水解酪素 液體 纖維素 分解菌 問題導(dǎo)析 問題導(dǎo)析 1 該培養(yǎng)基中是主要的碳源 所以可以用于篩選 2 由于該培養(yǎng)基中沒有加入 所以為培養(yǎng)基 該培養(yǎng)基中微生物與營養(yǎng)成分的接觸更充分 可以提高微生物的代謝效率 纖維素 纖維素分解菌 瓊脂 液體 答案 返回上頁 解析該培養(yǎng)基的主要碳源是纖維素粉 氮源有nano3 酵母膏 水解酪素 因沒有凝固劑成分 因此 該培養(yǎng)基從物理狀態(tài)上看屬于液體培養(yǎng)基 因該培養(yǎng)基僅以纖維素粉為主要碳源 因此 可用于選擇培養(yǎng)纖維素分解菌 返回上頁 1 從土壤中分離纖維素分解菌時 哪種情況下可以省略選擇培養(yǎng) 答案當(dāng)土壤中纖維素分解菌的濃度很高時 可以省略選擇培養(yǎng)這一步驟 2 本題中的培養(yǎng)基配方中的酵母膏可以為微生物提供什么成分 答案可以提供碳源 氮源和生長因子 3 該培養(yǎng)基中纖維素是否為唯一的碳源 答案不是 纖維素是主要的碳源 另外 酵母膏和水解酪素也可以提供少量的碳源 答案 解析剛果紅可以在細(xì)菌菌落形成前倒平板時加入 也可以在菌落形成后加入 若在細(xì)菌菌落形成前倒平板時加入剛果紅 則所加剛果紅要進(jìn)行滅菌 以防雜菌的侵入 影響纖維素分解菌菌落的形成 若在菌落形成后加入剛果紅 則不需要滅菌 6 下列有關(guān)剛果紅染色法的敘述 不正確的是a 剛果紅可以在細(xì)菌菌落形成前倒平板時加入b 剛果紅可以在菌落形成后加入c 剛果紅在菌落形成前倒平板時加入 加入的剛果紅不需要滅菌d 在菌落形成后加入剛果紅時 剛果紅不需要滅菌 答案 解析 關(guān)于纖維素分解菌篩選的三個易錯警示 1 纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基中的碳源并不只有纖維素 其中酵母膏和水解酪素也可起碳源的作用 2 在纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基中生長的不只有纖維素分解菌 因此 選擇培養(yǎng)后要進(jìn)行鑒別培養(yǎng) 才能獲得纖維素分解菌 3 出現(xiàn)透明圈的菌落也不一定是纖維素分解菌 課堂小結(jié) 涂布平板 當(dāng)堂檢測 1 菌種鑒定的重要依據(jù)是a 細(xì)菌的大小 形狀和顏色b 菌落的大小 形狀和顏色c 有無鞭毛d 培養(yǎng)基的不同 2 3 4 1 解析不同種類的微生物所形成的菌落在大小 形狀 邊緣特征 隆起程度 顏色等方面具有一定的差異 所以 在一定條件下所形成的菌落 可以作為微生物鑒定的重要依據(jù) 單個的細(xì)菌用肉眼是看不見的 故細(xì)菌的個體特征不能作為菌種鑒定的依據(jù) 答案 解析 解析在設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)時 一定要涂布至少3個平板 作為重復(fù)組 才能增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的說服力與準(zhǔn)確性 c項(xiàng)雖涂布了三個平板 但是 其中一個平板的計(jì)數(shù)結(jié)果與另兩個相差太
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