浙科版選修1 第一部分 第1課時(shí) 大腸桿菌的培養(yǎng)和分離 課件（62張）.pptx

第1課時(shí)大腸桿菌的培養(yǎng)和分離 第一部分微生物的利用 選修1生物技術(shù)實(shí)踐 一 微生物培養(yǎng)的基本條件 二 細(xì)菌的培養(yǎng)與分離 達(dá)標(biāo)檢測(cè) 內(nèi)容索引 一 微生物培養(yǎng)的基本條件 2 分類 病毒界 放線菌藍(lán)細(xì)菌 生物界 真菌界原生動(dòng)物原生植物 原生生物界 1 微生物 1 特點(diǎn) 簡(jiǎn)單 形體的單細(xì)胞 多細(xì)胞或沒(méi)有的低等生物 新知導(dǎo)學(xué) 結(jié)構(gòu) 微小 細(xì)胞結(jié)構(gòu) 病毒 細(xì)菌 原核 真菌 3 用途 許多種來(lái)源于放線菌和霉菌 酒由發(fā)酵產(chǎn)生 由紅曲霉和毛霉發(fā)酵制成 微生物能用于治理 在新能源領(lǐng)域也將發(fā)揮巨大作用 抗生素 酵母 腐乳 環(huán)境污染 2 培養(yǎng)基 1 概念 培養(yǎng)基是微生物生存的環(huán)境和 2 分類 培養(yǎng)基按物理性質(zhì)?？煞譃楹?一般都含有水 氮源和無(wú)機(jī)鹽四類營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 另外還需滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)ph 特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和氧氣的要求 通常細(xì)菌培養(yǎng)基要用和 來(lái)配制 還要加入一定量的氯化鈉以維持一定的 霉菌培養(yǎng)基一般用配制或添加的豆芽汁即可 3 酸堿性 細(xì)菌通常要求在的環(huán)境中生長(zhǎng) 霉菌要求在 的環(huán)境中生長(zhǎng) 因此 在制備培養(yǎng)基時(shí)需調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的酸堿度 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 固體培養(yǎng)基 液體培養(yǎng)基 碳源 蛋白胨 酵母 提取物 滲透壓 無(wú)機(jī)物 蔗糖 中性偏堿 中性偏 酸 有關(guān)培養(yǎng)微生物所需營(yíng)養(yǎng)的三點(diǎn)提醒 1 不同微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)的需求不同 所以培養(yǎng)不同的微生物所需要的營(yíng)養(yǎng)可能不同 2 對(duì)異養(yǎng)微生物來(lái)說(shuō) 含c h o n的有機(jī)物既是碳源又是氮源 能源 3 培養(yǎng)微生物時(shí)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)要協(xié)調(diào) 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)過(guò)少不能滿足微生物的營(yíng)養(yǎng)需要 過(guò)多對(duì)微生物的生長(zhǎng)有抑制作用 3 滅菌操作 1 常見(jiàn)滅菌方法 對(duì)于培養(yǎng)皿 試管 三角瓶 鑷子等常采用法滅菌 對(duì)于不能加熱滅菌的化合物 如尿素等 只能用過(guò)濾 但玻璃砂漏斗使用前也要在121 下用紙包好滅菌 實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中 一般采用的方法對(duì)接種環(huán)進(jìn)行滅菌 高壓蒸汽滅菌 g6玻璃砂漏斗 灼燒 2 高壓蒸汽滅菌操作的要求 滅菌前各種用品均需用牛皮紙或報(bào)紙包好 在 下滅菌15min 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中不能用 因?yàn)槠湟孜?吸水后容易引起污染 如培養(yǎng)基中有 為防止其分解碳化 要用g cm2壓力 90 以上 滅菌30min 121 脫脂棉 葡萄糖 500 探究1 圖示解讀結(jié)合所學(xué)知識(shí) 完成下圖橫線上大腸桿菌的結(jié)構(gòu)名稱 然后思考 互動(dòng)探究 核糖體 莢膜 細(xì)胞壁 類核區(qū) dna 鞭毛 1 大腸桿菌與酵母菌相比 在結(jié)構(gòu)上最主要的區(qū)別是什么 答案 答案大腸桿菌是原核生物 與酵母菌相比 最主要的區(qū)別是沒(méi)有由核膜包被的細(xì)胞核 2 大腸桿菌是革蘭氏性 的腸道桿菌 在腸道中一般對(duì)人 但也有一些菌株對(duì)人體是的 可以侵襲并產(chǎn)生 但是 任何大腸桿菌如果進(jìn)入人的系統(tǒng) 都會(huì)對(duì)人體產(chǎn)生危害 3 應(yīng)用 大腸桿菌是技術(shù)中被廣泛采用的工具 陰 兼性厭氧 有害 腸黏膜 毒素 無(wú)害 泌尿 基因工程 探究2 歸納概括1 培養(yǎng)基的成分 2 培養(yǎng)基的類型 探究3 比較異同1 比較消毒和滅菌的不同之處 2 幾種消毒和滅菌方法及其適用范圍 煮沸消毒 巴氏消毒 紫外線 接種工具 試管口 干熱滅菌 耐高溫 高壓蒸汽滅菌 1 滅菌與消毒的原理是相同的 僅僅是作用的條件不同 抑菌和滅菌的程度不同 2 對(duì)培養(yǎng)基ph的調(diào)節(jié) 需在滅菌之前進(jìn)行 例1 2017 紹興高二月考 下列有關(guān)大腸桿菌的敘述 正確的是a 大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)的dna全部位于擬核區(qū)b 大腸桿菌是原核生物 屬于兼性厭氧菌c 大腸桿菌的細(xì)胞壁與植物細(xì)胞的細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu) 功能非常相近d 大腸桿菌對(duì)人類無(wú)害 答案 解析 解析大腸桿菌是原核生物 屬于兼性厭氧菌 b項(xiàng)正確 大腸桿菌的小型環(huán)狀dna分子 質(zhì)粒 位于細(xì)胞質(zhì)中 a項(xiàng)錯(cuò)誤 大腸桿菌的細(xì)胞壁的成分和功能與植物細(xì)胞的細(xì)胞壁不同 c項(xiàng)錯(cuò)誤 任何大腸桿菌如果進(jìn)入人的泌尿系統(tǒng) 都會(huì)對(duì)人體產(chǎn)生危害 d項(xiàng)錯(cuò)誤 例2 2017 溫州高二檢測(cè) 下列關(guān)于滅菌的敘述 正確的是a 用于細(xì)菌等微生物培養(yǎng)的培養(yǎng)基都必須用高壓蒸汽滅菌鍋滅菌b 錐形瓶 培養(yǎng)皿 移液管等器具的高壓蒸汽滅菌時(shí)間一般為15min 121 條件下 c 超凈工作臺(tái)或接種箱用紫外燈滅菌30min即可d 滅菌后的培養(yǎng)基 器具就已經(jīng)達(dá)到了完全無(wú)菌 答案 解析 解析培養(yǎng)基通?？梢赃M(jìn)行高壓蒸汽滅菌 若培養(yǎng)基中有碳酸氫鈉 尿素等高溫易分解的成分 就不能用此方法 a項(xiàng)錯(cuò)誤 超凈工作臺(tái)或接種箱用紫外燈滅菌30min 同時(shí)還需打開(kāi)過(guò)濾風(fēng) c項(xiàng)錯(cuò)誤 滅菌后的培養(yǎng)基 器具不一定達(dá)到了完全無(wú)菌 而且要防止二次污染 d項(xiàng)錯(cuò)誤 三種常用滅菌方法的比較 二 細(xì)菌的培養(yǎng)與分離 1 細(xì)菌的培養(yǎng) 1 繁殖方式 細(xì)菌以的方式繁殖 分裂速度很快 約分裂一次 2 人們?cè)谂囵B(yǎng)細(xì)菌時(shí) 需要將已有細(xì)菌的培養(yǎng)物轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)基中 一般用轉(zhuǎn)移帶菌的培養(yǎng)物 大腸桿菌的培養(yǎng)和分離實(shí)驗(yàn)中采用擴(kuò)大培養(yǎng)大腸桿菌 新知導(dǎo)學(xué) 分裂 20min 接種環(huán) lb液體培養(yǎng)基 2 細(xì)菌的分離方法 1 劃線分離法 通過(guò)在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)的操作 由于劃線過(guò)程中 接種環(huán)上的菌液逐漸減少 因此劃線的細(xì)菌間距離加大 經(jīng)過(guò)培養(yǎng)可獲得 2 涂布分離法 用此法分離時(shí) 需要先將培養(yǎng)的菌液 通常稀釋10 5 10 7倍 取ml稀釋度不同的菌液 加在培養(yǎng)皿的培養(yǎng)基上 用涂布在培養(yǎng)基平面上 然后進(jìn)行培養(yǎng) 通常以每個(gè)培養(yǎng)皿中有個(gè)以內(nèi)的單菌落最為合適 3 兩種分離法的比較 分離法 方法簡(jiǎn)單 分離法 單菌落更易分開(kāi) 但操作復(fù)雜些 接種環(huán) 劃線 最后部分 單菌落 稀釋 0 1 固體 玻璃刮刀 20 劃線 涂布 3 大腸桿菌的培養(yǎng)和分離 1 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容 將大腸桿菌擴(kuò)大培養(yǎng)和劃線分離 即用培養(yǎng)基擴(kuò)大培養(yǎng)大腸桿菌 培養(yǎng)后再在培養(yǎng)基上劃線進(jìn)行分離 隨后培養(yǎng)基上就會(huì)形成一個(gè)個(gè)單獨(dú)的菌落 lb液體 lb固體平面 2 實(shí)驗(yàn)步驟 高壓蒸 汽 倒平板 接種 三角瓶 連續(xù)劃線 單個(gè)菌落 單菌落 劃線 4 探究1 圖示解讀固體培養(yǎng)基經(jīng)高壓蒸汽滅菌后 待培養(yǎng)基冷卻到60 時(shí) 需擱置斜面 圖甲 或倒平板 圖乙 請(qǐng)回答下列問(wèn)題 互動(dòng)探究 1 如何確定制備的培養(yǎng)基滅菌是否合格 答案將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置一定時(shí)間 觀察培養(yǎng)基上是否有菌產(chǎn)生 2 在固體培養(yǎng)基凝固前擱置斜面的目的是什么 答案增大接種面積 3 平板冷凝后 為什么要將平板倒置 答案平板冷凝后 皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠 凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高 將平板倒置 既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā) 又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基 造成污染 答案 1 請(qǐng)用文字和箭頭寫(xiě)出正確的倒平板操作流程 2 甲 乙 丙中的滅菌方法是 3 丁中的操作需要等待才能進(jìn)行 4 觀察甲 乙 丙 丁四幅圖 熟悉倒平板的操作流程 請(qǐng)?zhí)羁?灼燒滅菌 丙 乙 甲 丁 平板冷卻凝固 探究2 科學(xué)探究1 平板劃線及培養(yǎng)結(jié)果接種環(huán)在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線 將聚集的菌種逐步分散到培養(yǎng)基的表面 下圖為平板劃線示意圖 a 及培養(yǎng)后菌落分布示意圖 b 1 a圖中 填圖中序號(hào) 區(qū)域?yàn)槠鹗继?在圖中 填圖中字母 區(qū)域更易獲得單菌落 a b 每一次劃線后都要將接種環(huán)灼燒 除第一次劃線外 每一次劃線的起點(diǎn)都是第一次劃線的末端 2 下圖中甲為劃線分離法中最重要的環(huán)節(jié) 乙為操作的結(jié)果 判斷下列正誤 2 劃線分離的注意事項(xiàng) 1 第一次劃線及每次劃線之前都需要灼燒接種環(huán) 2 灼燒接種環(huán) 待其冷卻后才能伸入菌液 以免溫度太高殺死菌種 3 劃線時(shí) 只能蘸取一次菌液 每次劃線以上次劃線的末端為起點(diǎn) 劃線最后一區(qū)不要與第一區(qū)相連 4 劃線用力大小要適當(dāng) 防止用力過(guò)大將培養(yǎng)基劃破 劃線分離過(guò)程中每次灼燒接種環(huán)的目的不同 探究3 科學(xué)探究1 涂布分離法用涂布分離法分離細(xì)菌時(shí) 需要先將培養(yǎng)的菌液稀釋 通常稀釋10 5 10 7倍 取0 1ml稀釋度不同的菌液 加在培養(yǎng)皿的固體培養(yǎng)基上 用玻璃刮刀涂布在培養(yǎng)基平面上 然后進(jìn)行培養(yǎng) 涂布操作如圖所示 a 將浸在盛有酒精的燒杯中 b 取不超過(guò)0 1ml的 滴加到培養(yǎng)基表面 c 將蘸有少量酒精的玻璃刮刀在火焰上引燃 待酒精燃盡后 冷卻8 10s d 用玻璃刮刀將菌液均勻地涂布在培養(yǎng)基表面 涂布時(shí)可轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)皿 使菌液分布均勻 玻璃刮刀 菌液 2 兩種分離方法的比較如圖是采用分離微生物培養(yǎng)的兩種接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖 請(qǐng)思考并回答下列問(wèn)題 1 獲得圖a效果和圖b效果的接種方法分別是什么 答案獲得圖a效果的接種方法為涂布分離法 獲得圖b效果的接種方法為劃線分離法 答案 2 某同學(xué)在分離土壤中的細(xì)菌時(shí) 發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成了一片 最可能的原因是什么 應(yīng)當(dāng)怎樣操作才可避免此種現(xiàn)象 答案最可能的原因是菌液濃度過(guò)高或劃線時(shí)在劃下一區(qū)域前未將接種環(huán)灼燒滅菌 應(yīng)采取的措施是增大稀釋倍數(shù)或每次劃新區(qū)域前先將接種環(huán)灼燒滅菌 答案 a 接種前應(yīng)對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌b 連續(xù)劃線的目的是獲得單個(gè)細(xì)菌形成的菌落c 接種過(guò)程中至少需要對(duì)接種環(huán)灼燒5次d 甲中a區(qū)域?yàn)閯澗€的起始位置 例3 2017 浙江效實(shí)中學(xué)檢測(cè) 在分離 純化大腸桿菌實(shí)驗(yàn)中 劃線接種 甲 培養(yǎng)結(jié)果 乙 如圖所示 有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是 答案 解析 解析培養(yǎng)基一般用高壓蒸汽滅菌法滅菌 a項(xiàng)正確 菌液經(jīng)過(guò)連續(xù)劃線 菌液中的菌體越來(lái)越少 最后容易形成單菌落 b項(xiàng)正確 在每次劃線前后都要對(duì)接種環(huán)進(jìn)行滅菌 因此按照?qǐng)D中劃線順序 d c b a 整個(gè)劃線過(guò)程中至少需要對(duì)接種環(huán)灼燒5次 c項(xiàng)正確 每次劃線的菌種來(lái)自上一區(qū)域的末端 因此劃線的起始區(qū)域菌落多 由圖乙可知 甲中d區(qū)域菌落多 為劃線的起始位置 d項(xiàng)錯(cuò)誤 1 圖甲是利用法進(jìn)行微生物接種 圖乙是利用法進(jìn)行微生物接種 解析分析圖示可知 圖甲為用劃線分離法進(jìn)行微生物接種 圖乙是利用涂布分離法進(jìn)行微生物接種 例4 2017 嘉興高二檢測(cè) 圖甲 圖乙是微生物接種常用的兩種方法 請(qǐng)回答相關(guān)問(wèn)題 答案 解析 劃線分離 涂布分離 2 這兩種方法所用的接種工具分別是和 對(duì)這兩種接種工具進(jìn)行滅菌和消毒的方法依次是和酒精消毒 解析前者利用的工具是接種環(huán)或接種針 后者利用的工具是玻璃刮刀 對(duì)于接種環(huán)而言 滅菌的操作方法是灼燒 玻璃刮刀通常浸泡在70 的酒精中消毒 答案 解析 接種環(huán) 或接種針 玻璃刮刀 灼燒滅菌 3 下圖是采用上述接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖解 其接種方法是 填 圖甲 或 圖乙 解析題圖中 菌落均勻分布 分離效果較好 是涂布分離法操作的結(jié)果 答案 解析 圖乙 4 下列關(guān)于微生物培養(yǎng)和分離的敘述不正確的是 a 利用圖乙所示接種法可以分離微生物但不能對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)b 接種時(shí)連續(xù)劃線的目的是將聚集的菌種逐步稀釋獲得單菌落c 利用圖甲所示接種法接種過(guò)程中 每次劃線前后都要對(duì)接種環(huán)進(jìn)行滅菌d 圖乙所示接種法中使用的接種工具須保存在70 的酒精中 解析采用涂布分離法 可以通過(guò)培養(yǎng)基表面的菌落數(shù) 對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù) 但采用該方法計(jì)數(shù)通常比實(shí)際菌落數(shù)偏低 a項(xiàng)錯(cuò)誤 答案 解析 劃線分離與涂布分離的比較 滅菌 劃線分離 涂布分離 學(xué)習(xí)小結(jié) 達(dá)標(biāo)檢測(cè) 1 2017 杭州高二檢測(cè) 下列有關(guān)大腸桿菌培養(yǎng) 分離的敘述中 錯(cuò)誤的是a 用lb液體培養(yǎng)基擴(kuò)大培養(yǎng)大腸桿菌 再在lb固體培養(yǎng)基的平板上劃線分離b lb液體培養(yǎng)基與lb固體培養(yǎng)基成分的差異是有無(wú)瓊脂c 實(shí)驗(yàn)時(shí)要設(shè)置空白對(duì)照實(shí)驗(yàn)d 獲得大腸桿菌的單細(xì)胞形成的菌落 只能用劃線分離法分離 答案 解析 解析獲得大腸桿菌的單細(xì)胞菌落常用的方法有劃線分離法和涂布分離法 1 2 3 4 5 a 步驟操作時(shí)需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行b 步驟 中 待倒入的培養(yǎng)基冷卻后蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋c 步驟 中 每次劃線前都需對(duì)接種環(huán)進(jìn)行灼燒處理d 劃線接種結(jié)束后 將圖 平板倒置后放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 2 如圖為實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)和純化大腸桿菌過(guò)程中的部分操作步驟 下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是 答案 解析 1 2 3 4 5 解析由圖可知 步驟 是倒平板 步驟 是用接種環(huán)蘸取菌液 步驟 是進(jìn)行平板劃線 步驟 是培養(yǎng) 步驟操作時(shí)需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行 防止被雜菌污染 a項(xiàng)正確 倒完平板后應(yīng)立即蓋上培養(yǎng)皿蓋 冷卻后將平板倒過(guò)來(lái)放置 b項(xiàng)錯(cuò)誤 每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后接種環(huán)上殘留的菌種 使下一次劃線時(shí) 接種環(huán)上的菌種直接來(lái)源于上次劃線的末端 從而通過(guò)劃線次數(shù)的增加 使每次劃線時(shí)菌種的數(shù)目逐漸減少 以便得到單菌落 c項(xiàng)正確 劃線接種結(jié)束后 將平板倒置后放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 有利于培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)和防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基造成污染 d項(xiàng)正確 1 2 3 4 5 3 2017 浙江余姚期末 下列關(guān)于微生物的培養(yǎng)和分離的敘述中 不正確的是a 細(xì)菌能在液體培養(yǎng)基中以分裂方式迅速擴(kuò)增b 噬菌體或大腸桿菌可在蛋白胨培養(yǎng)基中增殖c 滅菌的目的是消滅與培養(yǎng)菌競(jìng)爭(zhēng)的雜菌d 涂布分離法分散細(xì)菌得到單菌落的效果更好 解析噬菌體屬于病毒 營(yíng)寄生生活 不能在蛋白胨培養(yǎng)基中增殖 答案 解析 1 2 3 4 5 4 在劃線分離法操作中 錯(cuò)誤的是a 將接種環(huán)放在酒精燈火焰上灼燒 直到接種環(huán)燒紅b 將燒紅的接種環(huán)在酒精燈火焰旁邊冷卻c 接種環(huán)在平板上的劃線位置是隨機(jī)的d 在蘸取菌種前和接種完畢后均要將試管口通過(guò)火焰 解析接種環(huán)灼燒及接種前后試管口要通過(guò)火焰 其目的是為了防止雜菌污染 將接種環(huán)先冷卻再接種可以避免高溫燙死菌種 因此a b d都是正確的 在平板上劃線時(shí) 要?jiǎng)澣廖鍡l平行線 而不是隨機(jī)劃線 因此c選項(xiàng)錯(cuò)誤 答案 解析 1 2 3 4 5 5 2017 蕭山中學(xué)聯(lián)考 微生物的分離和培養(yǎng)是現(xiàn)代生物工程應(yīng)用中的重要環(huán)節(jié) 下圖甲 乙 丙是大腸桿菌分離和培養(yǎng)過(guò)程中部分操作和實(shí)驗(yàn)結(jié)果示意圖 請(qǐng)據(jù)圖回答有關(guān)問(wèn)題 1 2 3 4 5 1 下圖甲所示的是制備固體培養(yǎng)基時(shí)的實(shí)驗(yàn)操