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第一次微生物學(xué)實驗準備工作及微生物接種技術(shù)細菌革蘭氏染色法第二次細菌芽孢及莢膜染色觀察第三次細菌的運動性觀察及細菌鞭毛染色法第四次常見放線菌及霉菌觀察 一 微生物接種技術(shù)一 實驗?zāi)康膶W(xué)習(xí)微生物接種工具的使用 掌握無菌操作方法 建立有菌概念 二 實驗原理在微生物學(xué)實驗或科研生產(chǎn)中 要經(jīng)常地把一定種類的微生物菌種接種或移植到新鮮培養(yǎng)基中 由于我們接種的微生物都是純種的 所以接種工作都必須在無菌環(huán)境下 在無菌室或超凈工作臺 進行 并嚴格遵守?zé)o菌操作技術(shù) 利用接種工具 如接種環(huán) 接種鏟等 進行菌種的移植 因此無菌操作是接種培養(yǎng)微生物的關(guān)鍵 三 實驗用品接種環(huán)等接種工具 斜面培養(yǎng)基 酒精燈 酒精棉球四 實驗步驟 1 接種工具的介紹接種環(huán) 接種鉤 接種針 接種圈 接種鋤 玻璃涂棒 其他接種工具 2 無菌操作要點1 要求建立 有菌概念 2 接種時要有一個潔凈的環(huán)境 整個操作過程必須在火焰旁進行 3 接種環(huán) 棉塞一定要拿在手上 不能隨便亂丟 3 微生物接種技術(shù)1 斜面接種技術(shù)從斜面菌種將菌移接至另一斜面培養(yǎng)基的方法 叫做斜面接種 接種方法 A 接種前用酒精棉球擦凈桌面 B 將試管貼上標簽 注明菌名 接種日期 接種人姓名等 然后用酒精棉球擦手消毒 C 點燃酒精燈以后 在火焰旁將每一支試管內(nèi)的棉塞稍微轉(zhuǎn)一下 使其松動 以便在接種時易拔出 并將試管放在試管架上 放在接種臺的右前方 D 將菌種和斜面培養(yǎng)基的兩支試管 用大拇指和其他四指握在左手中 使中指位于兩試管之間的部分 斜向上 并使他們呈水平位置 也可將試管橫放在左手掌中央 用四個手指托住試管 大拇指壓在試管上 斜面向上 E 右手拿接種環(huán) 在火焰上將環(huán)的部分燒紅滅菌 環(huán)以上凡在接種可能進入試管內(nèi)的部分 均應(yīng)通過火焰灼燒 見圖4 圖4接種環(huán)滅菌 以下操作 需要使管口靠近火旁F 用右手小指 無名指和手掌拔掉棉塞 G 以火焰灼燒管口 灼燒時應(yīng)不斷轉(zhuǎn)動試管口 使試管口沾染的少量菌得以燒死 H 將燒過的接種環(huán)伸入菌種試管內(nèi) 先將環(huán)接觸沒有長菌的培養(yǎng)基部分 使其冷卻 以免燒死被接種的菌體 然后輕輕接觸菌體 取出少許 慢慢將接種環(huán)抽出試管 圖5 注意盡量不要使環(huán)的部分碰釘子到管壁 取出后不可使環(huán)通過火焰 圖5從一個試管移種到另一試管 I 迅速將接種環(huán)在火焰旁伸進另一試管 在斜面培養(yǎng)基上從底部劃線到頂部 但不要把培養(yǎng)基劃破 也不要使菌種沾染管壁 J 取出接種環(huán) 灼燒試管口 并在火焰旁將棉塞塞上 不要用試管去迎棉塞 以免試管在運到時灌入不潔的空氣 K 將接種環(huán)在火焰上再灼燒滅菌 放回原出后 再騰出手來將棉塞塞緊 將新接種的斜面試管放在試管架上 L 接種后的斜面培養(yǎng)基 放在恒溫箱內(nèi)培養(yǎng) 2 液體接種方法3 穿刺接種方法
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