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文檔簡介

課題2 多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) pcr 擴(kuò)增dna片段 溫故知新1 組成dna分子的基本單位是什么 這些基本單位是如何連接成dna分子的 dna分子結(jié)構(gòu)有什么特點(diǎn) 脫氧核苷酸 脫氧核糖 含氮堿基 嘌呤 嘧啶 腺嘌呤 a 鳥嘌呤 g 胞嘧啶 c 胸腺嘧啶 t 脫氧核苷酸鏈結(jié)構(gòu)簡圖 磷酸二酯鍵 5 5 3 3 dna分子的復(fù)制需要哪些條件 dna分子的復(fù)制過程是怎樣的 溫故知新2 dna母鏈 提供復(fù)制的模板解旋酶 打開dna雙鏈4種脫氧核苷酸 合成子鏈的原料dna聚合酶 催化合成dna子鏈atp 為復(fù)制過程提供能量引物 使dna聚合酶從引物的3 端開始連接脫氧核苷酸 dna復(fù)制的條件 一 pcr原理 pcr 多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) 技術(shù)是一種體外迅速擴(kuò)增dna片段的技術(shù) 它能以極少量的dna為模板 在幾小時內(nèi)復(fù)制出上百萬份的dna拷貝 利用了dna的熱變性原理 通過控制溫度來控制雙鏈的解聚與結(jié)合 dna母鏈 提供復(fù)制的模板解旋酶 打開dna雙鏈4種脫氧核苷酸 合成子鏈的原料dna聚合酶 催化合成dna子鏈atp 為復(fù)制過程提供能量引物 使dna聚合酶從引物的3 端開始連接脫氧核苷酸 pcr反應(yīng)的條件 80 100 耐熱的dna聚合酶 緩沖溶液 維持反應(yīng)的ph值不變 二 pcr反應(yīng)的過程 1 變性 溫度上升到90 以上時 雙鏈dna解聚成為單鏈 2 復(fù)性 退火 溫度下降到50 左右 引物與模板dna單鏈的互補(bǔ)序列配對結(jié)合 3 延伸 溫度上升到72 左右 溶液中的4種脫氧核苷酸在

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