蔗糖酶米氏常數(shù)的測定PPT課件.ppt_第1頁
蔗糖酶米氏常數(shù)的測定PPT課件.ppt_第2頁
蔗糖酶米氏常數(shù)的測定PPT課件.ppt_第3頁
蔗糖酶米氏常數(shù)的測定PPT課件.ppt_第4頁
蔗糖酶米氏常數(shù)的測定PPT課件.ppt_第5頁
已閱讀5頁，還剩5頁未讀， 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明：本文檔由用戶提供并上傳，收益歸屬內(nèi)容提供方，若內(nèi)容存在侵權(quán)，請進行舉報或認領(lǐng)

文檔簡介

目的 了解底物濃度與酶反應(yīng)速度間的關(guān)系 學習求蔗糖酶米氏常數(shù)的方法 原理 米氏方程式v 米氏常數(shù)的求法很多 最常用的是Lineweaver Burk的作圖法 雙倒數(shù)作圖法 米氏方程式可改寫為下列倒數(shù)形式 選擇不同的 s 測定相應(yīng)的v 求出兩者的倒數(shù) 以1 s 為橫坐標 以1 v為縱坐標作圖 繪出一條直線 外推至橫軸相交 橫軸截距即為 1 Km 蔗糖酶米氏常數(shù)的測定 1 2 3 還原糖與3 5 二硝基水楊酸 DNS 試劑反應(yīng) 4 2020 2 5 5 儀器與試劑 1 儀器 分光光度計 恒溫水浴 試管 吸管 秒表 坐標紙2 試劑標準葡萄糖溶液 1mg mL 3 蔗糖溶液 87 7mM 0 2mol LNaAc緩沖溶液 pH4 6 0 5mol LNaOH溶液3 5 二硝基水楊酸試劑 6 操作步驟 1 葡萄糖標準曲線的制定 將各管溶液混合均勻 在沸水浴中加熱5min 取出后立即用冷水冷卻至室溫 以蒸餾水稀釋至25mL 搖勻 測540nm處A值 以葡萄糖含量 mg 為橫坐標 A值為縱坐標作出標準曲線 7 取試管8支編號 按下表將蔗糖溶液 醋酸緩沖液分別加入試管 于37 水浴中保溫10min 一定量酶液同一水浴中保溫約10min 于各管中依次按同樣間隔 0 5min 加入已保溫過的酶液1 0mL 計時 立即搖勻 在37 中準確溫浴5min 按同樣次序和時間間隔 加入1mL0 5mol LNaOH 搖勻 終止反應(yīng) 吸取反應(yīng)物1 0mL 加入盛有3 0mL3 5 二硝基水楊酸試劑和1 0mL水的試管中混勻 放入沸水浴中加熱5min 冷卻后稀釋至25mL 搖勻 在540nm比色測定A值 以A值對應(yīng)的葡萄糖量為相對反應(yīng)速度 以1 S 為橫坐標 1 v為縱坐標作圖

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明，都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等，如果需要附件，請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙，網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預覽，若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 人人文庫網(wǎng)僅提供信息存儲空間，僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理，對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯，并不能對任何下載內(nèi)容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當內(nèi)容，請與我們聯(lián)系，我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論