溶出度測(cè)定法-上崗證培訓(xùn).doc

第十二章 溶出度測(cè)定法第一節(jié) 溶出和溶出度研究發(fā)展概況藥物溶出度是指藥物從片劑或膠囊劑等固體制劑在規(guī)定介質(zhì)中溶出的速度和程度。由于藥物的溶出直接影響藥物在體內(nèi)的吸收和利用，溶出度試驗(yàn)已成為評(píng)價(jià)制劑質(zhì)量及生產(chǎn)工藝的指標(biāo)之一。而且，溶出度試驗(yàn)是在體外對(duì)體內(nèi)藥物生物利用度進(jìn)行研究和評(píng)價(jià)的有效的替代方法, 也是保證和衡量固體口服制劑生產(chǎn)工藝及質(zhì)量是否合理和穩(wěn)定的一項(xiàng)重要手段，它以科學(xué)先進(jìn)的測(cè)定手段替代了過(guò)去的崩解時(shí)限檢查, 從而提高了藥品質(zhì)量控制方法的科學(xué)性, 保證了藥品的臨床療效。1溶出度與崩解時(shí)限的關(guān)系 藥物要發(fā)揮作用必須到達(dá)作用部位, 藥物能否到達(dá)作用部位以及到達(dá)的速度和程度, 又受到許多因素的影響。以片劑為例, 服藥后, 藥物首先必須經(jīng)過(guò)崩解、分散, 然后才能溶解而被吸收產(chǎn)生療效。所以, 各國(guó)藥典對(duì)一些片劑均進(jìn)行崩解時(shí)限檢查, 它對(duì)藥物療效起到了一定的保證作用。但是另有許多實(shí)驗(yàn)又提出了新的問(wèn)題, 例如Glevy和Hayes在做阿司匹林實(shí)驗(yàn)時(shí), 發(fā)現(xiàn)體外崩解時(shí)間不能說(shuō)明體內(nèi)的有效性。僅依靠崩解時(shí)限檢查作為所有片劑、膠囊在體內(nèi)吸收的評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)顯然是不夠完善的，因?yàn)樗幬锶芙夂笸ㄟ^(guò)崩解儀篩網(wǎng)粒徑常在1.6-2.0mm之間，而藥物需呈溶液狀態(tài)才能被機(jī)體吸收，其粒子大小以單位A來(lái)計(jì)算，所以崩解僅僅是藥物溶出的最初階段，而后面的繼續(xù)分散和溶解過(guò)程，崩解時(shí)限檢查是無(wú)法控制的，且固體制劑的崩解還要受到處方設(shè)計(jì)，制劑制備，貯存過(guò)程及體內(nèi)許多復(fù)雜因素的影響，所以崩解時(shí)限檢查不能客觀反映藥物與賦形劑之間的關(guān)系和影響，而溶出度檢查卻包括了崩解及溶解過(guò)程，因此研究溶出度就有更重要的意義，提出藥物的溶出速度和程度與體內(nèi)吸收情況的關(guān)系才更加密切。2溶出度與生物利用度的關(guān)系 生物利用度是人和動(dòng)物服藥后通過(guò)血或尿中藥物濃度的測(cè)定來(lái)反映藥物制劑在體內(nèi)可能被吸收利用的程度進(jìn)而推斷療效。從理論上講，藥物的體內(nèi)實(shí)驗(yàn)和臨床研究才是評(píng)價(jià)制劑的最根本和最可靠的依據(jù)。但生物利用度試驗(yàn)工作量極大，費(fèi)用高，對(duì)每個(gè)樣品進(jìn)行篩選評(píng)定, 檢驗(yàn)和控制產(chǎn)品質(zhì)量只能借助于體外實(shí)驗(yàn)方法來(lái)完成。溶出度雖非必然與體內(nèi)生物利用度相關(guān), 但多數(shù)情況下是相關(guān)的，它是以體外實(shí)驗(yàn)法代替動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的一種方法。3 溶出度試驗(yàn)方法發(fā)展歷程 Noyes 和Whitney 于1897 年最早研究了溶出,提出了溶出速率方程。Nernst 和Brnner 于1904年將Fick 擴(kuò)散定律應(yīng)用于Noyes-Whitney 方程,Hixson 和Crowell 于1931 年導(dǎo)出了立方根定律。到本世紀(jì)中葉,研究重心轉(zhuǎn)移到考察藥物溶出行為對(duì)藥物劑型生物活性的影響。1948年，Sperabdio在研究片劑崩解對(duì)藥效的關(guān)系時(shí)，提出用溶出度試驗(yàn)代替崩解度，對(duì)評(píng)價(jià)藥物制劑內(nèi)在質(zhì)量更具說(shuō)服力。美國(guó)FDA最早測(cè)試溶出度的品種是地高辛和洋地黃毒甙，溶出度測(cè)試結(jié)果揭示了兩種藥物在不同劑型、規(guī)格及批號(hào)之間存在的療效和毒性的顯著差異來(lái)源于產(chǎn)品的溶出度。Edwards 于1951 年對(duì)阿斯匹林片劑的研究,指出其鎮(zhèn)痛作用取決于藥物在胃腸道內(nèi)的溶出速率，而與崩解速率無(wú)明顯關(guān)系。其后Shenoy 等研究了苯丙胺緩釋片的生物利用度與體外溶出速率的關(guān)系，Smolen 等介紹了溶出與生物利用度曲線近似一致的概念。近年來(lái),不少文獻(xiàn)側(cè)重于研究不同配方、工藝對(duì)藥物溶出的影響,及其與生物利用度相關(guān)性,并用來(lái)篩選處方和工藝,指導(dǎo)新藥包括緩、控釋制劑的研究。過(guò)去認(rèn)為只有難溶性藥物才有溶出度的問(wèn)題，但近年來(lái)研究證明，易溶性藥物也會(huì)因制劑的配方和工藝不同而致藥物溶出度有很大差異，從而影響藥物生物利用度和療效，在USP中規(guī)定測(cè)定溶出度的制劑有相當(dāng)數(shù)量是易溶性藥物。4 各國(guó)藥典收載情況 1967 年美國(guó)處方集(NF) 12 版第二補(bǔ)充版首先介紹了緩釋片與膠丸的溶出度試驗(yàn),其后,1970 年USP/ NFX 、1975 年的BP73 補(bǔ)充版、1981年第十改正日本藥局方都收載了溶出度檢測(cè)項(xiàng)目。其中USP 收載了潑尼松片等6 個(gè)品種,BP73補(bǔ)充版收載了地高辛片1個(gè)品種,第十改正日本藥局方收載了4 個(gè)品種，隨后檢測(cè)品種不斷擴(kuò)大。自USP() 開(kāi)始傾向于所有的片、膠囊都要做溶出試驗(yàn)。USP 收載了56 個(gè)品種,USP 收載了372 個(gè),其補(bǔ)充本、又增加了約20 個(gè),USP(1990) 468 個(gè),USP (1995) 為532個(gè)品種；BP1980 年版18個(gè); 第十一改正日本藥局方(1986)為7個(gè)。中國(guó)藥典1977 年開(kāi)始收載溶出試驗(yàn)，1985 年版收載了7 個(gè)品種，1990 年版43 個(gè)，1995 年版擴(kuò)大為134 個(gè)品種，在2010年版中溶出度已成為很普及的檢驗(yàn)項(xiàng)目。第二節(jié)溶出度測(cè)定基本原理藥物釋放所遵循的基本定率是Noyes-Whitney方程，其表述如下：dw/dt=KS(Csat-Csol)其中dw/dt為溶出速率；K為溶出速率常數(shù)；S是固體藥物表面積；Csat為該藥物飽和溶液濃度；Csol為任一時(shí)間溶液中藥物濃度。而藥物釋放所取決的基本點(diǎn)就是Csat的值大于Csol，即形成我們常說(shuō)的漏槽條件（概念）。第三節(jié)溶出度測(cè)定的方法和儀器溶出度測(cè)定方法根據(jù)藥物與介質(zhì)混合的類型主要分為兩類。一類是由于攪拌或旋轉(zhuǎn)而在介質(zhì)中產(chǎn)生的強(qiáng)制對(duì)流導(dǎo)致混合,如轉(zhuǎn)籃法、槳法等；另一類是由于介質(zhì)的自然對(duì)流導(dǎo)致混合,使樣品一直暴露于均勻的無(wú)渦流新鮮介質(zhì)中,以保持漏槽條件,如循環(huán)法、流通池法。在中國(guó)藥典2010年版溶出度檢查法中收載了籃法、槳法和小杯法，另外，在釋放度檢查項(xiàng)下收載了用于緩釋貼劑釋放的碟上槳法。轉(zhuǎn)籃法的主要缺點(diǎn)是籃網(wǎng)或過(guò)濾裝置或兩者可能被堵塞,槳法的明顯缺點(diǎn)是樣品可能上浮,而且采用轉(zhuǎn)籃法或槳法對(duì)于溶解度低而劑量大的藥物或在溶出液中迅速達(dá)到飽和的藥物,難以保持溶出介質(zhì)的漏槽條件。流通池法適合于小劑量、難溶性藥物的緩、控釋制劑,尤其是腸溶制劑,它比轉(zhuǎn)籃法和槳法更能模擬藥物在體內(nèi)的轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程,更接近體內(nèi)層流流動(dòng)的情況,可以測(cè)定峰時(shí)濃度,便于進(jìn)行釋放介質(zhì)的交換。被USP/NF 第5 補(bǔ)充版收入作為法定方法。BP(1980)版采用轉(zhuǎn)籃法,1993 年版增加為轉(zhuǎn)籃法、槳法、流通池法；日本藥局方第十、十一、十二改正版都收載了轉(zhuǎn)籃法和槳法；USP (1995) 收載了轉(zhuǎn)籃法和槳法,對(duì)延時(shí)釋放制劑還收載了往復(fù)圓筒法( reciprocating cylinder ) 和流通池法( flow-through cell method) 。中國(guó)藥典1985 年版收載了轉(zhuǎn)籃法、槳法和循環(huán)法,1990 年版收載了轉(zhuǎn)籃法、槳法，1995年版為轉(zhuǎn)籃法、槳法、小杯法,2000 年版(草案) 收載轉(zhuǎn)籃法、槳法、小杯法和流通池法，正式版將流通池法取消。樊德厚等人對(duì)國(guó)內(nèi)1990 - 1996年的有關(guān)溶出度試驗(yàn)的文獻(xiàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì),其中采用轉(zhuǎn)籃法的為163 篇,用槳法的為66篇,循環(huán)法1 篇,小杯法6 篇。目前常用的智能溶出度試驗(yàn)儀系列,能進(jìn)行準(zhǔn)確的溫度控制,可以在30 39（有的可達(dá)到50） 范圍內(nèi)每隔 0.1任意調(diào)節(jié),轉(zhuǎn)籃或槳板的轉(zhuǎn)速可以任意調(diào)速,并采用微型計(jì)算機(jī)單片技術(shù)測(cè)量實(shí)際轉(zhuǎn)速,轉(zhuǎn)速準(zhǔn)確,時(shí)間可以自動(dòng)預(yù)置，到時(shí)峰鳴報(bào)警。自動(dòng)溶出儀的應(yīng)用越來(lái)越廣泛。近來(lái)，還有用反射光譜定量的自動(dòng)溶出儀和帶半透膜的溶出儀，而光纖溶出度測(cè)定儀作為目前的一個(gè)研究熱點(diǎn)正在被大家所注意。第四節(jié)固體制劑溶出度試驗(yàn)評(píng)價(jià)方法對(duì)于藥物固體制劑，國(guó)產(chǎn)藥與進(jìn)口藥有什么區(qū)別；為什么同樣劑型、同樣劑量的某些藥物，患者服用后會(huì)有不同的療效；用什么試驗(yàn)方法、什么檢測(cè)指標(biāo)才能夠科學(xué)、有效地評(píng)價(jià)出不同質(zhì)量制劑的差別呢。顯而易見(jiàn)，溶出度是一項(xiàng)非常重要的指標(biāo)，但我國(guó)現(xiàn)行的溶出度方法能否做到這一點(diǎn)，顯然還要有很多工作去做。人體對(duì)藥物的吸收部位主要是消化道。體內(nèi)環(huán)境正常者，胃腸道內(nèi)存在有正常量和正常pH的胃酸和腸液；體內(nèi)環(huán)境非正常或體質(zhì)虛弱者，胃酸和腸液的量及pH會(huì)有差異。據(jù)報(bào)道，人體消化器官內(nèi)的液體pH范圍為：胃1.27.6，十二指腸3.1 6.7，小腸5.26.0。50歲以上的人群，胃酸和腸液的pH均有變化,隨著年齡的增長(zhǎng),胃酸缺乏的狀況日漸嚴(yán)重,而藥品療效優(yōu)良的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)為：患有該疾病的任何(無(wú)論性別、年齡、體質(zhì)、體內(nèi)環(huán)境)患者服藥后均有一定的療效和作用，即治療有效性好和適用范圍廣。否則就會(huì)導(dǎo)致： 由不同廠家生產(chǎn)的相同劑型的同一藥品，對(duì)不同患者有不同的療效；同一廠家的同一藥品對(duì)不同患者療效不同，即治療有效性低、范圍窄。療效的優(yōu)劣與生物利用度緊密相關(guān)。生物利用度低的藥品可能只在某一體內(nèi)環(huán)境(如胃酸正常者)才有一定的崩解、溶出和吸收，而對(duì)其它患者療效不顯著。這正是藥品內(nèi)在質(zhì)量差異的核心所在。目前日本采用以下4種溶出介質(zhì)來(lái)模擬：(1)pH 1.2的溶液(氯化鈉2.0g，加水適量溶解，加鹽酸7ml，再加水稀釋至1000ml，即得)。國(guó)外目前傾向于此配制方法，不同于我國(guó)目前通常采用的0.1molL-1鹽酸液(鹽酸9ml一1000m1)。(2)pH4.0乙酸鹽緩沖液0.05molL-1乙酸:0.05molL-1乙酸鈉(16.4：3.6)。其中的離子濃度較我國(guó)藥典附錄中記載的低。目前我國(guó)有關(guān)該介質(zhì)條件下的溶出試驗(yàn)研究進(jìn)行得較少。(3)pH 6.8磷酸鹽緩沖液(磷酸二氫鉀3.4g和無(wú)水磷酸氫二鈉3.55g，加水適量溶解并定容至1000ml，再稀釋一倍，即得)。其中的離子濃度也較我國(guó)藥典附錄中記載的低。(4)水。一個(gè)優(yōu)質(zhì)藥品，在采用一定的溶出裝置和轉(zhuǎn)速時(shí)(這些條件也需進(jìn)行詳盡的研究和論證)，在以上4種溶出介質(zhì)中均應(yīng)有一定的溶出曲線，這樣就能保證該藥品用于人體時(shí)，可在各種體內(nèi)環(huán)境中均有一定的溶出或釋放，即對(duì)于任何體質(zhì)的患者均有一定的療效。如將4條(或多條)曲線結(jié)合起來(lái)，還可用時(shí)間、溶出量和溶出介質(zhì)三維圖來(lái)表示，應(yīng)當(dāng)是平滑、有一定坡度的山坡型。而如果該制劑僅在pH1.2條件下溶出較好，就只能保證胃酸正常的患者吸收良好，而胃酸缺乏的患者可能就較差。人體胃腸道的蠕動(dòng)程度，個(gè)體差異較大。藥物溶出度試驗(yàn)中，如果該制劑僅能在槳法、100 rpmmin-1條件下溶出，那么它也許只在身體機(jī)能強(qiáng)壯者的體內(nèi)釋放和被吸收，而在虛弱者體內(nèi)，便不能釋放和被吸收；而如果在槳法、50rpmmin-1條件下，在上述4種溶出介質(zhì)中均有“較高的、一定的”溶出曲線，那么無(wú)論患者體內(nèi)情況如何，均會(huì)具有較高的、一定的生物利用度，即具有廣泛的療效性。第五節(jié)藥品溶出度測(cè)定中的影響因素分析在多年的工作實(shí)踐中，絕大多數(shù)藥品均能達(dá)到溶出度的要求，也有部分藥品溶出度測(cè)定不符合規(guī)定，這其中多為藥品本身的質(zhì)量問(wèn)題，但也有測(cè)定方法存在的問(wèn)題，致使測(cè)定結(jié)果偏離。分析溶出度測(cè)定偏離的原因，有針對(duì)性地予以糾正，對(duì)實(shí)際工作具有十分重要的指導(dǎo)意義。為保證溶出度測(cè)定數(shù)據(jù)的客觀性、準(zhǔn)確性和科學(xué)性，本文綜述了溶出度測(cè)定過(guò)程中的常見(jiàn)問(wèn)題和解決辦法。 1儀器因素1.1 溶出儀的調(diào)試 在溶出度測(cè)定前，必須檢查溶出儀的穩(wěn)定性、轉(zhuǎn)速、溫度等是否符合要求。儀器運(yùn)轉(zhuǎn)時(shí)，整套裝置應(yīng)保持平穩(wěn)，均不能產(chǎn)生明顯的晃動(dòng)或振動(dòng)（包括儀器裝置所處的環(huán)境）。轉(zhuǎn)軸應(yīng)在中心孔并垂直，旋轉(zhuǎn)應(yīng)平穩(wěn)無(wú)顫動(dòng)，儀器應(yīng)處于良好的穩(wěn)定轉(zhuǎn)動(dòng)狀態(tài)。檢查儀器的實(shí)際轉(zhuǎn)速與其儀器的電子顯示數(shù)據(jù)是否一致，分別設(shè)置轉(zhuǎn)速50，100，150rpm進(jìn)行測(cè)定，用經(jīng)校驗(yàn)的秒表計(jì)時(shí)，記下2min轉(zhuǎn)動(dòng)的次數(shù)，每分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)次數(shù)誤差均不得超過(guò)4。調(diào)試槳或藍(lán)的高度，在溶出杯未放入溶出介質(zhì)時(shí)，按藥典各法的要求，調(diào)節(jié)槳或藍(lán)的底部距溶出杯內(nèi)底部的距離，應(yīng)符合規(guī)定。從流體力學(xué)的角度來(lái)看，槳板的厚度決定所產(chǎn)生漩渦力的大小，即樣品所受物理力的大小。在轉(zhuǎn)速一定的情況下，槳板越厚，所產(chǎn)生的物理機(jī)械理越大。設(shè)置好溫度，用經(jīng)校驗(yàn)的溫度計(jì)測(cè)定溶出杯內(nèi)溶出介質(zhì)的溫度，應(yīng)能恒定在 37.00.5，6個(gè)溶出杯內(nèi)的溫度差異應(yīng)在0.5。轉(zhuǎn)籃的處理，應(yīng)用轉(zhuǎn)籃法試驗(yàn)時(shí)，應(yīng)注意轉(zhuǎn)籃的潔凈程度，一般在陽(yáng)光下觀察轉(zhuǎn)籃的空隙是否有堵塞。如有堵塞，可采用超聲或在稀硝酸中煮沸、再在水中煮沸的辦法進(jìn)行清理，否則將影響溶出度數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。尤其是在低轉(zhuǎn)速時(shí)，影響更為明顯。同時(shí)，還應(yīng)注意試驗(yàn)時(shí)應(yīng)取用干燥的轉(zhuǎn)籃。水浴高度， 溶出儀外圍水浴高度應(yīng)超過(guò)溶出杯里溶出介質(zhì)液面高度，否則將影響溶出杯中溶出液的溫度，導(dǎo)致結(jié)果偏低；尤其是進(jìn)行緩、控釋制劑試驗(yàn)時(shí)，由于試驗(yàn)時(shí)間較長(zhǎng)，更需注意。1.2溶出儀的校正 溶出儀不僅各項(xiàng)機(jī)械性能指標(biāo)(轉(zhuǎn)速、軸距、 高度等)應(yīng)符合溶出度檢測(cè)的規(guī)定，同時(shí)，還應(yīng)定期使用校正片對(duì)其性能進(jìn)行校正。特別是當(dāng)試驗(yàn)中出現(xiàn)異常情況或檢驗(yàn)結(jié)果有爭(zhēng)議時(shí)，為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性，必須用溶出度校正片對(duì)儀器進(jìn)行校正。溶出度校正片是由美國(guó)藥典委員會(huì)在20世紀(jì)70年代提出的。因?yàn)槿艹鰞x僅機(jī)械指標(biāo)符合要求還不夠，應(yīng)采用一定的標(biāo)準(zhǔn)制劑進(jìn)行校正，對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行數(shù)理統(tǒng)計(jì)后必須符合一定的要求。如不符合，則應(yīng)適當(dāng)調(diào)整儀器的機(jī)械部件，直至校正片的測(cè)定符合規(guī)定。我國(guó)目前使用的是非崩解型溶出度校正片水楊酸片。使用溶出度校正片不僅能確定溶出儀的性能狀態(tài)，還能考查實(shí)驗(yàn)操作是否規(guī)范，因此校正片對(duì)溶出實(shí)驗(yàn)具有非常實(shí)用的價(jià)值，對(duì)尋找溶出度結(jié)果偏差的來(lái)源有很好的幫助。溶出儀在校正后，溶出杯需編號(hào)配對(duì)，溶出杯不配套對(duì)實(shí)驗(yàn)有一定的影響。 2 溶出介質(zhì)的配制與脫氣2.1溶出介質(zhì)的脫氣 溶出度試驗(yàn)規(guī)定，溶出介質(zhì)在試驗(yàn)前應(yīng)進(jìn)行脫氣處理，因?yàn)榻橘|(zhì)中的氣泡在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中會(huì)影響樣品的崩解、擴(kuò)散和溶出。溶出介質(zhì)脫氣與否對(duì)轉(zhuǎn)籃法的影響較明顯，因?yàn)槿芤褐械臍馀輹?huì)堵塞轉(zhuǎn)籃空隙，影響樣品溶出。而對(duì)槳法影響不大。脫氣方法一般采用煮沸法、抽濾法或超聲法等，煮沸法需煮沸并保持15min再放冷，剛沸騰即放冷除氣效果不夠好。較好的脫氣方法是緩慢攪拌下加熱至約41，并在真空條件下不斷攪拌5 min，或減壓抽濾，現(xiàn)在已有加熱，抽真空，水循環(huán)攪拌一體化的儀器，脫氣效果較好。 2.2配制溶出介質(zhì)的試劑和試液 若溶出介質(zhì)為鹽酸溶液等，需在水脫氣后冷至約37時(shí)配制，先配好再加熱脫氣會(huì)影響酸度。含有有機(jī)溶劑的溶出介質(zhì)更應(yīng)在脫氣后配制。若溶出介質(zhì)為緩沖液，應(yīng)調(diào)節(jié)pH值至規(guī)定值0.05之內(nèi)。溶出介質(zhì)中所用到的無(wú)機(jī)鹽或有機(jī)溶劑(乙醇或異丙醇等)，不同廠商的差異不顯著；而水則由于來(lái)源各異、pH值不同，對(duì)某些品種可能會(huì)導(dǎo)致測(cè)定結(jié)果的差異。表面活性劑，如十二烷基硫酸鈉(SDS)、聚山梨酯80、溴化十六烷基三甲基銨、三羥甲基氨基甲烷等，因品牌的不同可能導(dǎo)致測(cè)定結(jié)果的差異較大。在部分品種(如非諾貝特緩釋片、非洛地平緩釋片) 的溶出度測(cè)定中曾有此類情況，有時(shí)甚至?xí)绊懡Y(jié)果的判定。 2.3溶出介質(zhì)的揮發(fā) 當(dāng)溶出介質(zhì)中有機(jī)相比例較大時(shí)，應(yīng)注意減少預(yù)熱和試驗(yàn)過(guò)程中介質(zhì)的揮發(fā)，盡量使用密封性良好的溶出儀。 3取樣時(shí)間和取樣量 按規(guī)定的取樣時(shí)間取樣，從6個(gè)杯中完成取樣的時(shí)間應(yīng)在1min內(nèi)，自取樣至濾過(guò)應(yīng)在30秒鐘內(nèi)完成。若手工取樣，1min內(nèi)取6份溶出液有一定困難，可采用在開(kāi)始時(shí)每隔1min放下一根轉(zhuǎn)桿，將供試品逐一放入溶出介質(zhì)中，取樣時(shí)即可按時(shí)從容取樣。對(duì)于緩釋控釋制劑，需多次取樣，多次取樣所量取溶出介質(zhì)的體積之和應(yīng)在其總體積的1之內(nèi)，如超過(guò)總體積的1時(shí)，應(yīng)及時(shí)補(bǔ)充溶出介質(zhì)或在計(jì)算時(shí)加以校正。4溶出液的過(guò)濾與濾膜的吸附取樣過(guò)濾時(shí)，應(yīng)注意可能存在的損失。因?yàn)V膜與藥物間有一個(gè)吸附飽和過(guò)程，即濾膜只有吸附到一定量之后，方能達(dá)到飽和、不再吸附。比如，使用同一個(gè)濾膜進(jìn)行6份樣品過(guò)濾時(shí)，往往第一個(gè)數(shù)據(jù)偏低，這就是吸附飽和過(guò)程所致。該過(guò)程與濾膜的品牌和性質(zhì)，藥物的理化性質(zhì)、是否經(jīng)微粉化處理等因素有關(guān)。對(duì)用濾膜過(guò)濾時(shí)有吸附作用的藥品，要用其他無(wú)吸附的濾材濾過(guò)，或用適當(dāng)?shù)姆椒ㄏ降挠绊?，如可將濾膜在沸水中煮沸1小時(shí)，或加大初濾液體積等，也可采用樣品直接高速離心的方法。 判定濾膜吸附與否的方法可采用：取對(duì)照品溶液，經(jīng)濾膜過(guò)濾后，與原溶液進(jìn)行比較，觀察測(cè)定前后響應(yīng)值（吸光度或峰面積）的變化。取溶出液過(guò)濾，舍去不同體積的初濾液后測(cè)定，觀察響應(yīng)值（吸光度或峰面積）的變化，了解被測(cè)藥物與濾膜的吸附情況。 取樣后，一部分不過(guò)濾，直接采用高速離心，取上清液測(cè)定。另一部分采用過(guò)濾法，取續(xù)濾液測(cè)定，考察兩者間測(cè)定數(shù)據(jù)的差異。 一些小規(guī)格制劑如格列美脲片(1mg、2mg、3mg)、硝酸異山梨酯片(5mg、10mg)等品種，由于此類藥品的主藥均難溶于水，制成制劑時(shí)一般均需進(jìn)行微粉化處理使原料藥粒徑變小，比表面能變大，靜電吸附能力增強(qiáng)，故與濾膜的吸附作用明顯，達(dá)到飽和所需的初濾液體積大大增加。同時(shí)，又由于規(guī)格小，溶出液濃度低，需消耗更多初濾液方能達(dá)到飽和。所以，遇到此類情況時(shí)，一定要仔細(xì)考察濾膜的吸附情況，從而確保實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可靠性。 5 膠囊殼對(duì)測(cè)定的影響 膠囊殼質(zhì)量的不同，紫外吸光強(qiáng)度也各不相同，故在紫外法測(cè)定時(shí)常常有干擾，筆者在工作中曾多次遇到溶出度均值大于含量10%20% (均采用紫外法測(cè)定)的情況，所以在測(cè)定膠囊劑的溶出度時(shí)，應(yīng)注意膠囊殼對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。校正試驗(yàn)一般采用取6?？瞻啄z囊殼，置于同一溶出杯內(nèi)，用該品種項(xiàng)下規(guī)定體積的溶出介質(zhì)溶解空膠囊殼，并按該品種項(xiàng)下的分析方法測(cè)定，測(cè)得每個(gè)空膠囊的空白校正值，如校正值大于標(biāo)示量的25，實(shí)驗(yàn)無(wú)效，如校正值2，則可忽略不計(jì)。 6沉降藍(lán)的使用溶出試驗(yàn)中加沉降藍(lán)的目的是為了防止被測(cè)樣品上浮或貼壁，致使溶出液的濃度不均勻，或因貼壁致使部分樣品的活性成分難以溶出。因沉降籃加入后會(huì)造成溶出杯內(nèi)流體力學(xué)的改變，因此在建立溶出度方法是應(yīng)進(jìn)行詳細(xì)的驗(yàn)證。但在日常檢驗(yàn)中，如果該品種項(xiàng)下溶出度測(cè)定法沒(méi)有規(guī)定要求使用沉降藍(lán)，那么不可隨意使用，否則會(huì)造成溶出度試驗(yàn)結(jié)果的偏差。 7溶出液的穩(wěn)定性主成分在溶出介質(zhì)中的穩(wěn)定性也是一個(gè)不容忽視的問(wèn)題。如溶液穩(wěn)定性不佳，如一些光穩(wěn)定性、熱穩(wěn)定性較差的藥品（尼莫地平制劑、硝苯地平制劑或硝酸甘油制劑等），應(yīng)在取樣后立即測(cè)定?？傊谌艹龆仍囼?yàn)中，一方面要嚴(yán)格控制各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件，另一方面也要考慮具體品種的個(gè)性。比如我們?cè)陉P(guān)注濾膜吸附的同時(shí)，還應(yīng)注意濾膜與溶出介質(zhì)的相容性問(wèn)題，如濾膜被溶出介質(zhì)溶解，便會(huì)在溶液中產(chǎn)生濁度，使紫外吸光度偏大，從而造成結(jié)果偏差。溶出度測(cè)定的影響因素很多，有儀器和操作的誤差，更需要注意的是特殊品種的特殊情況。只有在實(shí)驗(yàn)中善于分析問(wèn)題，總結(jié)經(jīng)驗(yàn)，不斷提高分析問(wèn)題解決問(wèn)題的能力，才能及時(shí)有效地校正偶然出現(xiàn)的結(jié)果偏離現(xiàn)象，確保溶出度測(cè)定數(shù)據(jù)的客觀性和準(zhǔn)確性。第六節(jié) 溶出結(jié)果的處理及比較方法用于比較藥劑溶出曲線的方法很多，最簡(jiǎn)單、直觀的方法是將溶出數(shù)據(jù)以曲線圖或列表的形式來(lái)描述每種制劑的平均溶出度，該法可直觀了解制劑配方改變和溶出度變化的關(guān)系，但是不能提供一個(gè)綜合指標(biāo)，很難進(jìn)行相應(yīng)的數(shù)據(jù)分析。當(dāng)對(duì)多種制劑進(jìn)行比較時(shí)，這種方法的曲線圖或數(shù)據(jù)列表顯得凌亂和復(fù)雜。為此，很多藥學(xué)工作者對(duì)溶出度比較的方法進(jìn)行了深入研究，建立了一些可行的方法,主要分為非模型依賴法和模型依賴法。（一）非模型依賴法1、相似因子法 擬合因子包括相似因子f2和差異因子f1。由Moore和Flanner首先提出。f1和f2方程提供了簡(jiǎn)單的計(jì)算方法，并對(duì)單一的溶出曲線間的相似性進(jìn)行了量化比較，均符合美國(guó)食品藥物管理局(FDA)和藥品配方制程改變管理規(guī)范(SUPAC)指導(dǎo)原則中有關(guān)藥劑相似性的定量分析。其中相似因子f2被FDA推薦為比較兩條溶出曲線相似性的首選方法?？勺鳛樵u(píng)價(jià)工藝或處方中輔料改變時(shí)制劑溶出曲線間的差異性評(píng)價(jià)參數(shù)，以及研制制劑與市售制劑間溶出曲線的差異性評(píng)價(jià)參數(shù)。相似因子f2的數(shù)學(xué)表達(dá)式如下f2=50log1+(1/n) (Rt 一Tt )2 -0.5100式中：Rt為t時(shí)間參比制劑累積釋藥百分率；Tt為t時(shí)間受試制劑累積釋藥百分率；n為取點(diǎn)數(shù)目。目前此公式已被引用于FDA許多指導(dǎo)性文件。當(dāng)f2在50100之間時(shí)，表明兩種制劑的溶出度相似或等同。參比制劑和受試制劑在任何時(shí)間點(diǎn)溶出度的平均誤差不能超過(guò)15% 。這種方法對(duì)于有3個(gè)或3個(gè)以上時(shí)間點(diǎn)構(gòu)成的溶出曲線間的比較更為有效，但是如果f2值大于100，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)就應(yīng)該先進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化。相似因子f2的主要優(yōu)點(diǎn)是：（1）便于計(jì)算，通過(guò)一個(gè)簡(jiǎn)單的數(shù)字就可以對(duì)溶出度進(jìn)行描述和比較，可用于正交設(shè)計(jì)或均勻設(shè)計(jì)的數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析；(2)可直接對(duì)釋藥數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，無(wú)需擬合各種釋藥速率。但同時(shí)具有以下缺點(diǎn)或局限性 ：(1)沒(méi)有考慮到數(shù)據(jù)的變異性或相關(guān)性；(2) f2和f1容易受溶出度時(shí)間點(diǎn)數(shù)目的影響；(3)溶出度測(cè)定的最后一點(diǎn)的設(shè)計(jì)對(duì)f2值至關(guān)重要；(4)對(duì)于單組的溶出數(shù)據(jù)不適用，不能提供單組溶出數(shù)據(jù)的信息。2、 此外非模型依賴法還包括釋放區(qū)間法、偏離度法以及溶出速率法等等。（二）模型依賴法模型依賴法能較好地?cái)M合和提供溶出度數(shù)據(jù)。藥物釋放研究中所用的數(shù)學(xué)模型已達(dá)十余種。這些數(shù)學(xué)模型被用于實(shí)際觀測(cè)的數(shù)據(jù)分析中有兩個(gè)目的：一是通過(guò)數(shù)據(jù)分析而確立具有較好的擬合效果的模型，用其預(yù)報(bào)累積釋放率的某個(gè)時(shí)間的取值；二是通過(guò)觀測(cè)數(shù)據(jù)的分析，闡明釋放過(guò)程所遵循的基本規(guī)律，或者說(shuō)判斷釋放與藥量及制劑釋放特性的結(jié)構(gòu)關(guān)系。選擇較好模型的三點(diǎn)建議：(1)所選模型的時(shí)間過(guò)程特征應(yīng)與釋放過(guò)程的時(shí)間特征一致；(2)擬合效果好且模型參數(shù)少；(3)模型參數(shù)應(yīng)有較為明確的物理意義。例如Weibull模型、Logistic模型和Gompertz模型。Weibull模型有3個(gè)參數(shù)；Logistic和Gompertz模型有4個(gè)未知參數(shù)；一般需要5個(gè)以上時(shí)間點(diǎn)的絕對(duì)最小值來(lái)擬合這些模型。用最小平方法的非線性回歸值可獲得最好的擬合度并計(jì)算指定時(shí)間點(diǎn)的積分值。這種計(jì)算方法可針對(duì)于每個(gè)容器。因此可計(jì)算得到溶出效率的均值(6個(gè)容器)及其標(biāo)準(zhǔn)差。通過(guò)計(jì)算溶出效率均值及其標(biāo)準(zhǔn)差或批次間的置信區(qū)間，比較參考制劑的溶出效率和受試制劑間的溶出效率的差異。如果差異和差異的95%的置信區(qū)間在合理的范圍內(nèi)(例如1O )即能得出參考制劑和測(cè)試制劑溶出度是等效的結(jié)論。1、威布爾分布(Weibull分布函數(shù))是一種概率分布：F(t)=1-exp-(t-)m/；可以轉(zhuǎn)化成另一種公式表達(dá)：lnln1/(1-F(t)=mln(t-)-ln其中F(t)：累積溶出百分率。：位置參數(shù)。該參數(shù)物理意義最為明確，=0時(shí)，說(shuō)明藥物制劑溶出無(wú)時(shí)間延滯，0時(shí)，