（化學(xué)工程專業(yè)論文）阿霉素磁性明膠微球的制備、表征及體外釋放性能的研究.pdf

摘要 摘要 磁性靶向藥物已成為當(dāng)前抗癌研究的熱點(diǎn) 其中磁性靶向藥物載體材料的 制備是極其關(guān)鍵的 其性能的優(yōu)劣直接影響來(lái)藥物的載藥量 包封率及其在體 內(nèi)的靶向性 緩釋性能 本文以阿霉素為模型藥物 f e 3 0 4 為磁核材料 明膠為 載體材料 通過(guò)乳化交聯(lián)法制備了阿霉素磁性明膠微球 并利用x 射線粉末衍 射儀 透射電鏡 掃描電鏡 傅立葉紅外光譜儀 粒度分析儀等對(duì)產(chǎn)物的晶型 純度 形貌 粒度分布等進(jìn)行了測(cè)試和表征 以f e c l 2 和f e c l 3 為原料利用化學(xué)共沉淀法制備f e 3 0 4 納米粒子 以產(chǎn)物得 純度和顆粒尺寸作為評(píng)價(jià)指標(biāo) 通過(guò)單因素實(shí)驗(yàn)確定f e 3 0 4 納米粒子的最佳制備 條件為 以n h 4 0 h 作為堿源 以p e g 4 0 0 0 作為乳化劑 f e 2 f e 3 的摩爾比為 1 1 5 p h 值為1 0 乳化時(shí)間為3 0 m i n 反應(yīng)溫度為5 0 轉(zhuǎn)速為1 0 0 0 r m i n 最佳制備條件下產(chǎn)物結(jié)晶狀態(tài)良好 無(wú)團(tuán)聚 粒徑主要分布于5 n m 2 0 n m 利用乳化交聯(lián)法制備磁性明膠復(fù)合微球 采用單因素及正交實(shí)驗(yàn)對(duì)磁性明 膠復(fù)合微球的制備條件進(jìn)行優(yōu)化 確定其最佳制備條件為 s p a n 8 0 與t w e e n 8 0 以0 3 0 7 的比例形成復(fù)配乳化劑 選擇戊二醛作為交聯(lián)劑 明膠溶液濃度1 0 攪拌速度為1 0 0 0 r m i n 乳化劑用量為3 水油相比為1 1 0 乳化時(shí)間為3 0 m i n 乳化溫度為6 0 最佳條件下制備的產(chǎn)物透射電鏡表明f e 3 0 4 粒子已經(jīng)被明膠 復(fù)合成球體 粒子成球性好 成球率高 大小較均勻 無(wú)粘連 紅外測(cè)試表明 該復(fù)合微球是由明膠和f e 3 0 4 共同組成 激光散射粒度分析表明該產(chǎn)物平均粒徑 為1 8 p m 通過(guò)微球的磁吸附率 產(chǎn)率及形態(tài)等特性的檢測(cè) 以及用紫外分光光度法 測(cè)定藥物微球的載藥量和包封率確定出阿霉素與明膠的最佳投料比為1 1 5 最 佳投藥比下藥物微球的載藥量3 4 2 包封率為7 7 5 4 平均回收率為9 9 7 8 采用透析法測(cè)定阿霉素磁性明膠微球的體外釋放規(guī)律 表明了該藥物微球有明 顯的緩釋作用 關(guān)鍵詞 靶向藥物 磁性微球 乳液聚合法 制備 表征 a b s t r a c t a b s t r a c t m a g n e t i ct a r g e t i n gd r u gh a sn o wb e c o m eah o tr e s e a r c ho na n t i c a n c e r t h ed r u g l o a d i n g e n c a p s u l a t i o ne f f i c i e n c y i nt a r g e t i n gt h eb o d ya n d s u s t a i n e d r e l e a s e p r o p e r t i e s w e r ea f f e c t e dd i r e c t l y b yt h em a g n e t i ct a r g e t i n gd r u gc a r r i e rm a t e r i a l w h i c ht h ep r e p a r a t i o ni sc r u c i a l i nt h i sp a p e r t h ea d r i a m y c i nd o x o r u b i c i nm a g n e t i c g e l a t i nm i c r o s p h e r e sw e r ep r e p a r e db yt h ee m u l s i o nc r o s s l i n k e dm e t h o dw h i c ht h e a d r i a m y c i nd o x o r u b i c i na sam o d e ld r u g t h ef e 3 0 4a sn u c l e a rm a g n e t i cm a t e r i a l s a n dt h e g e l a t i na s c a r t i e rm a t e r i a l a n dt h e c o n f i g u r a t i o n s i z ed i s t r i b u t i o n c o m p o s i t i o n e n c a p s u l a t i o ne f f i c i e n c y a s w e l la st h er e l e a s eo fi nv i t r o c h a r a c t e r i z a t i o no ft h em i c r o s p h e r e sw e r et o k e na n dt e s t e db ys e m t e m f t i r d l s x r d t h em a g n e t i cm a t e r i a lf e 3 0 4w a ss y n t h e s i z e db yc h e m i c a l c o p r e c i p i t a t i o n r e a c t i o nf r o mf e c l 2a n df e c l 3 t o o kt h ep a r t i c l es i z ea n dt h ep u r i t yo ff e 3 0 4a s c r i t e r i a t h eo p t i m a lp r e p a r a t i o nc o n d i t i o n sw e r eo b t a i n e db ys i n g l ef a c t o rt e s t t h e o p t i m a lp r e p a r a t i o nc o n d i t i o nw e r ed e t e r m i n e da sf o l l o w s t h en h a o ha sab a s et o t h ea l k a l is o u r c e t h ep e g 4 0 0 0a se m u l s i f i e r t h er a t i oo ff e 2 f e w a s2 3 t h ep h v a l u ew a s10 t h er e a c t i o nt i m ew a s3 0 m i n t h er e a c t i o nt e m p e r a t u r ew a s 5 0 c a n dt h es t i r r i n gr a t ew a s10 0 0 r m i n t h ef e 3 0 4n a n o p a r t i c l e sp r e p a r e d f r o mt h eo p t i m a l p r e p a r a t i o nc o n d i t i o nw e r ed i s p e r s i v ea n dh a v ef i n es c r y s t a l s t r u c t u r ea n dn a r r o ws i z e d i s t r i b u t i o nm a i n l yi nt h er a n g eo f5 n ma n d2 0 n m t h ec o m p o s i t em a g n e t i cg e l a t i nm i c r o s p h e r e sw e r ep r e p a r e db yt h ee m u l s i o n c r o s s l i n k e dm e t h o d t h eo p t i m a lp r e p a r a t i o nc o n d i t i o n sw e r eo b t a i n e db ys i n g l e f a c t o rt e s t a n dt h eo p t i m a lp r e p a r a t i o nc o n d i t i o n sw e r ed e t e r m i n e da sf o l l o w s t h e c o n c e n t r a t i o no fg e l a t i ns o l u t i o nw a s10 t h es t i r r i n gr a t ew a s10 0 0 r m i n t h e e m u l s i f i e r d o s a g e i s3 t h er a t i o o fw a t e r o i li s1 10 t h e g l u t a r a l d e h y d ea s c r o s s l i n k i n ga g e n t t h er e a c t i o nt i m ew a s3 0 m i n t h er e a c t i o nt e m p e r a t u r ew a s6 0 t h ec o m p o s i t em a g n e t i c g e l a t i nm i c r o s p h e r e sw e r ep r e p a r e df r o mt h eo p t i m a l p r e p a r a t i o nc o n d i t i o nw e r er e g u l a r n oa d h e s i o n s t h ed i s p e r s i v i t ya n df l u i d i t yw e r e p e r f e c t t h ei n f r a r e dt e s ts h o w e dt h a tt h ef e 3 0 4n a n o p a r t i c l e sw e r ec o a t e db yt h e i i a b s t r a c t g e l a t i n t h ed l st e s ts h o w e dt h a tt h ea v e r a g es i z eo fc o m p o s i t em a g n e t i cg e l a t i n m i c r o s p h e r e sw e r e18 i r t m t h eo p t i m a lr a t i oo fa d r i a m y c i nd o x o r u b i c i na n dg e l a t i nw e r e1 15w h i c hw e r e d e t e r m i n e db yt h ea b s o r p t i o nr a t e t h ey i e l dc h a r a c t e r i s t i c sa n dp a t t e r n s a sw e l la st h e e n c a p s u l a t i o ne f f i c i e n c ya n dd r u g l o a d e dt h a tt e s t e db yt h eu s i n go fu v m si n p r e p a r a t i o no fa d r i a m y c i nd o x o r u b i c i nm a g n e t i cg e l a t i nc o m p o s i t em i c r o s p h e r e s t h ed r u g l o a d i n go ft h eo p t i m a lr a t i ow a s3 4 2 t h ee n c a p s u l a t i o ne f f i c i e n c yw a s 7 7 5 4 a n dt h ea v e r a g er e c o v e r yw a s9 9 7 8 t h ev i t r or e l e a s eo fa d r i a m y c i n d o x o r u b i c i nm a g n e t i cg e l a t i nc o m p o s i t em i c r o s p h e r e sw a sd e t e r m i n e db yt h ed i a l y s i s w h i c hs h o w e dt h a tt h es l o w r e l e a s ee f f e c to ft h ed r u gm i c r o s p h e r e sw a ss i g n i f i c a n t k e yw o r d s t a r g e t i n gd r u g m a g n e t i cm i c r o s p h e r e s e m u l s i o nc r o s s l i n k e dm e t h o d p r e p a r a t i o n t o k e n i i i 學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明 學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明 本人聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工 作及取得的研究成果 據(jù)我所知 除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地 方外 論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的研究成果 也不包含 為獲得直昌太堂或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書(shū)而使用過(guò)的材料 與 我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確 的說(shuō)明并表示謝意 學(xué)位論文作者簽名 手寫(xiě) 喙住芡簽字日期 加薩 工月2 占日 學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書(shū) 本學(xué)位論文作者完全了解直昌太堂有關(guān)保留 使用學(xué)位論文 的規(guī)定 有權(quán)保留并向國(guó)家有關(guān)部門(mén)或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和磁 盤(pán) 允許論文被查閱和借閱 本人授權(quán)直昌太堂可以將學(xué)位論文的全 部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索 可以采用影印 縮印或掃描 等復(fù)制手段保存 匯編本學(xué)位論文 同時(shí)授權(quán)中國(guó)科學(xué)技術(shù)信息研究 所將本學(xué)位論文收錄到 中國(guó)學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 并通過(guò)網(wǎng)絡(luò)向 社會(huì)公眾提供信息服務(wù) 保密的學(xué)位論文在解密后適用本授權(quán)書(shū) 導(dǎo)師簽名 簽字日期 揪 1 瑚 第1 章文獻(xiàn)綜述 第1 章文獻(xiàn)綜述 1 1 磁性靶向給藥系統(tǒng) 1 1 1 磁性靶向藥物的定義 磁性靶向藥物 是利用天然的或合成的高分子材料將磁性納米粒子 固體或 液體藥物包覆而成的具有靶向性的磁性藥物 應(yīng)用于體內(nèi)后 在外加磁場(chǎng)的作 用下 可在體內(nèi)定向移動(dòng) 靶向特定的腫瘤細(xì)胞或生物分子并緩慢釋放藥物 從一定意義上講 磁性靶向藥物實(shí)現(xiàn)了醫(yī)療工作者內(nèi)科用藥外科化的理想 因 此 僅從用藥方法上講 磁性靶向藥物是一次重大革新 1 1 2 磁性靶向藥物的組成 磁性靶向藥物由磁性材料 骨架材料 藥物載體 及藥物三部分組成 第一部分 磁性材料 磁性材料為磁性靶向藥物提供磁性 同時(shí)也起藥物 載體作用 常用的磁性材料有f e 3 0 4 磁粉 純鐵粉 鐵磁流體 羥基鐵 正鐵鹽 酸 磁赤鐵礦等 作為磁性藥物毫微粒所用的磁性材料粒度越小越好 一般直 徑在1 0 3 0 n m 同時(shí)要求具有良好的磁響應(yīng)和靈敏度 在外加磁場(chǎng)作用下能定向 移動(dòng)和集中 固定在腫瘤部位 其中f e 3 0 4 因制備簡(jiǎn)單 性質(zhì)穩(wěn)定 磁響應(yīng)性強(qiáng) 靈敏度高 整個(gè)療程所用的載體含鐵量不超過(guò)貧血病人的常規(guī)補(bǔ)鐵總量 除部 分被人體利用外 其余的磁性粒子可通過(guò)皮膚 膽汁 腎臟等安全排除體外 獲得粒徑為納米級(jí) 磁響應(yīng)性強(qiáng)的f e 3 0 4 磁性粒子是實(shí)現(xiàn)藥物磁導(dǎo)向的先決條 件 第二部分 藥物 磁性靶向藥物中的藥物也必須具備一定特性 1 不與骨 架材料和磁性材料起化學(xué)反應(yīng) 2 半衰期短 需頻繁給藥 如阿霉素 l 2 順鉑 3 4 1 5 氟尿嘧啶 5 1 胰島素 6 7 等 半衰期小于1 h 或大于2 4 h 不宜用于制備磁性 靶向藥物毫微粒 3 齊l j 量小 藥效平穩(wěn) 溶解度好 例如米托蒽醌1 8 9 l 平陽(yáng)霉 素 1 0 劑量大 藥效劇烈 溶解度差的藥物不宜用于制備磁性毫微粒 4 藥物 劑量不需要精密調(diào)節(jié) 像降壓藥 抗心率失常藥 組胺藥 抗精神失常藥等需 要精密調(diào)節(jié)藥物劑量的藥物也不宜用于磁性毫微粒的制備 已與磁性材料制備 第1 章文獻(xiàn)綜述 成微球的抗腫瘤藥物有 阿霉素 絲裂霉素c 甲氨碟呤 米托葸醌 順鉑 平 陽(yáng)霉素 氟尿嘧啶等 它們都具有水溶性且不與磁性材料起化學(xué)反應(yīng) 其中以 阿霉素應(yīng)用最廣泛 第三部分 骨架材料 骨架材料是用來(lái)支撐磁性材料和藥物的 首先應(yīng)具 有良好的生物相容性 不會(huì)引起免疫反應(yīng) 能夠在體內(nèi)逐步降解清除 同時(shí)必 須具備一定的通透性 能夠使被包覆的藥物釋放出來(lái) 骨架材料都是一些高分 子材料 氨基酸聚合物類 聚多糖類以及其它高分子材料 氨基酸聚合物類又 可分為天然的和合成的兩類 天然氨基酸聚合物有各種白蛋白 球蛋白 明膠 等 合成類的主要有多肽 例如聚賴氨酸和聚谷氨酸等 聚多糖類有葡聚糖 殼聚糖 阿拉伯膠等 還有一些根據(jù)一定要求人工合成的高分子材料 如乙基 酸纖維素 聚乙烯亞胺 聚乙烯醇的共聚物 聚丙烯醇 有機(jī)硅高分子 聚苯 乙烯類 聚乳酸及其共聚物 聚己內(nèi)酯及其共聚物等 國(guó)內(nèi)外現(xiàn)在大多采用的 是白蛋白 葡聚糖 殼聚糖 聚乳酸以及聚苯乙烯類等 1 1 3 主要載體介紹 磁性藥物的載體如表1 1 所示 自美國(guó)學(xué)者w i d d e r 報(bào)道制備磁性白蛋白 微球以來(lái) d e v i n e n i 等 1 2 1 3 1 不斷改進(jìn)藥物和磁性粒子的結(jié)合 其中有采用氨基乙 醇 聚乙二醇 p e g 中性葡聚糖或陽(yáng)離子氨基葡聚糖制備磁性粒子一化療藥 物復(fù)合物的方法 所攜帶的藥物有氨甲碟呤 阿霉素 絲裂霉素等 l u b b e i l 引 a e x i o u 等 1 5 1 采用鐵磁流體作為藥物的載體 y a n a s e 等1 1 6 采用陽(yáng)離子脂質(zhì)體等制 備磁性脂質(zhì)體作為化療藥物的載體 v i r o o n c h a t a p a n 等 1 7 首次提出了熱敏磁性脂 質(zhì)體 在外磁場(chǎng)作用下將藥物輸送到靶部位 通過(guò)高頻電磁場(chǎng)和激光脈沖加熱 使藥物從脂質(zhì)體中釋放 2 0 0 0 年f e r x 公司r u d g e 等 1 8 將金屬鐵和活性碳混合 在球磨機(jī)中制成磁性微球 2 第1 章文獻(xiàn)綜述 磁性紅血球 磁性白蛋白微球 磁性乙基纖維素微膠囊 磁性乳膠 磁性淀粉微球 磁性聚烷基丙烯酸脂納米粒 磁性脂質(zhì)體 鐵磁流體 磁性葡聚糖 鐵碳復(fù)合物 z i m m e m a n nu p i l w a tc w i d d e rj k k a t ot n e m o t o r a k i m o t om m o r i m o t oy m o s b a c hk l b r a h i m aa k i w a d a h b a b i n c o v am s h i n k a im v i r o o n c h a t a p a ne b a b i n c o v am b a b i n e ep y a n a s e m b u l t ej w k u b o t l u b b e a s a l e x i o u s p u l f e rs k g a l l oj m r u d g es r k u r t zt l 可 可 不可 可 可 可 可 7 可 可 泡狀 微粒 微粒 微粒 微粒 微粒 微粒 微粒 微粒 微粒 目前制備的藥物的載體主要有 磁性蛋白微球 磁性脂質(zhì)體和鐵磁流體 制備的主要方法 熱固化法等制備磁性蛋白微球 逆相蒸發(fā)法等制備磁性脂質(zhì) 體 化學(xué)吸收綁定法制備鐵磁流體復(fù)合物 磁性藥物注射方式通常采用動(dòng)脈 靜脈注射 口服 最初的藥物載體材料多數(shù)是非生物降解材料 如聚苯乙烯 二乙氨乙基纖 維素 聚丙烯酰胺 聚丙烯酸酯類等 用這類載體材料制備納米粒類工藝較簡(jiǎn) 單 但載體毒性較大 其在體內(nèi)又不能降解 滯留時(shí)間長(zhǎng) 對(duì)人體正常生理功 能有一定影響 故已不多用 目前使用較多的是天然或合成的生物降解材料 白蛋白 球蛋白 明膠等氨基酸聚合物作為載體材料因?yàn)槿菀讏F(tuán)聚 很難達(dá)到 納米級(jí) 而且載藥量低 從而限制它們?cè)诖判园邢蚪o藥系統(tǒng)中的應(yīng)用 目前研 究中較多都是采用聚多糖類高分子材料作為載體材料 殼聚糖和明膠更是現(xiàn)在 的研究熱點(diǎn) 特別是明膠 不僅具有良好的生物相溶性和生物可降解性 且具 3 他力 昭躬跖鴝舛鱷卯鰓鯽 92 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 o 9 0 9 0侉侈侈侈侈侈侉侈抄侈侈侈侈加侈拋侈撕 第1 章文獻(xiàn)綜述 有多種生物活性 1 2 磁性微球的主要特性 1 2 1 小尺寸效應(yīng) 相對(duì)于普通磁性顆粒材料 磁性微球具有良好的表面效應(yīng)和體積效應(yīng) 具體 反映在其比表面積激增 微球官能團(tuán)密度和選擇性吸附能力增大 吸附平衡時(shí)間 大大縮短 1 9 磁性納米微球的磁核尺寸一般為2 0 n m 左右 而磁性納米微球的粒 徑一般在0 1 1 5 p m 之間 根據(jù)不同的需要 即可以選擇不同的微球粒徑 例 如7 1 2 9 m 粒徑的微球具有明顯的肺部靶向效應(yīng) 而平均直徑小于1 岬的磁性 白蛋白納米微粒 則可以進(jìn)入組織間隙并被靶細(xì)胞 腫瘤細(xì)胞 吞噬 從而可 以在細(xì)胞 亞細(xì)胞 水平供藥 而在栓塞中 則要求粒徑稍微大一些 比如1 0 3 0 1 t m 的磁性明膠微球已經(jīng)被證實(shí)對(duì)狗的腎動(dòng)脈栓塞具有良好效果 此外 由于 磁性載體具有高的選擇吸附能力 所以它們的載藥能力也較大 一般隨著微球 粒徑的減小 其載藥量和藥物的包埋率也都提高 1 2 2 磁響應(yīng)性 磁性微球具有很好的選擇性磁響應(yīng)性 當(dāng)磁性四氧化三鐵晶體的粒徑小于 3 0 n m 時(shí) 具有超順磁性 從而可以避免在使用中粒子之間發(fā)生磁性團(tuán)聚 利用磁 性納米微球的磁響應(yīng)性 在外加磁場(chǎng)作用下 磁性納米微球可以方便的進(jìn)行分 離和磁性導(dǎo)向 比如用免疫磁性微球從骨髓中分離癌細(xì)胞 用絲裂霉素一聚碳 酸酯磁性微球?qū)θ寺闶蟾文Ｐ瓦M(jìn)行靶向治療 磁性微球中磁核的含量是反映微 球磁響應(yīng)性的一個(gè)重要參數(shù) 磁核含量為微球總重量2 0 5 0 為最佳 對(duì)于 載藥的磁性納米微球 應(yīng)用磁性的靶向過(guò)程就是血管內(nèi)血流對(duì)微粒的推力和磁 鐵產(chǎn)生的磁力的競(jìng)爭(zhēng)過(guò)程 當(dāng)磁力大于毛細(xì)管的推力時(shí) 磁性載體則被截留在 靶部位 已經(jīng)證明 在血流速率為0 5 5 0 1 c m s 的血管處 在0 8 t 的外磁場(chǎng)下 就足以使含有2 0 的磁性載體全部滯留在靶器官中 當(dāng)作為磁核的金屬氧化物 粒子的直徑小于3 0 n m 時(shí) 具有超順磁性 即在磁場(chǎng)中有強(qiáng)磁性 沒(méi)有磁場(chǎng)時(shí)磁 性很快消失 從而使磁性納米微球能夠在磁場(chǎng)中不被永久磁化 因此在機(jī)體內(nèi) 既安全又易于控n t 2 0 1 4 第1 章文獻(xiàn)綜述 1 2 3 生物相容性和生物降解性 在生物工程中 尤其是生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中 生物相容性和生物降解性是磁性 載體在生物及醫(yī)學(xué)中應(yīng)用的重要方面 磁性納米微球的結(jié)構(gòu)中的殼層 大都使 用生物高分子如多聚糖 蛋白質(zhì)等具有良好的生物相容性 它們?cè)谌梭w內(nèi)安全無(wú) 毒 并且可生物降解 載體與藥物或基因片段等定向進(jìn)入靶細(xì)胞之后 表層的 載體被生物降解 芯部的藥物釋放出來(lái)發(fā)揮療效 避免了藥物在其它組織中釋 放 從而提高藥物療效 這在靶向藥物中尤其重要 磁性納米微球的磁核 可 以很方便的通過(guò)人體自然排出 而不會(huì)影響人的健康 2 0 1 2 4 功能基團(tuán)特性 由于磁性微粒表面包覆有高分子材料 而生物高分子帶有多種具有反應(yīng)活 性的功能基團(tuán) 如一c h o 一o h c o o h 一n h 2 就可連接具有生物活性 的物質(zhì) 如藥物d n a r n a 免疫蛋白 生物酶等 同時(shí)也可在顆粒表面偶聯(lián) 特異性的靶向分子 如特異性配體 單克隆抗體等 通過(guò)靶向分子與細(xì)胞表面 特異性受體結(jié)合 在細(xì)胞攝粒作用下進(jìn)入細(xì)胞內(nèi) 實(shí)現(xiàn)安全有效的用作靶向性 藥物基因治療 細(xì)胞表面標(biāo)記 同位素標(biāo)記等 2 0 1 1 2 5 理化性質(zhì) 磁性微球的物理化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定 具備一定的機(jī)械強(qiáng)度和化學(xué)穩(wěn)定性 能耐受 一定濃度的酸堿溶液和微生物的降解 其內(nèi)含的磁性物質(zhì)不易被氧化 磁性能不 易下降 并且具有一定的生物相容性 不會(huì)對(duì)生物體造成明顯的傷害 磁性微球表 面本身具有或通過(guò)表面改性帶有多種活性的功能基團(tuán) 如 o h c o o h n h 2 等 可連接生物活性物質(zhì) 如核酸 酶等 也可以偶聯(lián)特異性分子 如特異性配體 抗 體 抗原等 來(lái)專一性的分離生物大分子 l 9 1 3 磁性微球的制備方法 磁性微球是一種廣泛使用的有機(jī)固相合成和生物分子固定化的載體 固定 化的生物分子通常在生物醫(yī)學(xué)與生物工程的研究和實(shí)踐中用作親和分離分析的 配基 亦可作為生物反應(yīng)的催化劑或藥物 由于磁性微粒徑一般很小 比表面 積大 故而偶聯(lián)容量較高 懸浮穩(wěn)定性亦較好 便于各種反應(yīng)高效而方便地進(jìn) 行 又因其具有順磁性 在外磁場(chǎng)的作用下固液相的分離十分簡(jiǎn)單 可省去離 5 第1 章文獻(xiàn)綜述 心 過(guò)濾等繁雜操作 并可在磁場(chǎng)作用下定位 2 1 1 c u y p e r 2 2 等用磷脂處理納米 級(jí)的磁性粒子 制得磁性脂質(zhì)體微球 d e k k e r 2 3 將磁性粒子懸浮于聚乙烯亞胺 p e i 溶液中 通過(guò)過(guò)濾 干燥處理得到外包p e i 的磁性微球 h a s e g a m a 2 4 等利 用葡聚糖制得了葡聚糖磁性微球 g u p t a 2 5 等用牛血清清蛋白和棉籽油對(duì)磁性粒 子進(jìn)行處理 得到外包牛血清蛋白的磁性微球 磁性無(wú)機(jī)物微球則主要是通過(guò) 無(wú)機(jī)鹽類共沉淀法來(lái)制備的 c h e nq i e 2 6 等通過(guò)f e c l 3 6 h 2 0 與m g c l 2 6 h 2 0 在 n a o h 溶液中共沉淀制得具有超順磁性的m g f e 2 0 4 的納米微粒 k u z n e t s o v 2 7 j 等 制得了超順磁性的f e c 微球 制備磁性微球的方法很多 主要根據(jù)磁性微球 的結(jié)構(gòu)來(lái)區(qū)分 有以下幾種 1 3 1 共沉淀法 共沉淀法是在生成磁性物質(zhì) f e 3 0 4 或f e 2 0 3 的同時(shí)產(chǎn)生磁性高分子微球的 制備方法 即先將高分子物質(zhì)溶解 然后依次加入f e 2 和h 2 0 2 或f e 2 和f e 攪拌的同時(shí)滴加堿性溶液 通過(guò)氧化沉淀或共沉淀反應(yīng) 這樣磁性物質(zhì)一產(chǎn)生 就被包裹 形成核一殼磁性微球 國(guó)內(nèi)的孫敏莉等 2 8 利用此法合成平均粒徑在 2 0 0 n m 左右的d e a e 一葡聚糖磁性微球 d e a e 葡聚糖對(duì)磁性納米粒子實(shí)現(xiàn)了良 好的包覆 并且微球的球形度好 國(guó)外的l e e 等 2 9 通過(guò)在聚乙烯醇 p v a 的水溶 液中溶解鐵鹽 然后用共沉淀法 形成穩(wěn)定分散的p v a 包裹的磁性納米顆粒 h o n d a 等 3 0 先將殼聚糖的溶液和含鐵鹽與亞鐵鹽溶液在激烈攪拌下混合均勻 然后加氨水恒溫靜置 經(jīng)過(guò)反應(yīng)處理后制得殼聚糖磁性納米微球 共沉淀法的優(yōu)點(diǎn)是制備方法簡(jiǎn)單 避免了制取磁流體或均勻分散磁粒子的相 關(guān)處理 制得的磁性微球粒徑較小 幾b i n 到幾百個(gè)n m 比表面積大 缺點(diǎn)是磁 性微球大小不均勻 磁響應(yīng)性較差 操作時(shí)需要較強(qiáng)的外加磁場(chǎng) 1 3 2 噴霧干燥法 在一定壓力下把熱明膠溶液通過(guò)噴嘴噴出 形成的霧狀液滴蒸發(fā)掉水分而 形成微球 調(diào)節(jié)壓力 溫度和噴嘴進(jìn)出口的直徑可以得到不同大小的產(chǎn)品 此 法制得的微球直徑比較均勻 h u a n g t 3 l j 等用此法制得了直徑為1 4 m 的明膠一 殼聚糖復(fù)合微球 發(fā)現(xiàn)明膠的比例對(duì)產(chǎn)品大小 形狀和表面形態(tài)有顯著影響 b o n f e r o n i 3 2 等則制備了直徑小于1 0 1 x m 的明膠一卡拉膠復(fù)合微球 但產(chǎn)品彼此粘 連 球形也較差 王強(qiáng)斌 3 3 1 等將納米磁流體分散在聚丙烯腈的n n 二甲基甲酰 6 第1 章文獻(xiàn)綜述 胺 d m f 溶液中 混合均勻后進(jìn)行噴霧 得到外形規(guī)整 粒徑分布較窄 磁含量約 1 5 的聚丙烯腈磁性微球 得到的磁性微球可作為固定化酶的載體 1 3 3 包埋法 包埋法制備磁性微球主要是通過(guò)范德華力 氫鍵 配位鍵和共價(jià)鍵等作用 將水溶性高分子物質(zhì)纏繞在無(wú)機(jī)磁性顆粒表面 形成聚合物包被的磁性微球 安 小寧掣3 4 用殼聚糖直接包埋磁粉制備出高磁性的殼聚糖微球 并研究了包埋磁粉 使用的殼聚糖與磁粉用量的比例對(duì)磁性殼聚糖微粒磁性的影響 結(jié)果表明 磁性 殼聚糖微粒的磁性與殼聚糖的用量成反比 采用此法制備磁性微球優(yōu)點(diǎn)是方法 簡(jiǎn)單 微球表面不需要化學(xué)修飾就含有活性功能基團(tuán) 可以直接偶聯(lián)所需的配基 缺點(diǎn)是制備的磁性微球大小難以控制 粒度分布寬 形狀不規(guī)則 不同微球磁性物 質(zhì)的含量相差很大 而且殼層中易混有雜質(zhì) 因此用于免疫測(cè)定和細(xì)胞分離時(shí)受 到很大的限制 如張密林 3 5 等報(bào)道了用羥基纖維素對(duì)磁性微球進(jìn)行改性 制備 羥基纖維素的磁性微粒 邱廣亮 3 6 1 等采用乳化復(fù)合技術(shù)制各出粒徑為2 0 一 3 0 0 n m 的具有磁核的瓊脂糖復(fù)合微球 1 3 4 單體聚合法 單體聚合法包括分散聚合 乳液聚合 懸浮液聚合三種 是將磁性粒子用 表面改性劑 偶聯(lián)劑 引發(fā)劑等處理后分散到含有聚合物單體的溶劑中進(jìn)行聚 合反應(yīng) 通常以磁性粒子為活性中心進(jìn)行單體聚合 該法的特點(diǎn)是制得的高分 子微球磁響應(yīng)性強(qiáng) 形狀較規(guī)則 大部分成圓球狀 且粒度分布較均勻 但是其粒徑 較大 疏水性單體聚合生成的磁性微球表面一般不含功能活性基團(tuán) 需要通過(guò)表 面化學(xué)改性才能帶上活性基團(tuán) 1 3 4 1 乳液聚合法 乳液聚合法是將金屬鹽和一定的沉淀劑形成微乳狀液 在較小的微區(qū)內(nèi)控 制膠粒成核和生長(zhǎng) 經(jīng)過(guò)熱處理后得到納米粒子 該法的特點(diǎn)是可以通過(guò)調(diào)整 微乳液的組成和結(jié)構(gòu) 實(shí)現(xiàn)對(duì)粒子尺寸 形態(tài) 結(jié)構(gòu)乃至物性的人為調(diào)控 制 得的粒子分散性好 另外該方法還具有實(shí)驗(yàn)裝置簡(jiǎn)單 操作方便 能耗低 應(yīng) 用領(lǐng)域廣等優(yōu)點(diǎn) 3 7 1 劉雪奇 3 8 1 以苯乙烯 s t n n 烯酸為共聚單體 以氧化苯甲酰 b p o 為引發(fā)劑 用分散聚合法制得了含羥基的磁性物質(zhì)為核 高分子為殼的復(fù) 合微球 微球粒徑大約在l 5 9 m 核心f e 3 0 4 1 0 n m 左右 分散聚合法對(duì)于合成大 7 第l 章文獻(xiàn)綜述 粒徑 單分散的磁性高分子具有較大優(yōu)勢(shì) 胡書(shū)春 i 用聚7 醇 p e g 處理f e 3 0 4 磁流體 然后加入聚合反應(yīng)的引發(fā)劑過(guò)硫酸鉀 k p s 充分?jǐn)嚢韬箪o置 溶脹 然 后分散到苯乙烯 s t 單體與穩(wěn)定劑 分散劑的混合溶劑中制成乳化體系 進(jìn)行乳液 聚合制得磁性物質(zhì)為核高分子為殼的復(fù)合微球 乳液聚合可在提高聚合速率的 同時(shí)提高分子量 聚合產(chǎn)物的粒徑小 o 0 5 一0 2 1 t m 比常見(jiàn)懸浮聚合法制得的產(chǎn) 物的粒徑 5 0 2 0 0 肛m 要小得多 1 3 4 2 懸浮聚合法 懸浮聚合和乳液聚合類似 將磁流體加入到高分子單體中 不加乳化劑的情 況下 借助高速攪拌的作用將單體分散成小液滴 單體在小液滴中反應(yīng) 得到磁性 高分子微球 王勝林 4 0 等采用懸浮聚合法制備了聚苯乙烯磁性微球 將f e 3 0 4 磁性粒子用一種復(fù)合分散劑進(jìn)行表面處理后分散到苯乙烯中 從而形成苯乙烯磁 流體 在磁流體中加入引發(fā)劑單體二乙烯基苯 d v b 然后將磁流體分散在水中 經(jīng)過(guò)高速剪切乳化 形成穩(wěn)定的微懸浮液 在穩(wěn)定的溫度下發(fā)生聚合反應(yīng) 最后過(guò) 濾分離 得到包覆良好的磁性微球 乳液聚合與懸浮聚合法得到的磁性微球的粒徑不同 采用乳化交聯(lián)法可得到 納米級(jí)的磁性微球 而懸浮聚合法得到的磁微球一般為微米級(jí) 乳液聚合法制各 磁性微球過(guò)程中需加入乳化劑 因此 需要進(jìn)行洗滌 熱處理等一些后續(xù)的處理 采用不同的聚合方法 可制備不同粒徑的磁性微球 1 3 5 界面沉積法 界面沉積法可用于制備核殼型和多層型磁性微球 f u r u s a w a 等 4 l 的方法是預(yù) 先制備一種表面含有某種功能基團(tuán) 如 s 0 3 c o o 的聚合物乳膠粒 與納米磁性 顆粒均勻混合 通過(guò)加入電解質(zhì)或者調(diào)節(jié)p h 值使聚合物膠粒與磁性顆粒表面攜 帶的電荷相反 磁性顆粒借助靜電吸引而沉積在聚合物乳膠粒表面形成包覆層 形成b 型磁性微球 如果以此乳膠粒為種子進(jìn)行乳液聚合 表面再包覆一層聚合 物 就可以形成d 型結(jié)構(gòu)的磁性聚合物微球 也有些學(xué)者則采用先制備磁性顆粒 然后通過(guò)靜電吸附在磁性顆粒的表面沉積一層物質(zhì)而形成a 型磁性微球 界面 沉積法制備的微球 磁含量均一 粒度可控 均勻 但是制備過(guò)程復(fù)雜 8 第1 章文獻(xiàn)綜述 1 4 磁性微球的應(yīng)用 由于磁性高分子微球具有磁性 在磁場(chǎng)作用下可定向運(yùn)動(dòng)到特定部位 或 迅速?gòu)闹車(chē)橘|(zhì)中分離出來(lái)具有磁響應(yīng)性和不同的表面功能性 因此自7 0 年代 中期以來(lái) 磁性高分子微球在許多領(lǐng)域的應(yīng)用研究也日益增多 下面就磁性高 分子微球在部分領(lǐng)域的最新應(yīng)用進(jìn)展做一簡(jiǎn)介 1 4 1 固定化酶 固定化酶是指利用物理吸附或化學(xué)結(jié)合法將自由酶固定到載體上以提高酶 的操作穩(wěn)定性和反復(fù)回收利用酶的技術(shù) m u n k o 4 2 制備了纖維素等三種磁性粒 子 用于凝乳化蛋白酶的固定化 研究了不同殼層 不同磁核及粒徑對(duì)酶的活性及 固定量的影響 t o r c h i l i n l 4 3 等進(jìn)行了磁性交聯(lián)葡聚糖作為固定化載體的研究工 作 b e n d i l i e n e 4 4 等制備了磁性殼聚糖微球用作固定化載體 酶被固定在這種載 體上之后 可以很容易地用磁性裝置從反應(yīng)的混合液中分離回收 由于生物高分 子具有很多官能團(tuán) 如 n h 2 c 0 0 h o h 等 酶分子可通過(guò)物理吸附 交聯(lián) 共價(jià)偶合等方式固定在磁性微球表面 磁性生物高分子微球固定化酶有以下優(yōu) 點(diǎn) 易于將酶與底物和產(chǎn)物分離 提高酶的生物相容性和免疫活性 提高酶的穩(wěn)定 性 操作簡(jiǎn)便 可降低成本 1 4 2 細(xì)胞分離 有效的細(xì)胞分離是臨床和免疫學(xué)的基本而重要的步驟 磁性微球在細(xì)胞分 離中的應(yīng)用之一是血液中紅細(xì)胞的分離 另一種應(yīng)用是在臨床進(jìn)行自身骨髓移 植時(shí)用于清除骨髓中已轉(zhuǎn)移的癌細(xì)胞 異體骨髓移植時(shí)清除骨髓中的t 細(xì)胞等 康繼超 4 5 等用物理吸附和化學(xué)鍵共價(jià)結(jié)合的方法 將抗人膀胱癌單克隆抗體連接 到預(yù)先制備的聚苯乙烯磁性微球表面 構(gòu)建了能特異地與靶細(xì)胞結(jié)合并賦予其磁 響應(yīng)性的免疫磁性微球 i m m u n o m a g n e t i cm i c r o s p h e r e si m m s 用于從骨髓中分離 癌細(xì)胞 實(shí)驗(yàn)證明 所構(gòu)建的i m m s 可有效地和靶細(xì)胞結(jié)合 用i m m s 從動(dòng)物骨 髓中分離癌細(xì)胞的初步實(shí)驗(yàn)表明 i m m s 可有效清除癌細(xì)胞 而骨髓細(xì)胞僅有很少 量的損失 j h u n uc h a t t e r j e e t 4 6 用血凝素修飾聚苯乙烯磁微球和白蛋白微球 用于 紅細(xì)胞的分離 用血凝素修飾聚苯乙烯微球和白蛋白微球后 其具有良好的結(jié)合 紅細(xì)胞的能力 白蛋白微球與合成的聚合物微球相比較更具優(yōu)勢(shì) 因?yàn)榻?jīng)白蛋 白微球分離后的紅細(xì)胞能重新注射進(jìn)入病人的體內(nèi) 9 第1 章文獻(xiàn)綜述 1 4 3 免疫測(cè)定 免疫測(cè)定的目的是確定溶液中免疫活性分子 如抗原 抗體的濃度 研究 者利用磁性高分子微球比表面積大 易分離 表面可功能化等優(yōu)點(diǎn)將其用于免 疫測(cè)定 例如用于氨甲蝶呤 甲狀腺素 催乳激素 地谷新等的放射免疫測(cè)定 r i a 內(nèi)質(zhì)醇 氫化可的松 的熒光免疫測(cè)定 f i a i g e 的酶免疫測(cè)定 e i a v b l 2 的非放射免疫測(cè)定 n o n r i a 等 與傳統(tǒng)方法相比 它們具有特異性好 靈敏度高 準(zhǔn)確性好的優(yōu)點(diǎn) 如用抗免i g g p s 磁性微球?qū)Ρ郊姿岚返臏y(cè)定效果 增加近4 0 倍 將磁性微球用于免疫電化學(xué)發(fā)光分析 對(duì)食品和環(huán)境水樣中的大 腸桿菌和沙門(mén)氏傷寒菌進(jìn)行了快速準(zhǔn)確的測(cè)定 利用硅烷化正鐵鹽進(jìn)行放射性 免疫測(cè)定1 4 7 j 1 4 4 磁控栓塞 磁性藥物微球是磁性藥物制劑的一種類型 是靶向給藥系統(tǒng)的新劑型 在 磁性納米粒子表面涂覆高分子 再與蛋白質(zhì)相結(jié)合 以這種磁性納米粒子作為 藥物的載體 然后靜脈注射到動(dòng)物體內(nèi) 在外加磁場(chǎng)下通過(guò)納米微粒的磁性導(dǎo) 航 使其移向病變部位 就可達(dá)到定向治療的目的 惠旭輝等 4 8 用自制的聚甲 基丙烯酸甲酯 p m m a 磁性微球血管內(nèi)栓塞效果及對(duì)血細(xì)胞的影響進(jìn)行研究 術(shù)中栓塞觀察 注射磁性微球后均有磁栓固位于磁控處股動(dòng)脈管腔內(nèi) 形成灰 黑色栓塞 栓塞以下動(dòng)脈搏動(dòng)消失 顏色蒼白 磁栓1 5 分鐘斷磁 磁栓無(wú)脫落 及移位 股動(dòng)脈下段血供無(wú)再通 c o r d u l a t 4 9 等通過(guò)實(shí)驗(yàn)證明使用多種聚合物基 體材料可以提高不同種磁性微球的性能 磁性雜化物如聚糖一聚乳酸 硅一聚 苯乙烯 硅一聚糖 聚糖一聚腈基丙烯酸烷基酯 聚糖一聚苯乙烯顆粒 通過(guò) 動(dòng)力學(xué)研究測(cè)試了其固定蛋白質(zhì)的能力 這些性能的提高導(dǎo)致了磁性微球在藥 理學(xué) 分子生物化學(xué)和生物醫(yī)藥學(xué)的新型應(yīng)用 1 4 5 有機(jī)和生化合成 近幾年來(lái) 組合化學(xué)因能快速合成巨大的化合物庫(kù) 用以滿足生物學(xué)測(cè)試 的要求 因此得以迅猛發(fā)展 從而使固相有機(jī)合成技術(shù)得以復(fù)興 而以磁性微 球?yàn)檩d體的固相有機(jī)合成技術(shù) 不僅可充分發(fā)揮固相合成的優(yōu)勢(shì) 而且在反應(yīng) 完成后 可迅速地將目標(biāo)產(chǎn)物從剩余反應(yīng)物 副產(chǎn)物及溶劑中方便地分離出來(lái) 且不影響產(chǎn)物的性質(zhì)與純度 c h a n g t 5 0 j 等合成了一種新型的高分子磁球 利用i r 1 0 第1 章文獻(xiàn)綜述 x r d s e m 測(cè)定了其對(duì)乳化劑的吸收和沉積 證明了此種微球具有良好的熱敏 性 s u c h o l e i k i 5 1 等分別制備了具有高濃度懸垂功能基和具有親水性表面的復(fù)合 磁性微球 并將該復(fù)合磁性微球用于核苷酸 多肽 單糖 多糖的合成 該微 球外層為低度交聯(lián)的p s 殼體 內(nèi)部為含有f e 3 0 4 磁粒的高度交聯(lián)p s 核 由于 內(nèi)外交聯(lián)度的不同 既保證了在各種有機(jī)溶劑 二甲基甲酰胺 d m f 二甲基 亞砜 d m s o 等 中的充分溶脹 又可確保磁粒不損失 1 4 6 環(huán)境 食品生物檢測(cè) 以磁性微球?yàn)榛A(chǔ)的免疫磁性分離 i m s 技術(shù)不但廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué) 生物 學(xué)的各個(gè)領(lǐng)域 而且在環(huán)境和食品衛(wèi)生檢測(cè)方面的應(yīng)用也初見(jiàn)端倪 沙門(mén)氏菌 是引起食物中毒最常見(jiàn)的菌屬之一 曾有報(bào)道用免疫磁性分離技術(shù)從乳及乳制 品 肉類和蔬菜中分離出沙門(mén)氏菌 其檢測(cè)限為每克l 1 0 2 個(gè)細(xì)菌 免疫磁分 離技術(shù)可快速將目標(biāo)微生物從樣品中分離出來(lái) 如果和其它檢驗(yàn)方法 如酶聯(lián) 免疫吸附分析 e l i s a 多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) p c r 熒光免疫分析 f i a 電子 化學(xué)發(fā)光 e c l 相結(jié)合 則可數(shù)倍地提高分離效率和檢測(cè)極限 如用以免疫磁 性微球?yàn)楣滔噍d體的e c l 技術(shù)探測(cè)土壤中的b a n t h r a c i s 孢子 y a n g 5 2 1 等合成 了一種表面含酮類的電化學(xué)加成磁性高分子微球 其可以與胺反應(yīng) 隨著其表 面胺類衍生物的減少其檢測(cè)性也逐漸降低 張津輝 5 3 等在磁流體存在的條件下 采用6 0 c oy 射線源 于常溫下輻照引發(fā)聚合水溶性的丙烯酰胺和烯丙胺 制得 了具有良好理化性能的磁性微球 并將其用于固相放射免疫分析及微量蛋白質(zhì) 親合富集 收到了較好的效果 1 4 7 靶向藥物 目前醫(yī)藥學(xué)研究的熱點(diǎn) 磁性納米粒子表面涂覆高分子材料后 外部再與 蛋白質(zhì)結(jié)合 將這種載有高分子和蛋白的磁性納米粒子作為藥物的載體 注射 到生物體內(nèi) 在外加磁場(chǎng)的作用下 通過(guò)納米粒子的磁性導(dǎo)向性使藥物更方便 地移向病變部位 增強(qiáng)其對(duì)病變組織的靶向性 有利于提高藥效 達(dá)到定向治 療的目的 從而改變目前放療和化療中正常細(xì)胞和癌細(xì)胞統(tǒng)統(tǒng)被殺死的狀況 動(dòng)物臨床實(shí)驗(yàn)證實(shí) f e 3 0 4 磁性納米粒子是應(yīng)用于這種技術(shù)的最有前途的載體 它在治療結(jié)束后可以通過(guò)人體肝臟和脾臟自然排泄 u r sh 擻f e l i 5 3 1 在磁性微球 上標(biāo)定1 32 放射錸 r e 18 8 磁性載體是由金屬鐵和活性炭組成 由于磁性載體 第1 章文獻(xiàn)綜述 m t c 能有效靶向到腫瘤部位 所以r e m t c 能集中對(duì)腫瘤部位輻射治療 減小了 對(duì)周?chē)M織和器官的輻射 m u n i y a n d ys a r a v a n a n l 5 4 制備了用于治療關(guān)節(jié)炎的二 氯苯二磺酰鈉凝膠磁性微球 二氯苯二磺酰鈉是一種抗炎和止痛藥 能用來(lái)治療 關(guān)節(jié)炎 由于生理半衰期短 需要持續(xù)頻繁的注射以維持其治療效果 需要緩釋以 長(zhǎng)期維持其濃度 同時(shí)這種藥物具有很強(qiáng)的副作用 如胃潰瘍 腸胃出血 過(guò)敏 性反應(yīng)等 制備凝膠磁性微球靶向藥物到需要的部位 實(shí)驗(yàn)表明此微球的藥物釋 放超過(guò)1 8 天 采用超聲波能加快藥物的釋放 1 5 磁性藥物微球的表征方法 1 5 1 磁性藥物微球的形貌表征 磁性靶向藥物毫微粒的形貌通常可由透射電鏡 環(huán)境掃描電鏡來(lái)表征 透射電鏡 t e m 是以電子束透過(guò)樣品經(jīng)過(guò)聚焦與放大后所產(chǎn)生的物像 投 射到熒光屏上或照相底片上進(jìn)行觀察 透射電鏡的分辨率為0 1 0 2 n m 放大 倍數(shù)為幾萬(wàn) 幾十萬(wàn)倍 透射電鏡照片不但可以直接給出藥物毫微粒顆粒大小 和形狀 而且還可以給出樣品內(nèi)部的超微結(jié)構(gòu) 掃描電鏡 s e m 是用極細(xì)的電子束在樣品表面掃描 將產(chǎn)生的二次電子 用特制的探測(cè)器收集 形成電信號(hào)運(yùn)送到顯像管 在熒光屏上顯示物體 細(xì)胞 組織 表面的立體構(gòu)像 可攝制成照片 掃描電鏡樣品用戊二醛等固定 經(jīng)脫 水和臨界點(diǎn)干燥后 再于樣品表面噴鍍薄層金膜 以增加二波電子數(shù) 1 5 2 粒徑及粒徑分布 磁性靶向藥物毫微粒粒徑及粒徑分布通?？捎贸恋矸?電超聲和光散射法 進(jìn)行測(cè)試 沉降法粒度分析方法 5 5 是通過(guò)顆粒在液體中沉降速度來(lái)測(cè)量粒度分 布的方法 主要有重力沉降式和離心沉降式兩種光透沉降粒度分析方式 適合 毫微粒粒度分析的主要有離心式分析方法 常用的沉降法存在著檢測(cè)速度慢 重復(fù)性差 對(duì)非球形粒子誤差大 不適用于混合物料 動(dòng)態(tài)范圍窄等缺點(diǎn) 電超聲粒度測(cè)量范圍為5 1 0 9 m 其測(cè)試原理為當(dāng)聲波在樣品內(nèi)部傳導(dǎo)時(shí) 通過(guò)測(cè)試聲波衰減譜 計(jì)算衰減值與粒度的關(guān)烈5 6 1 激光光散射法 5 7 5 8 1 是利用激光遇到粒子時(shí)發(fā)生散射特性來(lái)工作 它通過(guò)測(cè)定 溶液中大分子或膠體質(zhì)點(diǎn)的平動(dòng)擴(kuò)散系數(shù) 從而得知其大小或流體力學(xué)半徑 1 2 第1 章文獻(xiàn)綜述 測(cè)試原理是當(dāng)分散體系的質(zhì)點(diǎn)小于光的波長(zhǎng)時(shí) 將產(chǎn)生散射光 散射光的強(qiáng)度 與質(zhì)點(diǎn)大小和分布u 質(zhì)點(diǎn)形狀以及兩相的折射率有關(guān) 通常顆粒小 散射角大 顆粒大 散射角小 據(jù)此 利用光散射技術(shù)可測(cè)定質(zhì)點(diǎn)的大小和分布 測(cè)定的 粒徑范圍為幾個(gè)納米到五個(gè)微米之間 激光光散射法能夠準(zhǔn)確得到粒子的分布 及各種平均粒徑 是測(cè)定納米粒子大小和粒徑分布的理想工具 1